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第十章

高效液相色譜法葉樺珍福建衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院教學(xué)目標(biāo)

掌握化學(xué)鍵合相色譜法；高效液相色譜法對(duì)固定相和流動(dòng)相的要求與選擇方法。熟悉實(shí)驗(yàn)條件的選擇；高效液相色譜儀的組成。了解高效液相色譜法的特點(diǎn)和分類；高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用。第二節(jié)

高效液相色譜儀HPLC流程圖

高壓輸液系統(tǒng)包括貯液瓶、高壓泵、脫氣裝置、過(guò)濾器、梯度洗脫裝置和壓力脈動(dòng)阻尼器等，最重要的部件是高壓泵（一）高壓輸液系統(tǒng)1.轉(zhuǎn)動(dòng)凸輪，2.柱塞，3.橡膠墊，4.液缸，5流動(dòng)相入口，6入口單向閥，7..出口單向閥，8.流動(dòng)相出口柱塞往復(fù)泵結(jié)構(gòu)示意圖一、基本結(jié)構(gòu)

是將樣品溶液送入色譜柱的裝置，要求死體積小，密封性和重復(fù)性好（二）進(jìn)樣系統(tǒng)HPLC的進(jìn)樣方式有隔膜注射進(jìn)樣和六通閥進(jìn)樣兩種，其中六通閥進(jìn)樣常用4。實(shí)驗(yàn)結(jié)束用合適的溶劑沖洗，兩端塞緊密封；（三）分離系統(tǒng)色譜柱為直形不銹鋼管。色譜柱的使用和保存應(yīng)注意：5。新色譜柱應(yīng)先按說(shuō)明書操作2。樣品先要用微孔濾膜過(guò)濾；1。流動(dòng)相pH值在2～8之間；3。更換流動(dòng)相要保證互溶，防止鹽析堵塞流路；將色譜柱分離出組分的濃度或含量轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。通用型檢測(cè)器專屬型檢測(cè)器紫外檢測(cè)器熒光檢測(cè)器電化學(xué)檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器固定波長(zhǎng)檢測(cè)器可變波長(zhǎng)檢測(cè)器光電二極管陣列檢測(cè)器（四）檢測(cè)系統(tǒng)二、?基本操作1.檢查儀器狀態(tài)2.制備流動(dòng)相與樣品3.用流動(dòng)相平衡4.設(shè)定并保存方法參數(shù)5.設(shè)定并保存樣品測(cè)定參數(shù)6.基線與壓力

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