pcr上崗證考試題及答案浙江

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術的中文名稱是（）A.聚合酶鏈反應B.核酸內切酶反應C.逆轉錄反應D.連接酶反應答案：A2.在PCR反應中，哪種酶起關鍵作用（）A.限制酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.連接酶答案：B3.PCR反應的三個基本步驟不包括（）A.變性B.退火C.延伸D.轉錄答案：D4.以下哪種物質是PCR反應的原料（）A.氨基酸B.核苷酸C.葡萄糖D.脂肪酸答案：B5.PCR反應體系中，引物的作用是（）A.提供能量B.起始DNA合成C.穩(wěn)定反應體系D.分解模板答案：B6.一般PCR反應的變性溫度是（）A.90-95℃B.70-75℃C.50-55℃D.30-35℃答案：A7.在PCR反應中，退火溫度主要取決于（）A.酶的活性B.引物的長度和GC含量C.模板的長度D.dNTP的濃度答案：B8.PCR產物的特異性主要取決于（）A.模板的純度B.酶的種類C.引物的特異性D.dNTP的質量答案：C9.以下哪種PCR技術可以在一個反應體系中同時檢測多個基因（）A.常規(guī)PCRB.熒光定量PCRC.多重PCRD.巢式PCR答案：C10.PCR技術可用于（）A.基因克隆B.疾病診斷C.法醫(yī)學鑒定D.以上都是答案：D二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術的應用領域包括（）A.遺傳病診斷B.腫瘤檢測C.病原體檢測D.基因表達分析答案：ABCD2.影響PCR反應的因素有（）A.模板質量B.引物設計C.酶的活性D.反應體系的離子濃度答案：ABCD3.以下哪些是PCR反應中常用的緩沖液成分（）A.Tris-HClB.KClC.MgCl?D.明膠答案：ABC4.在PCR產物分析中，可采用的方法有（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.聚丙烯酰胺凝膠電泳C.測序D.酶切分析答案：ABCD5.熒光定量PCR技術的特點包括（）A.靈敏度高B.特異性強C.可定量分析D.不需要模板答案：ABC6.以下關于引物設計的原則正確的是（）A.長度合適B.GC含量適中C.避免二級結構D.特異性強答案：ABCD7.PCR反應中的污染來源可能有（）A.樣本間交叉污染B.試劑污染C.實驗室環(huán)境污染D.操作過程污染答案：ABCD8.以下屬于PCR衍生技術的有（）A.反向PCRB.不對稱PCRC.原位PCRD.熱啟動PCR答案：ABCD9.在進行PCR實驗時，實驗人員需要注意（）A.嚴格遵守操作規(guī)程B.做好防護措施C.定期進行設備維護D.防止污染答案：ABCD10.對于PCR結果的準確性，以下說法正確的是（）A.與模板質量有關B.與引物質量有關C.與反應條件有關D.與檢測方法有關答案：ABCD三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應只能擴增DNA，不能擴增RNA。（）答案：錯誤2.只要有足夠的模板，PCR反應就可以無限循環(huán)進行。（）答案：錯誤3.引物的長度越長越好。（）答案：錯誤4.所有的DNA聚合酶都適用于PCR反應。（）答案：錯誤5.PCR反應中，退火溫度越高，引物與模板的結合越特異。（）答案：錯誤6.熒光定量PCR中不需要用到DNA聚合酶。（）答案：錯誤7.在PCR反應體系中，dNTP的濃度越高越好。（）答案：錯誤8.巢式PCR的特異性比常規(guī)PCR高。（）答案：正確9.PCR反應對實驗室環(huán)境沒有特殊要求。（）答案：錯誤10.對于污染的PCR產物，可以直接重新進行PCR反應。（）答案：錯誤四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR反應的基本原理。答案：PCR反應是一種體外模擬體內DNA復制的技術。以DNA為模板，在DNA聚合酶、引物、dNTP和緩沖液等存在的條件下，經過變性（使模板DNA雙鏈解開）、退火（引物與模板結合）、延伸（在DNA聚合酶作用下合成新的DNA鏈）三個基本步驟的多次循環(huán)，實現特定DNA片段的大量擴增。2.簡述熒光定量PCR技術的原理。答案：在PCR反應體系中加入熒光基團，熒光信號的變化可反映PCR產物量的變化。在反應過程中，隨著PCR循環(huán)數增加，熒光信號強度增加。通過檢測每個循環(huán)的熒光信號，利用特定的數學算法，可實現對起始模板量的定量分析。3.如何減少PCR反應中的污染？答案：使用一次性耗材；試劑分裝；實驗空間分區(qū)；操作前后清潔消毒；嚴格按照操作流程，避免樣本間交叉污染；定期對實驗室設備清潔維護等。4.簡述引物設計的基本要求。答案：長度一般18-30bp；GC含量40%-60%；避免引物內部二級結構；避免引物間相互作用；與模板特異性結合等。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論PCR技術在新型冠狀病毒檢測中的意義。答案：PCR技術可快速、靈敏地檢測新冠病毒核酸。能早期發(fā)現感染者，對疫情防控至關重要，包括確診患者、無癥狀感染者的篩查等，有助于及時隔離、控制病毒傳播，為制定公共衛(wèi)生策略提供依據。2.請討論如何提高PCR反應的特異性。答案：優(yōu)化引物設計，確保引物特異性；精確控制反應條件如退火溫度等；提高模板純度；使用高質量的酶和試劑等。3.論述PCR技術在腫瘤診斷中的應用及局限性。答案：應用包括檢測腫瘤相關基因、監(jiān)測微小殘留病變等。局限性為可能存在假