醫(yī)學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)ExperimentofMedicalMicrobiology第一頁，共三十九頁。穩(wěn)固根底理論、根本概念學(xué)習(xí)根本操作樹立無菌概念微生物實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡诙?，共三十九頁。?shí)驗(yàn)室規(guī)那么：1.必須穿白大衣；2.盡量保持安靜；3.自己的實(shí)驗(yàn)器材(試管、平皿等)注明菌種、日期、組、姓名；4.除示教片以外，沾染過傳染物的實(shí)驗(yàn)器材必須放入消毒缸；5.注意平安；不要隨意調(diào)動(dòng)實(shí)驗(yàn)室儀器。6.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，泡手、洗手。第三頁，共三十九頁。細(xì)菌的培養(yǎng)法第四頁，共三十九頁。細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必要條件

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子環(huán)境條件：酸堿度、滲透壓、溫度和必要的氣體培養(yǎng)基的定義微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)混合而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，一般pH為7.2~7.6，高壓滅菌后使用。

第五頁，共三十九頁。培養(yǎng)基分類按其營(yíng)養(yǎng)組成和用途不同根底培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：厭氧培養(yǎng)基：第六頁，共三十九頁。按物理狀態(tài)不同液體培養(yǎng)基:用于大量繁殖細(xì)菌固體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基中參加1.5%~2.5%瓊脂粉，用于細(xì)菌別離和純化半固體培養(yǎng)基:瓊脂粉含量在0.3%~0.5%，用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力和短期保存菌種第七頁，共三十九頁。細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況液體培養(yǎng)基：外表生長(zhǎng)均勻混濁生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)第八頁，共三十九頁。固體培養(yǎng)基：菌落，菌苔別離培養(yǎng)：將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基外表，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基外表分散開，稱別離培養(yǎng)。菌落：?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌生長(zhǎng)后形成的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)叫菌落。純培養(yǎng)：挑取一個(gè)菌落接種到另一培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)出來的細(xì)菌為純種，稱為純培養(yǎng)。第九頁，共三十九頁。半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力第十頁，共三十九頁。細(xì)菌培養(yǎng)的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用感染性疾病的病原學(xué)診斷細(xì)菌學(xué)的研究生物制品的制備在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用在基因工程中的應(yīng)用第十一頁，共三十九頁。實(shí)驗(yàn)三細(xì)菌的培養(yǎng)

培養(yǎng)基 菌種 方法

普通瓊脂平板 大腸、金葡混和菌液 平板劃線肉湯培養(yǎng)基 大腸、枯草桿菌 液體接種

半固體培養(yǎng)基 變形、痢疾桿菌 穿刺接種目的：學(xué)習(xí)掌握細(xì)菌別離和培養(yǎng)的各種根本技術(shù)斜面培養(yǎng)基 大腸桿菌 斜面劃線2人/組第十二頁，共三十九頁。four-areastreakplatetechniqueIVIII1/5I1/10Rotate90

FlameloopRotate90

Rotate90

III1/4Flameloop第十三頁，共三十九頁。液體接種第十四頁，共三十九頁。斜面接種

第十五頁，共三十九頁。

細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)第十六頁，共三十九頁。細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)細(xì)菌根本形態(tài)：球菌桿菌螺形菌第十七頁，共三十九頁。細(xì)菌根本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)：SporeCapsuleFlagellaPilus？？？第十八頁，共三十九頁。細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)：觀察示教片：9張

觀察內(nèi)容示教片重點(diǎn)觀察細(xì)菌基本形態(tài)球菌葡萄球菌鏈球菌肺炎鏈球菌形狀、大小、排列方式桿菌大腸桿菌炭疽桿菌弧菌霍亂弧菌細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)莢膜肺炎球菌莢膜大小與菌體的關(guān)系芽胞破傷風(fēng)梭菌

芽胞在菌體上的位置、大小

鞭毛變形桿菌

鞭毛的形態(tài)、數(shù)量、位置

第十九頁，共三十九頁。第二十頁，共三十九頁。第二十一頁，共三十九頁。第二十二頁，共三十九頁。第二十三頁，共三十九頁。第二十四頁，共三十九頁。第二十五頁，共三十九頁。第二十六頁，共三十九頁。第二十七頁，共三十九頁。第二十八頁，共三十九頁。真菌形態(tài)的觀察第二十九頁，共三十九頁。真菌的菌落形態(tài)

1.新生隱球菌：酵母型菌落；類似細(xì)菌菌落；2.白假絲酵母菌：類酵母菌落(酵母樣菌落)；3.霉菌：絲狀菌落；多細(xì)胞真菌的菌落形式。第三十頁，共三十九頁。真菌鏡下形態(tài)觀察

1.霉菌小培養(yǎng)：菌絲，孢子2.新生隱球菌墨汁涂片：厚莢膜、芽生孢子3.白假絲酵母菌：厚膜孢子、假菌絲第三十一頁，共三十九頁。第三十二頁，共三十九頁。

第三十三頁，共三十九頁。第三十四頁，共三十九頁。

第三十五頁，共三十九頁。第三十六頁，共三十九頁。革蘭染色法菌種：兩個(gè)單菌落E、S試劑：生理鹽水、結(jié)晶紫、碘液、95%乙醇、沙黃材料：酒精燈、接種環(huán)、玻片、步驟①涂片②自然枯燥③固定④染色初染：結(jié)晶紫，1~2滴，時(shí)間1分鐘，用水沖洗。媒染：碘液，1~2滴，時(shí)間1分鐘，用水沖洗。脫色：95％乙醇數(shù)滴，時(shí)間半分鐘〔30秒〕，用水沖洗。復(fù)染：沙黃，1~2滴，1分鐘，用水沖洗。⑤濾紙吸干，油鏡觀察。第三十七頁，共三十九頁。抗酸染色法標(biāo)本：結(jié)核病人痰涂片，枯草涂片試劑：石炭酸復(fù)紅、3%鹽酸酒精、堿性美蘭步驟①固定②染色初染：石炭酸復(fù)紅數(shù)滴，時(shí)間8~10分