題型05生物技術(shù)與功能類

本節(jié)導(dǎo)航

模板01利用PCR技術(shù)獲取目的基因

模板02利用PCR技術(shù)鑒定目的基因的連接方式

模板03利用PCR技術(shù)引導(dǎo)基因定點(diǎn)突變

識(shí)·命題特點(diǎn)明命題特點(diǎn)、窺命題預(yù)測(cè)

明·答題模板答題要點(diǎn)+答題技巧+模板運(yùn)用

練·高分突破模板綜合演練，快速技巧突破

命題點(diǎn)真題在線常見設(shè)問/關(guān)鍵詞

微生物的基

2023·全國乙·T372022·天津·T32021·天津·T1

本培養(yǎng)技術(shù)

發(fā)酵工程的

2023·山東·T202022·湖北·T132022·山東·T20

原理及應(yīng)用

基因工程的

2023·新課標(biāo)·T62021·全國乙·T382021·湖北·T7

基本工具

基因工程的

2022·河北·T242022·廣東·T222022·全國乙·T382021·河北·T24設(shè)問關(guān)鍵詞：常規(guī)

應(yīng)用

PCR、重疊延伸PCR、

動(dòng)物細(xì)胞融

2023·北京·T12023·湖北·T222022·山東·T152022·福建·T13熒光定量PCR

合和單克隆

2021·山東·T152021·江蘇·T112020·全國Ⅰ·T38

抗體的制備

植物細(xì)胞工

2023·山東·T14

程的應(yīng)用

幾種不同2023·江蘇·T222023·山東·T252022·江蘇·T242022·山東·T25

PCR的應(yīng)用2021·全國甲·T382021·山東·T252020·北京·T122020·江蘇·T33

命題預(yù)測(cè)PCR技術(shù)是近年高考熱點(diǎn)，常涉及對(duì)PCR基本過程、引物的選擇、多種PCR的應(yīng)用

關(guān)鍵技巧掌握PCR過程的基本原理

模板01利用PCR技術(shù)獲取目的基因

獲取目的基因是基因工程操作的第一步。獲取目的基因的方法有多種，現(xiàn)在常用PCR特異性地快速擴(kuò)增目

的基因。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)

制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。該技術(shù)由穆里斯等人于1985年

發(fā)明，為此，穆里斯于1993年獲得了諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。

技巧01利用PCR技術(shù)獲取目的基因

1．（2024·河南·模擬預(yù)測(cè)）數(shù)字PCR技術(shù)被稱為第三代PCR,在核酸定量檢測(cè)中具有突出優(yōu)勢(shì)。該技術(shù)通過將

一個(gè)樣本稀釋分成幾十至幾萬份，并分配到不同的反應(yīng)單元，每個(gè)單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的目標(biāo)分子(DNA

模板)，在每個(gè)反應(yīng)單元中分別對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)束后對(duì)各個(gè)反應(yīng)單元的熒光信號(hào)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)

學(xué)分析，計(jì)算初始樣品中靶標(biāo)分子的拷貝數(shù)。據(jù)此分析，下列說法正確的是（）

A．?dāng)?shù)字PCR技術(shù)僅適用于樣本中目標(biāo)分子含量較高的材料

B．?dāng)?shù)字PCR技術(shù)遵循的基本原理是DNA的邊解旋邊復(fù)制

C．每個(gè)單元中加入等量的4種核糖核苷酸溶液作為擴(kuò)增原料

D．每個(gè)單元中目標(biāo)分子的兩條子鏈合成都是從5'端向3'端延伸

【答案】D

【思路詳解】A、數(shù)字PCR技術(shù)把檢測(cè)樣本稀釋后分配到不同的反應(yīng)單元，在每個(gè)單元進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)目標(biāo)

分子擴(kuò)增，再對(duì)每個(gè)單元的擴(kuò)增結(jié)果綜合分析，計(jì)算初始樣品中靶標(biāo)分子的拷貝數(shù)。該技術(shù)對(duì)高、中、低

水平的目標(biāo)分子含量的材料均可實(shí)現(xiàn)正確、精密的測(cè)定，A錯(cuò)誤；

B、數(shù)字PCR技術(shù)遵循的基本原理是DNA半保留復(fù)制，B錯(cuò)誤；

CD、每個(gè)反應(yīng)單元中分別對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增，需要加入4種脫氧核苷酸的等量混合液、與目標(biāo)分子

特異性結(jié)合的兩種引物和TaqDNA聚合酶等，兩條子鏈合成是從兩種引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，C錯(cuò)

誤、D正確。

（2024·安徽蕪湖·二模）不對(duì)稱PCR是利用不等量的一對(duì)引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA（ssDNA）的方法。加入

的一對(duì)引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。PCR反應(yīng)最初的若干次循環(huán)

中，其擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA（dsDNA），但當(dāng)限制性引物消耗完后，就會(huì)產(chǎn)生大量的ssDNA。不對(duì)稱PCR

的簡單過程如圖所示。假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后開始擴(kuò)增產(chǎn)生ssDNA。下列有關(guān)敘

述錯(cuò)誤的是（）

A．限制性引物和非限制性引物均可與模板DNA單鏈結(jié)合

B．不對(duì)稱PCR循環(huán)6次需要消耗（26-1）a個(gè)限制性引物

C．最后獲得的ssDNA中不含非限制性引物

D．子鏈的延伸都是從兩種引物的3'端開始的

模板02利用PCR技術(shù)鑒定目的基因的連接方式

檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否穩(wěn)定存在是基因工程操作的重要步驟，可以借助載體上的標(biāo)記基因、PCR

技術(shù)和核酸分子雜交技術(shù)等方法鑒定受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)入了目的基因。在實(shí)際操作中，PCR技術(shù)不僅可以

精準(zhǔn)地鑒定受體細(xì)胞是否轉(zhuǎn)入目的基因，還可以通過引物的巧妙設(shè)計(jì)鑒定目的基因的連接方式。

【補(bǔ)充】利用PCR技術(shù)快速檢測(cè)病原體

病原體檢測(cè)是診斷和控制傳染病的重要手段，為迅速而準(zhǔn)確地確定病原體的存在和種類，發(fā)展了許多快速

檢測(cè)方法。PCR技術(shù)是一種基于DNA擴(kuò)增原理的快速病原體檢測(cè)方法，它能夠在幾小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增和檢測(cè)極小

量的病原體DNA，并且具備高度的特異性和敏感性。

技巧02利用PCR技術(shù)鑒定目的基因的連接方式

（2024·廣西·模擬預(yù)測(cè)）現(xiàn)將XplA和XplB兩種能降解彈藥使用后殘留的危險(xiǎn)污染物的基因轉(zhuǎn)入實(shí)彈射擊場(chǎng)

的柳枝稷草中。若要通過PCR檢測(cè)所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的XplA和XplB基因，應(yīng)選擇的

引物組合是（）

A．引物1+引物3B．引物1+引物2

C．引物2+引物3D．引物3+引物4

【答案】A

【思路詳解】根據(jù)啟動(dòng)子的位置，若正確插入，模板鏈應(yīng)為題甲圖中下鏈，則引物1應(yīng)與下鏈的3'端結(jié)合，

引物3可以結(jié)合題甲圖上鏈的3'端，若XplA和XplB基因正確插入，則使用引物1+引物3可通過PCR擴(kuò)增

出XplA和XplB基因融合片段，若Xp1A和XplB基因其中一個(gè)基因反接或者兩個(gè)都基因反接，通過PCR均無

法擴(kuò)增出Xp1A和XplB基因融合片段，因此，使用引物1+引物3通過PCR可檢測(cè)所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是

否含有正確插入的Xp1A和XplB基因，A正確；BCD錯(cuò)誤。

（2024·浙江紹興·一模）免疫PCR是對(duì)微量抗原的一種檢測(cè)方法。下圖是利用該技術(shù)檢測(cè)牛乳中微量抗生素

的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標(biāo)記的抗體2，進(jìn)行PCR擴(kuò)

增，最后進(jìn)行電泳檢測(cè)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A．PCR擴(kuò)增中延伸時(shí)間取決于引物的長度

B．引物濃度大小會(huì)影響PCR擴(kuò)增獲得產(chǎn)物的數(shù)量

C．圖示過程中三次沖洗的目的均不同

D．圖示抗原檢測(cè)過程發(fā)生兩次抗原與抗體的結(jié)合

模板03利用PCR技術(shù)引導(dǎo)基因定點(diǎn)突變

重疊延伸PCR技術(shù)是指在PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上，采用具有互補(bǔ)末端的引物，使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈，通

過重疊鏈的延伸，將不同來源的片段重疊拼接起來的一項(xiàng)新技術(shù)。該技術(shù)在基因的定點(diǎn)突變、長片段基因

的合成、基因敲除以及目的基因的擴(kuò)增等方面有著獨(dú)特的應(yīng)用。

【補(bǔ)充】利用PCR技術(shù)擴(kuò)增未知基因序列

利用PCR技術(shù)進(jìn)行基因擴(kuò)增時(shí)，為了便于設(shè)計(jì)引物，要求目的基因兩側(cè)的序列是已知的。當(dāng)DNA的某些

序列已知，而需要擴(kuò)增已知序列兩端的未知序列時(shí)，可采用反向PCR技術(shù)。

技巧03利用PCR技術(shù)引導(dǎo)基因定點(diǎn)突變

反向PCR是一種通過已知序列設(shè)計(jì)引物對(duì)未知序列進(jìn)行擴(kuò)增的技術(shù)，其過程如下圖所示。下列敘述正確的

有（）

A．應(yīng)選擇引物1和引物4進(jìn)行PCR擴(kuò)增

B．設(shè)計(jì)的引物中GC堿基含量越高，退火溫度越低

C．PCR產(chǎn)物是包含所有已知序列和未知序列的環(huán)狀DNA分子

D．在環(huán)化階段，可選E.coliDNA連接酶而不能選T4DNA連接酶

【答案】A

【思路詳解】A、DNA子鏈合成的方向?yàn)?'端到3'端，因此要通過已知序列設(shè)計(jì)引物對(duì)未知序列進(jìn)行擴(kuò)增應(yīng)

選擇引物1和引物4進(jìn)行PCR擴(kuò)增，A正確；

B、GC堿基含量越高，堿基對(duì)間氫鍵的含量越多，退火的溫度越高，B錯(cuò)誤；

C、PCR產(chǎn)物是包含所有已知序列和未知序列的鏈狀DNA分子，C錯(cuò)誤；

D、在環(huán)化階段，因?yàn)閳D示的末端為黏性末端，因此，既可選E.coliDNA連接酶也可選T4DNA連接酶，D錯(cuò)。

（2024·廣西·模擬預(yù)測(cè)）基因定點(diǎn)突變的目的是通過定向地改變基因內(nèi)一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)堿基來改變多肽鏈上

一個(gè)或幾個(gè)氨基酸。該技術(shù)是蛋白質(zhì)工程的重要技術(shù)，圖示為利用PCR技術(shù)進(jìn)行定點(diǎn)突變的流程，相關(guān)敘

述錯(cuò)誤的是（）

注：引物1和引物3的突起處代表與模板不能互補(bǔ)的突變位點(diǎn)，而這兩條引物有部分堿基(包括突變位點(diǎn))

是可以互補(bǔ)的。

A．酶①應(yīng)為耐高溫DNA聚合酶，引物X和Y為引物2和4

B．將四種引物置于同一個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)中同時(shí)進(jìn)行第一個(gè)階段的反應(yīng)

C．第一階段PCR過程中需要進(jìn)行兩次循環(huán)才能得到兩種所需的DNA片段

D．通過該技術(shù)獲得的突變基因可以表達(dá)出原來自然界不存在的蛋白質(zhì)

1．發(fā)酵工程在食品、醫(yī)藥、農(nóng)牧業(yè)等方面有著廣泛地應(yīng)用，下列有關(guān)說法正確的是（）

A．發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是滅菌，防止雜菌污染

B．pH能影響發(fā)酵產(chǎn)物，谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)過程中，堿性條件下易產(chǎn)生谷氨酰胺

C．啤酒生產(chǎn)中的焙烤、蒸煮環(huán)節(jié)既可以殺菌，又可以使所有酶失活

D．微生物飼料中的單細(xì)胞蛋白除蛋白質(zhì)外還含有糖類、脂質(zhì)、維生素等

2．“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”，一般來說，在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需添加動(dòng)物性營養(yǎng)物質(zhì)，如蛋白胨等；而在培養(yǎng)霉

菌時(shí)，一般需要添加植物性營養(yǎng)成分，如豆芽汁。下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A．蛋白胨為細(xì)菌提供碳源、氮源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)

B．細(xì)菌和霉菌體內(nèi)的酶存在差異，導(dǎo)致二者偏好的營養(yǎng)成分不同

C．分別培養(yǎng)細(xì)菌和霉菌時(shí)，需將培養(yǎng)基調(diào)節(jié)至相同的pH

D．若需要比較細(xì)菌和霉菌形成的菌落差異，培養(yǎng)基中還需添加瓊脂

3．如圖是老陳醋的生產(chǎn)流程，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A．蒸熟的高粱米應(yīng)先加入大曲再冷卻

B．“糖化”是將高粱中的淀粉等大分子氧化分解為小分子，為酒精發(fā)酵提供原料

C．“醋醅”中含有的醋酸菌，是一種異養(yǎng)的單細(xì)胞真核生物

D．“醋酸發(fā)酵”步驟中每天翻料兩次，可為醋酸菌提供更多氧氣

4．下列關(guān)于細(xì)胞工程的說法正確的是（）

A．體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞形態(tài)相比體內(nèi)正常細(xì)胞可能會(huì)發(fā)生改變

B．作物脫毒苗培養(yǎng)時(shí)先誘導(dǎo)愈傷組織生根，再誘導(dǎo)生芽

C．iPS細(xì)胞都是通過將外源基因?qū)塍w細(xì)胞獲得的

D．離心法收集細(xì)胞只能用于傳代培養(yǎng)細(xì)胞的收集

5．肝細(xì)胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突變會(huì)導(dǎo)致酪氨酸血癥。下圖是研究人員利用基因編輯技術(shù)糾

正病人來源肝細(xì)胞，成功治療酪氨酸血癥小鼠的過程，為治療人類酪氨酸血癥奠定理論基礎(chǔ)。相關(guān)敘述準(zhǔn)

確的是（）

A．酪氨酸血癥的發(fā)生說明基因能通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)控制生物性狀

B．過程②需在培養(yǎng)液中添加瓊脂、葡萄糖、干擾素動(dòng)物血清等物質(zhì)

C．過程③需敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因，并敲除相關(guān)抗原基因

D．基因編輯后的人源肝細(xì)胞植入小鼠分化為完整肝臟，是治療小鼠酪氨酸血癥的關(guān)鍵

6．堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶，將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”，

使多柔比星前體在腫瘤細(xì)胞處被活化，對(duì)其DNA造成損傷，抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動(dòng)，達(dá)到治療

腫瘤的目的。下列敘述正確的是（）

A．給小鼠注射多柔比星前體后，可從脾臟中得到能產(chǎn)生腫瘤抗體的B細(xì)胞

B．制備單克隆抗體的過程中需用特定的選擇培養(yǎng)基和抗體檢測(cè)進(jìn)行篩選

C．“生物導(dǎo)彈”利用了堿性磷酸酶的定向制導(dǎo)作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力

D．多柔比星前體活化后可直接抑制腫瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制和翻譯，而抑制其無限增殖

7．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A．滅活的病毒可與細(xì)胞質(zhì)膜發(fā)生作用，從而誘導(dǎo)細(xì)胞融合

B．用特定抗原免疫小鼠后；可從其骨髓中分離出漿細(xì)胞，用于細(xì)胞融合

C．產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞可在小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，從腹水中提取抗體

D．單克隆抗體可高度特異性地識(shí)別抗原，從而輔助腫瘤診斷

8．黑曲霉多不耐高溫，發(fā)酵獲得檸檬酸的過程需大量冷卻水控制溫度，生產(chǎn)成本高。現(xiàn)利用原生質(zhì)體融合

技術(shù)獲得耐高溫高產(chǎn)黑曲霉，過程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A．處理①培養(yǎng)基中黃色圈大的菌落不一定為高產(chǎn)菌株

B．處理②、③用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁

C．處理④升高溫度即可篩選出耐高溫高產(chǎn)黑曲霉

D．發(fā)酵結(jié)束后通過適當(dāng)?shù)倪^濾、沉淀等方法獲得檸檬酸

9．抗體一藥物偶聯(lián)物，也就是ADC，又被稱為“生物導(dǎo)彈”，由單克隆抗體、細(xì)胞毒性藥物以及兩者之間的

連接物共3個(gè)部分組成。下列敘述正確的是（）

A．該抗體一藥物偶聯(lián)物能識(shí)別腫瘤細(xì)胞上的各種膜蛋白性.

B．經(jīng)步驟①篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點(diǎn)是能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異并能大量制備

C．ADC起作用時(shí)會(huì)被細(xì)胞吞噬，并在溶酶體內(nèi)被分解后釋放藥物

D．誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與脾臟中的細(xì)胞融合，可用的誘導(dǎo)因素只有滅活的病毒

10．如圖是我國科學(xué)家培育克隆猴“中中”“華華”的過程，Kdm4d為組蛋白去甲基化酶基因、TSA為組蛋白脫

乙酰酶抑制劑。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A．各種動(dòng)物胚胎移植的最佳時(shí)期不盡相同，一般是在原腸胚期前

B．滅活的仙臺(tái)病毒可誘導(dǎo)體細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合

C．Kdm4d的mRNA和TSA的作用是對(duì)組蛋白進(jìn)行表觀遺傳修飾來調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)

D．克隆猴和核供體所具有的微小差異來自基因突變或者染色體變異

11．某小組通過PCR（假設(shè)引物長度為8個(gè)堿基，短于實(shí)際長度）獲得了含有目的基因的DNA片段，并用

限制酶進(jìn)行酶切（如圖），再用所得片段與質(zhì)粒連接成功構(gòu)建了基因表達(dá)載體。下列敘述正確的是（）

A．其中一個(gè)引物序列為3'-TGCGCAGT-5'

B．步驟①所用的酶是SpeI和CfoI

C．用步驟①的酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切，至少獲得2個(gè)片段

D．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要使用限制酶和DNA聚合酶

12．紫外線引發(fā)的DNA損傷，可通過“核苷酸切除修復(fù)（NER）”方式修復(fù)，機(jī)制如圖所示。著色性干皮癥（XP）

患者的NER酶系統(tǒng)存在缺陷，受陽光照射后，皮膚易出現(xiàn)炎癥，進(jìn)而發(fā)展成皮膚癌。下列敘述錯(cuò)誤的是

（）

A．圖中切口的產(chǎn)生應(yīng)是限制酶的作用

B．填補(bǔ)缺口時(shí)，新鏈合成以5'到3'的方向進(jìn)行

C．在DNA復(fù)制時(shí)可以進(jìn)行缺口修復(fù)

D．XP患者年齡增長，發(fā)生皮膚癌的可能性會(huì)下降

13．科學(xué)家常利用λ-Red同源重組酶系統(tǒng)進(jìn)行基因敲除。圖為科學(xué)家運(yùn)用A-Red同源重組酶系統(tǒng)到大腸桿菌

（E．coli）內(nèi)進(jìn)行靶基因敲除的過程，其中重組質(zhì)粒pKD46在30℃時(shí)正常復(fù)制，而37℃時(shí)自動(dòng)丟失。下列

說法正確的是（）

A．HA1和HA2分別添加在兩種引物的5'和3'端

B．過程I和Ⅱ的培養(yǎng)溫度分別是30℃、37℃

C．靶基因敲除過程，只發(fā)生磷酸二酯鍵的斷裂及合成

D．若過程I是使用含青霉素的培養(yǎng)基成功篩選出含質(zhì)粒pKD46的大腸桿菌，則說明該大腸桿菌自身含

有青霉素抗性基因

14．雙脫氧測(cè)序法（Sangtr法）是第一代DNA測(cè)序方法。在4支試管中分別加入4種dNTP和少量的1種

ddNTP進(jìn)行PCR，再把PCR產(chǎn)物變性，利用電泳進(jìn)行分離，根據(jù)結(jié)果確定特定堿基的位置。通過該方法測(cè)定

并比較某疾病患者與對(duì)照個(gè)體DNA模板鏈的一段堿基序列，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

注：dNTP是PCR的四種原料；雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）有ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP四種；在DNA

聚合酶作用下，ddNTP與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點(diǎn)，以加入ddATP的體系為例：若配對(duì)的為ddATP，延

伸終止；若配對(duì)的為dATP，繼續(xù)延伸

A．5'-TAGTGCCCATC-3'為對(duì)照個(gè)體的一段序列

B．PCR過程中需要DNA聚合酶，不需要DNA解旋酶和DNA連接酶

C．上述PCR反應(yīng)體系中模板鏈需要足夠多

D．患者該段序列中某位點(diǎn)的堿基C突變?yōu)門

15．抗蟲和耐除草劑玉米“雙抗12-5”是我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售等環(huán)

節(jié)，可采用PCR技術(shù)進(jìn)行基因監(jiān)測(cè)，為轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管提供依據(jù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A．PCR開始階段的預(yù)變性可使模板DNA變性更充分

B．PCR循環(huán)過程中，復(fù)性的目的是使DNA聚合酶與模板相結(jié)合

C．進(jìn)行PCR基因監(jiān)測(cè)時(shí)，應(yīng)使用待檢目的基因的特征序列作為引物

D．安全監(jiān)管中，應(yīng)阻止檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因擴(kuò)增產(chǎn)物的非轉(zhuǎn)基因標(biāo)識(shí)農(nóng)產(chǎn)品上市

16．基因工程技術(shù)給人類生產(chǎn)生活和醫(yī)療帶來巨大的影響，下面有關(guān)說法正確的是（）

A．限制酶具有專一性，因此不同的限制酶不能產(chǎn)生相同的黏性末端

B．在自然條件下，農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不適用于將目的基因?qū)氪蠖鄶?shù)的單子葉植物細(xì)胞

C．只要有證據(jù)證明轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品不安全，就應(yīng)禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究

D．將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的調(diào)控元件重組在一起，導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的乳腺細(xì)胞，可獲

得乳腺生物反應(yīng)器

17．隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，其安全性問題引發(fā)了極大的關(guān)注，下列敘述錯(cuò)．誤．的是（）

A．轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品可能會(huì)引發(fā)過敏反應(yīng)

B．轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物中都含有會(huì)危害健康的毒性蛋白

C．轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物可通過傳粉將轉(zhuǎn)入的基因擴(kuò)散到其近緣物種中

D．對(duì)轉(zhuǎn)基因安全性的爭議源于對(duì)基因結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控機(jī)制了解有限

18．CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于基因治療等領(lǐng)域。其基本工具sgRNA/Cas9來源于原核細(xì)胞，

包括具有導(dǎo)向功能的sgRNA和行使DNA雙鏈切割功能的Cas9蛋白，技術(shù)原理如圖甲所示?；卮鹣铝袉栴}：

I.某研究團(tuán)隊(duì)以人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞、Lenti-CAS9-sgRNA質(zhì)粒等為材料，進(jìn)行原位定