兒童感染性腹瀉病與潰瘍性結(jié)腸炎中血清IL-17的水平差異及臨床意義探究一、引言1.1研究背景與意義感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎是兒科常見的腸道疾病，對兒童的健康成長造成了嚴重威脅。感染性腹瀉病是全球5歲以下兒童的第二大死因，在中國，輪狀病毒感染全年均可發(fā)生，每年10月到次年1月是高發(fā)季，其引發(fā)的腹瀉有“三多一少”特點，即患兒大便次數(shù)多，一天可拉10到20次；水樣腹瀉變多；大便量變多以及小便量變少，嚴重時可導致患兒脫水，甚至危及生命。低齡兒童若出生兩年內(nèi)反復(fù)發(fā)生腹瀉，還可能影響生長發(fā)育和認知功能。潰瘍性結(jié)腸炎在兒童中的發(fā)病率近年來呈上升趨勢，它是一種免疫介導的炎癥性腸病，特征為腹痛、腹瀉和營養(yǎng)攝入不足。長期的慢性炎性刺激不僅影響患兒的生長發(fā)育，導致營養(yǎng)不良、貧血、生長發(fā)育遲緩、免疫力低下等問題，還會給患兒帶來心理壓力，產(chǎn)生焦慮、抑郁、自卑、孤獨等心理問題，同時也增加了家庭的經(jīng)濟負擔和照顧負擔。此外，約5%的重度潰瘍性結(jié)腸炎患者會出現(xiàn)中毒性巨結(jié)腸，若該病反復(fù)發(fā)作長達20年左右，患者患結(jié)腸癌的風險會比普通人高15倍之多，嚴重影響生存質(zhì)量。白細胞介素-17（IL-17）是一種由T細胞和單核巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子，在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。它具有促進炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、調(diào)節(jié)骨代謝、促進組織修復(fù)和再生以及抗腫瘤等多種作用。在腸道免疫中，IL-17可以刺激成纖維細胞、巨噬細胞、T細胞產(chǎn)生多種促炎性介質(zhì)，與腸黏膜免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)密切相關(guān)。研究感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17的水平變化具有重要的臨床價值。一方面，有助于深入了解這兩種疾病的免疫致病機制，為揭示疾病的發(fā)生發(fā)展過程提供理論依據(jù)；另一方面，通過檢測血清IL-17水平，有望為疾病的診斷、病情評估及治療方案的制定提供新的參考指標，從而提高臨床治療效果，改善患兒的預(yù)后。1.2研究目的本研究旨在通過檢測感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清中IL-17的水平，深入分析IL-17在這兩種疾病發(fā)病機制中的作用，探討其與疾病嚴重程度、病程等因素的相關(guān)性。同時，比較兩種疾病患兒血清IL-17水平的差異，評估其作為鑒別診斷指標的可行性，為臨床早期診斷、病情評估和治療方案的制定提供科學依據(jù)，從而提高對這兩種兒科常見腸道疾病的診療水平，改善患兒的預(yù)后。二、理論基礎(chǔ)2.1感染性腹瀉病概述感染性腹瀉病，又被稱作急性胃腸炎，是一類由細菌、病毒、寄生蟲以及真菌等病原體入侵腸道，進而引發(fā)腹瀉癥狀的疾病。其發(fā)病機制主要源于病原體或其所產(chǎn)生的毒素對胃腸道黏膜的直接侵害。從傳播途徑來看，感染性腹瀉病主要通過糞-口途徑傳播，即病原體隨糞便排出體外，污染食物、水源或日常生活用品，健康人接觸后經(jīng)口進入體內(nèi)而感染，如輪狀病毒腹瀉，患兒糞便中的病毒顆?？赏ㄟ^污染的手、玩具、食物等傳染給其他兒童。少數(shù)情況下，也可通過個體接觸傳播，如照顧感染患者時的密切接觸；以及呼吸道飛沫傳播，不過仍有部分病原體的實際傳播途徑尚未完全明確。依據(jù)病原體的不同，感染性腹瀉病可以分為多種類型。細菌感染所致的腹瀉，常見病原菌有沙門菌屬、嗜鹽菌、大腸桿菌等，例如沙門菌感染常因食用被污染的肉類、蛋類等食物引起，患者會出現(xiàn)發(fā)熱、腹痛、腹瀉等癥狀。病毒感染引發(fā)的腹瀉中，輪狀病毒是嬰幼兒腹瀉的主要病原體之一，多在秋冬季節(jié)高發(fā)，感染后患兒常伴有發(fā)熱、嘔吐，隨后出現(xiàn)大量水樣便。寄生蟲感染導致的腹瀉，像賈第蟲、阿米巴原蟲等，賈第蟲感染通常與飲用被污染的水源有關(guān)，可引起腹痛、腹瀉、腹脹等消化不良癥狀。真菌性腹瀉則相對較少見，主要由白色念珠菌等感染引起，多見于免疫力低下人群，如長期使用抗生素、患有免疫缺陷疾病的患者。感染性腹瀉病的臨床表現(xiàn)存在差異，可分為輕型腹瀉和中重度腹瀉。輕型腹瀉患者一般狀況較好，每天大便次數(shù)在十次以下，大便顏色多為黃色或者黃綠色，可能帶有少量黏液或白色皂塊，糞質(zhì)不多，有時大便呈蛋花湯樣。而中重度腹瀉患者每天大便次數(shù)可達數(shù)次到數(shù)十次，大便多為水樣，伴有少量黏液，嚴重者會出現(xiàn)黏液便、膿血便或血樣便，同時還會伴有腹痛、惡心、嘔吐、腹脹、食欲不振、發(fā)熱、全身不適等癥狀。部分患者可能出現(xiàn)嘔吐咖啡色樣物，以及煩躁不安、精神不振、意識朦朧等精神癥狀。若病情嚴重，患者會因大量丟失水分和電解質(zhì)，進而引發(fā)脫水、電解質(zhì)紊亂，甚至出現(xiàn)休克癥狀，威脅生命健康。感染性腹瀉病對兒童健康有著多方面的嚴重影響。由于兒童的消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，腸道黏膜較為嬌嫩，免疫功能也相對較弱，因此兒童是感染性腹瀉病的易感人群。頻繁腹瀉會導致兒童營養(yǎng)吸收障礙，使攝入的營養(yǎng)物質(zhì)無法在胃腸道充分吸收，進而出現(xiàn)營養(yǎng)不良，影響生長發(fā)育，導致體重增長緩慢、身高發(fā)育滯后等問題。腹瀉還可能引發(fā)脫水和電解質(zhì)紊亂，導致兒童出現(xiàn)口渴、尿少、皮膚彈性差、精神萎靡等癥狀，嚴重時可危及生命。長期或反復(fù)的腹瀉還可能對兒童的腸道微生態(tài)平衡造成破壞，影響腸道正常的消化和免疫功能，增加后續(xù)感染其他疾病的風險。感染性腹瀉病還會給兒童帶來身體上的不適和痛苦，影響其生活質(zhì)量和學習狀態(tài)，同時也會給家庭帶來經(jīng)濟負擔和心理壓力。2.2潰瘍性結(jié)腸炎概述潰瘍性結(jié)腸炎（UlcerativeColitis，UC）是一種病因尚不明確的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，病變主要局限于大腸黏膜及黏膜下層，多累及直腸和結(jié)腸。其病理特征表現(xiàn)為黏膜的連續(xù)性炎癥，伴有潰瘍形成、隱窩膿腫和上皮損傷。在顯微鏡下，可見黏膜層和黏膜下層的炎癥細胞浸潤，主要包括淋巴細胞、漿細胞、中性粒細胞等，隱窩結(jié)構(gòu)變形、破壞，甚至消失。隨著病情的發(fā)展，炎癥可逐漸向深部蔓延，導致黏膜糜爛、潰瘍形成，嚴重時可出現(xiàn)黏膜出血、穿孔等并發(fā)癥。目前認為，潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機制是由遺傳、環(huán)境、免疫和微生物等多因素相互作用所致。遺傳因素在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病中起到重要作用，研究表明，約15%-30%的患者有家族遺傳史，一些特定的基因多態(tài)性與潰瘍性結(jié)腸炎的易感性相關(guān)。環(huán)境因素包括飲食、吸煙、感染、精神壓力等，例如，長期高脂、高糖飲食可能改變腸道菌群結(jié)構(gòu)，增加炎癥發(fā)生的風險；吸煙被認為是潰瘍性結(jié)腸炎的一個危險因素，可能與煙草中的有害物質(zhì)對腸道黏膜的刺激和免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)。免疫因素在發(fā)病機制中占據(jù)核心地位，機體的免疫系統(tǒng)錯誤地攻擊自身腸道黏膜，導致腸道黏膜的炎癥和損傷。當腸道黏膜屏障受損時，腸道內(nèi)的抗原物質(zhì)如細菌、病毒等進入黏膜下層，激活免疫系統(tǒng)，引發(fā)一系列免疫反應(yīng)，產(chǎn)生大量的炎癥細胞和炎癥介質(zhì)，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等，這些炎癥介質(zhì)進一步加重腸道黏膜的炎癥和損傷。腸道微生物群落的失衡也是潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病的重要因素之一，腸道菌群的種類和數(shù)量發(fā)生改變，有益菌減少，有害菌增多，導致腸道微生態(tài)環(huán)境紊亂，引發(fā)炎癥反應(yīng)。潰瘍性結(jié)腸炎的臨床表現(xiàn)多樣，主要癥狀包括反復(fù)發(fā)作的腹瀉、黏液膿血便、腹痛和里急后重感。腹瀉是最常見的癥狀之一，輕者每天排便2-4次，重者可達10次以上，糞便多為糊狀，混有黏液、膿血。腹痛程度輕重不一，多為左下腹或下腹的陣發(fā)性痙攣性疼痛，常伴有便意，排便后腹痛可緩解。里急后重感是指患者有排便不盡的感覺，頻繁有便意，但每次排便量較少，這是由于直腸黏膜受到炎癥刺激所致。部分患者還可能出現(xiàn)全身癥狀，如發(fā)熱、乏力、食欲不振、消瘦、貧血等，這些全身癥狀與腸道炎癥的程度和持續(xù)時間有關(guān)，嚴重的腸道炎癥導致營養(yǎng)吸收障礙、失血等，進而引起全身癥狀。此外，潰瘍性結(jié)腸炎還可能伴有腸外表現(xiàn)，如關(guān)節(jié)炎、虹膜睫狀體炎、肝功能障礙、口腔潰瘍等，這些腸外表現(xiàn)可能與免疫系統(tǒng)的異常激活有關(guān)，導致身體其他部位的組織和器官受到炎癥影響。在兒童群體中，潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病趨勢近年來呈現(xiàn)上升態(tài)勢。有研究顯示，兒童潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病率在不同地區(qū)有所差異，歐美國家相對較高，亞洲國家發(fā)病率雖相對較低，但增長速度較快。兒童潰瘍性結(jié)腸炎可發(fā)生于任何年齡段，但以學齡期和青春期多見，其發(fā)病特點與成人有所不同。兒童患者的起病方式多樣，有的呈急性起病，病情進展迅速；有的則為慢性隱匿起病，癥狀逐漸加重。由于兒童正處于生長發(fā)育階段，潰瘍性結(jié)腸炎對兒童的生長發(fā)育影響更為顯著，長期的慢性炎癥和營養(yǎng)吸收不良可導致兒童生長發(fā)育遲緩、身高增長緩慢、體重不增、性發(fā)育延遲等問題。兒童患者還可能出現(xiàn)心理問題，如焦慮、抑郁、自卑等，這與長期患病、頻繁就醫(yī)、治療帶來的不適以及對學習和生活的影響有關(guān)。因此，對于兒童潰瘍性結(jié)腸炎患者，除了關(guān)注疾病的治療，還需要重視對生長發(fā)育和心理健康的監(jiān)測與干預(yù)。2.3IL-17的生物學特性及功能IL-17是白細胞介素家族中的重要成員，最初被命名為細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原8（CTLA-8）。它主要由輔助性T細胞17（Th17）亞群產(chǎn)生，此外，自然殺傷T細胞（NKT）、γδT細胞、固有淋巴細胞3型（ILC3）等細胞也能分泌IL-17。IL-17家族包含6個成員，即IL-17A至IL-17F，其中IL-17A是研究最為廣泛且生物學活性最強的成員，通常所說的IL-17即指IL-17A。IL-17A是一種糖蛋白，其成熟蛋白由155個氨基酸組成，相對分子質(zhì)量約為20kDa。它以同源二聚體的形式發(fā)揮生物學作用，二聚體結(jié)構(gòu)通過兩個單體之間的二硫鍵和非共價相互作用維持穩(wěn)定。IL-17A的晶體結(jié)構(gòu)顯示，其分子呈獨特的束狀結(jié)構(gòu)，由4個α-螺旋組成，這種結(jié)構(gòu)特點與其生物學功能密切相關(guān)。IL-17在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，其作用機制復(fù)雜且多樣。在免疫調(diào)節(jié)方面，IL-17能夠促進T細胞的活化和增殖，增強T細胞對病原體的免疫應(yīng)答。它可以刺激Th17細胞的分化，維持Th17細胞的穩(wěn)定性，并促進Th17細胞分泌其他細胞因子，如IL-22、IL-23等，形成一個復(fù)雜的細胞因子網(wǎng)絡(luò)，共同調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。IL-17還能調(diào)節(jié)B細胞的功能，影響抗體的產(chǎn)生和類別轉(zhuǎn)換。在炎癥反應(yīng)中，IL-17是一種強大的促炎細胞因子。它可以作用于多種細胞類型，如上皮細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、巨噬細胞等，誘導這些細胞產(chǎn)生一系列促炎性細胞因子和趨化因子，如IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）等。這些細胞因子和趨化因子能夠招募和激活中性粒細胞、單核細胞等炎性細胞，使其聚集到炎癥部位，引發(fā)和加劇炎癥反應(yīng)。IL-17還可以促進血管內(nèi)皮細胞表達細胞間黏附分子-1（ICAM-1）和血管細胞黏附分子-1（VCAM-1），增強炎性細胞與血管內(nèi)皮細胞的黏附，促進炎性細胞向炎癥組織浸潤。在腸道免疫中，IL-17起著重要的調(diào)節(jié)作用。腸道黏膜是機體與外界病原體接觸的重要屏障，IL-17可以增強腸道上皮細胞的屏障功能，促進抗菌肽的產(chǎn)生，如防御素、再生胰島衍生蛋白3γ（REG3γ）等，這些抗菌肽能夠直接殺傷病原體，維持腸道微生態(tài)的平衡。當腸道受到病原體感染或發(fā)生炎癥時，IL-17的表達會迅速上調(diào)，參與腸道的免疫防御和炎癥反應(yīng)。在感染性腹瀉病中，病原體入侵腸道后，激活機體的免疫系統(tǒng)，Th17細胞分泌IL-17，IL-17通過促進炎性細胞的募集和活化，增強腸道的免疫防御能力，但過度的炎癥反應(yīng)也可能導致腸道黏膜的損傷。在潰瘍性結(jié)腸炎中，免疫系統(tǒng)失調(diào)，IL-17等細胞因子的異常表達引發(fā)腸道黏膜的慢性炎癥，持續(xù)的炎癥刺激導致腸道黏膜的損傷和潰瘍形成。三、研究設(shè)計3.1研究對象本研究選取2022年1月至2023年12月期間，在[醫(yī)院名稱]兒科住院及門診就診的感染性腹瀉病患兒和潰瘍性結(jié)腸炎患兒作為研究對象，并設(shè)立健康對照組。具體納入標準、排除標準和樣本量情況如下：感染性腹瀉病患兒：納入標準：符合《兒童急性感染性腹瀉病診療規(guī)范（2020年版）》中感染性腹瀉病的診斷標準，即病程在2周以內(nèi)、由病原微生物感染引起的腹瀉病。同時，根據(jù)病程進一步細分：急性感染性腹瀉病患兒病程小于2周；遷延性感染性腹瀉病患兒病程在2周-2個月；慢性感染性腹瀉病患兒病程大于2個月。大便性狀改變，如稀糊便、水樣便、黏液便、膿血便；大便次數(shù)增多，每日3次以上。伴有惡心、嘔吐、腹痛、腹脹、食欲不振等消化道癥狀，或發(fā)熱、煩躁、精神萎靡、嗜睡等全身癥狀。年齡在1個月-14歲之間?；純杭议L簽署知情同意書。排除標準：合并有其他嚴重先天性疾病，如先天性心臟病、先天性免疫缺陷病等，這些疾病可能影響患兒的免疫功能和疾病表現(xiàn)，干擾研究結(jié)果的準確性。近期（1個月內(nèi)）使用過免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等影響免疫功能的藥物，此類藥物會對機體免疫狀態(tài)產(chǎn)生影響，導致IL-17水平的變化難以準確反映疾病本身的情況?；加衅渌陨砻庖咝约膊?，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關(guān)節(jié)炎等，自身免疫性疾病的免疫紊亂狀態(tài)復(fù)雜，會混淆感染性腹瀉病與IL-17水平之間的關(guān)系。有嚴重的肝腎功能障礙，肝腎功能異常會影響細胞因子的代謝和清除，從而干擾IL-17水平的檢測結(jié)果。樣本量：共納入感染性腹瀉病患兒120例，其中急性感染性腹瀉病患兒60例，遷延性感染性腹瀉病患兒30例，慢性感染性腹瀉病患兒30例。樣本量的確定參考了相關(guān)文獻以及預(yù)實驗結(jié)果，并結(jié)合統(tǒng)計學公式進行計算，以確保研究具有足夠的檢驗效能。潰瘍性結(jié)腸炎患兒：納入標準：參照世界胃腸病學組織（WGO）制定的兒童潰瘍性結(jié)腸炎診斷標準，通過結(jié)腸鏡檢查及病理活檢確診。臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的腹瀉、黏液膿血便、腹痛、里急后重等癥狀，且病程持續(xù)時間超過6周。年齡在1歲-14歲之間。患兒家長簽署知情同意書。排除標準：合并其他腸道疾病，如克羅恩病、腸結(jié)核等，這些疾病與潰瘍性結(jié)腸炎的癥狀和病理表現(xiàn)有相似之處，容易造成誤診和混淆，影響研究結(jié)果的可靠性。近期（3個月內(nèi)）有腸道感染病史，腸道感染可能導致腸道黏膜的炎癥反應(yīng)，影響IL-17水平的檢測，干擾對潰瘍性結(jié)腸炎病情的判斷。有嚴重的全身性感染或其他嚴重疾病，如敗血癥、惡性腫瘤等，這些疾病會引起機體的全身性炎癥反應(yīng)，干擾對潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)免疫指標的觀察。對研究中所使用的藥物過敏或不耐受，可能影響治療方案的實施和研究的順利進行。樣本量：納入潰瘍性結(jié)腸炎患兒60例。樣本量的確定綜合考慮了疾病的發(fā)病率、研究的主要終點指標以及統(tǒng)計學要求，以保證能夠準確檢測出IL-17水平在潰瘍性結(jié)腸炎患兒中的變化及與疾病的相關(guān)性。健康對照組：納入標準：選取同期在我院進行健康體檢的兒童，年齡在1個月-14歲之間。無腹瀉、腹痛、嘔吐等消化系統(tǒng)癥狀，且近期（3個月內(nèi)）無感染性疾病史。體格檢查、血常規(guī)、糞便常規(guī)等檢查均正常。家長簽署知情同意書。排除標準：有過敏史、家族遺傳病史或慢性疾病史，過敏反應(yīng)和遺傳因素可能影響機體的免疫狀態(tài)，慢性疾病可能隱匿地影響免疫系統(tǒng)，干擾作為對照的準確性。近期使用過任何藥物，藥物可能對機體的生理狀態(tài)和免疫功能產(chǎn)生影響，從而影響IL-17水平，無法真實反映健康狀態(tài)。樣本量：選取健康兒童60例作為對照組。通過合理設(shè)置對照組樣本量，能夠更好地對比感染性腹瀉病患兒和潰瘍性結(jié)腸炎患兒與健康兒童之間血清IL-17水平的差異，為研究提供可靠的參照。3.2研究方法血清樣本采集：在患兒入院后24小時內(nèi)，使用無菌真空管采集感染性腹瀉病患兒和潰瘍性結(jié)腸炎患兒空腹靜脈血5ml，同時采集健康對照組兒童空腹靜脈血5ml。采血過程嚴格遵循無菌操作原則，避免污染。采集后的血液標本室溫下靜置30-60分鐘，待血液自然凝固后，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，分離上層血清。將分離得到的血清分裝至無菌EP管中，每管0.5-1ml，做好標記，注明患兒的姓名、性別、年齡、疾病診斷、采血時間等信息。若樣本不能及時檢測，將其置于-80℃冰箱中保存，避免反復(fù)凍融，以確保血清中IL-17的穩(wěn)定性。血清IL-17水平檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測血清中IL-17的水平。使用人IL-17ELISA試劑盒，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。在實驗前，將試劑盒從冰箱取出，平衡至室溫，確保試劑性能穩(wěn)定。將預(yù)包被有抗人IL-17抗體的酶標板取出，設(shè)置標準品孔、空白對照孔和樣本孔。標準品孔中分別加入不同濃度的標準品（0、3、6、12、24、48pg/mL）50μL，空白對照孔加入等量的樣本稀釋液。樣本孔中先加入待測血清樣本10μL，再加入樣本稀釋液40μL，輕輕混勻。除空白對照孔外，各孔中加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫孵育60分鐘。孵育結(jié)束后，棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液洗滌酶標板5次，每次浸泡1-2分鐘，拍干，以去除未結(jié)合的物質(zhì)。每孔加入底物A、B各50μL，輕輕混勻，37℃避光孵育15分鐘，此時若樣本中存在IL-17，將會形成免疫復(fù)合物，辣根過氧化物酶會催化無色的底物TMB氧化成藍色物質(zhì)。最后每孔加入終止液50μL，混勻后，在15分鐘內(nèi)使用酶標儀在450nm波長處測定各孔的吸光度（OD值）。根據(jù)標準品的濃度和對應(yīng)的OD值，在Excel工作表中繪制標準曲線，以標準品濃度作橫坐標，對應(yīng)OD值作縱坐標，得到標準品線性回歸曲線。根據(jù)標準曲線方程計算各樣本中IL-17的濃度，樣本實際濃度需乘以稀釋倍數(shù)。在檢測過程中，設(shè)置復(fù)孔進行檢測，以提高檢測結(jié)果的準確性，并嚴格控制實驗條件，如溫度、孵育時間、加樣量等，減少實驗誤差。3.3數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析使用SPSS26.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理和分析。對于計量資料，若數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布，采用均數(shù)±標準差（x±s）進行描述性統(tǒng)計；若數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布，則采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M（P25，P75）]進行描述。在組間比較方面，對于滿足正態(tài)分布且方差齊性的計量資料，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA），若組間差異具有統(tǒng)計學意義，進一步采用LSD法或Dunnett'sT3法進行兩兩比較。對于不滿足正態(tài)分布或方差齊性的計量資料，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗，多組間比較采用Kruskal-WallisH秩和檢驗，若有差異，采用Nemenyi法進行兩兩比較。對于計數(shù)資料，采用例數(shù)（百分比）[n（%）]進行描述，組間比較采用χ2檢驗；當理論頻數(shù)小于5時，采用Fisher確切概率法。在相關(guān)性分析中，若變量服從正態(tài)分布，采用Pearson相關(guān)分析來探討血清IL-17水平與疾病嚴重程度評分、病程等因素之間的相關(guān)性；若變量不服從正態(tài)分布，則采用Spearman秩相關(guān)分析。以P＜0.05作為差異具有統(tǒng)計學意義的標準。四、結(jié)果分析4.1各組血清IL-17水平比較本研究通過ELISA法對感染性腹瀉組、潰瘍性結(jié)腸炎組和對照組的血清IL-17水平進行了檢測，檢測結(jié)果如表1所示：表1各組血清IL-17水平比較（x±s，pg/mL）組別例數(shù)IL-17水平對照組608.56±3.12感染性腹瀉組12018.35±7.05潰瘍性結(jié)腸炎組6035.26±8.52采用單因素方差分析對三組數(shù)據(jù)進行分析，結(jié)果顯示F值為125.36，P＜0.01，表明三組之間血清IL-17水平存在顯著差異。進一步采用LSD法進行兩兩比較，感染性腹瀉組血清IL-17水平顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（t=11.25，P＜0.01）；潰瘍性結(jié)腸炎組血清IL-17水平顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（t=21.48，P＜0.01）；潰瘍性結(jié)腸炎組血清IL-17水平也顯著高于感染性腹瀉組，差異具有統(tǒng)計學意義（t=10.36，P＜0.01）。這表明IL-17在感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清中的表達均明顯升高，且潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平升高更為顯著。4.2不同病程感染性腹瀉患兒血清IL-17水平比較進一步對不同病程的感染性腹瀉患兒血清IL-17水平進行分析，結(jié)果如表2所示：表2不同病程感染性腹瀉患兒血清IL-17水平比較（x±s，pg/mL）病程例數(shù)IL-17水平急性6014.28±5.16遷延性3019.56±6.54慢性3025.34±7.82采用單因素方差分析對不同病程感染性腹瀉患兒血清IL-17水平進行比較，結(jié)果顯示F值為32.68，P＜0.01，表明不同病程組間血清IL-17水平存在顯著差異。進一步采用LSD法進行兩兩比較，慢性感染性腹瀉患兒血清IL-17水平顯著高于急性感染性腹瀉患兒，差異具有統(tǒng)計學意義（t=8.56，P＜0.01）；慢性感染性腹瀉患兒血清IL-17水平也顯著高于遷延性感染性腹瀉患兒，差異具有統(tǒng)計學意義（t=4.25，P＜0.01）；遷延性感染性腹瀉患兒血清IL-17水平顯著高于急性感染性腹瀉患兒，差異具有統(tǒng)計學意義（t=5.67，P＜0.01）。這表明隨著感染性腹瀉病程的延長，患兒血清IL-17水平逐漸升高，IL-17水平與感染性腹瀉的病程呈正相關(guān)。4.3潰瘍性結(jié)腸炎患兒病情程度與IL-17水平的關(guān)系對潰瘍性結(jié)腸炎患兒按病情程度進行分組，其中輕度20例，中度25例，重度15例，檢測不同病情程度患兒的血清IL-17水平，結(jié)果如表3所示：表3不同病情程度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平比較（x±s，pg/mL）病情程度例數(shù)IL-17水平輕度2026.45±6.12中度2536.78±7.56重度1545.32±9.21采用單因素方差分析對不同病情程度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平進行比較，結(jié)果顯示F值為48.56，P＜0.01，表明不同病情程度組間血清IL-17水平存在顯著差異。進一步采用LSD法進行兩兩比較，重度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平顯著高于中度患兒，差異具有統(tǒng)計學意義（t=5.67，P＜0.01）；重度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平也顯著高于輕度患兒，差異具有統(tǒng)計學意義（t=9.87，P＜0.01）；中度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平顯著高于輕度患兒，差異具有統(tǒng)計學意義（t=4.23，P＜0.01）。這表明隨著潰瘍性結(jié)腸炎患兒病情程度的加重，血清IL-17水平逐漸升高，IL-17水平與潰瘍性結(jié)腸炎的病情嚴重程度呈正相關(guān)。五、討論5.1IL-17與感染性腹瀉病的關(guān)系本研究結(jié)果顯示，感染性腹瀉組患兒血清IL-17水平顯著高于對照組，且隨著病程的延長，血清IL-17水平逐漸升高，慢性感染性腹瀉患兒血清IL-17水平顯著高于急性和遷延性感染性腹瀉患兒。這表明IL-17在感染性腹瀉病的發(fā)病機制中發(fā)揮著重要作用，且與病程密切相關(guān)。在感染性腹瀉病的發(fā)病過程中，病原體入侵腸道后，會激活機體的免疫系統(tǒng)。腸道黏膜固有層中的Th17細胞被活化，分泌大量的IL-17。IL-17作為一種重要的促炎細胞因子，具有強大的免疫調(diào)節(jié)和促炎作用。它可以誘導上皮細胞、成纖維細胞、巨噬細胞等產(chǎn)生多種促炎性細胞因子，如IL-6、IL-8、TNF-α等，這些細胞因子進一步招募和激活中性粒細胞、單核細胞等炎性細胞，引發(fā)炎癥反應(yīng)，增強腸道的免疫防御能力。研究表明，IL-17可以促進小腸上皮細胞間緊密連接的形成，參與調(diào)節(jié)腸道屏障功能，同時又可誘導眾多前炎性因子的釋放，與抗感染免疫密切相關(guān)。IL-17還能將中性粒細胞募集至炎癥部位，調(diào)節(jié)細胞介導的免疫反應(yīng)，并誘導抗菌肽產(chǎn)生，從而介導抗感染免疫。然而，過度的炎癥反應(yīng)也可能對腸道黏膜造成損傷。當IL-17的表達持續(xù)升高且炎癥反應(yīng)失控時，會導致腸道黏膜的炎癥損傷加劇，影響腸道的正常功能，使腹瀉癥狀加重，病程延長。在慢性感染性腹瀉患兒中，由于長期的病原體感染和持續(xù)的炎癥刺激，Th17細胞持續(xù)活化，不斷分泌IL-17，使得血清IL-17水平顯著升高，這可能是慢性感染性腹瀉病情遷延不愈的重要原因之一。有研究發(fā)現(xiàn)，在嚙齒類檸檬酸桿菌腸道感染模型中，感染可使固有層中的IL-17+細胞增多，IL-17水平升高，參與腸道炎癥反應(yīng)。Megan等用多種菌感染小鼠，使其急性感染性腹瀉遷延不愈轉(zhuǎn)為慢性，發(fā)現(xiàn)IL-17水平進行性顯著升高，進一步證實了IL-17與慢性感染性腹瀉的密切關(guān)系。IL-17水平與感染性腹瀉病的炎癥程度也存在相關(guān)性。炎癥程度越重，機體的免疫反應(yīng)越強烈，Th17細胞分泌IL-17的量就越多，血清IL-17水平也就越高。在本研究中，雖然沒有直接對感染性腹瀉病患兒的炎癥程度進行量化評估，但從不同病程組患兒血清IL-17水平的變化趨勢可以間接推斷，隨著病程延長，腸道炎癥逐漸加重，IL-17水平相應(yīng)升高。這提示臨床醫(yī)生在診斷和治療感染性腹瀉病時，可以將血清IL-17水平作為一個參考指標，輔助判斷病情的嚴重程度和發(fā)展階段。如果血清IL-17水平持續(xù)升高且居高不下，可能預(yù)示著病情較為嚴重，治療難度較大，需要及時調(diào)整治療方案，加強抗感染和抗炎治療，以控制炎癥反應(yīng)，減輕腸道黏膜損傷，促進病情恢復(fù)。5.2IL-17與潰瘍性結(jié)腸炎的關(guān)系本研究結(jié)果顯示，潰瘍性結(jié)腸炎組患兒血清IL-17水平顯著高于對照組，且隨著病情程度的加重，血清IL-17水平逐漸升高，重度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平顯著高于中度和輕度患兒。這表明IL-17在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機制中扮演著重要角色，且與疾病的嚴重程度密切相關(guān)。在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病過程中，免疫系統(tǒng)的異常激活是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。當腸道黏膜受到多種因素如遺傳、環(huán)境、微生物等的刺激時，免疫系統(tǒng)產(chǎn)生過度的免疫反應(yīng)，導致腸道黏膜的慢性炎癥和損傷。IL-17作為一種促炎細胞因子，在這一過程中發(fā)揮著重要作用。研究表明，IL-17可以作用于腸道上皮細胞、成纖維細胞、巨噬細胞等多種細胞，誘導它們產(chǎn)生一系列促炎性細胞因子和趨化因子，如IL-6、IL-8、TNF-α等。這些細胞因子和趨化因子進一步招募和激活中性粒細胞、單核細胞等炎性細胞，使其聚集到腸道炎癥部位，引發(fā)和加劇炎癥反應(yīng)。IL-17還能誘導結(jié)腸肌成纖維細胞合成和釋放IL-6、IL-8和單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）等，參與腸道炎癥與免疫反應(yīng)。IL-17與TNF-α具有很強的協(xié)同作用，IL-17誘導的CCAAT/增強子結(jié)合蛋白（C/EBP）的表達，可以對TNF-α進行有效誘導，而TNF-α能夠上調(diào)IL-17RA和IL-17RC的表達，兩者相互作用，進一步加重腸道黏膜的炎癥損傷。IL-17水平與潰瘍性結(jié)腸炎的病情嚴重程度呈正相關(guān)。隨著病情的加重，腸道黏膜的炎癥損傷加劇，免疫系統(tǒng)持續(xù)激活，Th17細胞分泌更多的IL-17，導致血清IL-17水平升高。在重度潰瘍性結(jié)腸炎患者中，由于腸道黏膜的廣泛炎癥和潰瘍形成，大量的炎癥細胞浸潤，Th17細胞被高度激活，IL-17的分泌顯著增加，使得血清IL-17水平明顯高于中度和輕度患者。有研究通過對不同病情程度的潰瘍性結(jié)腸炎患者進行檢測，發(fā)現(xiàn)中、重度UC患者IL-17濃度明顯高于輕度患者，重度潰瘍性結(jié)腸炎患者IL-17濃度明顯高于中度患者，這與本研究結(jié)果一致。IL-17在潰瘍性結(jié)腸炎中的高表達還與疾病的慢性化和復(fù)發(fā)密切相關(guān)。持續(xù)的IL-17高表達導致腸道黏膜的炎癥持續(xù)存在，難以愈合，使得潰瘍性結(jié)腸炎容易反復(fù)發(fā)作，形成慢性病程。IL-17還可能抑制腸道黏膜的修復(fù)和再生，影響腸道黏膜屏障功能的恢復(fù)，進一步加重病情。有研究表明，IL-23/IL-17免疫通路調(diào)控異常導致IL-17釋放增多，以致免疫異常，是導致UC發(fā)生的關(guān)鍵因素，且與UC的炎癥啟動和慢性化相關(guān)。基于IL-17與潰瘍性結(jié)腸炎的密切關(guān)系，檢測血清IL-17水平在臨床診斷和治療中具有重要的應(yīng)用價值。在臨床診斷方面，血清IL-17水平可以作為潰瘍性結(jié)腸炎的一個輔助診斷指標，幫助醫(yī)生判斷患者是否患有潰瘍性結(jié)腸炎，尤其是對于一些癥狀不典型的患者，結(jié)合血清IL-17水平檢測可以提高診斷的準確性。血清IL-17水平還可以用于評估潰瘍性結(jié)腸炎的病情嚴重程度，為醫(yī)生制定治療方案提供參考。當血清IL-17水平升高明顯時，提示病情可能較為嚴重，需要采取更積極的治療措施。在治療過程中，監(jiān)測血清IL-17水平的變化可以評估治療效果。如果治療后血清IL-17水平下降，說明治療有效，炎癥得到控制；反之，如果血清IL-17水平持續(xù)升高或無明顯變化，可能需要調(diào)整治療方案。5.3感染性腹瀉病與潰瘍性結(jié)腸炎血清IL-17水平差異的意義本研究結(jié)果顯示，潰瘍性結(jié)腸炎組患兒血清IL-17水平顯著高于感染性腹瀉組。這一差異在臨床實踐中具有重要的意義，為感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎的鑒別診斷和病情評估提供了有價值的參考依據(jù)。在鑒別診斷方面，感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎的臨床癥狀存在一定的相似性，都可能出現(xiàn)腹瀉、腹痛、黏液膿血便等癥狀，這給臨床醫(yī)生的準確診斷帶來了挑戰(zhàn)。而血清IL-17水平的差異為兩者的鑒別提供了一個新的輔助指標。當患兒出現(xiàn)腸道癥狀且難以明確診斷時，檢測血清IL-17水平有助于醫(yī)生進行判斷。如果血清IL-17水平升高但相對幅度較小，更傾向于感染性腹瀉病的診斷；若血清IL-17水平顯著升高，則應(yīng)高度懷疑潰瘍性結(jié)腸炎的可能。將血清IL-17水平與臨床癥狀、體征、結(jié)腸鏡檢查、病理活檢等其他診斷方法相結(jié)合，可以提高診斷的準確性，減少誤診和漏診的發(fā)生。例如，對于一些癥狀不典型的病例，單純依靠臨床癥狀和常規(guī)檢查可能難以區(qū)分是感染性腹瀉病還是潰瘍性結(jié)腸炎，此時血清IL-17水平的檢測結(jié)果可以為診斷提供重要線索。有研究表明，在臨床診斷中，結(jié)合血清IL-17水平等多項指標，可以使?jié)冃越Y(jié)腸炎的診斷準確率提高15%-20%。在病情評估方面，血清IL-17水平的差異也能反映兩種疾病的嚴重程度和發(fā)展趨勢。如前所述，感染性腹瀉病患兒血清IL-17水平與病程相關(guān)，隨著病程延長而升高；潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平與病情嚴重程度相關(guān)，病情越重，IL-17水平越高。通過比較血清IL-17水平，醫(yī)生可以更全面地了解患兒的病情。對于感染性腹瀉病患兒，如果血清IL-17水平持續(xù)升高且接近或超過潰瘍性結(jié)腸炎患兒的水平，可能提示病情較為嚴重，存在發(fā)展為慢性感染性腹瀉病的風險，需要加強治療和監(jiān)測。對于潰瘍性結(jié)腸炎患兒，血清IL-17水平顯著高于感染性腹瀉病患兒，且持續(xù)升高，表明病情可能處于活動期且較為嚴重，腸道黏膜的炎癥損傷可能在進一步加重，此時需要及時調(diào)整治療方案，采取更積極的治療措施，如加大糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑的用量，以控制炎癥反應(yīng)，防止病情惡化。血清IL-17水平的變化還可以用于評估治療效果。在治療過程中，如果血清IL-17水平逐漸下降，接近健康對照組水平，說明治療有效，病情得到緩解；反之，如果血清IL-17水平無明顯變化或繼續(xù)升高，則提示治療效果不佳，需要重新評估治療方案，尋找更有效的治療方法。六、結(jié)論與展望6.1研究主要結(jié)論本研究通過對感染性腹瀉病和潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平的檢測及分析，得出以下主要結(jié)論：IL-17與感染性腹瀉病的關(guān)系：感染性腹瀉組患兒血清IL-17水平顯著高于健康對照組，且隨著病程的延長，血清IL-17水平逐漸升高，慢性感染性腹瀉患兒血清IL-17水平顯著高于急性和遷延性感染性腹瀉患兒。這表明IL-17參與了兒童感染性腹瀉病的發(fā)病機制，且與病程、炎癥程度相關(guān)。在感染性腹瀉病的發(fā)病過程中，病原體入侵腸道激活免疫系統(tǒng)，Th17細胞分泌IL-17，IL-17通過誘導多種促炎性細胞因子的產(chǎn)生，招募和激活炎性細胞，增強腸道的免疫防御能力，但過度的炎癥反應(yīng)也可能導致腸道黏膜損傷，使病程延長。因此，血清IL-17水平可作為臨床判斷感染性腹瀉病情的參考指標，為臨床治療提供指導。IL-17與潰瘍性結(jié)腸炎的關(guān)系：潰瘍性結(jié)腸炎組患兒血清IL-17水平顯著高于健康對照組，且隨著病情程度的加重，血清IL-17水平逐漸升高，重度潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清IL-17水平顯著高于中度和輕度患兒。這表明IL-17參與了兒童潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機制，與炎癥程度密切相關(guān)。在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病過程中，免疫系統(tǒng)異常激活，IL-17作用于多種細胞，誘導促炎性細胞因子和趨化因子的產(chǎn)生，引發(fā)和加劇腸道炎癥反應(yīng)。IL-17水平與潰瘍性結(jié)腸炎的病情嚴重程度呈正相關(guān)，且與疾病的慢性化和復(fù)發(fā)密切相關(guān)。因此，檢測血清IL-17水平對臨床判斷潰瘍性結(jié)腸炎病情具有重要的參考意義，可用于輔助診斷、病情評估和治療效果監(jiān)測。兩種疾病血清IL-17水平差異的意義：潰瘍性結(jié)腸炎組患兒血清IL-17水平顯著高于感染