生物制藥技術工藝操作流程題姓名_________________________地址_______________________________學號______________________密封線1.請首先在試卷的標封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細閱讀各種題目，在規(guī)定的位置填寫您的答案。一、單選題1.生物制藥技術中，以下哪一種方法是用來提取目的蛋白的？

a.超濾

b.離心

c.離子交換

d.柱層析

2.以下哪一項不是生物制藥過程中的純化步驟？

a.離心

b.過濾

c.沉淀

d.洗脫

3.重組蛋白生產過程中，哪種細胞表達系統(tǒng)被廣泛應用？

a.哺乳動物細胞

b.植物細胞

c.微生物細胞

d.以上都是

4.以下哪種方法用于檢測蛋白質的純度？

a.光密度法

b.紫外光譜法

c.紅外光譜法

d.以上都是

5.生物制藥過程中，以下哪種緩沖液常用于pH調節(jié)？

a.氨水

b.磷酸鹽緩沖液

c.氯化鈉溶液

d.以上都是

6.以下哪一項不是蛋白質折疊過程中的影響因素？

a.溫度

b.pH值

c.溶劑類型

d.蛋白質濃度

7.生物制藥中，哪種技術用于蛋白質的活性檢測？

a.ELISA

b.Westernblot

c.流式細胞術

d.以上都是

8.以下哪種方法用于蛋白質的結晶？

a.萃取法

b.超濾法

c.結晶法

d.離心法

答案及解題思路：

1.答案：d.柱層析

解題思路：柱層析是生物制藥中常用的蛋白質分離純化技術，利用固定相與流動相之間的分配系數(shù)差異，使目的蛋白在固定相與流動相之間進行分離。

2.答案：d.洗脫

解題思路：洗脫是蛋白質純化過程中的一個步驟，通過改變緩沖液條件使結合在固定相上的蛋白質逐漸洗脫下來，而雜質則被留在固定相中。

3.答案：d.以上都是

解題思路：重組蛋白生產過程中，哺乳動物細胞、植物細胞和微生物細胞都已被廣泛應用，不同細胞表達系統(tǒng)具有各自的優(yōu)勢。

4.答案：d.以上都是

解題思路：光密度法、紫外光譜法和紅外光譜法都是檢測蛋白質純度的常用方法，它們可以從不同角度反映蛋白質的純度。

5.答案：b.磷酸鹽緩沖液

解題思路：磷酸鹽緩沖液具有良好的緩沖能力，能夠有效調節(jié)生物制藥過程中的pH值，保持生物活性。

6.答案：d.蛋白質濃度

解題思路：蛋白質濃度并不是蛋白質折疊過程中的影響因素，溫度、pH值和溶劑類型等都會影響蛋白質的折疊。

7.答案：d.以上都是

解題思路：ELISA、Westernblot和流式細胞術都是生物制藥中常用的蛋白質活性檢測技術，它們可以從不同層面反映蛋白質的活性。

8.答案：c.結晶法

解題思路：結晶法是蛋白質結晶的一種方法，通過改變溶劑條件，使蛋白質從溶液中析出形成晶體。二、多選題1.以下哪些步驟是生物制藥中的發(fā)酵過程？

a.培養(yǎng)基制備

b.接種

c.搖瓶培養(yǎng)

d.培養(yǎng)基過濾

2.以下哪些因素會影響蛋白質的折疊？

a.溫度

b.pH值

c.溶劑類型

d.蛋白質濃度

3.以下哪些方法是生物制藥中用于蛋白質純化的？

a.離子交換

b.膜過濾

c.超濾

d.離心

4.以下哪些技術可以用于蛋白質的活性檢測？

a.ELISA

b.Westernblot

c.流式細胞術

d.熒光顯微鏡

5.以下哪些緩沖液常用于生物制藥過程中的pH調節(jié)？

a.磷酸鹽緩沖液

b.氯化鈉溶液

c.氨水

d.氫氧化鈉溶液

6.以下哪些方法可以用于蛋白質的結晶？

a.萃取法

b.結晶法

c.離心法

d.超濾法

7.以下哪些技術可以用于蛋白質的分離純化？

a.離子交換

b.膜過濾

c.超濾

d.柱層析

8.以下哪些因素會影響蛋白質的純度？

a.溫度

b.pH值

c.溶劑類型

d.蛋白質濃度

答案及解題思路：

1.答案：a,b,c

解題思路：發(fā)酵過程包括培養(yǎng)基制備、接種和搖瓶培養(yǎng)等步驟，這些步驟為微生物提供生長環(huán)境并啟動生長過程。培養(yǎng)基過濾通常在發(fā)酵完成后進行，以去除微生物和代謝產物。

2.答案：a,b,c,d

解題思路：蛋白質的折疊受到多種因素的影響，包括溫度、pH值、溶劑類型和蛋白質濃度。這些因素可以改變蛋白質的物理化學性質，從而影響其折疊狀態(tài)。

3.答案：a,b,c,d

解題思路：蛋白質純化可以通過多種方法實現(xiàn)，包括離子交換、膜過濾、超濾和離心。每種方法都有其特定的原理和應用場景。

4.答案：a,b,c,d

解題思路：蛋白質的活性檢測可以使用多種技術，如ELISA、Westernblot、流式細胞術和熒光顯微鏡。這些技術可以檢測蛋白質的存在、表達水平和功能活性。

5.答案：a

解題思路：在生物制藥過程中，磷酸鹽緩沖液因其良好的穩(wěn)定性和pH調節(jié)能力而被廣泛用于pH調節(jié)。氯化鈉溶液、氨水和氫氧化鈉溶液雖然可以調節(jié)pH，但不如磷酸鹽緩沖液常用。

6.答案：b

解題思路：蛋白質的結晶通常通過結晶法實現(xiàn)，這是一種將溶解的蛋白質溶液轉化為固體晶體的過程。萃取法、離心法和超濾法主要用于分離和純化，而不是結晶。

7.答案：a,b,c,d

解題思路：蛋白質的分離純化可以通過多種技術實現(xiàn)，包括離子交換、膜過濾、超濾和柱層析。這些技術可以單獨使用或組合使用，以達到最佳的純化效果。

8.答案：a,b,c,d

解題思路：蛋白質的純度受多種因素影響，包括溫度、pH值、溶劑類型和蛋白質濃度。這些因素可以改變蛋白質的溶解性、電荷和穩(wěn)定性，從而影響純度。三、判斷題1.生物制藥技術中，超濾是用于提取目的蛋白的方法之一。（）

答案：√

解題思路：超濾是一種基于分子量差異的分離技術，常用于生物制藥中從混合物中提取目的蛋白，因此這個說法是正確的。

2.生物制藥過程中，離心可以用來分離蛋白質。（）

答案：√

解題思路：離心是利用離心力將混合物中的不同成分根據(jù)密度差異進行分離，因此在生物制藥中，離心是分離蛋白質的常用方法。

3.重組蛋白生產過程中，微生物細胞表達系統(tǒng)被廣泛應用。（）

答案：√

解題思路：微生物細胞，如大腸桿菌，因其繁殖速度快、基因操作簡便等特點，在重組蛋白生產中被廣泛應用。

4.光密度法可以用來檢測蛋白質的純度。（）

答案：×

解題思路：光密度法主要用于測定溶液中蛋白質的濃度，而不是純度。純度檢測通常通過SDSPAGE電泳等方法進行。

5.氨水常用于生物制藥過程中的pH調節(jié)。（）

答案：×

解題思路：氨水通常用于實驗室的清潔和消毒，而在生物制藥中，pH調節(jié)常用磷酸鹽緩沖液等，而不是氨水。

6.蛋白質折疊過程中的影響因素包括溫度、pH值、溶劑類型和蛋白質濃度。（）

答案：√

解題思路：蛋白質折疊是一個復雜的過程，受到多種因素的影響，包括溫度、pH值、溶劑類型和蛋白質濃度等。

7.生物制藥中，ELISA技術用于蛋白質的活性檢測。（）

答案：×

解題思路：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）技術主要用于檢測抗原或抗體，而不是蛋白質的活性。蛋白質活性檢測通常采用生物化學方法。

8.結晶法是生物制藥中用于蛋白質結晶的方法之一。（）

答案：√

解題思路：結晶法是生物制藥中獲取高純度蛋白質的重要方法之一，通過控制條件使蛋白質從溶液中析出結晶。四、填空題1.生物制藥技術中，_________是用于提取目的蛋白的方法之一。

答案：親和層析

解題思路：親和層析是一種利用蛋白質與特定配體之間的特異性相互作用來分離純化蛋白質的方法。

2.重組蛋白生產過程中，_________細胞表達系統(tǒng)被廣泛應用。

答案：哺乳動物細胞

解題思路：哺乳動物細胞表達系統(tǒng)因其能夠產生與人體內源性蛋白質相似的重組蛋白，因此在生物制藥中被廣泛應用。

3.生物制藥過程中，_________可以用來檢測蛋白質的純度。

答案：SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳

解題思路：SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳是一種常用的蛋白質純度檢測方法，通過電泳分離蛋白質并根據(jù)其遷移率判斷純度。

4.生物制藥中，_________常用于pH調節(jié)。

答案：緩沖溶液

解題思路：緩沖溶液能夠抵抗pH變化，保持溶液的pH穩(wěn)定，因此在生物制藥中常用于pH調節(jié)。

5.蛋白質折疊過程中的影響因素包括_________、_________、_________和_________。

答案：氨基酸序列、分子伴侶、環(huán)境因素、折疊中間體

解題思路：蛋白質折疊是一個復雜的過程，受到多種因素的影響，包括蛋白質的氨基酸序列、分子伴侶的作用、環(huán)境因素以及折疊過程中產生的中間體等。

6.生物制藥中，_________技術用于蛋白質的活性檢測。

答案：酶聯(lián)免疫吸附測定

解題思路：酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）是一種常用的蛋白質活性檢測方法，通過抗原與抗體之間的特異性結合來檢測蛋白質活性。

7.生物制藥中，_________是用于蛋白質結晶的方法之一。

答案：滴定法

解題思路：滴定法是一種通過逐漸增加溶液中某種成分的濃度，觀察其與蛋白質的相互作用，以找到蛋白質的最佳結晶條件的方法。

8.影響蛋白質純度的因素包括_________、_________、_________和_________。

答案：操作條件、分離技術、雜質去除、穩(wěn)定性

解題思路：蛋白質純度受多種因素影響，包括操作條件（如溫度、pH等）、分離技術（如層析、電泳等）、雜質去除效果以及蛋白質的穩(wěn)定性等。五、簡答題1.簡述生物制藥技術中發(fā)酵過程的主要步驟。

a.種子擴大培養(yǎng)

b.大規(guī)模發(fā)酵罐接種

c.發(fā)酵條件控制（溫度、pH、溶氧等）

d.細胞生長與代謝

e.產物形成與收集

f.發(fā)酵液處理與分離

2.簡述重組蛋白生產過程中微生物細胞表達系統(tǒng)的優(yōu)點。

a.產量高

b.生產成本低

c.操作簡便

d.可生產多種蛋白質

e.可在生物反應器中實現(xiàn)大規(guī)模生產

3.簡述蛋白質純化過程中常用的方法及其原理。

a.凝膠過濾：根據(jù)分子大小進行分離。

b.離子交換層析：根據(jù)蛋白質所帶電荷差異進行分離。

c.affinitychromatography：利用蛋白質與特定配體的特異性結合進行分離。

d.膜分離技術：根據(jù)分子大小和電荷進行分離。

4.簡述蛋白質折疊過程中的影響因素。

a.氨基酸序列

b.環(huán)境因素（溫度、pH、離子強度等）

c.蛋白質折疊伴侶

d.蛋白質折疊中間體

5.簡述生物制藥中蛋白質結晶的方法及其原理。

a.溫度梯度結晶：通過改變溫度使蛋白質從溶液中析出。

b.鹽度梯度結晶：通過改變溶液中鹽的濃度使蛋白質析出。

c.添加劑結晶：加入特定的添加劑使蛋白質結晶。

d.原理：利用蛋白質在不同條件下的溶解度差異進行結晶。

答案及解題思路：

1.答案：發(fā)酵過程的主要步驟包括種子擴大培養(yǎng)、大規(guī)模發(fā)酵罐接種、發(fā)酵條件控制、細胞生長與代謝、產物形成與收集以及發(fā)酵液處理與分離。解題思路：根據(jù)生物制藥技術中發(fā)酵的基本流程，逐一列出各個步驟。

2.答案：微生物細胞表達系統(tǒng)的優(yōu)點包括產量高、生產成本低、操作簡便、可生產多種蛋白質以及可在生物反應器中實現(xiàn)大規(guī)模生產。解題思路：根據(jù)重組蛋白生產過程中的特點，總結其優(yōu)點。

3.答案：蛋白質純化過程中常用的方法包括凝膠過濾、離子交換層析、親和層析和膜分離技術，這些方法分別基于分子大小、電荷、特異性結合和分子大小與電荷差異進行分離。解題思路：列舉常用的蛋白質純化方法，并解釋其原理。

4.答案：蛋白質折疊過程中的影響因素包括氨基酸序列、環(huán)境因素、蛋白質折疊伴侶和蛋白質折疊中間體。解題思路：分析影響蛋白質折疊的各種因素，并簡要說明其作用。

5.答案：生物制藥中蛋白質結晶的方法包括溫度梯度結晶、鹽度梯度結晶、添加劑結晶等，這些方法利用蛋白質在不同條件下的溶解度差異進行結晶。解題思路：介紹蛋白質結晶的方法，并解釋其原理。六、論述題1.論述生物制藥技術在生物醫(yī)藥領域的應用及其重要性。

a.生物制藥技術的定義與分類

b.生物制藥技術在生物醫(yī)藥領域的具體應用

i.疫苗制備

ii.抗體藥物研發(fā)

iii.蛋白質和多肽藥物的生產

c.生物制藥技術的重要性

i.提高藥物療效

ii.降低藥物副作用

iii.促進新藥研發(fā)

2.論述生物制藥過程中蛋白質純化的重要性及其影響因素。

a.蛋白質純化的定義與目的

b.蛋白質純化的重要性

i.提高藥物質量

ii.降低生產成本

iii.保證藥物安全性

c.影響蛋白質純化的因素

i.蛋白質特性

ii.純化方法選擇

iii.操作條件控制

3.論述生物制藥技術中發(fā)酵過程對生產成本的影響。

a.發(fā)酵過程在生物制藥中的地位

b.發(fā)酵過程對生產成本的影響

i.原料成本

ii.能源消耗

iii.設備投資

c.降低發(fā)酵過程生產成本的策略

4.論述生物制藥技術中蛋白質結晶對產品質量的影響。

a.蛋白質結晶的定義與目的

b.蛋白質結晶對產品質量的影響

i.蛋白質穩(wěn)定性

ii.生物活性

iii.純度

c.影響蛋白質結晶的因素及優(yōu)化策略

5.論述生物制藥技術中不同表達系統(tǒng)對蛋白質生產的影響。

a.生物制藥中常用的表達系統(tǒng)

i.原核表達系統(tǒng)

ii.真核表達系統(tǒng)

b.不同表達系統(tǒng)對蛋白質生產的影響

i.蛋白質表達水平

ii.蛋白質后修飾

iii.生產成本

c.選擇合適的表達系統(tǒng)策略

答案及解題思路：

1.答案：

a.生物制藥技術是指利用生物體或其組成部分（如細胞、酶、蛋白質等）進行藥物研發(fā)和生產的技術。

b.生物制藥技術在生物醫(yī)藥領域的應用廣泛，包括疫苗制備、抗體藥物研發(fā)、蛋白質和多肽藥物的生產等。

c.生物制藥技術的重要性體現(xiàn)在提高藥物療效、降低藥物副作用和促進新藥研發(fā)等方面。

解題思路：

簡要介紹生物制藥技術的定義和分類。

列舉生物制藥技術在生物醫(yī)藥領域的具體應用。

強調生物制藥技術的重要性，結合實際案例進行闡述。

2.答案：

a.蛋白質純化是指通過物理或化學方法去除蛋白質樣品中的雜質，獲得高純度蛋白質的過程。

b.蛋白質純化的重要性體現(xiàn)在提高藥物質量、降低生產成本和保證藥物安全性等方面。

c.影響蛋白質純化的因素包括蛋白質特性、純化方法選擇和操作條件控制。

解題思路：

解釋蛋白質純化的定