Q/LB.□XXXXX-XXXXI前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由惠州市林業(yè)局提出并歸口。本文件起草單位：惠州市林業(yè)科學(xué)研究所（惠州植物園管理服務(wù)中心）、惠州市林學(xué)會(huì)。本文件主要起草人：劉德浩、鐘小華、何沁園、吳穎、鄭洲翔、黃麗純、陳智濤、孟蕊、舒夏竺、巫添輝、江惠蘭、盧永輝、李運(yùn)龍、王少東、周小峰、劉健、張展鵬。橙黃玉鳳花組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了橙黃玉鳳花（Habenariarhodocheila）組織培養(yǎng)育苗過程中外植體采集、外植體處理、瓶苗培育、瓶苗移植、病蟲害防治、檔案管理等技術(shù)要求。本文件適用于橙黃玉鳳花組培苗培育。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程LY/T2752林木輕基質(zhì)無(wú)紡布容器育苗技術(shù)規(guī)程術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。橙黃玉鳳花Habenariarhodocheila

橙黃玉鳳花(Habenariarhodocheila)是蘭科玉鳳花屬多年生草本植物，塊莖長(zhǎng)圓形，莖具葉；葉線狀披針形或近長(zhǎng)圓形，花莖無(wú)毛；花苞片卵狀披針形，萼片和花瓣綠色，唇瓣紅、橙紅或橙黃色，花瓣直立，匙狀線形；蒴果紡錘形，有喙；花期7月～8月，果期10月～11月。外植體4.1采集需在連續(xù)3d晴天后采集成熟且未開裂的蒴果。4.2消毒處理用細(xì)毛刷清潔蒴果表面雜質(zhì)，在超凈工作臺(tái)上用75%乙醇表面消毒20s～30s，無(wú)菌水沖洗1次～2次；然后用添加1滴～2滴吐溫80的0.1%HgCl2溶液浸泡并不斷搖動(dòng)12min，用無(wú)菌水沖洗4次～6次，用滅菌過的濾紙吸干表面水分備用。瓶苗培育培養(yǎng)基配制種子萌發(fā)培養(yǎng)基為1/2MS＋NAA0.5mg/L＋AC0.2%，增殖培養(yǎng)基為1/2MS＋NAA0.4mg/L＋ZT3.0mg/L＋AC0.2%，生根培養(yǎng)基為1/2MS＋NAA0.2mg/L＋6-BA2.0mg/L＋AC0.2%，添加卡拉膠均為6g/L，蔗糖均為30g/L，pH值調(diào)至5.8～6.0。培養(yǎng)基配方參見附錄A。滅菌與存放采用高壓滅菌鍋121℃持續(xù)20min滅菌后存放至超凈工作臺(tái)備用，按LY/T1882的規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)條件應(yīng)定期清潔培養(yǎng)室，及時(shí)清除污染材料。培養(yǎng)室溫度26℃±2℃，相對(duì)濕度65%～70%，光照強(qiáng)度1000lx～2000lx，日光照時(shí)長(zhǎng)10h～12h。種子萌發(fā)培養(yǎng)用無(wú)菌解剖刀將消毒處理好的蒴果縱向切開,將其內(nèi)部的細(xì)粉狀種子均勻地撒播于培養(yǎng)基上；待培養(yǎng)20d～25d，種子開始出現(xiàn)膨大，形成白色的原球莖。增殖分化培養(yǎng)將未分化的原球莖轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20d～25d，原球莖分化出葉原基后長(zhǎng)出葉片，形成小苗；培養(yǎng)約35d，小苗基部生成叢生原球莖，進(jìn)一步分化出叢生苗3株～10株。生根培養(yǎng)選取2片以上舒展葉片、高1cm～1.5cm的芽苗，接種在生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，每株苗長(zhǎng)出1條～3條新根和1個(gè)～2個(gè)橢圓形或長(zhǎng)圓形塊莖。單株苗繼續(xù)增殖成叢生苗，部分用于繼代增殖，部分用于煉苗種植。培養(yǎng)周期為30d～35d。煉苗移植基質(zhì)與育苗袋采用輕型基質(zhì)（基質(zhì)成分參照LY/T2752相關(guān)條款執(zhí)行）或腐殖土作基質(zhì)，以塑料薄膜袋或無(wú)紡布袋等為育苗袋，規(guī)格為8cm×10cm。移植前2d對(duì)基質(zhì)與育苗袋用50%的多菌靈可濕性粉劑1000倍液淋透殺菌。煉苗選取長(zhǎng)出新根、球莖達(dá)0.2cm～0.5cm、葉片2片～3片的瓶苗移至煉苗棚內(nèi)。煉苗10d～15d后將瓶蓋擰開，繼續(xù)煉苗3d～5d。洗苗將經(jīng)過煉苗的瓶苗和培養(yǎng)基一起倒入清水中洗凈，注意避免損傷根系。移植在基質(zhì)中捅個(gè)小孔，小心將芽苗植入，用基質(zhì)完全覆蓋芽苗根部，不可大力按壓基質(zhì)以防傷苗；避開夏季高溫天氣移植。苗期管理遮蔭移植后用透光度25%的遮陰網(wǎng)遮蔭，45d后用透光度50%的遮陰網(wǎng)遮蔭。水分移植后即淋透水；后期做到見干見濕，保持基質(zhì)濕潤(rùn)。養(yǎng)分小苗移植10d后施薄肥，采用1g/L的復(fù)合肥（N2-P2O5-K2O=15-15-15）水溶液淋施，每7d～10d一次；移植30d后，采用3g/L的復(fù)合肥（N2-P2O5-K2O=15-15-15）水溶液淋施，每10d～15d一次。除草及時(shí)清除雜草。病蟲害防治7.1病害苗期偶有根腐病危害，應(yīng)及時(shí)清除病株，集中焚燒。用50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液噴灑基質(zhì)，防止病原傳播。7.2蟲害苗期偶有卷夜蛾或金龜子危害嫩葉和球莖，少量危害時(shí)人工捕殺，并用黑光燈或糖醋液誘殺成蟲。出圃生長(zhǎng)正常、無(wú)損傷、無(wú)病蟲害、苗高≥10cm的幼苗可以出圃。檔案管理按GB/T6001相關(guān)條款執(zhí)行。附錄A（資料性）橙黃玉鳳花組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方橙黃玉鳳花組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方見表A.1。表A.1橙黃玉鳳花組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基成份種子萌發(fā)培養(yǎng)基（mg/L）增殖培養(yǎng)基（mg/L）生根培養(yǎng)基（mg/L）KNO3950950950NH4NO3825825825KH2PO4858585CaCl2·2H2O220220220MgSO4·7H2O185185185FeSO4·7H2O13.913.913.9Na2-EDTA18.6518.6518.65MnSO4·4H2O11.1511.1511.15ZnSO4·7H2O4.34.34.3H3BO33.13.13.1KI0.4150.4150.415Na2MoO4·2H2O0.1250.1250.125CuSO4·5H2O0.01250.01250.0125CoCl2·6H2O0.01250.01250.0125甘氨酸1