綜合試卷第=PAGE1*2-11頁(yè)（共=NUMPAGES1*22頁(yè)） 綜合試卷第=PAGE1*22頁(yè)（共=NUMPAGES1*22頁(yè)）PAGE①姓名所在地區(qū)姓名所在地區(qū)身份證號(hào)密封線1.請(qǐng)首先在試卷的標(biāo)封處填寫(xiě)您的姓名，身份證號(hào)和所在地區(qū)名稱。2.請(qǐng)仔細(xì)閱讀各種題目的回答要求，在規(guī)定的位置填寫(xiě)您的答案。3.不要在試卷上亂涂亂畫(huà)，不要在標(biāo)封區(qū)內(nèi)填寫(xiě)無(wú)關(guān)內(nèi)容。一、選擇題1.生物制藥技術(shù)中常用的提取方法包括：

a.離心提取

b.溶劑提取

c.超臨界流體提取

d.以上都是

2.以下哪種方法不是生物制藥中常用的純化方法：

a.柱層析

b.膜分離

c.沉淀

d.電泳

3.超濾膜的特點(diǎn)不包括：

a.適用于中分子量物質(zhì)的分離

b.操作簡(jiǎn)單

c.分離效率高

d.對(duì)環(huán)境友好

4.蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，哪種方法適用于去除雜蛋白：

a.鹽析

b.酶聯(lián)免疫吸附

c.超濾

d.脫鹽

5.柱層析過(guò)程中，以下哪種因素影響分離效果：

a.柱子長(zhǎng)度

b.液相流速

c.固相吸附能力

d.以上都是

答案及解題思路：

1.答案：d.以上都是

解題思路：生物制藥技術(shù)中，提取方法多樣，離心提取用于去除固體雜質(zhì)，溶劑提取利用不同溶劑對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的溶解度差異進(jìn)行分離，超臨界流體提取則利用超臨界流體的特殊性質(zhì)進(jìn)行提取。因此，所有選項(xiàng)都是生物制藥技術(shù)中常用的提取方法。

2.答案：c.沉淀

解題思路：柱層析、膜分離和電泳都是生物制藥中常用的純化方法，其中柱層析用于分離混合物中的不同組分，膜分離則通過(guò)膜的選擇透過(guò)性實(shí)現(xiàn)分離，電泳則利用電荷差異進(jìn)行分離。沉淀方法主要用于形成固體沉淀物，而非分離混合物中的組分。

3.答案：a.適用于中分子量物質(zhì)的分離

解題思路：超濾膜通常用于分離分子量在幾百至幾千道爾頓的蛋白質(zhì)，屬于小分子物質(zhì)分離。因此，超濾膜的特點(diǎn)不包括適用于中分子量物質(zhì)的分離。

4.答案：b.酶聯(lián)免疫吸附

解題思路：鹽析通過(guò)改變?nèi)芤旱碾x子強(qiáng)度來(lái)沉淀蛋白質(zhì)，脫鹽則用于去除蛋白質(zhì)溶液中的鹽分，而超濾則用于去除溶液中的大分子物質(zhì)。酶聯(lián)免疫吸附是一種利用抗體特異性識(shí)別目標(biāo)蛋白的純化方法，適用于去除雜蛋白。

5.答案：d.以上都是的

解題思路：柱層析過(guò)程中，柱子長(zhǎng)度、液相流速和固相吸附能力都會(huì)影響分離效果。柱子長(zhǎng)度越長(zhǎng)，分離效果可能越好；液相流速過(guò)快可能影響分離效果；固相吸附能力強(qiáng)的材料可以更好地分離混合物中的組分。因此，以上因素都會(huì)影響分離效果。二、填空題1.生物制藥技術(shù)中，常用的提取方法有溶劑提取法、超聲提取法、微波提取法等。

2.純化過(guò)程中，常用的方法有離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析、親和層析等。

3.超濾膜的特點(diǎn)包括選擇性過(guò)濾、高通量、化學(xué)穩(wěn)定性好等。

4.蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，鹽析常用于初步純化。

5.柱層析過(guò)程中，液相流速過(guò)快會(huì)導(dǎo)致洗脫效果差。

答案及解題思路：

1.答案：溶劑提取法、超聲提取法、微波提取法

解題思路：生物制藥技術(shù)中，提取生物活性物質(zhì)常用的方法有溶劑提取法、超聲提取法、微波提取法等。這些方法具有操作簡(jiǎn)便、成本低、提取效率高等優(yōu)點(diǎn)。

2.答案：離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析、親和層析

解題思路：在生物制藥的純化過(guò)程中，離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析和親和層析是最常用的幾種層析方法。這些方法可以根據(jù)物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)將其從混合物中分離出來(lái)。

3.答案：選擇性過(guò)濾、高通量、化學(xué)穩(wěn)定性好

解題思路：超濾膜具有選擇性過(guò)濾、高通量和化學(xué)穩(wěn)定性好等特點(diǎn)，這使得它成為生物制藥過(guò)程中分離純化的一種重要工具。

4.答案：初步純化

解題思路：鹽析是一種常用的蛋白質(zhì)純化方法，主要用于蛋白質(zhì)的初步純化。通過(guò)調(diào)節(jié)溶液中的鹽濃度，可以使蛋白質(zhì)沉淀，從而將其從溶液中分離出來(lái)。

5.答案：洗脫效果差

解題思路：在柱層析過(guò)程中，液相流速過(guò)快會(huì)導(dǎo)致洗脫效果差。這是因?yàn)榱魉龠^(guò)快會(huì)使物質(zhì)在柱子中的停留時(shí)間縮短，從而影響分離效果。因此，在實(shí)際操作中需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)整流速，以獲得最佳的分離效果。三、判斷題1.溶劑提取法適用于所有生物大分子的提取。（×）

解題思路：溶劑提取法是一種常見(jiàn)的生物大分子提取方法，但并非適用于所有生物大分子。例如對(duì)于某些具有特殊化學(xué)性質(zhì)或結(jié)構(gòu)的生物大分子，可能需要特定的溶劑或條件才能有效提取。

2.超濾膜可以有效去除溶液中的所有污染物。（×）

解題思路：超濾膜是一種基于分子大小進(jìn)行分離的膜過(guò)濾技術(shù)，可以去除溶液中的大分子污染物。但是它不能去除所有污染物，如小分子有機(jī)物、離子和一些特殊的無(wú)機(jī)物質(zhì)。

3.鹽析是一種適用于所有生物分子的純化方法。（×）

解題思路：鹽析是一種通過(guò)改變?nèi)芤褐械柠}濃度來(lái)分離蛋白質(zhì)等生物大分子的方法，但它并不適用于所有生物分子。例如對(duì)于某些對(duì)鹽敏感的生物分子，鹽析可能會(huì)導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)和功能的破壞。

4.柱層析的分離效果與柱子長(zhǎng)度成正比。（×）

解題思路：柱層析的分離效果并不簡(jiǎn)單地與柱子長(zhǎng)度成正比。柱層析的分離效果受多種因素影響，包括固定相的性質(zhì)、流動(dòng)相的選擇、柱子的直徑等。柱子長(zhǎng)度只是其中之一。

5.蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，酶聯(lián)免疫吸附可以去除雜蛋白。（√）

解題思路：酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）是一種基于抗原抗體反應(yīng)的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，可以特異性地識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)蛋白。在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，ELISA可以通過(guò)選擇性地結(jié)合目標(biāo)蛋白，從而去除溶液中的雜蛋白。四、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述溶劑提取法在生物制藥技術(shù)中的應(yīng)用。

溶劑提取法是生物制藥中常用的提取方法之一，主要應(yīng)用于以下方面：

從植物、動(dòng)物和微生物中提取天然產(chǎn)物，如草藥中的有效成分。

提取發(fā)酵液中的目標(biāo)產(chǎn)物，如抗生素、維生素等。

從生物組織中提取蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子。

2.比較柱層析和膜分離在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的優(yōu)缺點(diǎn)。

柱層析：

優(yōu)點(diǎn)：分離效率高，純度好，適用于復(fù)雜混合物的分離。

缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，設(shè)備要求高，成本較高。

膜分離：

優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，成本低，適用于大規(guī)模生產(chǎn)。

缺點(diǎn)：分離效率相對(duì)較低，可能無(wú)法達(dá)到高純度。

3.簡(jiǎn)述超濾膜在生物制藥技術(shù)中的作用。

超濾膜在生物制藥技術(shù)中主要用于以下作用：

分離大分子和小分子物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、多肽和多糖。

體積排除，用于濃縮和脫鹽。

脫除熱原和細(xì)菌等雜質(zhì)。

4.說(shuō)明鹽析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的作用原理。

鹽析是通過(guò)調(diào)節(jié)溶液中的離子強(qiáng)度來(lái)沉淀蛋白質(zhì)的方法。其作用原理包括：

離子強(qiáng)度增加時(shí)，蛋白質(zhì)分子表面的電荷密度降低，分子間的靜電排斥力減弱，蛋白質(zhì)分子容易聚集形成沉淀。

鹽析還可以通過(guò)改變蛋白質(zhì)的溶解度來(lái)促進(jìn)蛋白質(zhì)的沉淀。

5.簡(jiǎn)述柱層析過(guò)程中影響分離效果的因素。

柱層析過(guò)程中影響分離效果的因素包括：

層析材料的選擇：不同的層析材料具有不同的吸附性和選擇性。

溶劑的選擇：溶劑的性質(zhì)會(huì)影響蛋白質(zhì)在層析柱中的移動(dòng)速度和分布。

層析柱的規(guī)格和條件：柱徑、流速、溫度等因素都會(huì)影響分離效果。

目標(biāo)蛋白質(zhì)的性質(zhì)：蛋白質(zhì)的分子量、電荷、形狀等因素也會(huì)影響分離效果。

答案及解題思路：

1.答案：

溶劑提取法在生物制藥技術(shù)中應(yīng)用于從植物、動(dòng)物和微生物中提取天然產(chǎn)物，從發(fā)酵液中提取目標(biāo)產(chǎn)物，以及從生物組織中提取蛋白質(zhì)、核酸等。

解題思路：結(jié)合實(shí)際應(yīng)用案例，如從青霉素發(fā)酵液中提取青霉素。

2.答案：

柱層析優(yōu)點(diǎn)：分離效率高，純度好；缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，設(shè)備要求高，成本較高。

膜分離優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，成本低；缺點(diǎn)：分離效率相對(duì)較低，可能無(wú)法達(dá)到高純度。

解題思路：比較兩種方法在抗生素生產(chǎn)中的應(yīng)用。

3.答案：

超濾膜在生物制藥技術(shù)中用于分離大分子和小分子物質(zhì)，體積排除，脫除熱原和細(xì)菌等雜質(zhì)。

解題思路：以血液透析為例說(shuō)明超濾膜的應(yīng)用。

4.答案：

鹽析通過(guò)增加離子強(qiáng)度，降低蛋白質(zhì)分子表面的電荷密度，減弱分子間的靜電排斥力，促進(jìn)蛋白質(zhì)沉淀。

解題思路：結(jié)合蛋白質(zhì)沉淀實(shí)驗(yàn)闡述鹽析原理。

5.答案：

影響因素包括層析材料、溶劑、層析柱規(guī)格條件、目標(biāo)蛋白質(zhì)的性質(zhì)。

解題思路：以蛋白質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)為例，分析各因素對(duì)分離效果的影響。

：五、論述題1.論述生物制藥技術(shù)中提取與純化過(guò)程的重要性。

【內(nèi)容】

生物制藥技術(shù)中的提取與純化過(guò)程對(duì)于生產(chǎn)高質(zhì)量、高純度的生物藥物。提取過(guò)程從生物原料中分離出具有生物活性的目標(biāo)物質(zhì)，而純化過(guò)程則是進(jìn)一步去除雜質(zhì)，保證藥品的穩(wěn)定性和安全性。提取與純化過(guò)程的重要性：

a)保證藥品的安全性：純化可以去除生物制藥中的病原體、內(nèi)毒素等有害物質(zhì)，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。

b)提高藥品的療效：去除非活性成分可以降低副作用，提高治療效果。

c)保證藥品的質(zhì)量：純化過(guò)程可以去除降解產(chǎn)物，保證藥品在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中的穩(wěn)定性。

d)符合法規(guī)要求：符合國(guó)際和中國(guó)國(guó)內(nèi)關(guān)于生物藥品質(zhì)量的要求，保障公眾用藥安全。

2.分析柱層析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的應(yīng)用前景。

【內(nèi)容】

柱層析是一種常用的蛋白質(zhì)純化方法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)在不同介質(zhì)中的吸附和洗脫性質(zhì)，通過(guò)柱層析介質(zhì)實(shí)現(xiàn)分離。柱層析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的應(yīng)用前景：

a)廣泛的適用性：適用于多種蛋白質(zhì)的分離純化。

b)靈活性：可根據(jù)不同的需求選擇合適的層析介質(zhì)和條件。

c)高純度：可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的高純度分離。

d)環(huán)保：柱層析過(guò)程中的溶劑和材料易于回收，有利于環(huán)保。

3.探討超濾膜在生物制藥技術(shù)中的發(fā)展趨勢(shì)。

【內(nèi)容】

超濾膜技術(shù)是一種有效的生物制藥分離技術(shù)，具有高效、節(jié)能、環(huán)保等特點(diǎn)。超濾膜在生物制藥技術(shù)中的發(fā)展趨勢(shì)：

a)膜材料創(chuàng)新：開(kāi)發(fā)具有更高分離功能、更長(zhǎng)使用壽命的膜材料。

b)膜結(jié)構(gòu)優(yōu)化：設(shè)計(jì)具有更高通量和更長(zhǎng)使用壽命的膜結(jié)構(gòu)。

c)膜集成技術(shù)：將超濾與其他分離技術(shù)相結(jié)合，提高生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量。

d)個(gè)性化定制：根據(jù)不同生物制藥需求，提供定制化的超濾解決方案。

4.分析鹽析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的局限性。

【內(nèi)容】

鹽析是一種常用的蛋白質(zhì)純化方法，但其存在一定的局限性：

a)蛋白質(zhì)沉淀?yè)p失：在高鹽濃度下，蛋白質(zhì)容易發(fā)生沉淀，導(dǎo)致部分損失。

b)影響蛋白質(zhì)活性：鹽析過(guò)程中，部分蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變性，影響其活性。

c)操作復(fù)雜：鹽析過(guò)程需要精確控制鹽濃度和溫度，操作相對(duì)復(fù)雜。

d)難以去除小分子雜質(zhì)：鹽析過(guò)程中，難以去除小分子雜質(zhì)。

5.論述生物制藥技術(shù)中提取與純化過(guò)程對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響。

【內(nèi)容】

提取與純化過(guò)程對(duì)生物制藥產(chǎn)品質(zhì)量具有重要影響：

a)影響藥品的穩(wěn)定性：純化過(guò)程可以有效去除降解產(chǎn)物，保證藥品的穩(wěn)定性。

b)影響藥品的療效：純化過(guò)程可以去除非活性成分，提高治療效果。

c)影響藥品的安全性：純化過(guò)程可以去除病原體、內(nèi)毒素等有害物質(zhì)，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。

d)影響藥品的純度：提取與純化過(guò)程直接關(guān)系到藥品的純度，影響其質(zhì)量和使用效果。

答案及解題思路：

答案：

1.生物制藥技術(shù)中提取與純化過(guò)程的重要性主要體現(xiàn)在保證藥品的安全性、提高療效、保證質(zhì)量以及符合法規(guī)要求等方面。

2.柱層析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的應(yīng)用前景表現(xiàn)在其廣泛適用性、靈活性、高純度和環(huán)保性。

3.超濾膜在生物制藥技術(shù)中的發(fā)展趨勢(shì)包括膜材料創(chuàng)新、膜結(jié)構(gòu)優(yōu)化、膜集成技術(shù)和個(gè)性化定制。

4.鹽析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的局限性主要體現(xiàn)在蛋白質(zhì)沉淀?yè)p失、影響蛋白質(zhì)活性、操作復(fù)雜和難以去除小分子雜質(zhì)等方面。

5.提取與純化過(guò)程對(duì)生物制藥產(chǎn)品質(zhì)量的影響主要體現(xiàn)在影響藥品的穩(wěn)定性、療效、安全性以及純度等方面。

解題思路：

對(duì)于此類(lèi)論述題，首先要明確論述題目的核心問(wèn)題，然后結(jié)合所學(xué)知識(shí)，從不同角度展開(kāi)論述。在論述過(guò)程中，要注意論述的條理性和邏輯性，并結(jié)合實(shí)際案例進(jìn)行說(shuō)明。在解答過(guò)程中，注意語(yǔ)言嚴(yán)謹(jǐn)、表達(dá)準(zhǔn)確，符合閱讀習(xí)慣。六、問(wèn)答題1.提取與純化過(guò)程中，如何選擇合適的提取方法？

提取方法的選擇應(yīng)考慮多種因素，包括目標(biāo)產(chǎn)物的性質(zhì)、溶劑的兼容性、提取效率、成本和環(huán)境影響。一些選擇提取方法時(shí)應(yīng)考慮的具體步驟：

目標(biāo)產(chǎn)物的特性：了解目標(biāo)產(chǎn)物的化學(xué)和物理性質(zhì)，如極性、分子量、溶解度等。

溶劑選擇：根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)物的溶解度選擇合適的溶劑，同時(shí)考慮溶劑的毒性、揮發(fā)性及與原料的相容性。

提取效率：選擇能夠快速、高效提取目標(biāo)產(chǎn)物的溶劑和方法。

成本和環(huán)境影響：考慮溶劑和方法的成本以及可能的環(huán)境影響。

2.如何提高柱層析的分離效果？

提高柱層析分離效果的方法包括：

優(yōu)化層析柱條件：調(diào)整柱徑與床高比例、流動(dòng)相組成和流速。

使用合適的固定相：選擇合適的固定相材料，如不同的樹(shù)脂類(lèi)型或凝膠。

梯度洗脫：使用梯度洗脫方法可以更精確地分離成分。

柱床預(yù)處理：使用合適的緩沖液和預(yù)處理步驟來(lái)優(yōu)化柱床。

3.超濾膜在生物制藥技術(shù)中的應(yīng)用有哪些？

超濾膜在生物制藥技術(shù)中的應(yīng)用包括：

去除雜質(zhì)：用于去除細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)、核酸等大分子雜質(zhì)。

濃縮溶液：用于濃縮蛋白質(zhì)溶液。

脫鹽：用于從含有鹽的水溶液中去除鹽分。

除菌：在無(wú)菌操作中用于過(guò)濾去除細(xì)菌和微生物。

4.鹽析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的適用范圍有哪些？

鹽析在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的適用范圍包括：

蛋白質(zhì)濃度調(diào)節(jié)：用于調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的溶解度，便于后續(xù)的分離過(guò)程。

初步純化：作為初步的純化步驟，去除某些雜蛋白。

蛋白質(zhì)回收：在下游處理中用于回收目標(biāo)蛋白質(zhì)。

5.如何評(píng)估提取與純化過(guò)程的效率？

評(píng)估提取與純化過(guò)程效率的方法包括：

產(chǎn)率：計(jì)算目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量與起始原料的比例。

純度：通過(guò)色譜分析等方法測(cè)定目標(biāo)產(chǎn)物的純度。

回收率：計(jì)算目標(biāo)產(chǎn)物在純化過(guò)程中的回收效率。

時(shí)間與成本效益：考慮整個(gè)過(guò)程所需的時(shí)間成本和經(jīng)濟(jì)效益。

答案及解題思路：

答案：見(jiàn)上述各小節(jié)的解答。

解題思路：對(duì)每個(gè)問(wèn)題，首先要理解提取與純化過(guò)程中的關(guān)鍵因素和步驟，然后根據(jù)這些因素和步驟來(lái)選擇合適的提取方法、提高分離效果、應(yīng)用超濾膜、理解鹽析的適用范圍以及評(píng)估過(guò)程效率。解題時(shí)，應(yīng)結(jié)合實(shí)際案例和最新知識(shí)，邏輯清晰，步驟詳盡。七、案例分析題1.案例一：某生物制藥公司生產(chǎn)一種抗生素，請(qǐng)分析其在提取與純化過(guò)程中的關(guān)鍵步驟。

提取與純化關(guān)鍵步驟：

原料預(yù)處理：包括原料的收集、干燥、粉碎等。

粗提?。和ǔ２捎萌軇┹腿　⒊暡ㄝo助提取等方法。

初步純化：通過(guò)固液萃取、吸附、離心等方法進(jìn)行初步分離。

柱層析：利用凝膠層析、離子交換層析等實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)的進(jìn)一步純化。

重結(jié)晶：通過(guò)溶劑選擇，提高目標(biāo)物質(zhì)濃度，進(jìn)行重結(jié)晶。

結(jié)晶處理：包括結(jié)晶形態(tài)的改善和晶體的收集。

干燥：采用冷凍干燥或減壓干燥等方法。

2.案例二：某生物制藥公司開(kāi)發(fā)一種抗癌藥物，請(qǐng)分析其在提取與純化過(guò)程中的關(guān)鍵步驟。

提取與純化關(guān)鍵步驟：

原料收集：選取合適的植物、動(dòng)物或其他生物材料。

溶劑萃?。菏褂糜袡C(jī)溶劑提取目標(biāo)藥物成分。

初步純化：采用酸堿沉淀、鹽析等方法進(jìn)行初步分離。

高效液相色譜（HPLC）：通過(guò)不同極性的流動(dòng)相和固定相實(shí)現(xiàn)分離純化。

膜分離技術(shù)：利用超濾、納濾等膜技術(shù)去除小分子雜質(zhì)。

質(zhì)量檢測(cè)：在純化過(guò)程中進(jìn)行多次質(zhì)量檢測(cè)。

3.案例三：某生物制藥公司生產(chǎn)一種疫苗，請(qǐng)分析其在提取與純化過(guò)程中的關(guān)鍵步驟。

提取與純化關(guān)鍵步驟：

原料選擇：選取健康生物材料，如病毒或細(xì)菌。

細(xì)胞培養(yǎng)：在適宜條件下培