2025屆四川省普通高中學高考壓軸卷生物試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)細胞內(nèi)物質(zhì)含量比值的敘述中，正確的是（）A．細胞內(nèi)自由水與結(jié)合水的比值，種子萌發(fā)時比休眠時低B．人體細胞內(nèi)O2與CO2的比值，線粒體內(nèi)比細胞質(zhì)基質(zhì)低C．細胞中RNA與DNA的比值，代謝旺盛的細胞比衰老細胞低D．生物膜上蛋白質(zhì)與脂質(zhì)的比值，線粒體內(nèi)膜比外膜低2．人類基因組計劃測定人的22號染色體約由5000萬個堿基單位組成，分析發(fā)現(xiàn)22號染色體上約有545個基因，下列有關(guān)關(guān)分析正確的是A．由22號染色體DNA轉(zhuǎn)錄的mRNA分子中堿基約2500萬個B．神經(jīng)細胞內(nèi)的22號染色體DNA可轉(zhuǎn)錄出545種mRNAC．DNA聚合酶和RNA聚合酶的結(jié)合位點分別在DNA和RNAD．在細胞周期中，mRNA的種類和含量在不斷發(fā)生變化3．下列生物大分子空間結(jié)構(gòu)改變后，導致其功能喪失的是（）A．解旋酶使DNA分子的空間結(jié)構(gòu)改變B．RNA聚合酶使基因片段的空間結(jié)構(gòu)改變C．高溫引起抗體的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變D．刺激引起離子通道蛋白空間結(jié)構(gòu)改變4．下圖是某個海島上部分生物之間的食物關(guān)系圖，相關(guān)敘述正確的是A．圖中顯示了5個生物種群組成的4條食物鏈B．碳在圖中生物之間以有機物的形式循環(huán)流動C．信息傳遞在圖中生物之間可以雙向進行D．圖中生物的能量可流向分解者，但分解者的能量不能流向這些生物5．對斐林試劑和雙縮脲試劑的配方，敘述不正確的是（）A．雙縮脲試劑和斐林試劑都含有NaOH溶液和CuSO4溶液B．斐林試劑是由質(zhì)量濃度為1．15g/mL的CuSO4溶液中和等量的質(zhì)量濃度為1．1/gmL的NaOH溶液配制而成，用時兩種溶液等量混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配C．雙縮脲試劑是將質(zhì)量為1．lg/mL的NaOH溶液滴入質(zhì)量濃度為1．11/mL的CuSO4溶液中混合而成的D．雙縮脲試劑由質(zhì)量濃度為1．1g/mL氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為1．11g/mL硫酸銅溶液組成6．下圖表示酵母菌培養(yǎng)過程中其數(shù)量的變化情況，下列分析正確的是（）A．酵母菌達到的最大值與起始數(shù)量有直接關(guān)系B．a(chǎn)b段酵母菌數(shù)量下降可能是營養(yǎng)不足或pH下降導致的C．若bc段過濾掉培養(yǎng)液中的有害物質(zhì)并增加營養(yǎng)，酵母菌數(shù)量將持續(xù)增加D．cd段酵母菌的數(shù)量基本不變，說明在這個階段酵母菌不進行繁殖二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）PRSV是單鏈RNA病毒，由蚜蟲傳播危害木瓜，華南農(nóng)業(yè)大學通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法成功培育出中國首例抗PRSV轉(zhuǎn)基因木瓜。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育植物抗病毒品種是目前常用的方法，請回答：（1）基因與染色體的關(guān)系是：一條染色體上有多個基因，基因在___________________。（2）轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，該步驟必須用到的工具酶包括限制酶和_______________，基因表達載體中含有啟動子和終止子，這兩者是___________(填“復制”或“轉(zhuǎn)錄”)過程所必須的。此步驟中一般用兩種___________處理，目的是防止Ti質(zhì)?；騙_____________自身環(huán)化、防止目的基因和Ti質(zhì)粒反向連接。（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是當植物體受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的_________化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞；如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的_____________上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進入植物細胞，并將其插入到植物細胞的染色體DNA上。8．（10分）基因工程目前已成為生物科學的核心技術(shù)，在農(nóng)牧業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生等方面有良好的應用前景。回答下列問題：（1）基因表達載體中的復制原點，本質(zhì)上是一段富含A—T堿基對的DNA序列，它易與引物結(jié)合而成為復制起點的原理是____________。啟動子與復制原點的化學本質(zhì)____________（填“相同”或“不同”），啟動子功能的含義主要是________________________。（2）利用PCR技術(shù)擴增目的基因，可在PCR擴增儀中進行的三步反應是____________。若在PCR擴增儀中加入模板DNA分子100個，則經(jīng)過30次循環(huán)后，DNA分子數(shù)量將達到____________個。（3）植物基因工程技術(shù)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力，如抗蟲性、抗病性等。我國的抗蟲棉就是通過____________法導人抗蟲基因____________基因培育成功的；抗病毒的轉(zhuǎn)基因小麥是導入抗病毒基因培育的，使用最多的抗病毒基因有________________________。9．（10分）圖甲表示O2濃度對某種蔬菜產(chǎn)生CO2的影響，圖乙表示當其他條件均適宜時，該種蔬菜在不同溫度和不同光照強度條件下的光合速率變化情況。請回答下列問題：（1）圖甲中A點時，植物細胞產(chǎn)生的CO2場所是_______________；影響A點位置高低的主要環(huán)境因素是__________。（2）為了有利于貯藏該種蔬菜，貯藏室內(nèi)的O2濃度應該調(diào)節(jié)到圖甲中_______點所對應的濃度。B點之后，CO2釋放量增加，其主要原因是_____________________________。（3）圖乙中，25℃條件下，光照強度為2klx時，該植物葉肉細胞中產(chǎn)生ATP的細胞器是___________________；與15℃相比，25℃條件下該植物的___________________________________________較高，導致光合速率較大；若降低CO2濃度，則P點向______________（方向）移動。10．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。11．（15分）下圖為人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)部分調(diào)節(jié)過程示意圖，A~F表示相關(guān)激素。請據(jù)圖同答：(1)當細胞外液滲透壓升高時，激素A____（名稱）釋放量增加，該激素由____釋放，而只作用于腎小管和集合管細胞的原因是____。(2)正常人飯后半小時，血液中____（填字母）激素含量明顯增多，該激素通過____（途徑）使血糖濃度保持穩(wěn)態(tài)。(3)受到寒冷刺激時，激素B、E、F中分泌量首先增加的是____，F(xiàn)的增多對B、E分泌的產(chǎn)生____。(4)研究者給家兔注射鏈脲佐菌素（一種可以特異性破壞胰島B細胞的藥物），一段時間后測定血液中的激素D的含量，預期與對照組相比，血液中激素D含量____。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

1、自由水與結(jié)合水的比值越大，細胞代謝越旺盛，抗逆性越差，反之亦然。2、人體細胞內(nèi)二氧化碳的運輸是由線粒體運輸?shù)郊毎|(zhì)基質(zhì)，二氧化碳的運輸是自由擴散，因此線粒體內(nèi)二氧化碳濃度高于細胞質(zhì)基質(zhì)，氧氣由細胞質(zhì)基質(zhì)通過自由擴散運輸?shù)骄€粒體，因此細胞質(zhì)基質(zhì)中氧氣的濃度大于線粒體?！驹斀狻緼、種子萌發(fā)時細胞代謝旺盛，自由水含量增多，細胞內(nèi)自由水與結(jié)合水的比值比休眠時高，A錯誤；B、人體細胞在進行有氧呼吸時消耗氧氣，釋放二氧化碳，其場所為線粒體，故同細胞質(zhì)基質(zhì)相比，線粒體氧氣濃度降低，二氧化碳濃度升高，所以人體細胞內(nèi)O2與CO2的比值，線粒體內(nèi)比細胞質(zhì)基質(zhì)低，B正確；C、代謝旺盛的細胞，需要合成大量的蛋白質(zhì)，通過轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA量比衰老細胞多，而代謝旺盛的細胞與衰老的細胞核DNA含量基本相同，因此，細胞中RNA與DNA的比值，代謝旺盛的細胞比衰老細胞高，C錯誤；D、線粒體內(nèi)膜的不同部位向內(nèi)腔折疊形成嵴，而且內(nèi)膜上還附著有多種與有氧呼吸有關(guān)的酶（蛋白質(zhì)），所以線粒體內(nèi)膜上蛋白質(zhì)與脂質(zhì)的比值高于線粒體外膜，D錯誤。故選B。2、D【解析】

A、22號染色休約由5000萬個堿基單位組成，545個基因共含堿基小于5000萬個堿基，每個基因轉(zhuǎn)錄時上下游的非編碼區(qū)均不轉(zhuǎn)錄到RNA上，因此就是22號染色體上基因全部轉(zhuǎn)錄，mRNA分子中堿基之和也小于2500萬個，A錯誤；B、22號染色體上基因并不一定全部轉(zhuǎn)錄，B錯誤；C、DNA聚合酶是DNA復制時起催化作用的，RNA聚合酶是轉(zhuǎn)錄時起催化作用的，結(jié)合位點都在DNA上，C錯誤；D、由于基因有選擇性表達，在細胞周期中不同時期，mRNA的種類和含量在不斷犮生變化，D正確。故選D。【點睛】結(jié)合題目中22號染色休約由5000萬個堿基單位組成，分析發(fā)現(xiàn)22號染色體上約有545個基因的信息逐項分析，易因?qū)θ旧w和基因的關(guān)系及基因的表達過程理解不準確而誤選。3、C【解析】

1、DNA分子解旋后，空間結(jié)構(gòu)改變，但功能未喪失，如DNA解旋后進行復制和轉(zhuǎn)錄。

2、蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸，氨基酸通過脫水縮合反應形成肽鏈，肽鏈盤曲折疊形成具有一定的空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，如果蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變，其功能也改變?！驹斀狻緼、解旋酶使DNA分子的空間結(jié)構(gòu)改變后，只斷裂氫鍵，DNA功能沒變，A錯誤；B、RNA聚合酶與DNA上的啟動子結(jié)合，使基因片段的空間結(jié)構(gòu)改變，DNA仍能發(fā)揮作用，B錯誤；C、抗體成分是蛋白質(zhì)，高溫引起抗體的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變后，使其變性失活，功能喪失，C正確；D、刺激引起離子通道蛋白空間結(jié)構(gòu)改變，通道打開，離子能通過通道蛋白，通道蛋白仍具有活性，D錯誤。故選C。4、C【解析】

A、圖中的植物多種多樣，不同種植物屬于不同的種群，其他生物也類似于植物，都有多個種群，因此圖中的種群數(shù)量遠遠多于5個，A錯誤；B、碳在圖中生物之間以有機物的形式順著食物鏈單向流動，不能循環(huán)流動，B錯誤；C、信息傳遞在圖中生物之間可以雙向進行，如鼬根據(jù)兔留下的氣味捕食兔，而兔根據(jù)黃鼬留下的氣味躲避鼬的捕食，C正確；D、當圖中的生物以分解者為食物時，能量就從分解者流向圖中所示的生物，D錯誤。故選C。5、C【解析】

斐林試劑是由甲液（質(zhì)量濃度為1.1g/mL氫氧化鈉溶液）和乙液（質(zhì)量濃度為1.15g/mL硫酸銅溶液）組成，用于鑒定還原糖，使用時要將甲液和乙液混合均勻后再加入含樣品的試管中，且需水浴加熱；

雙縮脲試劑由A液（質(zhì)量濃度為1.1g/mL氫氧化鈉溶液）和B液（質(zhì)量濃度為1.11g/mL硫酸銅溶液）組成，用于鑒定蛋白質(zhì)，使用時要先加A液混勻后再加入B液?！驹斀狻緼、雙縮脲試劑和斐林試劑都含有NaOH溶液和CuSO4溶液，A正確；

B、由上述分析可知，斐林試劑是由質(zhì)量濃度為1.15g/mL的CuSO4溶液和等量的質(zhì)量濃度為1.1g/mL的NaOH溶液配制而成，用時兩種溶液等量混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，B正確；

C、雙縮脲試劑是質(zhì)量濃度為1.1g/mL的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為1.11g/mL的CuSO4溶液構(gòu)成的，但是兩種溶液需要分開使用，C錯誤；

D、雙縮脲試劑由質(zhì)量濃度為1.1g/mL氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為1.11g/mL硫酸銅溶液組成，D正確。

故選C。6、B【解析】

“S”型曲線是受限制的指數(shù)增長函數(shù)，描述食物、空間都有限，有天敵捕食的真實生物數(shù)量增長情況，存在環(huán)境容納的最大值K。酵母菌培養(yǎng)過程較為符合S型增長趨勢，據(jù)此分析作答?！驹斀狻緼、酵母菌達到的最大值（K值）與環(huán)境條件有關(guān)，起始數(shù)量可能會影響達到K值的時間，但不會改變K的數(shù)量，A錯誤；B、ab段酵母菌數(shù)量下降可能是酵母菌數(shù)目增多導致營養(yǎng)不足或代謝產(chǎn)物引起pH下降導致的，B正確；C、若bc段過濾掉培養(yǎng)液中的有害物質(zhì)并增加營養(yǎng)，酵母菌數(shù)量可能會增加，但由于環(huán)境條件限制，不會一直增加，C錯誤；D、cd段酵母菌的數(shù)量基本不變，說明在該階段酵母菌的出生率與死亡率基本相等，D錯誤。故選B?！军c睛】本題考查種群數(shù)量變化的相關(guān)知識，屬于圖形分析題，利用好相關(guān)的知識，讀懂圖意，進行圖文轉(zhuǎn)換即可得出正確選項。二、綜合題：本大題共4小題7、染色體上呈線性排列DNA連接酶轉(zhuǎn)錄限制酶目的基因酚類T-DNA【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因在染色體上，且一條染色體含有多個基因，基因在染色體上呈線性排列。（2）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建。構(gòu)建基因表達載體時，首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA?；虮磉_載體中的啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動目的基因通過轉(zhuǎn)錄合成mRNA，終止子是轉(zhuǎn)錄的結(jié)束部位，因此啟動子和終止子是轉(zhuǎn)錄過程所必須的。為了防止Ti質(zhì)?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化、防止目的基因和Ti質(zhì)粒反向連接，在基因表達載體構(gòu)建中一般用兩種限制酶處理。（3）將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其依據(jù)主要是：當植物受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞，這時農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上?！军c睛】本題考查了基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結(jié)合所學的知識準確答題。8、A-T堿基對多，相對氫鍵少，DNA易解旋相同啟動子驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄成mRNA高溫變性，低溫退火、中溫延伸100×230花粉管通道Bt毒蛋白病毒外殼蛋白基因和病毒的復制酶基因【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復性、延伸三步。在循環(huán)之前，常需要進行一次預變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。PCR過程為:變性，當溫度上升到90℃以上時，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。復性，當溫度降低到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。延伸，溫度上升到72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈?！驹斀狻浚?）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因和復制原點等，所以復制原點和啟動子化學本質(zhì)相同，都是一段特定的DNA序列。已知復制原點中含A-T堿基對多，因此含氫鍵少，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易解旋，可做為復制的起點，而啟動子是驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄成mRNA的。（2）PCR技術(shù)擴增目的基因包括三步反應：高溫變性（氫鍵斷裂）、低溫退火（復性）形成氫鍵和中溫延伸形成子鏈。PCR擴增儀可以自動調(diào)控溫度，實現(xiàn)三步反應循環(huán)完成。PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制，結(jié)果使DNA呈指數(shù)增長，即2n（n為擴增循環(huán)的次數(shù)），所以100個DNA分子，30次循環(huán)，使DNA數(shù)量可達到100×230個。（3）植物基因工程培育抗蟲抗病等轉(zhuǎn)基因植物用到的抗蟲基因有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因等，我國的抗蟲棉就是利用花粉管通道法導入Bt毒蛋白基因培育的；抗病毒基因有病毒外殼蛋白基因和病毒的復制酶基因。【點睛】基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的關(guān)鍵步驟，熟知基因表達載體中各部分的結(jié)構(gòu)和功能是解答本題的關(guān)鍵，最后一問提醒學生要關(guān)注生物科學的新進展。9、細胞質(zhì)基質(zhì)溫度B隨著O2濃度增加，有氧呼吸逐漸增強線粒體、葉綠體光合作用相關(guān)酶的活性左下方【解析】

本題考查實際光合作用、表觀光合作用和細胞呼吸的相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論能力?！驹斀狻浚?）A點時沒有氧氣，因此只進行無氧呼吸，植物細胞產(chǎn)生的CO2場所是細胞質(zhì)基質(zhì)；影響A點位置高低即影響呼吸作用的主要環(huán)境因素是溫度。（2）貯藏室內(nèi)的O2濃度應該調(diào)節(jié)到圖甲中B點所對應的濃度時，產(chǎn)生二氧化碳的量最少，有機物消耗最少，最有利于貯藏該種蔬菜。B點之后，隨著氧氣濃度的增大，無氧呼吸受抑制程度越強，CO2釋放量增加的主要原因是有氧呼吸速率增大。（3）25℃條件下，光照強度為2klx時，該植物凈光合作用等于零，光合作用速率等于呼吸作用速率，葉肉細胞中產(chǎn)生ATP的細胞器是線粒體和葉綠體；溫度通過影響酶的活性影響代謝，所以與15℃相比，25℃條件下該植物的光合作用有關(guān)的酶的活性較高，導致光合速率較大；若降低CO2濃度，植物光飽和點降低，達到光飽和點所需光照強度隨之降低，所以P點向左下方移動?！军c睛】乙圖縱坐標在橫坐標為零時表示呼吸作用；縱坐標為零時表示光合作用速率等于呼吸作用速率；小于零時呼吸作用速率大于光合作用速率；大于零時表示光合作用速率大于呼吸作用速率。P點是最大光合作用速率，當一個條件減弱時，最大光合作用速率降低，所需橫坐標值也隨之降低，左移，P點左下移；反之，橫坐標值升高，右移，P點右上移。10、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法。3、PCR技術(shù)擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術(shù)。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達效率是否提高，則需設(shè)置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重