選擇性必修3生物技術(shù)與工程第十單元生物技術(shù)與工程第7講基因工程的應(yīng)用和蛋白質(zhì)工程、生物技術(shù)的安全性與倫理問題考情研讀·備考定位課標(biāo)要求1.闡明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞和目的基因的檢測與鑒定等步驟。2．舉例說明基因工程在農(nóng)牧食品及醫(yī)藥等行業(yè)的廣泛應(yīng)用改善了人類生活品質(zhì)。3．概述人們根據(jù)基因工程原理進(jìn)行蛋白質(zhì)設(shè)計(jì)和改造、可以獲得性狀和功能更符合人類需求的蛋白質(zhì)。4．舉例說明依據(jù)人類需要對(duì)原有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行基因改造、生產(chǎn)目標(biāo)蛋白質(zhì)的過程。5．活動(dòng)：利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增DNA片段并完成電泳鑒定，或運(yùn)用軟件進(jìn)行虛擬PCR實(shí)驗(yàn)。核心素養(yǎng)1.構(gòu)建基因工程和蛋白質(zhì)工程操作模型，明確原理。(科學(xué)思維)2．通過“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)與探究能力。(科學(xué)探究)3．通過分析基因工程的應(yīng)用，明確基因工程技術(shù)中的安全性問題。(社會(huì)責(zé)任)考點(diǎn)二考點(diǎn)三提能訓(xùn)練練案[46]考點(diǎn)一考點(diǎn)一基因工程的應(yīng)用必備知識(shí)·夯實(shí)基礎(chǔ)知|識(shí)|鞏|固1．基因工程的一般應(yīng)用2．乳腺生物反應(yīng)器思|維|辨|析易錯(cuò)整合，判斷正誤。(1)外源生長素基因的表達(dá)可以使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物長得更快。(

)(2)干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白，在臨床上被廣泛應(yīng)用。(

)(3)用基因工程的方法，使外源基因得到高效表達(dá)的菌類一般稱為基因工程菌。(

)答案：(1)×

(2)√

(3)√延|伸|探|究1．某些轉(zhuǎn)基因藥物只在雌性動(dòng)物的乳腺細(xì)胞表達(dá)，為什么？提示：藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起，通過顯微注射的方法導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物的受精卵中，讓藥用蛋白基因只在乳腺細(xì)胞中選擇性表達(dá)。2．為提高動(dòng)物的生長速度，需將外源生長激素基因?qū)雱?dòng)物體內(nèi)，應(yīng)該選擇的受體細(xì)胞是什么？并說明理由。提示：受精卵。受精卵體積較大，操作較容易，營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，也能保障發(fā)育成的個(gè)體所有細(xì)胞都含有外源生長激素基因，全能性較高。3．野外種植轉(zhuǎn)基因抗A害蟲植物的同時(shí)，還種植一定量的同種不抗蟲植物，可降低抗性害蟲在整個(gè)害蟲種群中所占比例的增加速率。試分析其中的原因。提示：種植一定量的同種不抗蟲植物，對(duì)抗性害蟲的選擇作用減弱。4．膀胱生物反應(yīng)器與乳腺生物反應(yīng)器相比，有哪些優(yōu)點(diǎn)？提示：乳腺生物反應(yīng)器是利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳汁生產(chǎn)藥用蛋白，而膀胱生物反應(yīng)器是利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的尿液生產(chǎn)藥用蛋白，其優(yōu)點(diǎn)是不受動(dòng)物的性別、生長發(fā)育時(shí)期的限制，提取簡單高效。剖析難點(diǎn)·考點(diǎn)突破考向結(jié)合基因工程的應(yīng)用，考查社會(huì)責(zé)任(2025·福建寧德期末)利用轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)丁酰膽堿酯酶，可治療有機(jī)磷中毒。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A．應(yīng)該用山羊乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子構(gòu)建基因表達(dá)載體B．通過體細(xì)胞克隆可將丁酰膽堿酯酶基因傳遞給子代C．通過顯微注射技術(shù)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入山羊乳腺細(xì)胞D．山羊乳腺細(xì)胞可將肽鏈加工成具有一定空間結(jié)構(gòu)的丁酰膽堿酯酶精|準(zhǔn)|命|題例答案：C解析：要得到轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要山羊乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子，使目的基因只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，A正確；通過體細(xì)胞克隆可把丁酰膽堿酯酶基因傳遞給子代，B正確；通過顯微注射技術(shù)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入山羊受精卵，C錯(cuò)誤；山羊乳腺細(xì)胞中含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可將肽鏈加工成具有一定空間結(jié)構(gòu)的丁酰膽堿酯酶，D正確?！沧兪接?xùn)練〕

(2024·遼寧沈陽期中)下列關(guān)于用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植供體的研究的敘述，錯(cuò)誤的是(

)A．人體移植器官短缺和免疫排斥是目前制約人體器官移植的兩大難題B．豬的內(nèi)臟構(gòu)造、大小和血管分布與人的極為相似C．靈長類動(dòng)物體內(nèi)隱藏的、可導(dǎo)致人類疾病的病毒少于豬D．無論以哪種動(dòng)物作為供體，都需要在其基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因答案：C解析：目前，人體移植器官短缺和免疫排斥是制約人體器官移植的兩大難題，A正確；豬的內(nèi)臟構(gòu)造、大小和血管分布與人的極為相似，且豬體內(nèi)隱藏的、可導(dǎo)致人類疾病的病毒遠(yuǎn)少于靈長類動(dòng)物，B正確，C錯(cuò)誤；無論以哪種動(dòng)物作為供體，都需要在其基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆器官，D正確。乳腺生物反應(yīng)器與工程菌的比較歸納總結(jié)比較內(nèi)容乳腺生物反應(yīng)器工程菌含義讓外源基因在哺乳動(dòng)物的乳腺中特異表達(dá)，利用動(dòng)物的乳腺組織生產(chǎn)藥物蛋白指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表達(dá)的微生物基因表達(dá)合成的藥物蛋白與天然蛋白相同細(xì)菌合成的藥物蛋白可能沒有活性比較內(nèi)容乳腺生物反應(yīng)器工程菌受體細(xì)胞動(dòng)物受精卵微生物細(xì)胞目的基因?qū)敕绞斤@微注射法Ca2＋處理法生產(chǎn)條件不需要嚴(yán)格滅菌，溫度等外界條件對(duì)其影響不大需要嚴(yán)格滅菌，嚴(yán)格控制工程菌所需的溫度、pH、營養(yǎng)物質(zhì)濃度等外界條件藥物提取從動(dòng)物乳汁中提取從微生物細(xì)胞或其培養(yǎng)液中提取考點(diǎn)二蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用必備知識(shí)·夯實(shí)基礎(chǔ)知|識(shí)|鞏|固1．概念剖析2．流程圖寫出流程圖中字母代表的含義：A．______ B．______C．____________ D．_________E．____________轉(zhuǎn)錄翻譯分子設(shè)計(jì)多肽鏈預(yù)期功能3．蛋白質(zhì)工程與基因工程的區(qū)別和聯(lián)系教材隱含知識(shí)(選擇性必修3P90正文信息)利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得的已整合藥用蛋白基因的轉(zhuǎn)基因小鼠分泌的乳汁中檢測不到藥用蛋白，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是_____________________________。藥用蛋白基因沒有轉(zhuǎn)錄或翻譯思|維|辨|析易錯(cuò)整合，判斷正誤。(1)蛋白質(zhì)工程需要改變蛋白質(zhì)分子的所有氨基酸序列。(

)(2)蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作，定向改造分子的結(jié)構(gòu)。(

)(3)蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)槿藗儗?duì)蛋白質(zhì)復(fù)雜的高級(jí)結(jié)構(gòu)沒有完全認(rèn)識(shí)。(

)(4)蛋白質(zhì)工程可以改造酶，提高酶的熱穩(wěn)定性。(

)答案：(1)×

(2)×

(3)√

(4)√延|伸|探|究1．蛋白質(zhì)工程為什么通過對(duì)基因操作來實(shí)現(xiàn)對(duì)天然蛋白質(zhì)的改造？提示：①蛋白質(zhì)具有十分復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)，基因的結(jié)構(gòu)相對(duì)簡單，容易改造。②改造后的基因可以遺傳給下一代，被改造的蛋白質(zhì)無法遺傳。2．基因工程能否完全滿足人們生產(chǎn)和生活的需要，為什么？提示：不能，因?yàn)榛蚬こ淘瓌t上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)不一定能完全滿足人類的需要。剖析難點(diǎn)·考點(diǎn)突破考向結(jié)合蛋白質(zhì)工程，考查科學(xué)探究(2025·湖北孝感高中質(zhì)檢)下圖表示蛋白質(zhì)工程的操作過程，相關(guān)說法錯(cuò)誤的是(

)精|準(zhǔn)|命|題例A．a(chǎn)、b過程分別是轉(zhuǎn)錄、翻譯B．蛋白質(zhì)工程中對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作C．蛋白質(zhì)工程是完全擺脫基因工程技術(shù)的一項(xiàng)全新的生物工程技術(shù)D．蛋白質(zhì)工程中可能構(gòu)建出一種全新的基因答案：C解析：a過程是以DNA的一條鏈為模板合成mRNA的轉(zhuǎn)錄過程，b過程是以mRNA為模板合成具有一定氨基酸順序的多肽鏈的翻譯過程，A正確；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求，因此蛋白質(zhì)工程中對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作，B正確；蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，C錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程中，可能根據(jù)已經(jīng)明確的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)構(gòu)建出一種全新的基因，D正確?！沧兪接?xùn)練〕

(2024·山東淄博期中)纖維素酶廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品發(fā)酵、造紙、廢水處理等領(lǐng)域。研究人員利用蛋白質(zhì)工程將細(xì)菌纖維素酶的相應(yīng)氨基酸替換后，纖維素酶熱穩(wěn)定性得到了提高。下列有關(guān)該技術(shù)的說法，正確的是(

)A．改造后的纖維素酶的較高熱穩(wěn)定性不可遺傳B．對(duì)纖維素酶的改造需要以基因工程為基礎(chǔ)C．改造纖維素酶無需構(gòu)建基因表達(dá)載體D．對(duì)纖維素酶的改造是通過直接改造mRNA實(shí)現(xiàn)的答案：B解析：由于蛋白質(zhì)工程是進(jìn)行了基因改造，所以改造后的纖維素酶的較高熱穩(wěn)定性是可遺傳的，A錯(cuò)誤；對(duì)纖維素酶的改造需要以基因工程為基礎(chǔ)，B正確；改造纖維素酶同樣需構(gòu)建基因表達(dá)載體，C錯(cuò)誤；對(duì)纖維素酶的改造是通過改造控制合成纖維素酶的基因來實(shí)現(xiàn)的，D錯(cuò)誤。考點(diǎn)三生物技術(shù)的安全性與倫理問題必備知識(shí)·夯實(shí)基礎(chǔ)知|識(shí)|鞏|固1．轉(zhuǎn)基因成果2．對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的爭論教材隱含知識(shí)(選擇性必修3P102相關(guān)信息)我國科學(xué)家將來自玉米的___________基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中，由于____________基因可以阻斷淀粉儲(chǔ)藏使花粉失去活性，因而可以防止____________的傳播。α－淀粉酶α－淀粉酶轉(zhuǎn)基因花粉3．理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)(1)理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)①清晰地了解轉(zhuǎn)基因技術(shù)的_____________________。②看到人們的觀點(diǎn)受到許多復(fù)雜的___________________等因素的影響。③靠確鑿的______和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)腳_____進(jìn)行思考和辯論。(2)我國對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持____________；推廣上要慎重，做到____________；管理上要嚴(yán)格，__________________。原理和操作規(guī)程政治、經(jīng)濟(jì)和文化證據(jù)邏輯自主創(chuàng)新確保安全堅(jiān)持依法監(jiān)管4．關(guān)注生殖性克隆人(1)比較治療性克隆與生殖性克隆項(xiàng)目治療性克隆生殖性克隆區(qū)別目的從胚胎中取出干細(xì)胞用于醫(yī)學(xué)研究和治療用于生育，獲得人的復(fù)制品水平細(xì)胞水平個(gè)體水平聯(lián)系都屬于______生殖；產(chǎn)生新個(gè)體或新組織，遺傳信息不變無性(2)5．比較試管嬰兒和“設(shè)計(jì)試管嬰兒”(1)試管嬰兒和“設(shè)計(jì)試管嬰兒”過程如下圖所示：(2)試管嬰兒和“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的異同點(diǎn)項(xiàng)目試管嬰兒“設(shè)計(jì)試管嬰兒”不同點(diǎn)技術(shù)手段無須進(jìn)行遺傳學(xué)診斷進(jìn)行遺傳學(xué)診斷應(yīng)用主要解決____________夫婦的生育問題主要用于白血病、貧血癥等遺傳疾病的預(yù)測及治療相同點(diǎn)二者都是體外受精、體外進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，再經(jīng)過____________，從生殖方式上都為______生殖不孕不育胚胎移植有性剖析難點(diǎn)·考點(diǎn)突破考向考查生物技術(shù)的安全性與倫理問題

隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，“基因污染”應(yīng)運(yùn)而生，下列關(guān)于基因污染的說法，錯(cuò)誤的是(

)A．轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉擴(kuò)散到它的近親作物上，從而污染生物基因庫B．雜草、害蟲從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性精|準(zhǔn)|命|題例C．基因污染是一種不可以增殖的污染D．基因污染難以清除答案：C解析：基因污染是可以隨著自然界中的生物擴(kuò)散的，如轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫；雜草、害蟲從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性；基因污染指基因工程中目的基因轉(zhuǎn)移到生物體內(nèi)可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人體健康造成潛在風(fēng)險(xiǎn)和威脅，而且會(huì)隨著生物的繁殖過程不斷增殖，難以清除。故選C?！沧兪接?xùn)練〕

(2023·浙江1月選考)以哺乳動(dòng)物為研究對(duì)象的生物技術(shù)已獲得了長足的進(jìn)步。對(duì)生物技術(shù)應(yīng)用于人類，在安全與倫理方面有不同的觀點(diǎn)，下列敘述正確的是(

)A．試管嬰兒技術(shù)應(yīng)全面禁止B．治療性克隆不需要監(jiān)控和審查C．生殖性克隆不存在倫理道德方面的風(fēng)險(xiǎn)D．我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)答案：D解析：試管嬰兒屬于有性生殖，在合理范圍內(nèi)，試管嬰兒技術(shù)是可以使用的，A錯(cuò)誤；治療性克隆要在嚴(yán)格監(jiān)管下進(jìn)行，B錯(cuò)誤；生殖性克隆會(huì)引起嚴(yán)重的道德、倫理、社會(huì)和法律問題，C錯(cuò)誤。素養(yǎng)提升·強(qiáng)化思維構(gòu)|建|網(wǎng)|絡(luò)真|題|再|(zhì)現(xiàn)1．(2023·浙江卷)某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3－GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計(jì)了引物1和引物2用于PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是(

)A．Gata3基因的啟動(dòng)子無法控制GFP基因的表達(dá)B．翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C．2號(hào)條帶的小鼠是野生型，4號(hào)條帶的小鼠是Gata3－GFP基因純合子D．若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分雜合子和純合子答案：B解析：分析圖示可知，啟動(dòng)子在左側(cè)，GFP基因整合在Gata3基因的右側(cè)，啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄后，可以使GFP基因轉(zhuǎn)錄，Gata3基因的啟動(dòng)子能控制GFP基因的表達(dá)，A錯(cuò)誤；因啟動(dòng)子在左側(cè)，轉(zhuǎn)錄的方向向右，合成的mRNA從左向右為5′→3′，剛好是翻譯的方向，所以翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正確；整合GFP基因后，核酸片段變長，2號(hào)個(gè)體只有大片段，所以是Gata3－GFP基因純合子，4號(hào)個(gè)體只有小片段，是野生型，C錯(cuò)誤；用引物1和引物3進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出的片段大小差異較小，無法較好的區(qū)分片段，D錯(cuò)誤。故選B。2．(2024·河北卷)新城疫病毒可引起家禽急性敗血性傳染病，我國科學(xué)家將該病毒相關(guān)基因改造為r2HN，使其在水稻胚乳中特異表達(dá)，制備獲得r2HN疫苗，并對(duì)其免疫效果進(jìn)行了檢測?；卮鹣铝袉栴}：(1)實(shí)驗(yàn)所用載體的部分結(jié)構(gòu)及其限制酶識(shí)別位點(diǎn)如圖1所示。其中GtP為啟動(dòng)子，若使r2HN僅在水稻胚乳表達(dá)，GtP應(yīng)為________________________啟動(dòng)子。Nos為終止子，其作用為__________。r2HN基因內(nèi)部不含載體的限制酶識(shí)別位點(diǎn)。因此，可選擇限制酶________和________對(duì)r2HN基因與載體進(jìn)行酶切，用于表達(dá)載體的構(gòu)建。(2)利用_________方法將r2HN基因?qū)胨居鷤M織。為檢測r2HN表達(dá)情況，可通過PCR技術(shù)檢測_________，通過______________技術(shù)檢測是否翻譯出r2HN蛋白。(3)獲得轉(zhuǎn)基因植株后，通常選擇單一位點(diǎn)插入目的基因的植株進(jìn)行研究。此類植株自交一代后，r2HN純合體植株的占比為________。選擇純合體進(jìn)行后續(xù)研究的原因是____________________。(4)制備r2HN疫苗后，為研究其免疫效果，對(duì)實(shí)驗(yàn)組雞進(jìn)行接種，對(duì)照組注射疫苗溶劑。檢測兩組雞體內(nèi)抗新城疫病毒抗體水平和特異應(yīng)答的CD8＋T細(xì)胞(細(xì)胞毒性T細(xì)胞)水平，結(jié)果如圖2所示。據(jù)此分析，獲得的r2HN疫苗能夠成功激活雞的________免疫和________免疫。(5)利用水稻作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)r2HN疫苗的優(yōu)點(diǎn)是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(答出兩點(diǎn)即可)答案：(1)在水稻胚乳中特異性表達(dá)的基因的終止轉(zhuǎn)錄HindⅢ

EcoRⅠ

(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化r2HN是否轉(zhuǎn)錄出mRNA抗原—抗體雜交(3)1/4純合體自交后代不發(fā)生性狀分離(4)體液細(xì)胞(5)不受性別的限制、可大量種植、成本低、安全性高解析：(1)利用水稻細(xì)胞培育能表達(dá)r2HN的水稻胚乳細(xì)胞生物反應(yīng)器，在胚乳中特異性表達(dá)的啟動(dòng)子在水稻胚乳細(xì)胞中更容易被RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄。Nos為終止子，終止子可以終止轉(zhuǎn)錄。r2HN基因內(nèi)部不含載體的限制酶識(shí)別位點(diǎn)。KpnⅠ破壞了啟動(dòng)子序列不能選用，SacⅠ位于終止子序列之外不能選用，則為了將目的基因插入到載體的啟動(dòng)子和終止子之間，則需要用限制酶HindⅢ和EcoRⅠ對(duì)r2HN基因與載體進(jìn)行酶切，用于表達(dá)載體的構(gòu)建。(2)獲得水稻愈傷組織后，通過農(nóng)桿菌的侵染，使目的基因進(jìn)入水稻細(xì)胞并完成轉(zhuǎn)化。為檢測r2HN表達(dá)情況，可通過PCR技術(shù)檢測轉(zhuǎn)錄的r2HNmRNA，可從轉(zhuǎn)基因水稻中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交檢測是否翻譯出r2HN蛋白。(3)獲得轉(zhuǎn)基因植株后，通常選擇單一位點(diǎn)插入目的基因的植株進(jìn)行研究。單一位點(diǎn)插入目的基因的植株，則相當(dāng)于雜合子，雜合子自交，后代含有r2HN基因的純合子為1/4。由于純合體自交后代不發(fā)生性狀分離，具有遺傳的穩(wěn)定性，所以選擇純合體進(jìn)行后續(xù)研究。(4)據(jù)圖可知，實(shí)驗(yàn)組的抗體水平和CD8＋T細(xì)胞水平都比對(duì)照組高，說明通過體液免疫產(chǎn)生了抗體，通過細(xì)胞免疫產(chǎn)生了細(xì)胞毒性T細(xì)胞，即r2HN疫苗能夠成功激活雞的體液免疫和細(xì)胞免疫。(5)通過水稻作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)r2HN疫苗具有不受性別的限制、可大量種植、成本低、安全性高等優(yōu)點(diǎn)。3．(2024·吉林卷)將天然Ti質(zhì)粒改造成含有Vir基因的輔助質(zhì)粒(輔助T－DNA轉(zhuǎn)移)和不含有Vir基因、含有T－DNA的穿梭質(zhì)粒，共同轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，可提高轉(zhuǎn)化效率。細(xì)菌和棉花對(duì)密碼子偏好不同，為提高翻譯效率，增強(qiáng)棉花抗病蟲害能力，進(jìn)行如下操作?；卮鹣铝袉栴}。注：F1－F3，R1－R3表示引物；T－DNA－LB表示左邊界；T－DNA－RB表示右邊界；Ori表示復(fù)制原點(diǎn)；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。(1)從蘇云金桿菌提取DNA時(shí)，需加入蛋白酶，其作用是________________。提取過程中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精，其目的是__________________________________________________________________________________________________________________________。(2)本操作中獲取目的基因的方法是____________和________。(3)穿梭質(zhì)粒中p35s為啟動(dòng)子，其作用是______________________，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄；插入兩個(gè)p35s啟動(dòng)子，其目的可能是__________。(4)根據(jù)圖中穿梭質(zhì)粒上的KanR和HygBR兩個(gè)標(biāo)記基因的位置，用________基因?qū)?yīng)的抗生素初步篩選轉(zhuǎn)化的棉花愈傷組織。(5)為檢測棉花植株是否導(dǎo)入目的基因，提取棉花植株染色體DNA作模板，進(jìn)行PCR，應(yīng)選用的引物是________和________。(6)本研究采用的部分生物技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，理由是________。A．通過含有雙質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞B．將蘇云金桿菌Bt基因