專題九第1講一、選擇題1．中國科學(xué)工作者培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,其抗蟲基因起源于()A．蘇云金芽孢桿菌中抗蟲基因B．棉鈴蟲變異形成致死基因C．寄生在棉鈴蟲體內(nèi)線蟲基因D．一般棉突變基因[答案]A[解析]用于植物抗蟲基因工程研究基因很多,但并不是全部基因均可用于轉(zhuǎn)基因抗蟲棉培育,而應(yīng)依據(jù)棉花本身受害蟲危害情況,有針對性地選擇那些對棉花害蟲含有較強(qiáng)殺傷作用基因。伴隨科學(xué)發(fā)展,大家從蘇云金芽孢桿菌中分離出Bt基因能控制合成不一樣結(jié)構(gòu)特征伴胞晶體毒素蛋白,從而含有對不一樣種類害蟲殺傷能力,A正確,B、C、D錯(cuò)誤。2．圖甲、乙中箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶酶切位點(diǎn),ampr表示氨芐青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確是()A．圖甲中質(zhì)粒用BamHⅠ切割后,含有4個(gè)游離磷酸基團(tuán)B．在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNAC．用PstⅠ和HindⅢ酶切,加入DNA連接酶后可得到1種符合要求重組質(zhì)粒D．導(dǎo)入目基因大腸桿菌可在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中生長[答案]C[解析]圖甲中質(zhì)粒用BamHⅠ切割后,會(huì)破壞兩個(gè)磷酸二酯鍵,磷酸二酯鍵是由相鄰脫氧核苷酸磷酸基團(tuán)和脫氧核糖脫水形成,所以只含有2個(gè)游離磷酸基團(tuán);因?yàn)锽amHⅠ切割位點(diǎn)在目基因內(nèi)部,使用它切割外源DNA會(huì)破壞目基因;用PstⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒后,即使破壞了ampr基因,不過會(huì)保留下neo基因作為標(biāo)識基因,以備篩選。用PstⅠ和HindⅢ切割外源DNA后,可得到兩個(gè)能與質(zhì)粒連接DNA片段,不過只有帶目基因DNA片段與酶切后質(zhì)粒連接才符合要求;因?yàn)榘逼S青霉素抗性基因遭到破壞,所以,只能用含新霉素培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。3．下列說法正確是()A．DNA連接酶可使目基因與載體黏性末端形成氫鍵,實(shí)現(xiàn)黏性末端黏合,形成重組DNAB．限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)是DNA中磷酸和堿基之間磷酸二酯鍵C．T4DNA連接酶既能夠連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)黏性末端又能夠連接雙鏈DNA片段平末端D．用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞取得原生質(zhì)體,便于植物雜交育種[答案]C[解析]DNA連接酶又稱“分子縫合針”,可使目基因與載體黏性末端之間形成磷酸二酯鍵,實(shí)現(xiàn)黏性末端黏合,形成重組DNA,A錯(cuò)誤;限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)是DNA中磷酸和脫氧核糖之間磷酸二酯鍵,B錯(cuò)誤;T4DNA連接酶可縫合兩種末端,但連接平末端之間效率低,C正確;用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞取得原生質(zhì)體,便于植物體細(xì)胞雜交,D錯(cuò)誤。4．如圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞進(jìn)行原生質(zhì)體培養(yǎng)過程,據(jù)圖分析不正確是()棉花葉肉細(xì)胞eq\o(→,\s\up7(①))原生質(zhì)體eq\o(→,\s\up7(②))愈傷組織eq\o(→,\s\up7(③))根、芽eq\o(→,\s\up7(④))棉花幼苗A．①過程是在0.5～0.6mol/L甘露醇溶液環(huán)境下用纖維素酶和果膠酶處理B．②過程表示原生質(zhì)體在培養(yǎng)基提供特定條件下形成愈傷組織,此過程叫做再分化C．③過程中以合適配比營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)整劑進(jìn)行誘導(dǎo)D．該過程表現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性[答案]B[解析]植物組織培養(yǎng)時(shí),去除細(xì)胞壁方法是酶解法,即用纖維素酶和果膠酶處理;原生質(zhì)體在低滲溶液中會(huì)吸水漲破,所以選擇0.5～0.6mol/L甘露醇溶液;形成愈傷組織過程稱為脫分化;再分化過程需要以合適配比營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)整劑進(jìn)行誘導(dǎo);植物組織培養(yǎng)過程表現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性。5．某農(nóng)學(xué)院對玉米(2N＝20)花粉進(jìn)行離體培養(yǎng)和再生植株研究(圖示以下),下列相關(guān)敘述哪些是不正確()A．圖示過程在育種中稱為單倍體育種B．在花粉形成過程中等位基因分離,非同源染色體非等位基因自由組合C．對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,對花粉進(jìn)行消毒后才能進(jìn)行接種和培養(yǎng)D．花粉離體培養(yǎng)得到植株有10條染色體,是單倍體[答案]A[解析]圖示過程是花藥離體培養(yǎng),屬于單倍體育種一個(gè)關(guān)鍵過程,得到單倍體有10條染色體,不含同源染色體,故A錯(cuò)、D對;在植物組織培養(yǎng)中對培養(yǎng)基要消毒滅菌預(yù)防其她微生物干擾,C正確;花粉形成過程是減數(shù)分裂,所以在花粉形成過程中有等位基因分離,非同源染色體非等位基因自由組合,B正確。6．抗蟲棉產(chǎn)生含有重大意義,在抗蟲棉產(chǎn)生過程中,毒蛋白基因受體細(xì)胞是()A．棉花受精卵細(xì)胞 B．棉花分裂旺盛體細(xì)胞C．棉花花粉粒 D．棉花任何細(xì)胞[答案]B[解析]因?yàn)橹参锛?xì)胞含有全能性,所以植物基因工程受體細(xì)胞能夠是體細(xì)胞。具體操作時(shí),用分裂旺盛體細(xì)胞。7．下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體具體操作步驟,其中對單克隆抗體制備相關(guān)敘述中不正確是()①從患骨髓瘤小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞②將X抗原注入小鼠體內(nèi),取得能產(chǎn)生抗X抗體B淋巴細(xì)胞③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)④篩選出能產(chǎn)生抗X抗體雜交瘤細(xì)胞⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞⑥從腹水中提取抗體⑦利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合A．試驗(yàn)次序應(yīng)該是①②⑦⑤④③⑥B．③過程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞稱為克隆C．⑦過程取得細(xì)胞均可無限增殖D．利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過程中通常要經(jīng)過兩次篩選[答案]C[解析]骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合時(shí)能出現(xiàn)三種融合細(xì)胞,分別是兩個(gè)B淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞、兩個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞。其中,兩個(gè)淋巴細(xì)胞融合產(chǎn)生雜交細(xì)胞不能無限增殖?？寺》譃榉肿铀?、細(xì)胞水平和個(gè)體水平三個(gè)層次,雜交瘤細(xì)胞無限增殖屬于細(xì)胞水平克隆。8．某種微生物合成蛋白酶與人體消化液中蛋白酶結(jié)構(gòu)和功效很相同,只是其熱穩(wěn)定性較差,進(jìn)入人體后輕易失效?，F(xiàn)要將此酶開發(fā)成一個(gè)片劑,臨床診療食物消化不良,最好方案是()A．替換此酶中少數(shù)氨基酸,以改善其功效B．將此酶與人蛋白酶進(jìn)行拼接,形成新蛋白酶C．重新設(shè)計(jì)與發(fā)明一個(gè)蛋白酶D．降低此酶在片劑中含量[答案]A[解析]蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)包含一級結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu),一級結(jié)構(gòu)是指組成蛋白質(zhì)氨基酸種類、數(shù)量、排列次序,蛋白質(zhì)功效是由一級結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)共同決定,尤其是空間結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)功效關(guān)系更親密。要想使蛋白酶熱穩(wěn)定性有所提升,就要改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),這類問題通常是對蛋白質(zhì)中部分氨基酸進(jìn)行替換。9．伴隨生物技術(shù)快速發(fā)展,已滅絕生物“復(fù)活”將不再是神話。假如世界上最終一只野驢剛剛死亡,下列“復(fù)活”野驢方法中,最可行是()A．將野驢體細(xì)胞取出,利用組織培養(yǎng)技術(shù),經(jīng)脫分化、再分化,培育成新個(gè)體B．取出野驢體細(xì)胞兩兩融合,再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體C．取出野驢體細(xì)胞核移植到家驢去核卵母細(xì)胞中,經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體D．將野驢基因?qū)爰殷H受精卵中,培育成新個(gè)體[答案]C[解析]選項(xiàng)C為用克隆方法“復(fù)制”剛剛死亡野驢。10．(·淮安二模)下列相關(guān)生物工程敘述,正確是()A．應(yīng)用基因診療技術(shù),可檢測受體細(xì)胞中目基因是否表示B．篩選產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞需要使用特定選擇培養(yǎng)基C．莖尖細(xì)胞含有很強(qiáng)分裂能力,離體培養(yǎng)時(shí)不需要脫分化即可培養(yǎng)成完整植株D．早期胚胎細(xì)胞分化程度低、全能性高,囊胚期和原腸胚期是胚胎移植最好時(shí)期[答案]B[解析]A選項(xiàng)目基因是否表示應(yīng)用抗原－抗體雜交來檢測,基因診療技術(shù)用于檢測目基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞;C選項(xiàng)莖尖細(xì)胞已經(jīng)分化,經(jīng)過植物組織培養(yǎng)成完整植株,需要脫分化、再分化過程;D選項(xiàng)原腸胚高度分化,不能胚胎移植。二、非選擇題11．逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是一個(gè)表示型質(zhì)粒,結(jié)構(gòu)如圖所表示。圖上“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”能夠整合到動(dòng)物細(xì)胞染色體上,不停地表示其攜帶目基因,取得大量重組逆轉(zhuǎn)錄病毒。(E、F、H分別為限制酶E、F、H酶切位點(diǎn))。(1)逆轉(zhuǎn)錄模板是________,原料是________________。(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),目基因插入該質(zhì)粒,此過程需要酶是限制酶________和________。(3)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌前用某種離子處理大腸桿菌使之成為________,才能完成轉(zhuǎn)化過程。為了篩選出含重組質(zhì)粒大腸桿菌,通常需要用添加________培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(4)獲取大量重組質(zhì)粒后,可培育轉(zhuǎn)基因小鼠,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠受精卵方法是______________。若目基因進(jìn)入細(xì)胞后插入到一條染色體DNA上,那么取得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠方法是________________。[答案](1)RNA(四種)脫氧核苷酸(2)FDNA連接酶(3)感受態(tài)細(xì)胞抗生素A(4)顯微注射(法)轉(zhuǎn)基因小鼠間相互交配(或雜交)[解析](1)逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板,合成DNA過程,原料是4種脫氧核苷酸。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),需要用同種限制酶切割質(zhì)粒和目基因,使之產(chǎn)生相同黏性末端,因逆轉(zhuǎn)錄病毒序列在F處,所以用限制酶F進(jìn)行切割,再用DNA連接酶連接,形成重組質(zhì)粒。(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌,通常見Ca2＋處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞,才能完成轉(zhuǎn)化過程,質(zhì)粒上含有抗生素A抗性基因,假如重組質(zhì)粒導(dǎo)入到受體細(xì)胞成功,則受體細(xì)胞在含抗生素A培養(yǎng)基上培養(yǎng)能正常生存。所以為了篩選出含重組質(zhì)粒大腸桿菌,通常需要用添加抗生素A培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(4)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到小鼠受精卵中方法是顯微注射法;將目基因插入到小鼠一條染色體DNA上,則小鼠為雜合子,要想取得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠能夠讓雜合子小鼠之間,相互交配(或雜交)。12．(·焦作模擬)如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)診療遺傳性糖尿病(基因缺點(diǎn)造成胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)過程圖解,請據(jù)圖回復(fù):(1)圖中所包含現(xiàn)代生物技術(shù)有________________等。(寫3個(gè))(2)圖中①結(jié)構(gòu)表示______________;選擇____________(時(shí)期)卵母細(xì)胞去核后作為受體細(xì)胞構(gòu)建重組細(xì)胞A。②所表示細(xì)胞是__________________。(3)將健康胰島B細(xì)胞基因?qū)擘谥耙獦?gòu)建______________,這是基因工程關(guān)鍵,除含目基因外,還必需含有______________等。(4)重組細(xì)胞B在一定細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑作用下,能夠定向分化形成含有正常胰島B細(xì)胞功效胰島樣細(xì)胞,其根本原因是________________________________________。培養(yǎng)重組細(xì)胞B培養(yǎng)