1植物油脂—葉綠素a和葉綠素a'降解產(chǎn)物的測定（脫鎂葉綠素a，a'和焦脫鎂葉綠素）ISO661動(dòng)植物油脂試樣的制備（Animalandvegetablefats焦脫鎂葉綠素a（葉綠素降解產(chǎn)物中的含量）pyropheophytina（contentinchlorophyll焦脫鎂葉綠素a的質(zhì)量除以脫鎂葉綠素a，a'和焦脫鎂葉綠素分離。用RP18-HPLC分析洗脫液，并使用可見-紫外光檢測器在410nm處監(jiān)注：由于缺少脫鎂葉綠素和焦脫鎂葉綠素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，所以用葉綠素a來生產(chǎn)這些降解產(chǎn)物。脫鎂葉綠素是通過葉綠5.6正庚烷或正己烷。5.7石油醚和乙醚混合物，體積分?jǐn)?shù):石油醚=90mL/100mL;乙醚=10mL/100mL。6.1.1高效液相系統(tǒng)：由泵、進(jìn)樣裝置(20μL器或熒光檢測器(激發(fā)波長λex=430nm，發(fā)射以下條件被認(rèn)為是合適的:——流動(dòng)相:水、甲醇、丙酮(6.1.3);2注：此外，內(nèi)部二氧化硅微型柱也可用于分離。為此，使用硅膠60用于柱層析(0.移到有塞的燒瓶中。加入5%的水，搖勻，直到?jīng)]有結(jié)塊和粉末自由流動(dòng)(在自動(dòng)振動(dòng)機(jī)中1小時(shí))。經(jīng)過處理的采樣不是本文件所規(guī)定的內(nèi)容，推薦采用ISO59測定結(jié)果34可用于典型色譜圖的參考，其他色素由于不穩(wěn)定性而不能作為參考。鑒定脫鎂葉綠素a、脫鎂葉綠素a′是相等的。焦脫鎂葉綠素a含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)的百分比計(jì)，ωPPPa，是根據(jù)峰面積比計(jì)算的，如下:附錄C為該標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室間協(xié)同驗(yàn)證數(shù)據(jù)的匯總。所得的數(shù)值可能不適用于其他濃度范圍和測試物實(shí)驗(yàn)，兩次單試驗(yàn)結(jié)果之間的絕對差值，超過表B.2中給出的重復(fù)性極限值r試獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果，超出表B.1中給出的再現(xiàn)性R值的情況不檢測報(bào)告應(yīng)包括:）；5本附錄描述了另一種方法。這些油不經(jīng)任何前處理，直接用高效液相A.2HPLC溶劑A.2.1水，色譜級。A.3.1二元高效液相色譜系統(tǒng)：含有泵、進(jìn)樣裝置（每環(huán)20μL）或自動(dòng)進(jìn)樣器、熒光檢測器(λexA.3.2色譜柱：長250mm，內(nèi)徑4.0mm或4.6mm，填充反相C18顆粒，粒徑5μm。A.4.2將測試樣品放入高效液相色譜裝置（C.3）。按照表C.1設(shè)置條件，典型色譜圖參見圖C.1。076圖B.1葉綠素降解產(chǎn)物中焦脫鎂葉綠素含量為5%的特級初榨橄欖油的HPLC色譜圖8圖B.2葉綠素降解產(chǎn)物中焦脫鎂葉綠素含量為30%的特級初榨橄欖油的HPLC色譜圖9該方法的精度是由脂肪、油脂、脂肪產(chǎn)品、相關(guān)產(chǎn)品和原材料分析聯(lián)合委員會（DIN/DGF）組織的一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室間研究的結(jié)果，來自法國、德國和意大利的16個(gè)實(shí)驗(yàn)室參與了該研究。該研究于2005年對5