第44講植物組織培養(yǎng)及植物有效成份提取第十二單元生物技術(shù)實(shí)踐第1頁(yè)[考綱點(diǎn)擊]1.植物組織培養(yǎng)2.從生物材料中提取一些特定成份第十二單元生物技術(shù)實(shí)踐第2頁(yè)一、植物組織培養(yǎng)1．培養(yǎng)基(1)成份：大量元素、微量元素、有機(jī)成份、____________和瓊脂。(2)類型：_______________、發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。(3)作用：為植物組織或器官生長(zhǎng)和發(fā)育提供___________。(4)制備：配制各種母液→配制培養(yǎng)基→__________。激素MS培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)條件滅菌第3頁(yè)2．組織培養(yǎng)(1)含義：在無(wú)菌和人工控制條件下，將離體植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制培養(yǎng)基上，給予適宜培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成____________。(2)原理：植物細(xì)胞含有全能性。(3)過(guò)程：完整植株脫分化再分化第4頁(yè)二、植物有效成份提取1．植物芳香油提取(1)植物芳香油主要化學(xué)成份：萜類化合物及其衍生物，含有很強(qiáng)_______性。提取方法有蒸餾、______和萃取等。揮發(fā)壓榨第5頁(yè)水蒸氣蒸餾法NaCl無(wú)水Na2SO4過(guò)濾第6頁(yè)壓榨壓榨第7頁(yè)水萃取紙層析法石油醚第8頁(yè)1.(·江西南昌市統(tǒng)考)制備好MS培養(yǎng)基用于植物組織培養(yǎng)時(shí)，需要加入植物激素。(

)2.被子植物花粉發(fā)育要經(jīng)過(guò)小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。(

)3.二倍體植株花粉經(jīng)脫分化與再分化后可得到穩(wěn)定遺傳植株。(

)4.培育草莓脫毒苗所采取主要技術(shù)是組織培養(yǎng)。(

)×√×√第9頁(yè)5.萃取是利用了芳香油易溶于有機(jī)溶劑特征進(jìn)行提取一個(gè)方法。(

)6.蒸餾法試驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解下來(lái)，再把水蒸發(fā)掉，剩下就是芳香油。(

)7.水溶性和水不溶性有機(jī)溶劑都能夠用于提取胡蘿卜素。(

)8.(·南師大附中期末)影響萃取效率原因除了萃取劑性質(zhì)和使用量之外，還有原料顆粒大小、緊密程度、含水量、萃取溫度和時(shí)間等。(

)√××√第10頁(yè)考點(diǎn)一植物組織培養(yǎng)成份作用微量元素和大量元素蔗糖甘氨酸、維生素、煙酸、肌醇提供植物細(xì)胞生活所必需無(wú)機(jī)鹽提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝路徑受一定影響后所產(chǎn)生特殊營(yíng)養(yǎng)需求第11頁(yè)2.脫分化和再分化比較過(guò)程特點(diǎn)條件脫分化再分化外植體成為愈傷組織排列疏松、高度液泡化薄壁細(xì)胞團(tuán)愈傷組織成為叢芽或胚狀體結(jié)構(gòu)有根、芽或有生根、發(fā)芽能力離體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素和其它適宜條件第12頁(yè)使用次序試驗(yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素同時(shí)使用有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化細(xì)胞既分裂也分化分化頻率提升第13頁(yè)生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素結(jié)果比值高時(shí)比值低時(shí)比值適中促進(jìn)根分化，抑制芽形成促進(jìn)芽分化，抑制根形成促進(jìn)愈傷組織形成第14頁(yè)第15頁(yè)第16頁(yè)第17頁(yè)新萌生側(cè)枝(或生長(zhǎng)旺盛嫩枝)母液滅菌(高壓蒸汽滅菌)單核靠邊第18頁(yè)abc全能性適中生長(zhǎng)素第19頁(yè)外植體消毒時(shí)間太短第20頁(yè)解析:(1)未開花植株莖上新萌生側(cè)枝比較幼嫩，分裂能力強(qiáng)，輕易誘導(dǎo)脫分化、再分化；配制培養(yǎng)基時(shí)，要先配制培養(yǎng)基所需成份母液，接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。(2)由高度分化植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織過(guò)程叫脫分化；脫分化產(chǎn)生愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，又能夠重新分化出根或芽等器官，叫再分化。(3)愈傷組織分化是否及產(chǎn)生根或芽，取決于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度比值及使用先后次序，當(dāng)細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素比值低時(shí)，誘導(dǎo)根分化；二者比值處于中間水平，愈傷組織只生長(zhǎng)不分化；二者比值高時(shí)，誘導(dǎo)芽形成。第21頁(yè)(4)隨滅菌時(shí)間推移、培養(yǎng)基pH增大、溫度升高，污染率在一定范圍內(nèi)波動(dòng)，而外植體消毒時(shí)間越長(zhǎng)，污染率越低，說(shuō)明污染主要是由外植體消毒時(shí)間短造成。第22頁(yè)考點(diǎn)二植物有效成份提取提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法試驗(yàn)原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)植物芳香油攜帶出來(lái)經(jīng)過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可取得芳香油第23頁(yè)提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法方法步驟適用范圍(1)水蒸氣蒸餾;(2)分離油層;(3)除水過(guò)濾(1)石灰水浸泡、漂洗;(2)壓榨、過(guò)濾靜置;(3)再次過(guò)濾(1)粉碎、干燥;(2)萃取、過(guò)濾;(3)濃縮

適合用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)芳香油適合用于柑橘、檸檬等易焦糊原料提取適用范圍廣,要求原料顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶劑中第24頁(yè)提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法優(yōu)點(diǎn)不足簡(jiǎn)單易行，便于分離生產(chǎn)成本低,易保持原料原有結(jié)構(gòu)和功效出油率高,易分離水中蒸餾會(huì)造成原料焦糊和有效成份水解等問(wèn)題分離較為困難,出油率相對(duì)較低使用有機(jī)溶劑處理不妥會(huì)影響芳香油質(zhì)量第25頁(yè)第26頁(yè)影響原因處理方法萃取劑性質(zhì)原料顆粒大小、緊密程度材料含水量萃取溫度萃取時(shí)間用水不溶性有機(jī)溶劑粉碎干燥探索最正確萃取溫度，嚴(yán)格控制溫度適當(dāng)延長(zhǎng)萃取時(shí)間第27頁(yè)第28頁(yè)第29頁(yè)第30頁(yè)水蒸氣不是橘黃萃取水浴負(fù)第31頁(yè)溶有胡蘿卜素萃取劑去除萃取劑A和C胡蘿卜素其它色素和雜質(zhì)第32頁(yè)解析:(1)圖1中裝置為蒸餾裝置，提取玫瑰精油可用水蒸氣蒸餾法。蒸餾時(shí)，玫瑰精油和水蒸氣一起蒸餾出來(lái),經(jīng)冷凝后得到是油水混合物,不是純玫瑰精油。(2)胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶。提取胡蘿卜素慣用萃取法。因?yàn)橛袡C(jī)溶劑易燃易爆,所以為了加緊胡蘿卜素溶解,常采取水浴加熱。提取效率與原料顆粒含水量呈負(fù)相關(guān)。(3)萃取、過(guò)濾得到液體是溶有胡蘿卜素萃取劑,因?yàn)楹}卜素不易揮發(fā),而萃取劑易揮發(fā),所以能夠利用蒸餾裝置蒸發(fā)掉萃取劑。(4)因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)胡蘿卜