測(cè)定的意義總大腸菌群的特征測(cè)定方法任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)總大腸菌群:指一群在37℃

培養(yǎng)24h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。主要包括有埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、腸桿菌屬、克雷伯氏菌屬等菌屬的細(xì)菌。

總大腸菌群數(shù)：每升水樣中所含有的大腸菌群數(shù)?！狙a(bǔ)充環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)】

生活飲用水:總大腸菌群數(shù)每100mL不得檢出水源水：?只經(jīng)過加氯消毒即供作生活飲用水的水源水，總大腸菌群平均每升不超過1000個(gè)?經(jīng)過凈化處理及加氯消毒后供作生活飲用的水源水，總大腸菌群平均每升不得超過10000個(gè)地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ類≤3個(gè)/L；Ⅳ≤100個(gè)/L；Ⅴ>100個(gè)/L

任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)一、測(cè)定意義

作為水體受糞便污染的指標(biāo)。

二、總大腸菌群的特征

在37℃

下培養(yǎng)24h可使乳糖發(fā)酵，并產(chǎn)酸產(chǎn)氣

是革蘭氏陰性無芽孢桿菌

在特殊培養(yǎng)基上能夠長(zhǎng)出具有典型特征的菌落

任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)三、測(cè)定方法（一）多管發(fā)酵法

(1)生活飲用水

①

初發(fā)酵試驗(yàn)

②

平板分離

③

復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)

陽性管接種在伊紅美蘭培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)18～24h，挑選典型特征的菌落，涂片、革蘭氏染色、鏡檢

原水樣各10mL37℃24h＋＋＋＋各10mL雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液根據(jù)陽性管的數(shù)目查表求出大腸菌群數(shù)5個(gè)10mL管中陽性管數(shù)最可能數(shù)（MPN）0＜2.212.225.139.2416.05＞16用5個(gè)10mL水樣時(shí)各種陽性和陰性結(jié)果組合時(shí)的最可能數(shù)（MPN）任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)(2)水源水：將水樣作1：10稀釋

37℃24h乳糖蛋白胨各10mL雙料乳糖蛋白胨各10mL水樣1mL各1mL各1mL各10mL10-137℃24h9mL無菌水任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)(3)地表水和廢水：水樣應(yīng)作1:10，1:100，1:1000或更高的稀釋

MPN值=MPN指數(shù)×

任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)（二）四管發(fā)酵法（以輕度污染者為例）

①

初發(fā)酵試驗(yàn)

②

平板分離

③

復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)

革蘭氏染色+_++10mL水樣25mL225mL無菌水1mL1mL1mL10-11mL10-237℃24h37℃18-24h+++G-G-G+查表任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)（三）濾膜法

濾膜是一種微孔薄膜（孔徑0.45μm）

過濾水樣

①濾膜及濾器的滅菌

②過濾裝置安裝

③水樣量的選擇

④過濾水樣

任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)培養(yǎng)

結(jié)果觀察和報(bào)告

挑選典型特征的菌落進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢；

染色為革蘭氏陰性無芽孢桿菌再接種于乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h，產(chǎn)酸產(chǎn)氣者則判為總大腸菌群陽性

37℃24h任務(wù)三水中總大腸菌群的檢測(cè)計(jì)數(shù)濾膜上生長(zhǎng)的大腸菌群菌落總