專題19現(xiàn)代生物科技專題1．（2021·1月浙江選考）下圖為動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）A．步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進行B．步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質(zhì)使細胞分離C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細胞轉(zhuǎn)化2．（2021·湖南高考真題）M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是_________，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的_________斷開。（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是_________。（3）與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是_________。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為_________（答出兩點即可），功能上具有_________。（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的_________淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，篩選融合雜種細胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路_________。3．（2021·全國乙卷高考真題）用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中__________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接。上圖中___________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是____________。（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細胞中能___________；質(zhì)粒DNA分子上有______________，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標記基因（如某種抗生素抗性基因），利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是______________。（4）表達載體含有啟動子，啟動子是指__________________。4．（2021·廣東高考真題）非細胞合成技術(shù)是一種運用合成生物學(xué)方法，在細胞外構(gòu)建多酶催化體系，獲得目標產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘、表達等。中國科學(xué)家設(shè)計了4步酶促反應(yīng)的非細胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以期解決高溫強酸水解方法造成的嚴重污染問題，并可以提高產(chǎn)率?；卮鹣铝袉栴}：（1）研究人員采用PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴增得到目標酶基因。此外，獲得酶基因的方法還有___________。（答出兩種即可）（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時必須除去蛋白，方法有___________。（答出兩種即可）（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細胞、pET20b為表達載體分別進行4種酶的表達。表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，首先應(yīng)制備___________細胞。為了檢測目的基因是否成功表達出酶蛋白，需要采用的方法有___________。（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個反應(yīng)體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導(dǎo)致的結(jié)果是___________。在分子水平上，可以通過改變___________，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化。5．（2021·全國甲卷高考真題）PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測。為檢測病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進行了相關(guān)操作：①分析PCR擴增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴增DNA片段；④采集病人組織樣本?；卮鹣铝袉栴}：（1）若要得到正確的檢測結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是_________（用數(shù)字序號表示）。（2）操作③中使用的酶是_________，PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、________三步，其中復(fù)性的結(jié)果是_______。（3）為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與_______特異性結(jié)合。（4）PCR（多聚酶鏈式反應(yīng)）技術(shù)是指_______。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。6．（2021·河北高考真題）采礦污染和不當使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進行后續(xù)處理（例如，收集植物組織器官異地妥善儲存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運蛋白（YCF1）基因?qū)胧茉囍参?，并檢測了相關(guān)指標?；卮鹣铝袉栴}：（1）為獲取YCF1基因，將酵母細胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，這個群體稱為__________。（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時，所需要的兩種酶是__________。構(gòu)建的重組基因表達載體中必須含有標記基因，其作用是______________________________。（3）進行前期研究時，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是__________。研究者進一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實驗材料的目的是______________________________。（4）將長勢一致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測定植株干重（圖1）及不同器官中Cd含量（圖2）。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對Cd具有更強的__________（填“耐性”或“富集能力”）；據(jù)圖2可知，對轉(zhuǎn)基因植株的__________進行后續(xù)處理對于緩解土壤Cd污染最為方便有效。（5）已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是____________________。相較于草本植物，采用楊樹這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢在于___________（寫出兩點即可）。1．（2020·廣東茂名·其他）基因組編輯技術(shù)是研究基因生物功能的重要手段，下圖是對某生物B基因進行定點編輯的過程，該過程中用sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點，相關(guān)說法不正確的是A．靶基因部分序列與sgRNA通過堿基互補配對原則進行配對B．核酸內(nèi)切酶Cas9可斷裂脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵C．被編輯后的B基因與編輯前的B基因互稱為非等位基因D．通過破壞B基因后生物體的功能變化可推測B基因的功能2．（2020·江蘇南通·月考）下圖是利用現(xiàn)代生物技術(shù)獲取轉(zhuǎn)基因羊的流程圖，并利用PCR技術(shù)檢測目的基因的轉(zhuǎn)錄水平來推斷目的基因的表達情況。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A．在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育的不同時期提取的總mRNA不完全相同B．圖中A過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與，獲得的cDNA不含基因的啟動子序列C．利用目的基因cDNA與總cDNA的比值可以推測目的基因的轉(zhuǎn)錄水平D．PCR擴增過程中需要用耐熱的DNA聚合酶來合成與模板結(jié)合的引物3．（2020·福建省福州第一中學(xué)開學(xué)考試）下列關(guān)于cDNA文庫和基因組文庫的說法中，正確的是（）A．同一物種的cDNA文庫只有1種B．某真核生物的cDNA文庫中的某基因一定比基因組文庫中的該基因短C．可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫和基因組文庫D．只有cDNA文庫的基因可實現(xiàn)物種間的基因交流4．（2020·福建省福州第一中學(xué)開學(xué)考試）下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中錯誤的是（）A．用限制酶從一個DNA分子中部獲取一個目的基因時，4個磷酸二酯鍵斷裂B．﹣CATG↓﹣和﹣G↓GATCC﹣序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同C．用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成重組質(zhì)粒D．限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小5．（2020·湖南郴州·其他）2015年諾貝爾化學(xué)獎頒給了研究DNA修復(fù)細胞基質(zhì)的兩位科學(xué)家，細胞通過DNA損傷修復(fù)可使DNA（基因）在復(fù)制過程中受到損傷的結(jié)構(gòu)大部分得以恢復(fù)，如圖為其中的一種方式---切除修復(fù)過程示意圖。下列有關(guān)敘述不正確的是A．圖示過程的完成，可能需要多種酶的共同作用B．圖中二聚體的形成可能是物理化學(xué)等因素的作用C．該修復(fù)過程遵循堿基互補配對原則D．對DNA（基因）的損傷修復(fù)，從生物變異角度看屬于基因重組6．（2020·和平·天津一中月考）為提高大豆對磷元素的吸收能力，研究人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將水稻的耐低磷基因OsPTF轉(zhuǎn)移到大豆植株中，下圖為重組Ti質(zhì)粒上T-DNA的序列結(jié)構(gòu)示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A．以水稻RNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄及PCR擴增可獲得大量OsPTF基因B．RNA聚合酶與啟動子I識別并結(jié)合后，啟動抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄C．可通過含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織D．用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質(zhì)粒后，經(jīng)電泳分離可得到兩條不同長度的帶7．（2020·福建省福州第一中學(xué)開學(xué)考試）關(guān)于利用細胞工程方法，以H7N9病毒的核衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B．體外培養(yǎng)單個已免疫的B淋巴細胞可以獲得大量抗H7N9病毒的單克隆抗體C．將等量已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細胞均為雜交瘤細胞D．利用該單克隆抗體與H7N9病毒的核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出H7N9病毒感染者8．（2020·和平·天津一中月考）通過體細胞核移植技術(shù)培育克隆牛的過程中，未涉及的操作是()A．用顯微操作技術(shù)處理次級卵母細胞，去除細胞核B．將精子放入適宜的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，使其獲能C．用物理或化學(xué)方法激活重組細胞，使其完成發(fā)育進程D．選擇合適時期的胚胎進行移植，使其發(fā)育成完整個體9．（2020·和平·天津一中月考）為增加玉米抗旱性，研究者構(gòu)建含有某微生物抗旱基因E的重組質(zhì)粒，采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入玉米幼胚組織細胞中，用E蛋白的抗體進行抗原-抗體雜交檢測后，經(jīng)進一步鑒定，篩選出抗旱的轉(zhuǎn)基因玉米。下列相關(guān)敘述錯誤的是A．提取該微生物mRNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，通過PCR可獲得大量目的基因B．將重組質(zhì)粒置于經(jīng)CaCl2處理的農(nóng)桿菌懸液中，可獲得轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌C．用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將E基因轉(zhuǎn)入玉米幼胚組織細胞后經(jīng)組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因植株D．用E蛋白的抗體進行抗原-抗體雜交，可在個體水平檢測轉(zhuǎn)基因玉米的抗旱性狀10．（2019·湖北競賽）下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是A．培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B．克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變C．二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D．惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)11．（2020·吳起高級中學(xué)月考）下列有關(guān)基因工程技術(shù)的正確敘述是（）A．重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和運載體B．所有的限制酶都只能識別同一種特定的核苷酸序列C．選用細菌作為重組質(zhì)粒的受體細胞是因為細菌繁殖快D．只要目的基因進入了受體細胞就能成功實現(xiàn)表達12．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）基因工程的操作步驟：①使目的基因與運載體相結(jié)合，②將目的基因?qū)胧荏w細胞，③檢測目的基因的表達是否符合特定性狀要求，④提取目的基因。正確的操作順序是（）A．③②④① B．②④①③ C．④①②③ D．③④①②13．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是（）A．基因治療就是把缺陷基因誘變成正?；駼．基因診斷的基本原理是DNA分子雜交C．一種基因探針能檢測水體中的各種病毒 D．原核基因不能用來進行真核生物的遺傳改良14．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）如圖為利用胚胎干細胞培育轉(zhuǎn)基因小鼠的基本流程示意圖。下列敘述錯誤的是（）A．過程①選擇胚胎干細胞作受體細胞是因為其具有發(fā)育全能性B．過程②中必須通過一定方法篩選含有目的基因的胚胎干細胞C．過程3中導(dǎo)入囊胚的細胞數(shù)不同，子代小鼠的性狀可能不同D．過程④中為提高成功率，需對代孕母鼠進行超數(shù)排卵處理15．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C，擬將其與質(zhì)粒重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實驗?zāi)康牟环氖?)A．用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B．在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞C．用含基因C的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將基因C導(dǎo)入細胞D．用分子雜交方法檢測基因C是否整合到菊花染色體上16．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）在下列選項中,沒有采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是（）A．利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗,得到多倍體植株B．利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株C．利用基因工程培育抗寒的番茄植株D．利用細胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株17．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D．過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上18．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）如圖是“白菜—甘藍”雜種植株的培育過程，下列說法正確的是（）A．圖示“白菜—甘藍”植株不能結(jié)子B．愈傷組織有葉綠體，代謝類型是自養(yǎng)需氧型C．上述過程中包含著有絲分裂、減數(shù)分裂和細胞分化等過程D．“白菜—甘藍”雜種植株的形成是細胞全能性表達的結(jié)果19．（2020·江蘇海陵·泰州中學(xué)月考）科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如下圖：（1）步驟①的技術(shù)名稱是____________。（2）將基因?qū)隕S細胞而不是導(dǎo)入到上皮細胞是因為ES細胞具有______________。（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的__________。由于DNA復(fù)制時，子鏈只能由5′向3′方向延伸，故構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，可以從下圖A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取_______作為引物。對干擾素基因片段和質(zhì)粒進行酶切時，可選用限制酶的組合為___________或_____________。（4）將步驟③獲得的ES細胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)_________色熒光的細胞進行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達，可以采用________________的方法。20．（2020·吉林油田第十一中學(xué)高三月考）人溶菌酶是人體中具有廣譜抗菌活性的酶，抗菌活性是其他來源溶菌酶的300倍以上。我國科研人員運用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出世界首例人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬，顯著增強了小豬崽的免疫力，提高了仔豬存活率。回答下列問題：（1）一個基因表達載體的組成，除了人溶菌酶基因外，還必須有_______、_______以及標記基因，其中標記基因的作用是_______________________。（2）_________是將人溶菌酶基因?qū)藙游锛毎挠行Х椒?，將人溶菌酶基因?qū)素i胎兒成纖維細胞后，可以采用_________技術(shù)檢測該細胞是否含有人溶菌酶基因。（3）將含溶菌酶基因的胎兒成纖維細胞注入_________卵母細胞，通過一定的方法構(gòu)建出重組胚胎。重組胚胎可以利用_________技術(shù)獲得多個轉(zhuǎn)基因胚胎。21．（2020·重慶市開州區(qū)鐵橋中學(xué)月考）用噬菌體抗體庫技術(shù)獲得人的單克隆抗體，方法是將人抗體基因插入噬菌體載體，然后讓該噬菌體感染大腸桿菌，抗體可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式，附著在噬菌體表面，也可能通過大腸桿菌分泌出去?；卮鹣铝袉栴}：（1）獲取人抗體基因時，可從人的___________（填“B”或“T”或“體”）細胞中獲取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再通過PCR技術(shù)擴增出抗體基因。在PCR反應(yīng)體系中，加入dNTP（dCTP、dATP、dGTP和dTTP）的作用是______________________。（2）在噬菌體抗體庫的構(gòu)建過程中，理論上可以不利用Ca2+處理大腸桿菌，依據(jù)是_________________。（3）從噬菌體抗體庫中篩選特異性抗體的方法是___________，原理是______________________。（4）在抗體基因與噬菌體基因之間設(shè)計了一個終止密碼子（UAG）的對應(yīng)序列在終止密碼子突變型的菌株表達時，抗體基因的表達產(chǎn)物是___________（填“融合蛋白”或“分泌型抗體”）。（5）與利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的單克降抗體相比，用該技術(shù)省去了___________（步驟），使制備更簡單易行。22．（2020·寧夏銀川·長慶高中月考）培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用胡蘿卜根段進行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因為植物細胞具有________。胡蘿卜根段細胞通過________過程得到愈傷組織。（2）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是________。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細胞的________過程，最終可形成試管苗。（3）步驟⑥要進行照光培養(yǎng)，其作用是________。（4）經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的________，這種繁殖方式屬于________繁殖。（5）植物體細胞雜交過程中，為了得到原生質(zhì)體需先用________和________來處理植物細胞。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)試劑是________，融合完成的標志是________。23．（2020·全國其他）神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)是一種多功能糖蛋白，在多種腫瘤組織中呈高表達，可與血管內(nèi)皮生長因子結(jié)合促進腫瘤血管的形成，使腫瘤體積增大?？蒲腥藛T通過制備NRP-1單克隆抗體，開展對小鼠的乳腺癌腫塊進行靶向治療的研究。請分析回答：（1）制備單克隆抗體涉及的動物細胞工程常用技術(shù)手段有_________________________(寫出兩項)。（2）制備時，首先給小鼠注射___________________________，分離得到B細胞。將B細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細胞，經(jīng)系列處理選出______________________細胞注射到小鼠腹腔中，從腹水中提取到大量的NRP-1單克隆抗體。（3）為了論證制取的單克隆抗體的治療效果，研究者選擇生長狀況一致的小鼠，分別注射等量的乳腺癌細胞懸液，經(jīng)飼養(yǎng)后，各小鼠均形成了體積基本相同的腫瘤。①將上述小鼠隨機分成實驗組和對照組，實驗組和對照組應(yīng)分別注射____________，___________________，且每隔3天重復(fù)進行相同的注射操作，一段時間后測算發(fā)現(xiàn)，實驗組小鼠的腫瘤體積都小于對照組，原因可能是_________________________發(fā)生特異性結(jié)合，阻斷了___________________________的結(jié)合，從而抑制了腫瘤內(nèi)血管生成，導(dǎo)致腫瘤體積減小。②上述實驗小鼠應(yīng)選用沒有___________________(器官)的動物模型鼠，由于這種鼠存在免疫缺陷，實驗時可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對NRP-1單克隆抗體和乳腺癌腫塊進行攻擊，從而保證實驗結(jié)果更可靠。24．（2020·湖北月考）圖1是利用兩種不同生物技術(shù)將小鼠培育成大鼠的過程。圖2中質(zhì)粒是基因工程中常用的質(zhì)粒pIJ702，其中tsr為硫鏈絲菌素抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識別序列。表1pIJ702pZHZ8BglⅡ5.7kb6.7kbClaⅠ5.7kb2.2kb，4.5kbPstⅠ5.7kb1.6kb，5.1kb(1)圖1中應(yīng)用到的生物工程技術(shù)有（_________）（寫3個）。c分子稱為（____），其上的生長激素基因表達產(chǎn)物幾乎可以作用于丁鼠的所有細胞，主要原因是這些細胞膜上具有（____________）。(2)若大鼠甲和大鼠乙體內(nèi)X染色體上均帶有某種致病基因，則培育出的大鼠丙和大鼠丁攜帶致病基因的情況是（_____________）（不考慮基因突變）。(3)用SacⅠ和SphⅠ同時切割大鼠生長激素基因和質(zhì)粒pIJ702，獲取的目的基因去置換pIJ702上0.4kb的片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8.上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度列在表1中。由此判斷目的基因的片段長度為（____）kb。參照表1數(shù)據(jù)，如果用PstⅠ和ClaⅠ同時酶切重組質(zhì)粒pZHZ8，則兩種酶可將pZHZ8切成（____________）個片段。(4)重組質(zhì)粒pZHZ8上的標記基因是（____________），在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，篩選過程中要淘汰（___________）菌落。25．（2020·江西臨川一中月考）玉米是世界上的第三大糧食作物，廣泛種植于世界各地。研究表明，轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米中的細菌BT基因能表達一種毒蛋白，這種毒蛋白能有效殺死玉米螟（一種農(nóng)業(yè)害蟲）請回答下列問題：（1）BT基因在基因工程中稱為______________。在基因表達載體中，除了要有BT基因外，還必須有啟動子、終止子