連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展連翹簡介連翹苷類的提取分離工藝連翹苷類的檢測方法結(jié)語參考文獻(xiàn)連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展連翹連翹(FructusForsythiae)為木犀科植物連翹Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl的干燥果實(shí),主產(chǎn)于我國山西、陜西、河南、山東等地。具有清熱解毒、消腫散結(jié)之功效,主治溫?zé)?、丹毒、斑疹、瘡瘍腫毒、瘰疬等癥。我國藥典規(guī)定，連翹的原植物為木犀科連翹(ForsythiasuspenseThund.Vahl)的成熟果實(shí)。秋季果實(shí)初熟尚帶綠色時(shí)采收，除去雜質(zhì)，蒸熟，曬干，習(xí)稱青翹；果實(shí)熟透時(shí)采收,曬干，除去雜質(zhì)，習(xí)稱“老翹”在國際市場上，其同屬植物金種花(F.viridissima)和朝鮮連翹(F.koreana)亦作為連翹正品使用[1]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展連翹中的化學(xué)成分主要包括萜類、苯乙醇苷類、木脂素類、黃酮類、天然醇類、香豆素、揮發(fā)性成分和一些醇、酯、酸、醛、酮等化合物。連翹苷類是連翹所含的主要有效化學(xué)成分，主要包括連翹苷和連翹酯苷兩種成分，其中連翹苷的含量較大且抗菌抗病毒活性很強(qiáng)[2]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展1.連翹苷類的提取分離工藝1.1連翹苷的提取分離工藝王麗婭等采用正交設(shè)計(jì)法研究以乙醇作溶劑利用回流法提取苷類的提取工藝，以乙醇濃度85%、回流次數(shù)3，回流時(shí)間60min和料液比1：10等提取條件下，連翹苷平均得率為5.781%[3]。胡光等采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選乙醇提取連翹苷的工藝，認(rèn)為提取連翹苷的最佳工藝條件為80%乙醇，料液比為1:8，回流時(shí)間2h,共提取2次[4]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展于春波等采用70%乙醇回流，D2820型人孔吸附樹脂純化的方法制備得到連翹苷的含量達(dá)到27.2%的產(chǎn)品[5]。盧靜華等采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選連翹中連翹苷的最佳提取工藝，認(rèn)為連翹中連翹苷的最佳提取工藝為加10倍水，超聲提取3次，每次30min，提取連翹中連翹苷平均含量達(dá)到0.28%，RSD=1.15%[6]。武果桃等對(duì)比了超聲提取和索氏提取兩種提取方法，結(jié)果顯示以超聲法從連翹中提取連翹苷的提取率較高[7]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展1.2連翹酯苷提取分離工藝王霖嬌等提出了一種連翹酯苷提取新工藝，原料經(jīng)乙醇冷浸、大孔樹脂粗分離后過葡聚糖凝膠柱和C18中壓柱精分離獲得純度達(dá)98%的連翹酯苷產(chǎn)品[8]。高學(xué)敏等采用回流提取，大孔樹脂法分離制備連翹酯苷，并通過正交試驗(yàn)法考察加醇量、回流時(shí)間、回流次數(shù)、醇濃度4個(gè)因素，研究不同類型大孔樹脂對(duì)連翹酯苷收率的影響，得到連翹酯苷純度為18.3%-22.5%的產(chǎn)品[9]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展王進(jìn)東等認(rèn)為D101型大孔樹脂分離純化連翹酯苷能顯著提高連翹酯苷的純度，其最佳工藝為上樣液濃度含連翹生藥1.2g/ml,苷的最佳工藝為上樣液濃度為含連翹生藥1.2g/mL,用6BV的30%乙醇液進(jìn)行洗脫,二次洗脫后,連翹酯苷的含量可達(dá)60%以上。并得出結(jié)論，該技術(shù)能顯著提高連翹酯苷的純度,具有吸附量大,洗脫容易,經(jīng)濟(jì)環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),適合于規(guī)?；a(chǎn)[10]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展劉明等以連翹酯苷A含量為指標(biāo)，采用高效液相法，考察D-101型，D-201型，HPD-100型，HPD-300型等8種大孔吸附樹脂對(duì)連翹中連翹酯苷A吸附純化工藝條件，結(jié)果表明HPD-300型大孔吸附樹脂具有最佳的吸附洗脫參數(shù)，其動(dòng)態(tài)飽和吸附－洗脫量達(dá)3.57%其吸附分離連翹酯苷A的工藝條件為:上樣濃度為0.3g(生藥)/ml,吸附流速為1BV/h,以5倍柱體積水洗脫,繼以7倍柱體積50%乙醇洗脫。結(jié)論是該技術(shù)適用于連翹中連翹酯苷A粗提取的工業(yè)化生產(chǎn)，連翹酯苷A純度可達(dá)50%左右[11]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展王鵬等通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)比較連翹超臨界CO2萃取物、分子蒸餾蒸出物和水提物的解熱、鎮(zhèn)痛效果。其方法為用2,4-二硝基苯酚法比較萃取物、分離物及水提物的解熱效果;腹腔注射醋酸溶液法比較萃取物、分離物及水提物的鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果顯示連翹水提物的解熱、鎮(zhèn)痛效果均優(yōu)于超臨界萃取物和分子蒸餾蒸出物。因此得出結(jié)論連翹發(fā)揮解熱和鎮(zhèn)痛作用的主要有效成分存在于水溶性部分[12]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展2.1連翹苷類的檢測方法2.1連翹苷的檢測方法雷建林等采用反相高效液相色譜法測定不同產(chǎn)地連翹藥材中連翹苷的含量，流動(dòng)相為乙腈－水(25:75)，流速為1.0mLmin-1，檢測波長為277nm，進(jìn)樣量為10L，柱溫為30℃結(jié)果:在選定色譜條件下，連翹苷分離度良好，線性范圍為0.4348～4.348g，r=0.9999，平均回收率98.9%，RSD=0.68%(n=6)[13]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展王瑋等分別以拉曼峰的相對(duì)峰強(qiáng)和峰面積比值作為參量，以不同采收時(shí)期和不同產(chǎn)地的連翹葉為對(duì)象，采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行連翹苷的含量測定。以相對(duì)峰強(qiáng)為參量時(shí)，選取樣品溶液拉曼光譜中連翹苷苯環(huán)振動(dòng)(1319.1cm-1處的強(qiáng)峰)和溶劑甲醇中CH3-O反對(duì)稱伸縮振動(dòng)(2974.7cm-1)作為定量峰和內(nèi)標(biāo)參比峰;以峰面積比值作為參量時(shí)，選取連翹苷苯環(huán)振動(dòng)(1319.1cm-1處的強(qiáng)峰)和溶劑甲醇中CH3-O對(duì)稱伸縮振動(dòng)(3020.9cm-1)作為定量峰和內(nèi)標(biāo)參比峰，分別以定量峰與內(nèi)標(biāo)峰強(qiáng)和峰面積的比值為縱坐標(biāo)，以連翹苷濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并對(duì)線性和加樣回收率進(jìn)行比較。結(jié)果顯示2種參量作為響應(yīng)值用于拉曼光譜定量分析，均有良好的線性，相關(guān)系數(shù)r分別為0.9980和0.9976;回收率均在100.04%～101.30%之間，回收完全;對(duì)2種參量的測定結(jié)果進(jìn)行線性擬合，得出回歸方程C2=1.0304C1－0.0331，r=0.9996。結(jié)果表明兩者測得結(jié)果一致，利用2種參量進(jìn)行定量分析都能取得準(zhǔn)確結(jié)果。拉曼光譜用于連翹苷的定量分析具有操作簡便迅速等優(yōu)點(diǎn)，可以用于中草藥的含量測定[14]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展2.2連翹酯苷的檢測方法靖會(huì)等建立HPLC法測定連翹中連翹酯苷的含量,采用C18柱,乙腈-水-醋酸(15∶85∶0.2)為流動(dòng)相,檢測波長為332nm,柱溫室溫,流速為1.0mL·min-1。連翹酯苷在0.010～0.810g·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9999),平均回收率為100.5%,RSD1.61%。該法簡便快速,重現(xiàn)性好,適于連翹中連翹酯苷的定量分析[15]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展王星等利用近紅外光譜法快速測定連翹藥材中連翹酯苷含量。其利用HPLC測定樣品中連翹酯苷的含量，運(yùn)用偏最小二乘(PLS)法建立其含量與NIR光譜之間的多元校正模型,對(duì)未知樣品進(jìn)行含量預(yù)測。結(jié)果顯示建立的定量模型準(zhǔn)確性好,內(nèi)部交叉驗(yàn)證均方差(RMSECV)、內(nèi)部交叉驗(yàn)證決定系數(shù)分別為0.1221,0.1969。經(jīng)外部驗(yàn)證,NIR預(yù)測值與HPLC測定值之間的相關(guān)系數(shù)為0.1961,預(yù)測均方差(RMSEP)為0.118。得出結(jié)論近紅外光譜法對(duì)連翹中連翹酯苷含量預(yù)測結(jié)果較好,能滿足制藥中檢測的精度要求,為中藥生產(chǎn)過程的在線、無損定量分析提供了依據(jù)[16]。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展結(jié)語連翹在我國地理分布廣，資源豐富，臨床療效確切，具有很好的開發(fā)價(jià)值。對(duì)連翹有效活性成分的進(jìn)一步研究開發(fā)，可以使我國豐富的藥用植物資源得到充分的利用，也必將為疾病的治療提供有效的幫助。連翹提取物提取分離工藝及其檢測方法進(jìn)展參考文獻(xiàn)[1]閆麗麗,姜穎.連翹藥材主要化學(xué)成分及藥理作用研究綜述[J].中國新技術(shù)新產(chǎn)品，2011,11:11.[2]張海燕.連翹化學(xué)成分及藥理活性的研究進(jìn)展［J］．中藥材，2000，23(10):657－660.[3]王婭麗，楊建雄，柴渭莉.連翹葉中連翹苷類成分的提取工藝研究[J].西北藥學(xué)雜志，2006,21(1):92.[4]胡光，姚志娟.正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選乙醇提取連翹苷的工藝研究[J].黑龍江醫(yī)藥，2004,17(5):41-42.[5]于春波，秦緒紅.大孔吸附樹脂法富集連翹中連翹苷的研究[J].黑龍江醫(yī)藥，2004,17(2):104-106.[6]盧靜華，劉元媛.連翹中連翹苷超聲法提取工藝的研究[J].遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011,32(1):68-70.[7]武果桃，牛國慶，劉紅霞等.兩種提取方法對(duì)連翹中連翹苷含量的影響[J].中醫(yī)醫(yī)藥雜志，2009(6):48-50.[8]王霖嬌，盛茂銀.青翹和黃翹中連翹酯苷含量的比較及其提取工藝研究[J].種子，2006,25(10):29-31.[9]高學(xué)敏，王棟，金鑫等.正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選-大孔樹脂分離連翹酯苷的工藝[J].中華醫(yī)學(xué)實(shí)踐雜志，2007,6(1):6-8.[10]王進(jìn)東，趙志君,辛俊偉.D101型大孔樹脂分離純化連翹酯苷的工藝研究[J].山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008,9(3):45-46.[11]劉明,王慧森,李更生.HPD-300型大孔吸附樹脂分離純化連翹中連翹酯苷A的工藝研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,[12]王鵬，胡艷群.連翹提取分離產(chǎn)物的藥效學(xué)研究[J].中藥材，2011,34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