考點(diǎn)35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

（精講+精練）

錄

一、知識(shí)點(diǎn)精準(zhǔn)記憶

二、典型例題剖析

1、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

2、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

三,易混易錯(cuò)辨析

2022高考真題感悟

五、高頻考點(diǎn)精練

第一部分：知識(shí)點(diǎn)精準(zhǔn)記憶

一、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

i.培養(yǎng)基的配制

(1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

(2)用途：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。

(3)類型：按物理狀態(tài)分類

液體培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：不含凝固劑，呈液體狀態(tài)②用途：工業(yè)生產(chǎn)

固體培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：含凝固齊(如瓊脂)，呈固體狀態(tài)②用途：微生物的分離、鑒定，活菌

計(jì)數(shù)，菌種保藏

(4)成分

碳源：①特點(diǎn)：提供碳元素的物質(zhì)②作用：構(gòu)成生物體的細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些

也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)③來源：無機(jī)碳源：CCh.NaHCCh等；有機(jī)碳源：糖類、牛肉膏等

氮源：①特點(diǎn)：提供氮元素的物質(zhì)②作用：合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)③來源：無機(jī)氮源：

N2、NH3、鍍鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：蛋白膝等

無機(jī)鹽：①特點(diǎn)：為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素②

作用：為微生物提供無機(jī)營養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等③來源：無機(jī)化合物：KH2Po4、K2Hpe>4、

NaCl等

水：①特點(diǎn)：生物體含量最高的無機(jī)化合物②作用：良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等③來源：

培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物

(5)提醒：除了上述主要營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧

氣的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需

要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微

生物時(shí)，需要提供無氧的條件。

2.無菌技術(shù)

(1)目的：獲得純凈的培養(yǎng)物。

(2)關(guān)鍵：防止雜菌污染。

(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較

比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍

煮沸消毒法日常用品

巴氏消毒法不耐高溫的液體

較為溫和的物僅殺死物體表面

操作空間、操作

消毒理、化學(xué)或生物或內(nèi)部一部分微化學(xué)藥物消毒法

者的衣物和手等

等方法生物

接種室、接種箱

紫外線消毒法

或超凈工作臺(tái)

殺死物體內(nèi)外所濕熱滅菌法培養(yǎng)基、容器等

滅菌強(qiáng)烈的理化方法

有的微生物，包干熱滅菌法玻璃器皿、

括芽抱和抱子金屬用具等

灼燒滅菌法接種工具等

(4)提醒：選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二

要考慮操作對象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌

(5)其他操作

①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。

②為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺(tái)上并在酒精燈火

焰附近進(jìn)行。

3.微生物的純培養(yǎng)

(1)概念辨析

培養(yǎng)物：接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在適合條件下形成特定種類的微生物的群體

純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體

菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部繁殖形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)

構(gòu)的子細(xì)胞群體

純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程

(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟

配制培養(yǎng)基一目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、

pH適宜

制備

菌廠①培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌

培養(yǎng)

?'②培養(yǎng)皿用干熱滅菌法滅菌

基

倒平板一培養(yǎng)基冷卻至50年左右時(shí)倒

平板

［和分離I?通過平板劃線法操作純化、分離微生物

為有菌源，則說明培養(yǎng)塞被耒西污策

對照組：未接種平板倒置培養(yǎng)工

實(shí)驗(yàn)組：接種平板倒置培養(yǎng)

1(1)未接種培養(yǎng)基表面是否有菌落生長

結(jié)果12)接種的培養(yǎng)基表面是否出現(xiàn)單菌落，

分析

與評(píng)菌落大小、形狀、顏色是否一致，是否符

價(jià)合微生物特征

1(3)若培養(yǎng)基表面出現(xiàn)了其他菌落，可能

由哪些原因引起

(3)平板劃線法操作步驟

①將接種環(huán)放在火焰②在火焰旁冷卻接種環(huán),

上灼燒，直到接種環(huán)同時(shí)，拔出裝有酵母菌

的金屬絲燒紅培養(yǎng)液的試管的棉塞

⑤將試管口通⑥在火焰附近將皿蓋打開

過火焰，并塞一條縫隙，用接種環(huán)在培

上棉塞養(yǎng)基表面迅速劃三至五條

平行線，蓋上皿蓋

⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一

次劃線的末端開始作第二次劃線。重

復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。

注意不要將最后一次的劃線與第一次

的劃線相連。

(1)實(shí)驗(yàn)成功關(guān)鍵點(diǎn)

①第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)。

②灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。

③在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣才能使細(xì)菌

的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。

④劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。

⑤劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。

(2)平板劃線操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的

項(xiàng)目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束

殺死上次劃線后接種環(huán)上殺死接種環(huán)上殘存的菌

殺死接種環(huán)上原有

目的殘留的菌種，使下次劃線種，避免微生物污染環(huán)境

的微生物

的菌種直接來源于上次劃和感染操作者

線的末端，使每次劃線菌

種數(shù)目減少

二、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

1.區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基

1).選擇培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生

長②用途：從眾多微生物中分離所需的微生物③舉例：加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌

2).鑒別培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，

進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化②用途：鑒別不同種類的微生物③舉例：用伊紅一亞甲藍(lán)培

養(yǎng)基鑒別大腸桿菌

3).提醒常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。

②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。

2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測定

(1)稀釋涂布平板法步驟

①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞,

隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。

操作步驟：

9mL無菌水90mL

無菌水

②涂布平板操作步驟

涂布器

g

取0.1mL菌液滴加到涂布器浸在盛有

培養(yǎng)基表面酒精的燒杯中

爸一A

將涂布器在火焰上用涂布器將菌液均勻地涂

灼燒，待酒精燃盡、布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)

涂布器冷卻后，再可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻

進(jìn)行涂布

(2)微生物的數(shù)量測定方法

①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法

原理：利用特定細(xì)胞計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡計(jì)數(shù)一定容積的樣品中微生物的數(shù)量

方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)

缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌而使計(jì)數(shù)結(jié)果偏大

②間接計(jì)數(shù)法一活菌計(jì)數(shù)法(即稀釋涂布平板法)

原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一

個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(C+V)xM

C代表某一稀釋V代表涂布平板

“代表稀

度下平板上生長時(shí)所用的稀釋液

釋倍數(shù)

的平均菌落數(shù)的體積(mL)

3.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作

(1)實(shí)驗(yàn)原理

分離原理：①土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗麄兡芎铣?K酶②配制以尿素為唯一

氮源的培養(yǎng)基，能夠在該培養(yǎng)基中生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌

(3)實(shí)驗(yàn)流程

土壤取樣：從酸堿度接近中性的潮濕土壤中，鏟去表層土，取距地表3-5厘米的土壤層

樣品的稀釋：通常選取一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得的菌落數(shù)在30-300的

平板適于計(jì)數(shù)

微生物的培養(yǎng)與觀察：①接種：用稀釋涂布平板法接種②培養(yǎng)條件：30-37℃培養(yǎng)1-2天③

觀察：根據(jù)菌落的特征區(qū)分微生物④計(jì)數(shù)：每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目

穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果

(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)

對照的培養(yǎng)皿中

一未被雜菌污染

有無雜無菌落生長

菌污染

對照的培養(yǎng)皿中

的判斷

有菌落生長一被雜菌污染

培養(yǎng)基

"選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)選擇培養(yǎng)

是否具

＜目遠(yuǎn)少于牛肉膏蛋白豚基具篩選

篩選作

,培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目作用

用

‘樣品?。輗得到3個(gè)或3個(gè)以上菌落_操作

釋評(píng)價(jià)］f數(shù)目在30~300的平板一成功

重復(fù)組［比較各_^若選取同一種土樣，統(tǒng)

的結(jié)果f重復(fù)組計(jì)結(jié)果應(yīng)接近

c

第二部分：典型例題剖析

考向一、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

1.應(yīng)用特定的測序技術(shù)發(fā)現(xiàn)某明代古沉船船體飽水木材樣品與沉積物中含有豐富的原核微

生物類群，與漆黑海底現(xiàn)場取的木材樣品與沉積物中的菌群種類相似，但是菌群含量存在明

顯的差異。下列敘述正確的是（）

A.海底沉積物中的原核微生物結(jié)構(gòu)簡單，以RNA為遺傳物質(zhì)

B.在漆黑的海底現(xiàn)場獲取的木材樣品中含有大量能夠進(jìn)行化能合成作用的硝化細(xì)菌菌群

C.海底沉積物為多種多樣的細(xì)菌菌群提供了生長、繁殖所需的全部的碳源和氮源

D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)海底某細(xì)菌的種群數(shù)量時(shí)發(fā)現(xiàn)平均每小格中有3個(gè)細(xì)菌，可估算一

個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有1200個(gè)細(xì)菌

【答案】D

【詳解】A、原核生物具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)都是DNA,A錯(cuò)誤；B、硝化細(xì)

菌是一種好氧細(xì)菌，需要生活在氧氣充足的環(huán)境，而在漆黑的海底氧氣缺乏，因此在漆黑的

海底現(xiàn)場獲取的木材樣品中不會(huì)含有大量能夠進(jìn)行化能合成作用的硝化細(xì)菌菌群，B錯(cuò)誤；

C、細(xì)菌菌群生長、繁殖所需的碳源和氮源不是全部來自于海底沉積物，N源還可來自水中

溶解的無機(jī)鹽如硝酸鹽等，C錯(cuò)誤；D、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板一共有400個(gè)小格，平均每小格中有

3個(gè)細(xì)菌，可估算一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有400x3=1200個(gè)細(xì)菌，D正確。故選D。

考向二、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

2.下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是（）

A.配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基；牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基也要滅菌

B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各o.1ml,分別涂布于各組平板上

C.將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37，c恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)

D.確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)多的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

【答案】D

【詳解】A、配制好牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基后，培養(yǎng)基也要滅菌，A正確；B、取104、105、

106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL分別涂布于各組平板上，B正確；C、平板倒置后,

將實(shí)驗(yàn)組和對照組在37℃恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)，C正確；D、確定對照組無菌后，選擇菌

落數(shù)在30-300以內(nèi)的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。故選D。

第三部分：易混易錯(cuò)辨析

1.與微生物培養(yǎng)有關(guān)的6個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)

（1）固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。

（2）灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。

（3）劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。

（4）劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，這是為了防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。

（5）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)

胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（6）尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運(yùn)用了選擇培養(yǎng)基，前者所用的培養(yǎng)基中尿素是

唯一的氮源，后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。

2.教材結(jié)論性語句

（1）（選擇性必修3P18）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，

統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。

（2）（選擇性必修3P18）同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均

值。

第四部分：高考真題感悟

1.（2022?海南?高考真題）為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類，某興趣小組采集園內(nèi)土

壤樣本并開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.采樣時(shí)應(yīng)隨機(jī)采集植物園中多個(gè)不同地點(diǎn)的土壤樣本

B.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，可選用牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基

C.土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落

D.鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法

【答案】C

【詳解】A、采集植物園中土壤樣本的原則之一是要隨機(jī)采樣，A正確；B、牛肉膏蛋白陳

固體培養(yǎng)基中含有細(xì)菌生長所需的碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等，可用于細(xì)菌的培養(yǎng)，B正

確；C、土壤溶液稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，才能將聚集的細(xì)菌分散開，有助于在培養(yǎng)基表面形成

單菌落，C錯(cuò)誤；D、不同種類細(xì)菌的理化特性一般不同，鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除根據(jù)菌落特

征進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定外，還可以借助生物化學(xué)的方法進(jìn)行鑒定，D正確。故選C。

2.（2022?湖北?高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述

正確的是（）

A.動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行

B.微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白豚培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌

D.可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌

【答案】D

【詳解】A、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培

養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境,而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素,

B錯(cuò)誤；C、一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤;

D、可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污

染，D正確。故選D。

3.（2022?湖北?高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收

利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等

量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說

法錯(cuò)誤的是（）

A.甲菌屬于解脂菌

B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源

C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比

D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力

【答案】B

【詳解】A、根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色”，說明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解

成甘油和脂肪酸，脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此甲菌屬于解脂菌，A正確；

B、乙菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍(lán)色，說明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但

乙菌落也可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤；C、可將兩

種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比，更加直觀，C正確；D、可以利用該平板可

用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，觀察指標(biāo)可以以菌落周圍深藍(lán)色圈的大小，D正確。故

選B。

4.（2021?天津?高考真題）1.下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（）

A.用免洗酒精凝膠擦手B.制作泡菜前用開水燙洗容器

C.在火焰上灼燒接種環(huán)D.防疫期間用石炭酸噴灑教室

【答案】C

【詳解】A、用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，A錯(cuò)誤；B、制作泡菜前用開水燙洗容器屬于

消毒過程，B錯(cuò)誤；C、在火焰上灼燒接種環(huán)能達(dá)到滅菌目的，C正確；D、防疫期間用石

炭酸噴灑教室，屬于消毒，D錯(cuò)誤。故選C。

第五部分：高頻考點(diǎn)精練

1.某樣液經(jīng)濾膜過濾后，轉(zhuǎn)移到完全培養(yǎng)基上并適宜條件下培養(yǎng)，每隔12h統(tǒng)計(jì)一次菌落

數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的數(shù)據(jù)作為結(jié)果，統(tǒng)計(jì)某種菌菌落數(shù)為205個(gè)，如圖所示。下列

說法正確的是（）

廠過濾5L水

A.若用濾膜測定硝化細(xì)菌數(shù)量，則培養(yǎng)基中可不添加氮源

B.若計(jì)算出樣液中該種菌的密度為41個(gè)/L,該值比實(shí)際值偏大

C.為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，但不用空白對照

D.菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，大小不同的菌落形成的起始時(shí)間一般不同

【答案】D

【詳解】A、硝化細(xì)菌屬于化能合成型自養(yǎng)微生物，因此制備培養(yǎng)硝化細(xì)菌的培養(yǎng)基不需要

添加碳源，但需要添加氮源，A錯(cuò)誤；B、自來水中大腸桿菌濃度是205/5=41個(gè)，由于兩個(gè)

或多個(gè)大腸桿菌可能長成一個(gè)菌落，因此比真實(shí)值偏小，B錯(cuò)誤；C、為了提高準(zhǔn)確度，需

設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)需要設(shè)置空白對照，C錯(cuò)誤；D、當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，菌落的形成時(shí)

間一般是不同的，D正確。故選D。

2.藥物敏感試驗(yàn)簡稱藥敏試驗(yàn)，旨在了解某病原微生物對各種抗生素的敏感程度，以指導(dǎo)

臨床合理選用抗生素。紙片擴(kuò)散法是藥敏試驗(yàn)中一種常用的方法，在紙片周圍會(huì)形成透明的

抑菌圈。下列敘述正確的是（）

圖3

A.圖1所示操作需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行，不需要在酒精燈旁操作

B.圖3中IV的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變

C.進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測試菌，需使用的接種工具是接種環(huán)

D.接種后的平板在培養(yǎng)時(shí)的放置應(yīng)如圖2中②所示，可以防止污染

【答案】B

【詳解】A、圖1所示操作是倒平板，需要在酒精燈旁操作，以防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、

圖3中IV的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變，產(chǎn)生了耐藥性,

從而存活下來，B正確；C、進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測試菌，利用的接種方法是稀

釋涂布平板法，需使用的接種工具是涂布器，C錯(cuò)誤；D、接種后的平板在培養(yǎng)時(shí)需要倒置

培養(yǎng)，即圖2中①所示，圖2中②是培養(yǎng)皿正置，倒置培養(yǎng)既能防止培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā),

又能防止冷凝形成的水珠倒流，D錯(cuò)誤。故選B。

3.某興趣小組為研究“使用公筷對餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取

樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實(shí)驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是（）

r—不食用組餐前取樣冷藏》-1

研磨、取性接種一固體培培養(yǎng)、冷藏

每道菜使用公筷組加1000mL?取樣—>養(yǎng)基X->計(jì)數(shù)

分3組餐后取樣冷藜無菌水稀釋

菜品

「不使用公筷組」

A.在固體培養(yǎng)基X上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種

B.固體培養(yǎng)基X對菜品中的細(xì)菌有選擇作用

C.根據(jù)菌落的特征可以準(zhǔn)確判斷細(xì)菌的種類

D.理論上，不食用組的培養(yǎng)基上不會(huì)有菌落出現(xiàn)

【答案】A

【詳解】A、由圖分析可知，圖中對菌落進(jìn)行了計(jì)數(shù)，采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法,

A正確；B、固體培養(yǎng)基沒有做任何處理，所以對菜品中的細(xì)菌沒有選擇性，B錯(cuò)誤；C、

在一定培養(yǎng)條件下，不同的微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，根據(jù)菌落的性狀、大小、顏

色等特征，可以初步區(qū)分出不同種微生物，但不能準(zhǔn)確判斷，C錯(cuò)誤；D、不食用的菜品，

正常情況下也有微生物存在，D錯(cuò)誤。故選A。

4.為了觀察手掌上附著的微生物，某小組成員將自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白陳固體培

養(yǎng)基上輕輕按壓后，蓋上培養(yǎng)皿蓋，將平板倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,結(jié)果如圖所示。

下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.配制的培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后，還要調(diào)節(jié)pH才能用于接種

B.待高溫滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50°C左右后，再進(jìn)行倒平板

C.在超凈工作臺(tái)上和酒精燈火焰旁進(jìn)行操作，是為了防止雜菌污染

D.手掌上的某些微生物在該培養(yǎng)基上并沒有生長繁殖形成菌落

【答案】A

【詳解】A、配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基時(shí)，先調(diào)節(jié)pH,再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)誤；B、

待高溫滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右后，再進(jìn)行倒平板，此溫度下培養(yǎng)基不燙手，便于

后續(xù)操作，且培養(yǎng)基尚未凝固，容易倒出，B正確；C、超凈工作臺(tái)在使用前經(jīng)紫外線消毒,

而酒精燈火焰附近存在一個(gè)無菌區(qū)，為了防止雜菌污染，要在超凈工作臺(tái)上和酒精燈火焰附

近進(jìn)行操作，C正確；D、牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基雖然營養(yǎng)齊全，但并非所有微生物均可在其

上生存，如病毒則無法在該培養(yǎng)基上生長繁殖，D正確。故選A。

5.野生型大腸桿菌菌株能在未添加某種維生素的基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突

變株無法合成某種氨基酸，只能在添加了多種維生素的完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨

基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、

E為菌落。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

無菌落

A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基

B.紫外線的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量

C.B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面

D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)

【答案】A

【詳解】A、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合

成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④為完全培

養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、紫外線照射的目的誘導(dǎo)野生大腸桿菌發(fā)生基因突變，

通過紫外線照射處理可提高突變頻率，從而增加突變株的數(shù)量，B正確；C、B操作是將菌

液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C正確；D、從圖中可看出，

D在基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C

過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。故選A。

6.AM真菌能促進(jìn)根瘤菌（Rh）刺激根的局部膨大形成根瘤。為研究AM真菌促進(jìn)Rh形

成根瘤的機(jī)制，研究人員分別取經(jīng)AM-+Rh\AM++Rh和AM++Rh+處理的大豆根系分泌物

（+代表有，-代表無），滅菌后裝滿毛細(xì)管，將毛細(xì)管束放入含有根瘤菌菌液的試管中，實(shí)

驗(yàn)裝置如圖1（此培養(yǎng)條件下根瘤菌能生存但并不增殖）。每隔兩天取出毛細(xì)管，用無菌水

沖洗其外壁，打碎研磨沖洗定容后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，結(jié)果如圖2。下列有關(guān)上述實(shí)驗(yàn)操作及分

析敘述正確的是（）

石蠟密封

毛細(xì)管

根瘤菌菌液

圖1

A.根瘤菌與AM真菌都具有生物膜系統(tǒng)，二者本質(zhì)區(qū)別是有無核膜包被的細(xì)胞核

B.實(shí)驗(yàn)中可采用高壓蒸汽滅菌鍋對大豆根系分泌物和根瘤菌菌液進(jìn)行滅菌處理

C.可取一定量的毛細(xì)管研磨液劃線接種在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)

D.AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)，根系分泌物對根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)

【答案】D

【詳解】A.根瘤菌沒有生物膜系統(tǒng)而AM真菌有，A錯(cuò)誤；B、可采用高壓蒸汽滅菌鍋對

大豆根系分泌物進(jìn)行滅菌處理，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，根瘤菌菌液不能滅菌，B錯(cuò)誤；C、可取一

定量的毛細(xì)管研磨液進(jìn)行稀釋涂布在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、從曲線

圖上可以看出，AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)（AM++Rh+組），菌落數(shù)更多，說明根系分泌

物對根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)，D正確。故選D。

7.為了從反芻動(dòng)物的瘤胃中分離出能分解尿素的微生物，某興趣小組設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程。

下列敘述錯(cuò)誤的是（）

的珪超絡(luò)取稀釋液接種土美初步篩選出進(jìn)一步

取樣一稀釋一至固體培養(yǎng)基一培養(yǎng)一目的菌菌落一純化

A.為創(chuàng)造無氧環(huán)境，可采用穿刺接種法

B.該實(shí)驗(yàn)使用的固體培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基

C.細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣煞?/p>

D.版酶將尿素分解為氨和CO2,會(huì)使培養(yǎng)基pH降低

【答案】D

【詳解】A、穿刺接種法常用來接種厭氧菌，因此為創(chuàng)造無氧環(huán)境，可采用穿刺接種法，A

正確；B、由圖可知，該實(shí)驗(yàn)使用的固體培養(yǎng)基，目的是分離出能夠分解尿素的細(xì)菌，是典

型的選擇培養(yǎng)基，B正確；C、細(xì)菌想要分解尿素，必然含有能夠分解尿素的酶，即細(xì)菌能

合成胭酶，C正確；D、版酶將尿素分解為氨和CO2,氨會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，pH升高，D

錯(cuò)誤。故選D。

8.剛果紅是一種染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物，但不會(huì)與纖維素水解產(chǎn)物發(fā)生反

應(yīng)。研究人員利用該原理從土壤中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列敘

述錯(cuò)誤的是（）

剛果紅培養(yǎng)基上的部分菌落

A.剛果紅培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源

B.將菌液分散在培養(yǎng)基表面用平板劃線法

C.圖中菌落丁分解纖維素的能力最強(qiáng)

D.用顯微鏡直接計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比活菌實(shí)際數(shù)目多

【答案】B

【詳解】A、該實(shí)驗(yàn)的目的是從土壤中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，因此該剛果紅培養(yǎng)基應(yīng)該

以纖維素為唯一碳源，A正確；B、微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,

稀釋涂布平板法可用于計(jì)數(shù)，平板劃線法不能用來計(jì)數(shù)，故將菌液分散在培養(yǎng)基表面應(yīng)該用

稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；C、有透明圈說明纖維素被纖維素酶催化降解，透明圈大小與纖

維素酶的量與活性有關(guān)，透明圈越大，說明降解纖維素能力越強(qiáng)，由圖可知，菌落丁周圍的

透明圈最大，說明其降解纖維素的能力最強(qiáng)，C正確；D、由于顯微鏡直接計(jì)數(shù)時(shí)統(tǒng)計(jì)的數(shù)

據(jù)包括了已經(jīng)死亡的細(xì)菌，所以其統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比活菌實(shí)際數(shù)目多，D正確。故選B。

9.利用纖維素酶降解秸稈生產(chǎn)燃料乙醇，對緩解全球能源危機(jī)有重大意義。科研人員開展

篩選、誘變及選育高產(chǎn)纖維素酶菌株的相關(guān)研究，過程如圖。下列敘述正確的是（）

A.采集的黑土壤需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌進(jìn)行富集培養(yǎng)

B.需用牛肉膏、纖維素、瓊脂等配制CMC平板

C.誘變處理使每個(gè)細(xì)菌的產(chǎn)纖維素酶能力提高

D.人工篩選可以使產(chǎn)纖維素菌株發(fā)生定向進(jìn)化

【答案】D

【詳解】A、結(jié)合分析可知，為避免菌種被殺死，采集的黑土壤不需要高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)

誤；B、本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖沁x育高產(chǎn)纖維素酶菌株，故應(yīng)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng),

不能添加牛肉膏，B錯(cuò)誤；C、誘變處理的原理是基因突變，基因突變是不定向的，故誘變

處理不能使每個(gè)細(xì)菌的產(chǎn)纖維素酶能力提高，C錯(cuò)誤；D、人工篩選是定向的，在該定向選

擇的作用下，可以使產(chǎn)纖維素菌株向著高產(chǎn)的方向發(fā)生定向進(jìn)化，D正確。故選D。

10.肉制品在發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生一類具有生物活性的含氮低分子化合物一生物胺。適量生物

胺可促進(jìn)人體的正常生理活動(dòng)，但含量較高時(shí)有一定的毒性?？蒲腥藛T擬采用水解圈（微生

物水解生物胺產(chǎn)生的透明圈）的方法，從魚露發(fā)酵液中篩選高效生物胺降解菌，其操作思路

如下：①從距發(fā)酵缸上表面8-12cm處吸取1mL發(fā)酵液一②—③取100uL均勻涂布在培養(yǎng)

基x上一④挑取目標(biāo)菌落分離純化—⑤測定菌株的生物胺降解活性。下列相關(guān)分析中錯(cuò)誤的

是（）

A.操作②是指用適量的蒸儲(chǔ)水稀釋魚露發(fā)酵液

B.操作③采用的接種方法也可用于微生物計(jì)數(shù)

C.配置培養(yǎng)基X時(shí)，應(yīng)以生物胺作為唯一氮源

D.選擇目標(biāo)菌落時(shí)，應(yīng)挑取水解圈較大的菌落

【答案】A

【詳解】A、操作②是指用適量的無菌水稀釋魚露發(fā)酵液，A錯(cuò)誤；B、操作③采用的接種

方法為稀釋涂布平板法，也可用于微生物計(jì)數(shù)，B正確；C、配置培養(yǎng)基X時(shí)，應(yīng)以生物胺

作為唯一氮源以便篩選出生物胺降解菌，C正確；D、水解圈越大，說明降解生物胺的能力

越強(qiáng)，因此選擇目標(biāo)菌落時(shí)，應(yīng)該挑取水解圈較大的菌落，D正確。故選A。

11.尿素容易保存，是目前使用量較大的一種化學(xué)氮肥，尿素分子并不能直接被農(nóng)作物吸收,

只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物利用。如圖是從土壤中分離、計(jì)數(shù)尿素分解菌

的過程，有關(guān)分析不正確的是（）

-------?再重復(fù)3次,

90mL甲

無菌水分離、計(jì)數(shù)

A.若②過程稀釋了10倍，則乙錐形瓶里盛有18mL無菌水

B.③的接種方法可用稀釋涂布平板法

C.a、b、c培養(yǎng)基可以用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

D.若①②過程稀釋了10倍，a、b、c培養(yǎng)基上的菌落數(shù)依次為57、58、56個(gè)，則10g土

樣中的尿素分解菌數(shù)量為5.7x108個(gè)

【答案】C

【詳解】A、②過程加入了2mL菌液，若稀釋了10倍，則乙錐形瓶里應(yīng)盛有18mL無菌水,

A正確；B、平板劃線法不能計(jì)數(shù)，③的接種方法不能用平板劃線法，B正確；C、牛肉膏

和蛋白陳均可提供氮源，a、b、c培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，C錯(cuò)誤；D、若a、b、e培

養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)為57個(gè)，10g土樣加入90mL無菌水相當(dāng)于稀釋了10倍，則由題圖

可知，共稀釋了1X107倍，根據(jù)稀釋涂布平板法的計(jì)算公式，10g土樣可含有尿素分解菌

5.7X108個(gè)，D正確。故選C。

12.為了研究抗生素X對四種不同細(xì)菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了如圖的抗菌

實(shí)驗(yàn)，四天后菌落形態(tài)如圖所示，則下列分析正確的是（）

虛線表示接種細(xì)黑色區(qū)域表示菌

菌位置分布位置

A.抗生素X對細(xì)菌3的抑制效果最好

B.抗生素X對細(xì)菌4的抑制效果最差

C.抗生素X對細(xì)菌2的抑制比對細(xì)菌3的抑制效果好

D.可以用抗生素X去治療由細(xì)菌1引起的疾病

【答案】C

【詳解】A、四天后細(xì)菌2的黑色區(qū)域最短，說明抗生素X對細(xì)菌2的抑制效果最好，A錯(cuò)

誤；B、四天后細(xì)菌3的黑色區(qū)域最短，說明抗生素X對細(xì)菌3的抑制效果最差，B錯(cuò)誤；

C、根據(jù)圖中結(jié)果可知，用抗生素X對細(xì)菌2的抑制比對細(xì)菌3的抑制效果好，C正確；D、

由圖可知，抗生素X對細(xì)菌1不起作用，因此不能用抗生素X去治療由細(xì)菌1引起的疾病，

D錯(cuò)誤。故選C。

13.為宣傳正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中將

牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基置于距正確佩戴口罩的實(shí)驗(yàn)者口部前方50cm處，然后對著培養(yǎng)基講話

Imin或咳嗽2次，再進(jìn)行微生物培養(yǎng)和觀察。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基并需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌

B.實(shí)驗(yàn)者對培養(yǎng)基進(jìn)行處理后，放入10℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2天

C.實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置不戴口罩直接講話或咳嗽進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對照

D.培養(yǎng)結(jié)束后可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征確定微生物的種類

【答案】B

【詳解】A、實(shí)驗(yàn)中要觀察微生物，因此配制的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，并進(jìn)

行嚴(yán)格滅菌處理，以防止雜菌污染，A正確；B、本實(shí)驗(yàn)是為了確定正確佩戴口罩可降低呼

吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，而人體的溫度約為37°C,因此應(yīng)設(shè)置與人體相同的溫度，即在37°

C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1~2天，B錯(cuò)誤；C、本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)組為佩戴口罩對著培養(yǎng)基講話Imin

或咳嗽2次，實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)該設(shè)置“不戴口罩直接說話或咳嗽'進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

的準(zhǔn)確性，C正確；D、不同微生物的菌落具有特殊的特征，在實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)結(jié)束后，可根據(jù)菌

落的形狀、大小、顏色、隆起程度等特征確定微生物種類，D正確。故選B。

14.做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是（）

A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋

B.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上

C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)立即去挑取菌落

D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上

【答案】D

【詳解】A、高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束時(shí)，應(yīng)等壓力表的壓力降到零時(shí)，再打開排氣閥，旋松

螺栓，打開鍋蓋，A錯(cuò)誤；B、倒平板時(shí)，將打開的皿蓋放在一邊，容易污染培養(yǎng)皿，B錯(cuò)

誤；C、經(jīng)火焰滅菌后的接種環(huán)溫度很高，若此時(shí)趁熱挑起待純化菌落會(huì)使其中的微生物死

亡，C錯(cuò)誤；D、用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，由于培養(yǎng)菌落時(shí)需倒置培養(yǎng)，為了方便查

看，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。故選D。

15.微生物需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)來維持正常的生長和繁殖。下列關(guān)于微生物營養(yǎng)的敘述,

正確的是（）

A.尿素分解菌和纖維素分解菌的培養(yǎng)基中可能含有相同的無機(jī)鹽

B.篩選硝化細(xì)菌（自養(yǎng)型）的培養(yǎng)基中需加入適宜濃度的有機(jī)碳源

C.只含有水和無機(jī)鹽兩類成分的培養(yǎng)基中不可能形成生物群落

D.乳酸菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是指其自身不能合成的某些無機(jī)物

【答案】A

【詳解】A、尿素分解菌的培養(yǎng)基中含有的無機(jī)鹽是KH2P04、Na2HPO4、MgSO4,纖維素

分解菌的培養(yǎng)基中含有的無機(jī)鹽是NaN03、KH2Po4、Na2Hp04、MgS04、KCLA正確；

B、硝化細(xì)菌是自養(yǎng)生物，可以用空氣中C02作為碳源，用缺乏有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可以篩

選硝化細(xì)菌。B錯(cuò)誤；C、只含有水和無機(jī)鹽兩類成分的培養(yǎng)基，可以培養(yǎng)既能固氮又能以

C02作為碳源的微生物（如固氮藍(lán)藻）。C錯(cuò)誤；D、乳酸菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是維生素,

是有機(jī)物。D錯(cuò)誤。故選A。

16.培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動(dòng)物細(xì)胞（或組織）生長繁殖的，由不同物質(zhì)組合配制

而成的營養(yǎng)基質(zhì)。針對下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

組別培養(yǎng)基成分

a蛋白膝、酵母提取物、甘露醇、水

b葡萄糖、尿素、NaCl、K2Hpe）八酚紅、瓊脂糖

c礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂

A.a組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過程需用到磁力攪拌器和搖床

B.b組培養(yǎng)基可用于分離含胭酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照

C.c組培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)植物愈傷組織再分化，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑需事先過濾滅菌

D.上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境

【答案】C

【詳解】A、a組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，磁力攪拌器和搖床都是擴(kuò)大菌落與

其所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，利于菌落的培養(yǎng)，A正確；B、b組培養(yǎng)基以尿素作為唯

一氮源，含服酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長，其它微生物在該培養(yǎng)基上因缺乏氮源而不能

生長，可用于分離含版酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照，通過對照

可以判斷選擇培養(yǎng)基的選擇作用，B正確；C、c組培養(yǎng)基可以用來誘導(dǎo)植物愈傷組織再分

化，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑不能過濾滅菌，易被分解，C錯(cuò)誤；D、上述培養(yǎng)基不僅要為相

應(yīng)的細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)，還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境，D正確。故選C。

17.結(jié)核桿菌是對抗生素極易產(chǎn)生耐藥性的細(xì)菌。為探究不同結(jié)核桿菌耐藥性的大小，研究

人員提取患者體內(nèi)的病原菌進(jìn)行培養(yǎng)（如圖甲），過程I接種純化的結(jié)果如圖乙。下列說法

正確的是（）

圖乙

A.在病原菌的培養(yǎng)過程中只采用一種滅菌方法即可

B.對單一菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)的目的是獲得更多的結(jié)核桿菌

C.培養(yǎng)中各培養(yǎng)基均需加入抗生素的目的是抑制雜菌生長

D.過程I接種時(shí)劃線的順序是①一②一③，該方法無法完成對菌落的計(jì)數(shù)

【答案】B

【詳解】A、微生物的分離、培養(yǎng)過程需要嚴(yán)格的無菌環(huán)境，需要用到多種滅菌方法，如培

養(yǎng)基、涂布器的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌，A錯(cuò)誤；B、對單一菌落進(jìn)行

液體培養(yǎng)的目的是獲得更多的結(jié)核桿菌，即進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，B正確；C、培養(yǎng)中各培養(yǎng)基均

需加入抗生素，目的是選擇出抗藥性強(qiáng)的目的菌，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)圖乙中菌落分布的特點(diǎn),

劃線次數(shù)越多，細(xì)菌數(shù)量越少，可以推導(dǎo)出劃線的順序依次是①一③一②，D錯(cuò)誤。故選B。

18.下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法，正確的是（）

①可以通過化學(xué)藥劑消毒法處理水源；

②培養(yǎng)基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后方可調(diào)節(jié)pH；

③配制培養(yǎng)基和接種時(shí)，均必需在酒精燈火焰旁操作；

④接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前，可用紫外線照射30min進(jìn)行消毒；

⑤高壓蒸汽滅菌是在壓力為201kPa,溫度為121℃的條件下維持15-30min來滅菌的；

A.①③B.③⑤C.③④D.①④

【答案】D

【詳解】①可以使用化學(xué)藥劑即通過化學(xué)消毒法處理水源，還可用微生物分解水體的有機(jī)物,

即通過生物消毒法凈化污水，①正確；②培養(yǎng)基配置時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH再滅菌，②錯(cuò)誤；③配

制培養(yǎng)基時(shí)，不需在酒精燈火焰旁操作，③錯(cuò)誤；④接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用

前，可用紫外線照射30min進(jìn)行消毒，④正確；⑤高壓蒸汽滅菌是在壓力為lOOkPa,溫度

為121°C的條件下維持15-30min來滅菌的，⑤錯(cuò)誤。故選D。

19.經(jīng)誘變處理后，某細(xì)菌群體中基因突變頻率增大，但突變體數(shù)量仍占極少數(shù)。梯度平板

法是篩選抗藥性突變型的一種簡單有效的方法，其操作要點(diǎn)是：先在培養(yǎng)皿中倒入不含抗生

素的培養(yǎng)基，立即傾斜培養(yǎng)皿到凝固為一個(gè)斜面，再將培養(yǎng)皿平放，繼續(xù)倒入含一定濃度抗

生素的培養(yǎng)基，直至形成平面，培養(yǎng)基內(nèi)的抗生素濃度呈線性梯度，一端濃度高，另一端濃

度低，將誘變處理的濃菌液涂在梯度平板上進(jìn)行培養(yǎng)及篩選。篩選出的抗藥性突變型再做抗

藥性的測定。下列推斷不合理的是（）

A.抗藥性突變型個(gè)體的主要誘因是培養(yǎng)基中的抗生素

B.制作含有抗生素的平板時(shí)，藥物須與培養(yǎng)基混合均勻

C.培養(yǎng)后，在高濃度抗生素處出現(xiàn)的菌落為抗藥性突變型菌株且抗藥性強(qiáng)

D.含抗生素的梯度平板上會(huì)出現(xiàn)未經(jīng)誘變處理的該細(xì)菌群體菌落

【答案】A

【詳解】A、培養(yǎng)基中的抗生素起選擇作用，不是抗藥性突變型個(gè)體產(chǎn)生的主要誘因，A錯(cuò)

誤；B、抗生素與培養(yǎng)基混合均勻，從而便于通過觀察微生物在培養(yǎng)基上的生長情況判斷藥

物的作用，B正確；C、不具有抗藥性的細(xì)胞會(huì)被抗生素殺死，故培養(yǎng)后在高濃度抗生素處

出現(xiàn)的菌落為抗藥性突變型菌株且抗藥性強(qiáng)，C正確；D、未經(jīng)誘變處理的該細(xì)菌中也有具

有抗藥性的個(gè)體，可以在含抗生素的梯度平板上生長并形成菌落，D正確。故選A。

20.高中生物實(shí)驗(yàn)中用到了不同體積分?jǐn)?shù)的酒精，下列說法正確的是()

A.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，用50%酒精給實(shí)驗(yàn)者的雙手消毒

B.觀察花生細(xì)胞中的脂肪顆粒，需要用70%的酒精洗去浮色

C.DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，用95%冷酒精進(jìn)一步提純DNA,DNA溶解于95%冷酒精

D.綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，可用無水乙醇作為提取液

【答案】D

【詳解】A、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，醫(yī)用和實(shí)驗(yàn)室的消毒常用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精,

A錯(cuò)誤；B、在檢測脂肪的試驗(yàn)中需要用體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色，B錯(cuò)誤；C、DNA

不溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,進(jìn)而提純DNA,因此用95%冷酒精進(jìn)一步提純DNA,

DNA不溶解于95%冷酒精，C錯(cuò)誤；D、在綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，需要用無水

乙醇來提取色素，D正確。故選D。

21.采后的葡萄在運(yùn)輸、貯藏等過程中，易受黑曲霉感染而腐爛引起“黑粉病”，食用價(jià)值下

降。為解決這一問題，研究人員從葡萄園土壤中分離、純化和篩選出對黑曲霉有較強(qiáng)抑制作

用的拮抗細(xì)菌，具體流程如圖。

(1)黑曲霉與拮抗細(xì)菌都具有的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)是。

①質(zhì)膜②核膜③核酸④核糖體⑤線粒體

(2)步驟I采用的接種方法是，采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是

(3)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行(填

“消

毒”或“滅菌”)處理；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和;靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外

線殺滅，其原因是紫外線能使其內(nèi)蛋白質(zhì)變性，還能損傷它的結(jié)構(gòu)。

(4)下列關(guān)于步驟IV的說法正確的有。

A.桔抗細(xì)菌與黑曲霉競爭營養(yǎng)與生存空間

B.桔抗細(xì)菌可能產(chǎn)生了某種物質(zhì)抑制黑曲霉的生長繁殖

C.黑曲霉可能產(chǎn)生了某種抗生素抑制描抗細(xì)菌的生長繁殖

D.桔抗細(xì)菌對黑曲霉抑制作用越大，則其周圍的透明圈越大

(5)為進(jìn)一步研究抽抗細(xì)菌對葡萄中黑曲霉的抑制效果，研究人員進(jìn)行了圖實(shí)驗(yàn)，其中施加

的處理①是、②是o

【答案】(1)①③④

(2)稀釋涂布平板法防止冷凝水倒流，污染培養(yǎng)基

⑶滅菌消毒DNA

(4)ABD

(5)接種黑曲霉