2025屆山東省濟(jì)寧鄒城一中高三第二次模擬考試生物試卷注意事項1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下圖是某生態(tài)農(nóng)業(yè)的模式圖，下列相關(guān)分析正確的是（）A．流入該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是蔬菜固定的太陽能總量B．對蔬菜除草、治蟲能提高該生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性C．生態(tài)農(nóng)業(yè)能夠提高物種豐富度和能量傳遞效率D．④過程中存在生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞2．用某種高等植物的純合紅花植株與純合白花植株進(jìn)行雜交，F(xiàn)1全部表現(xiàn)為紅花。若F1自交，得到的F2植株中，紅花為272株，白花為212株；若用純合白花植株的花粉給人紅花植株授粉，得到的子代植株中，紅花為101株，白花為302株。根據(jù)上述雜交實驗結(jié)果推斷，下列敘述正確的是（）A．F2中白花植株都是純合體B．F2中紅花植株的基因型有2種C．控制紅花與白花的基因在一對同源染色體上D．F2中白花植株的基因型種類比紅花植株的多3．2019年8月，英國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了草甘膦（一種除草劑）藥效具有晝夜節(jié)律性。研究人員找到了擬南芥中對草甘膦施用發(fā)生應(yīng)答反應(yīng)的基因，其中72%的草甘膦應(yīng)答基因在清晨的表達(dá)達(dá)到峰值。研究者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在清晨噴施草甘膦對擬南芥的致死效果最好。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．該實驗表明清晨噴施草甘膦對清除田間雜草效果最好B．?dāng)M南芥植物體內(nèi)的基因表達(dá)具有一定的晝夜節(jié)律性C．草甘膦通過干擾擬南芥基因的正常表達(dá)達(dá)到除草目的D．?dāng)M南芥生長具有晝夜節(jié)律性是長期自然選擇的結(jié)果4．下列有關(guān)組成生物體元素和化合物的敘述，正確的是（）A．組成不同細(xì)胞的元素種類基本相同，但含量可能會有差異B．脂質(zhì)的組成元素與糖類完全相同，但其分子中氧的相對含量遠(yuǎn)少于糖類C．蛋白質(zhì)和DNA分子的多樣性都與分子的空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)D．淀粉、糖原、纖維素徹底水解后，得到的產(chǎn)物是不同的5．科學(xué)家用槍烏賊的神經(jīng)纖維進(jìn)行實驗（如圖甲，電流左進(jìn)右出為+），記錄在鈉離子溶液中神經(jīng)纖維產(chǎn)生興奮的膜電位（如圖乙），其中箭頭表示施加適宜刺激，陰影表示興奮區(qū)域。若將記錄儀的微電極均置于膜外，其他條件不變，則測量結(jié)果是A． B．C． D．6．人體的內(nèi)環(huán)境是指（）A．體液 B．細(xì)胞內(nèi)液 C．細(xì)胞外液 D．血液二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）溫室大棚養(yǎng)殖蔬菜瓜果，最重要的是水肥管理。為探究施肥及CO2濃度對藍(lán)莓凈光合速率的影響，科研人員進(jìn)行了相關(guān)實驗，結(jié)果如下圖所示：（注：NPK指添加氮、磷肥和鉀肥;NP指添加氮和磷肥）?；卮鹣铝袉栴}：（1）據(jù)圖分析，實驗的自變量不止一個，除CO2濃度外，還有________________________。（2）a點(diǎn)所代表的含義為________________。（3）CO2濃度為2.0×10-2時，根據(jù)圖表可知，_____組促進(jìn)藍(lán)莓的凈光合速率最低。在CO2濃度為3.0×10-2時，單獨(dú)施用鉀肥藍(lán)莓凈光合速率低的原因是：很多與光合作用過程直接相關(guān)的物質(zhì)的合成離不開N、P等元素，如__________（至少寫兩種）。（4）中耕松土能促進(jìn)無機(jī)鹽的吸收，其原因是________________________。8．（10分）在適宜的溫度和光照條件下，將A、B兩種綠色植物分別置于相同的密閉容器中，測量容器中CO2濃度的變化情況，結(jié)果如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）A、B兩種植物細(xì)胞固定CO2的場所是____________。當(dāng)CO2濃度約為0.8mmol/L時，有人認(rèn)為此時A、B兩種植物的光合作用強(qiáng)度一定相等，你是否認(rèn)同該說法，并說明理由：____________________。（2）在0~15min內(nèi)，A、B兩種植物的光合速率均逐漸下降，其原因是___________。（3）在25~40min內(nèi)，A、B兩種植物所在玻璃容器中CO2含量均沒有發(fā)生變化的原因是___________。（4）若將A、B兩種植物置于同一密閉玻璃容器中，在光照等其他條件適宜的情況下，一段時間內(nèi)，生長首先受影響的植物是______________________。9．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。10．（10分）營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量的原料產(chǎn)物。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。回答下列問題：（1）過程①的接種方法為______，與基本培養(yǎng)基（只含碳源、無機(jī)鹽、水）相比，待測培養(yǎng)皿中特有的成分有______。（2）進(jìn)行②過程培養(yǎng)時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上，原因是______。從______培養(yǎng)基上獲得相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型菌株。釆用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是______。（3）為了進(jìn)一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定，實驗人員進(jìn)行了如下操作：①用接種針挑取______（填“菌落A”或“菌落B”）接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中，28℃振蕩培養(yǎng)1～2天后，離心，取沉淀物用______洗滌3次，并制成菌懸液。②吸取1mL菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，傾注15mL融化并冷卻至45?50℃的基本培養(yǎng)基，待其冷凝后用記號筆在皿底劃分五個區(qū)域，標(biāo)記為A、B、C、D、E。③在劃分的五個區(qū)域上放入少量分組的氨基酸粉末（如下表所示），經(jīng)培養(yǎng)后，觀察生長圈出現(xiàn)的區(qū)域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。組別所含氨基酸A組氨酸蘇氨酸谷氨酸天冬氨酸亮氨酸B精氨酸蘇氨酸賴氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸C酪氨酸谷氨酸賴氨酸色氨酸丙氨酸D甘氨酸天冬氨酸甲硫氨酸色氨酸絲氨酸E半胱氨酸亮氨酸苯丙氨酸丙氨酸絲氨酸在上述鑒定實驗中，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基A、D區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬于______。11．（15分）2018年7月，某生物公司的百白破疫苗檢驗不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序，科學(xué)家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項檢測均通過rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳桿菌、白喉桿菌和破傷風(fēng)桿菌的四種類毒素。請分析回答下列問題：(1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對應(yīng)____________，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列__________________(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用__________，然后通過____________大量擴(kuò)增，此技術(shù)的前提是已知一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物。(3)把目的基因?qū)荏w細(xì)胞時，科學(xué)家采用了改造后的腺病毒作為載體，寫出你認(rèn)為科學(xué)家選它的理由________________________________________________。(寫出2點(diǎn))(4)研究發(fā)現(xiàn)，如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，免疫效果更好，請寫出此種技術(shù)的基本流程____________________________________。(5)實驗證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的_________數(shù)量增多，當(dāng)同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點(diǎn)是____________，免疫預(yù)防作用更強(qiáng)。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

生態(tài)農(nóng)業(yè)：是按照生態(tài)學(xué)原理和經(jīng)濟(jì)學(xué)原理，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)成果和現(xiàn)代管理手段，以及傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的有效經(jīng)驗建立起來的，能獲得較高的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會效益的現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)，生態(tài)農(nóng)業(yè)能實現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級利用?！驹斀狻緼、流入該生態(tài)系統(tǒng)的總能量除了蔬菜固定的太陽能外，還有飼料有機(jī)物中的化學(xué)能，A錯誤；B、對蔬菜除草、治蟲會使生物種類減少，生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性下降，B錯誤；C、生態(tài)農(nóng)業(yè)能夠提高物種豐富度和能量利用率，但不能提高能量傳遞效率，C錯誤；D、長日照可提高雞的產(chǎn)蛋量，長日照屬于生態(tài)系統(tǒng)信息中的物理信息，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合圖解，考查生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能及其穩(wěn)定性、生態(tài)農(nóng)業(yè)等知識，要求考生識記生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能，識記生態(tài)農(nóng)業(yè)的概念、原理及優(yōu)點(diǎn)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。2、D【解析】

題意分析，首先要把F2中“紅花為272株，白花為212株”利用統(tǒng)計學(xué)方法處理為紅花：白花≈9：7，9：7是雙雜合子自交后代9：3：3：1的變式，據(jù)此推知控制花色性狀由兩對等位基因控制，且符合基因的自由組合定律。（假設(shè)相關(guān)基因用A、a和B、b表示）可知F1的基因型為AaBb，結(jié)合性狀表現(xiàn)可知F2植株中的基因型為紅色（A_B_）、白色為（aaB_）、（A_bb）和雙隱性（aabb），則可推斷親本基因型為AABB和aabb。【詳解】據(jù)分析可知：A、F2中白花植株不都是純合體，A錯誤；B、F2中紅花植株的基因型為雙顯性（A_B_），基因型有4種，B錯誤；C、紅花與白花由兩對獨(dú)立遺傳的等位基因控制，即兩對等位基因位于兩對同源染色體上，C錯誤；D、F2中白花植株共有5種基因型，紅花植株有4種基因型，白花植株比紅花植株基因型種類多，D正確。故選D。3、A【解析】

根據(jù)題意，由于72%的草甘膦應(yīng)答基因在清晨的表達(dá)達(dá)到峰值，說明每天都如此，可見基因表達(dá)具有一定的節(jié)律性；生物的晝夜節(jié)律性是長期自然選擇的結(jié)果，有利于其適應(yīng)環(huán)境?！驹斀狻緼、不同植物的晝夜節(jié)律性不一定相同，在清晨噴施草甘膦對擬南芥的致死效果最好，對其他植物的效果不一定最好，A錯誤；B、由于72%的草甘膦應(yīng)答基因在清晨的表達(dá)達(dá)到峰值，說明每天都如此，可見基因表達(dá)具有一定的節(jié)律性，B正確；C、在大多數(shù)草甘膦應(yīng)答基因表達(dá)的清晨使用草甘膦可有效殺死擬南芥，說明草甘膦是通過干擾擬南芥基因的正常表達(dá)達(dá)到除草目的，C正確；D、生物的晝夜節(jié)律性是長期自然選擇的結(jié)果，有利于其適應(yīng)環(huán)境，D正確。故選A。4、A【解析】

1、DNA的基本組成單位是脫氧核糖核苷酸，脫氧核糖核苷酸中與脫氧核糖相連的堿基有A、T、G、C四種，根據(jù)堿基不同脫氧核糖核苷酸分為4種，DNA分子是由2條脫氧核糖核苷酸鏈組成的規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)，DNA分子的多樣性與堿基對排列順序有關(guān)。2、組成蛋白質(zhì)的氨基酸根據(jù)R基不同分為20種，每個蛋白質(zhì)分子中的氨基酸小于或等于20種，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性與組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序和蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)有關(guān)。3、糖原、淀粉、纖維素是由單體葡萄糖聚合形成的多聚體，麥芽糖是由2分子葡萄糖形成的。4、脂質(zhì)包括磷脂、脂肪和固醇，脂肪的組成元素與糖類相同，只有C、H、O，但是脂肪中C、H的含量高于糖類，而O含量低與糖類?！驹斀狻緼、組成不同細(xì)胞的元素種類基本相同，這體現(xiàn)了細(xì)胞的統(tǒng)一性，但元素的含量可能會有差異，體現(xiàn)了細(xì)胞的多樣性，A正確；B、脂肪的組成元素與糖類完全相同，但其分子中氧的相對含量遠(yuǎn)少于糖類，B錯誤；C、蛋白質(zhì)分子的多樣性與其空間結(jié)構(gòu)有關(guān)，DNA分子多樣性與其空間結(jié)構(gòu)無關(guān)，與其堿基對的排列順序有關(guān)，C錯誤；D、糖原、淀粉、纖維素、麥芽糖的基本組成單位都是葡萄糖，因此徹底水解后的產(chǎn)物相同，D錯誤。故選A。5、B【解析】

據(jù)圖分析，興奮在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo)可以是雙向的。圖中的電位計檢測的是兩個神經(jīng)元膜外的電位差；在靜息狀態(tài)下呈外正內(nèi)負(fù)，動作電位為外負(fù)內(nèi)正，因此電流表發(fā)生兩次相反地轉(zhuǎn)動，并且兩點(diǎn)是先后興奮，因此中間會由延擱。【詳解】由題干和圖解可知，電極所示是膜外電位變化，未興奮之前，兩側(cè)的電位差為0；刺激圖中箭頭處，左側(cè)電極先興奮，左側(cè)膜外變?yōu)樨?fù)電位，而右側(cè)電極處膜外仍為正電位，因此兩側(cè)的電位差為負(fù)值；由于兩點(diǎn)中左側(cè)先興奮，右側(cè)后興奮，并且兩點(diǎn)之間具有一定的距離，因此中間會出現(xiàn)延擱；當(dāng)興奮傳導(dǎo)到右側(cè)電極后，電位差與之前的相反，因此測量結(jié)果為B。故選B。6、C【解析】

【詳解】人體的內(nèi)環(huán)境又叫細(xì)胞外液，是細(xì)胞生活的液體環(huán)境，包括血漿、組織液和淋巴，故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、施肥（不同）種類（也可以是否含鉀肥）及鉀肥濃度添加N肥和P肥時（NP組）的CO2的補(bǔ)償點(diǎn)（光合速率等于呼吸速率時的CO2濃度）NP（CK）酶、ATP、[H]、葉綠素等中耕松土促進(jìn)根細(xì)胞有氧呼吸，有利于主動運(yùn)輸吸收無機(jī)鹽【解析】

影響光合作用的環(huán)境因素：光照、二氧化碳濃度、溫度、水、礦質(zhì)元素等；由題圖可知，該實驗的自變量是礦質(zhì)元素的種類和二氧化碳度，因變量是凈光合作用強(qiáng)度因此實驗的目的是探究礦質(zhì)元素和二氧化碳濃度對光合作用強(qiáng)度的影響；分析實驗的過程應(yīng)該遵循對照原則和單一變量原則?！驹斀狻浚?）由分析可知，自變量是施肥種類及鉀肥濃度和二氧化碳濃度，光照強(qiáng)度、溫度等屬于無關(guān)變量，無關(guān)變量應(yīng)該保持一致且適宜。（2）NP組中，a點(diǎn)凈光合速率為0，即光合作用固定的二氧化碳與呼吸作用產(chǎn)生的二氧化碳相等，a點(diǎn)對應(yīng)的二氧化碳濃度是二氧化碳的補(bǔ)償點(diǎn)。（3）看圖可知，CO2濃度為2.0×10-2時，NP組藍(lán)莓的凈光合速率最低。光合作用過程中，需要N、P等元素參與的物質(zhì)有酶、ATP、[H]、葉綠素等。（4）植物根細(xì)胞吸收無機(jī)鹽的方式是主動運(yùn)輸，需要消耗能量，中耕松土促進(jìn)根細(xì)胞有氧呼吸，有利于主動運(yùn)輸吸收無機(jī)鹽。【點(diǎn)睛】本題考查學(xué)生理解礦質(zhì)元素、二氧化碳濃度對凈光合作用的影響，學(xué)會按照實驗的對照原則和單一變量的原則分析實驗結(jié)果、獲取結(jié)論。解答該題要注意對長句答案的描述準(zhǔn)確性、簡潔性、完整性。8、葉綠體基質(zhì)不認(rèn)同，玻璃容器中的CO2濃度單位時間內(nèi)的變化值代表植物的凈光合速率，而A、B兩種植物的呼吸速率大小未知此時間段內(nèi)植物光合作用固定的CO2量大于呼吸作用產(chǎn)生的CO2量，密閉容器中CO2濃度因植物光合作用吸收逐漸下降，導(dǎo)致暗反應(yīng)固定CO2的速率逐漸下降，光合速率隨之下降兩種植物的光合速率均等于呼吸速率（或兩種植物光合作用固定的CO2量均等于呼吸作用產(chǎn)生的CO2量）A【解析】

由圖可知，在密閉的容器內(nèi)開始A、B兩種植物的光合速率均大于呼吸速率，故室內(nèi)二氧化碳濃度下降；當(dāng)二氧化碳濃度降低到一定程度光合速率=呼吸速率，二氧化碳濃度不再發(fā)生變化。【詳解】（1）植物進(jìn)行光合作用時固定CO2的場所是葉綠體基質(zhì)。植物的光合作用強(qiáng)度（總光合速率）=凈光合速率+呼吸速率，而玻璃容器中的CO2濃度單位時間內(nèi)的變化值代表植物的平均凈光合速率，且a、b兩種植物的呼吸速率大小未知，因此當(dāng)CO2濃度約為0.8mmol/L時，A、B兩種植物的光合作用強(qiáng)度大小無法比較。（2）在0~15min內(nèi)，植物光合作用固定的CO2量大于呼吸作用產(chǎn)生的CO2量，植物從密閉容器中吸收CO2，使容器內(nèi)CO2濃度減低，植物吸收CO2速率逐漸下降，導(dǎo)致暗反應(yīng)速率逐漸下降，光合速率隨之下降。（3）在25~40min內(nèi)，由于容器內(nèi)CO2濃度較低，限制了光合速率，兩種植物光合作用固定CO2的量均與呼吸作用產(chǎn)生CO2的量相等，導(dǎo)致玻璃容器中CO2含量沒有發(fā)生變化。（4）由圖可知，A、B兩種植物光合作用強(qiáng)度對CO2濃度變化的響應(yīng)特性不同，B植物的CO2補(bǔ)償點(diǎn)低，與A植物相比，B植物能利用較低濃度的CO2，故將A、B兩種植物置于同一密閉玻璃容器中，隨著玻璃容器中CO2濃度的降低，A植物生長首先受影響?！军c(diǎn)睛】本題考查植物的光合作用和呼吸作用相關(guān)的知識，要求掌握光合作用和呼吸作用的特征和各個階段，以及二者對于植物生長的重要意義。9、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點(diǎn)考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。10、稀釋涂布平板法氨基酸防止將特定營養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基完全同種菌株的接種位置相同菌落A無菌水天冬氨酸缺陷型【解析】

分析題圖：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，然后運(yùn)用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，據(jù)此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株?！驹斀狻浚?）根據(jù)過程①培養(yǎng)的效果圖可以判斷，該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。圖示為實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程，據(jù)此可知：與基本培養(yǎng)基（只含碳源、無機(jī)鹽、水）相比，待測培養(yǎng)皿中的特有的成分有氨基酸。（2）為了防止將特定營養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基，進(jìn)行②過程培養(yǎng)時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上。氨基酸缺陷型菌株只能在完全培養(yǎng)基或補(bǔ)充了相應(yīng)的氨基酸的基本培養(yǎng)基中生長，因此應(yīng)從題圖中完全培養(yǎng)基上獲得相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型菌株。釆用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是同種菌株的接種位置相同。（3）為了進(jìn)一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定，結(jié)合對（2）的分析可知：①用接種針挑取菌落A接種并培養(yǎng)；離心后菌株存在于沉淀物中，為了防止雜菌污染，需取沉淀物用無菌水洗滌3次，并制成菌懸液。③表中信息顯示：A、D區(qū)域含有、其它區(qū)域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而實驗結(jié)果只有A、D區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬于天冬氨酸缺陷型?！军c(diǎn)睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠根據(jù)題干信息確定該菌種的篩選過程，同時能夠根據(jù)表格信息確實菌體缺陷的氨基酸種類，意在考查考生的信息處理能力。11、mRNA不同化學(xué)方法人工合成（人工化學(xué)合成）PCR技術(shù)能自主復(fù)制有多個限制酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)