A23GA23C(71)申請人成都橋然生物科技有限公司A23C地址610000四川省成都市新都區(qū)新都街道興樂北路88號3棟5層17號(72)發(fā)明人王大洪(74)專利代理機構(gòu)四川德韜專利代理事務(wù)所(普通合伙)51386專利代理師嬴雨徑A23L33/185(2016.01)A23L33/10(2016.01)A23P10/30(2016.01)A23G3/36(2006.01)權(quán)(54)發(fā)明名稱健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物、制備方法及其用途本發(fā)明屬于食品技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物、制備方法及其用途，包組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及1000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。本發(fā)明組合蛋白通過不同吸收速度互補供能，酸性乳糖酶和復(fù)合蛋白酶針對性分解乳糖與酪蛋白，減少未消化底物在腸道發(fā)21.一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，其特征在于：包括組合蛋白物、組合酶制劑以及酶保護組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及1000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，其特征在于：所述酶保護劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的2-15g/100g的低聚半乳糖以及0.2-3.0g/100g的酪蛋白磷酸肽。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，其特征在于：所述組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的1500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及3000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，其特征在于：所述酶保護劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的7-12g/100g的低聚半乳糖以及0.4-1.2g/100g的酪蛋白磷酸肽。5.根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，其特征在于：所述酶保護劑還包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的15-20g/100g的麥芽糊精、0.6-1.0mg/100g的葡萄糖酸鋅以及0.04-0.08g/100g的抗壞血酸棕櫚酸酯。6.一種制備方法，其特征在于：用于制作上述權(quán)利要求5中的健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，具體如下：按比例稱量組合蛋白物質(zhì)、組合酶制劑以及酶保護劑，將組合酶制劑先與酶保護劑中的低聚半乳糖預(yù)混形成酶預(yù)混物，然后將組合蛋白物質(zhì)與麥芽糊精預(yù)混形成蛋白載體預(yù)混將預(yù)混好的酶預(yù)混物加入酪蛋白磷酸肽溶液中攪拌混合后形成酶混合制劑，以海藻酸鈉溶液將的酶混合制劑乳化包裹，再緩慢滴入氯化鈣溶液中交聯(lián)形成微膠囊，清洗微膠囊表面多余的氯化鈣后干燥處理；再將微膠囊與蛋白載體預(yù)混物加入阿拉伯膠溶液中均質(zhì)分散，最后高壓噴霧干燥形成雙層包裹的營養(yǎng)組合物。7.一種用途，其特征在于：將權(quán)利要求5中的健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物應(yīng)用在食品中。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種用途，其特征在于：所述食品為糖果、飲料、乳制品、焙烤食品、膳食補充劑或特殊膳食用食品。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種用途，其特征在于：所述食品為奶粉。10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種用途，其特征在于：所述食品為乳制品。3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明屬于食品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物、制備方法及其用途。背景技術(shù)[0002]現(xiàn)有的食品中，奶制品作為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)與鈣的重要來源，在人群營養(yǎng)攝入中占據(jù)關(guān)鍵地位，但其消化吸收問題卻困擾著部分人群，尤其是嬰幼兒、兒童及胃功能較弱的個[0003]具有高含量蛋白質(zhì)的食品在消化時可能會因為個體差異而產(chǎn)生難以消化的問題，部分人群在攝入奶制品(如奶粉、牛奶、含乳飲料等)后，易出現(xiàn)胃部脹氣、吐奶(或返奶)等不適癥狀，嚴(yán)重時可能影響營養(yǎng)吸收與生長發(fā)育。從消化機制來看，此類問題與胃部消化酶的活性及分泌不足密切相關(guān)。奶制品中的主要蛋白質(zhì)成分為酪蛋白，其在胃內(nèi)的消化需依賴胃蛋白酶的作用——胃蛋白酶由胃黏膜主細(xì)胞分泌的胃蛋白酶原經(jīng)胃酸激活而來，負(fù)責(zé)將酪蛋白切割為較小的多肽片段，以便后續(xù)在小腸內(nèi)進一步分解。然而，兒童的胃蛋白酶活性僅為成人的10%-30%,且胃酸分泌量少、pH值較高(約4-5,成人胃酸pH為1-2),導(dǎo)致酪蛋白難以充分分解，易在胃內(nèi)形成較大凝乳塊，延緩胃排空速度。凝乳塊滯留胃內(nèi)不僅占據(jù)胃容積，還會刺激胃壁引發(fā)飽脹感，若胃內(nèi)容物過多或胃動力不足，可能導(dǎo)致奶液反流至食道，出現(xiàn)吐奶現(xiàn)象。[0004]此外，雖然乳糖的消化主要依賴小腸黏膜的乳糖酶，但若胃排空異常(如過快或過慢),可能間接影響腸道對乳糖的處理效率，未消化的乳糖進入結(jié)腸后被細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)氣，雖主要表現(xiàn)為腸道脹氣，但腸胃功能協(xié)同紊亂時，會加重胃部不適的主觀感受。對于成人或年長兒童，若因疾病、藥物或生理因素導(dǎo)致胃蛋白酶分泌減少(如萎縮性胃炎患者),同樣會出現(xiàn)奶制品消化不徹底的問題，引發(fā)胃部脹氣等癥狀。總體而言，胃蛋白酶的活性不足與分泌缺陷是導(dǎo)致奶制品在胃部消化受阻、進而引發(fā)脹氣吐奶的核心酶學(xué)因素，其涉及胃酸環(huán)境、酶促反應(yīng)效率及胃動力等多方面的協(xié)同作用，而兒童因消化系統(tǒng)發(fā)育不完善，此類問題尤為突出。發(fā)明內(nèi)容[0005]為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物、制備方法及其用途，通過酶保護劑將酶包裹后與組合蛋白物形成穩(wěn)定的營養(yǎng)組合物，不僅能夠避免單獨服用需要確定劑量配比，還能夠保證含有酶的蛋白組合物穩(wěn)定且具有較長的保存時[0006]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：第一方面，本發(fā)明提供一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，包括組合蛋白物、組合酶制劑組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及1000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。4[0007]結(jié)合第一方面，本發(fā)明提供第一方面的第一種實施方式，所述酶保護劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的2-15g/100g的低聚半乳糖以及0.2-3.0g/100g的酪蛋白磷酸肽。[0008]結(jié)合第一方面，本發(fā)明提供第一方面的第二種實施方式，所述組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的1500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及3000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。[0009]結(jié)合第一方面的第一種實施方式，本發(fā)明提供第一方面的第三種實施方式，所述酶保護劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的7-12g/100g的低聚半乳糖以及0.4-1.2g/100g的酪蛋白磷酸肽。[0010]結(jié)合第一方面的第一種或第三種實施方式，本發(fā)明提供第一方面的第四種實施方式，所述酶保護劑還包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的15-20g/100g的麥芽糊精、0.6-1.0mg/100g的葡萄糖酸鋅以及0.04-0.08g/100g的抗壞血酸棕櫚酸酯。[0011]第二方面，本發(fā)明還提供一種制備方法，用于制作上述中的健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合按比例稱量組合蛋白物質(zhì)、組合酶制劑以及酶保護劑，將組合酶制劑先與酶保護劑中的低聚半乳糖預(yù)混形成酶預(yù)混物，然后將組合蛋白物質(zhì)與麥芽糊精預(yù)混形成蛋白載體將預(yù)混好的酶預(yù)混物加入酪蛋白磷酸肽溶液中攪拌混合后形成酶混合制劑，以海藻酸鈉溶液將的酶混合制劑乳化包裹，再緩慢滴入氯化鈣溶液中交聯(lián)形成微膠囊，清洗微膠囊表面多余的氯化鈣后干燥處理；再將微膠囊與蛋白載體預(yù)混物加入阿拉伯膠溶液中均質(zhì)分散，最后高壓噴霧干燥形成雙層包裹的營養(yǎng)組合物。[0012]第三方面，本發(fā)明還提供一種用途，將上述中的健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物應(yīng)用在食[0013]結(jié)合第三方面，本發(fā)明提供第三方面的第一種實施方式，所述食品為糖果、飲料、[0014]結(jié)合第三方面，本發(fā)明提供第三方面的第二種[0015]結(jié)合第三方面，本發(fā)明提供第三方面的第三種實[0016]值得說明的是，本發(fā)明中所指的健脾養(yǎng)胃并不限定僅作用于脾胃，而是包括消化蛋白質(zhì)的整個消化道，所要解決的是針對蛋白質(zhì)營養(yǎng)物消化不良脹氣的問題，其中的蛋白酶主要存在于胃，而乳糖主要分解場所在小腸，但整個消化道是一個完整消化物質(zhì)的場所，前部和后部都處于協(xié)同消化的作用，所以主要針對于腸胃，通過改善蛋白質(zhì)的消化避免脹氣郁結(jié)從而達到健脾養(yǎng)胃的效果。[0017]本發(fā)明的有益效果為：1、本發(fā)明相較于傳統(tǒng)乳糖酶在奶粉中穩(wěn)定性差的問題，選用耐酸性乳糖酶，其三維結(jié)構(gòu)含更多二硫鍵，耐60℃噴霧干燥溫度，且在胃內(nèi)酸性環(huán)境中活性保留率大于70%,結(jié)合蛋白質(zhì)組合物，能夠提高蛋白質(zhì)的消化效率，降低胃脹氣的問題；2、本發(fā)明采用胃雙階段蛋白酶組合，胃蛋白酶在胃內(nèi)(pH2-3)將酪蛋白切割為大肽段(分子量降至10-20kDa),降低胃排空阻力；5絕氧氣和水分，使酶在40℃、相對濕度75%環(huán)境下儲存6個月活性保留率>80%,未包埋組僅4、本發(fā)明組合蛋白通過不同吸收速度互補供能，酸性乳糖酶和復(fù)合蛋白酶針對性分解乳糖與酪蛋白，減少未消化底物在腸道發(fā)酵產(chǎn)氣；而CPP、抗壞血酸棕櫚酸酯穩(wěn)定酶與蛋白結(jié)構(gòu)，麥芽糊精提供保護載體，配合微膠囊包埋技術(shù)，確保產(chǎn)品在儲存和沖調(diào)過程中活性。具體實施方式[0018]下面具體實施例對本發(fā)明做進一步闡釋。本實施例公開一種健脾養(yǎng)胃的營養(yǎng)組合物，包括組合蛋白物、組合酶制劑以及酶組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及1000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。[0020]其中，酶保護劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的2-15g/100g的低聚半乳糖以及0.2-3.0g/100g的酪蛋白磷酸肽。[0021]酶保護劑還包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的15-20g/100g的麥芽糊精、0.6-1.0mg/100g的葡萄糖酸鋅以及0.04-0.08g/100g的抗壞血酸棕櫚酸酯。[0022]作為一種實施方式的是，組合酶制劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的1500-3000PU/100g的胃蛋白酶以及3000-5000ALU/100g的酸性乳糖酶。[0023]作為一種實施方式的是，酶保護劑包括以組合蛋白物質(zhì)量計量的7-12g/100g的低聚半乳糖以及0.4-1.2g/100g的酪蛋白磷酸肽。[0024]本實施例還提供一種制備方法，用于制備上述營養(yǎng)組合物，具體如下：按比例稱量組合蛋白物質(zhì)、組合酶制劑以及酶保護劑，將組合酶制劑先與酶保護劑中的低聚半乳糖預(yù)混形成酶預(yù)混物，然后將組合蛋白物質(zhì)與麥芽糊精預(yù)混形成蛋白載體預(yù)混物；將預(yù)混好的酶預(yù)混物加入酪蛋白磷酸肽溶液中攪拌混合后形成酶混合制劑，以海藻酸鈉溶液將的酶混合制劑乳化包裹，再緩慢滴入氯化鈣溶液中交聯(lián)形成微膠囊，清洗微膠囊表面多余的氯化鈣后干燥處理；再將微膠囊與蛋白載體預(yù)混物加入阿拉伯膠溶液中均質(zhì)分散，最后高壓噴霧干燥形成雙層包裹的營養(yǎng)組合物。[0025]進一步地，將該實施例中的營養(yǎng)組合物優(yōu)化限定后應(yīng)用在食品中，尤其是一種高蛋白質(zhì)食品中，通過選定具體的組合蛋白物質(zhì)從而適用于不同食品種類。[0026]作為一種應(yīng)用方向的是，該營養(yǎng)物質(zhì)針對于兒童蛋白質(zhì)食品中，常見于奶制品零食中，包括固體和液體兩種類型，按照與組合蛋白物的質(zhì)量比例添加兩種包合的酶，從而達到幫助消化的效果。[0027]具體的，一種功能性兒童奶糖，以100g奶糖計算，包括作為基礎(chǔ)的復(fù)合蛋白物的全脂乳粉40g、水解乳清蛋白8g和豌豆蛋白7g,然后包括功能成分的麥芽糖漿和海藻糖的包裹物35g,功能成分酸性乳糖酶2000ALU以及復(fù)合蛋白酶1000PU,其他成分包括低聚半乳糖5g,6明膠和卡拉膠3g,以及天然水果味香精0.5g。先將微膠囊化酶制劑與乳粉、GOS在50℃以下預(yù)混，再與通過120℃熬煮至水分≤5%并冷卻至70℃的糖膠混合；壓膜成型后進行低溫干燥，使得奶糖水分控制在8%-10%,延緩酶活性衰減。[0029]作為一種應(yīng)用方向的是，該營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)用在乳制品飲料中，常見于各種調(diào)制乳飲料中，按照與組合蛋白物的質(zhì)量比例添加兩種包合的酶，也達到幫助消化的效果。[0030]具體的，以1L的調(diào)制乳飲料為標(biāo)準(zhǔn)，其包括復(fù)原乳800ml,其中蛋白質(zhì)含量接近3.2g/100ml,然后還包括水解乳清蛋白10g、酸性乳糖酶3000ALU、復(fù)合蛋白酶1200PU、乳鐵先將液體乳糖酶與GOS、CPP(0.5g)混合，通過20MPa的高壓均質(zhì)兩次形成納米級分散體，在采用巴適滅菌處理工藝進行滅菌處理，滅菌后立即降溫至4℃,再添加熱敏性成分，如羅伊氏乳桿菌1×10'CFU,然后在不大于4℃的環(huán)境中冷藏保存，測試其30天內(nèi)的蛋白沉淀率，要求不大于5%,同時酶的活性保留率在85%以上。[0032]作為一種應(yīng)用方向的是，該營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)用在奶片中，按照與組合蛋白物的質(zhì)量比例添加兩種包合的酶，也達到幫助消化的效果。[0033]具體的，以100g的奶片(不限定奶片尺寸，100g的產(chǎn)品包含若干片獨立包裝的奶白粉、8g的麥芽糊精以及2g的天然奶酪粉。[0034]通過干法壓片的方式，所有成分混合過80目篩后，在濕度小于40%的環(huán)境之下壓片，從而避免濕熱處理破壞酶活性。然后采用羥丙基甲基纖維素(HPMC)包衣，形成防潮屏障，同時控制崩解時間不大于3分鐘。[0035]作為一種應(yīng)用方向的是，該營養(yǎng)物質(zhì)針對于兒童奶粉中，用于解決兒童奶粉對于部分兒童個體難以消化出現(xiàn)胃脹或吐奶的情況。[0036]針對兒童因繼發(fā)性乳糖酶不足導(dǎo)致的腹瀉后腸黏膜受損情況，以及胃蛋白酶分泌不足導(dǎo)致的腹脹、產(chǎn)氣問題，開發(fā)含特定酶制劑的營養(yǎng)組合物，通過外源補充消化酶，降低腸道發(fā)酵產(chǎn)氣風(fēng)險，減輕胃腸消化負(fù)擔(dān)。[0037]核心的組合蛋白物的原料選擇蛋白源類型包括作為動物蛋白的：酪蛋白(酪蛋白酸鈉),緩釋供能，提供鈣、磷等礦物質(zhì)；與消化酶組合后更易吸收，質(zhì)量占比15%-25%;[0038]還包括作為植物蛋白的：豌豆蛋白，低致敏性，富含賴氨酸，彌補谷物蛋白缺陷；含膳食纖維，調(diào)節(jié)腸道功7大豆分離蛋白，植物蛋白中唯一含全部必需氨基酸；富含異黃酮，具有抗氧化作道菌群，質(zhì)量占比為0.1%-0.5%;以及膠原蛋白肽，補充甘氨酸、脯氨酸，促進皮膚、黏膜修成分類別核心作用分離乳清蛋白酪蛋白酸鈉緩慢釋放能量，補充礦物質(zhì)豌豆蛋白大豆分離蛋白水解蛋黃粉6乳鐵蛋白增強鐵吸收與免疫能力5益生元，調(diào)節(jié)腸道菌群，促進蛋白質(zhì)吸收酪蛋白磷酸肽1促進礦物質(zhì)吸收，穩(wěn)定蛋白結(jié)構(gòu)維生素D3揮作用葡萄糖酸鋅天然香草味香精改善口感麥芽糊精酶制劑在營養(yǎng)組合物中不以質(zhì)量分?jǐn)?shù)或微生物量確定，而是以酶活力單位為核心量或微生物數(shù)量無法準(zhǔn)確反映其功能效果。例如，同樣質(zhì)量的乳糖酶，不同來源或生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品，其分解乳糖的效率可能差異顯著。一范圍基于臨床研究數(shù)據(jù)，能確保在嬰幼兒胃內(nèi)酸性環(huán)境下分解70%-80%的乳糖，減少腸道發(fā)酵產(chǎn)氣。一種實施方式是，某批次酸性乳糖酶的活性為10000ALU/g,則每100g奶粉需添加0.2-0.5g該乳糖酶。8胃蛋白酶與胰蛋白酶按活性比例混合(通常1:1-1:2),確保在胃和腸道不同pH環(huán)境下高效分解酪蛋白。一種實施方式是，復(fù)合蛋白酶總活性為5000PU/g,每100g奶粉需添加0.2-[0042]酶保護劑的添加量需平衡保護效果、安全性及成本，具體計算依據(jù)及配方比例范低聚半乳糖(GOS)/低聚果糖(FOS)計算依據(jù)：基于其形成酶保護層的包裹效率及益生元功能，通常需達到酶制劑質(zhì)量的2-5倍，同時需符合嬰幼兒每日攝入量安全標(biāo)準(zhǔn)(≤15g/日)。[0043]配方比例：每100g奶粉添加5-10g。例如，若每100g奶粉中乳糖酶和復(fù)合蛋白酶總質(zhì)量為0.8g,則GOS/FOS添加量為4-8g,確保有效包裹酶分子并調(diào)節(jié)腸道菌群。[0044]酪蛋白磷酸肽(CPP)物質(zhì)含量及酶需求量匹配，過量可能導(dǎo)致礦物質(zhì)過度螯合，影響吸收。[0045]配方比例：每100g奶粉添加0.5-1g。例如，若奶粉中鈣含量為500mg/100g,鋅含量為1mg/100g,結(jié)合酶制劑的活性需求，CPP添加量控制在0.6-0.8g,可實現(xiàn)最佳穩(wěn)定效果。操作：先酶制劑過100目篩，與GOS、CPP在三維混合機中以50rpm混合20分鐘，形成均勻粉末；然后加入去離子水(粉水比1:2),在30℃水浴攪拌30分鐘至形成半透明混懸液，肽操作：先將動物蛋白與植物蛋白按比例混合，經(jīng)氣流粉碎至粒徑≤50μm;然后加入麥芽糊精及功能性蛋白，臥式螺帶混合機60rpm攪拌30分鐘，過80目篩備用。[0048]3、輔料處理：羅伊氏乳桿菌與葡萄糖酸鋅溶于5%CPP溶液，超聲分散10分鐘；抗壞血酸棕櫚酸酯溶于食用乙醇，噴霧法均勻噴灑于蛋白基質(zhì)表面，其中乙醇揮發(fā)后殘留量<[0049]二、內(nèi)層海藻酸鈉微膠囊包埋1、壁材制備：在60℃條件下溶解并冷卻至室溫形成2%海藻酸鈉溶液，加入0.1%殼聚糖來增強膜韌性；交聯(lián)劑準(zhǔn)備：采用0.2mol/L氯化鈣溶液，其中含1%甘油，防止膠囊硬度過高。[0050]2、乳化交聯(lián)：酶保護混懸液以10mL/min速度滴入氯化鈣溶液，200rpm高速攪拌形成5-10μm微膠囊，交聯(lián)時間40分鐘；以3000rpm轉(zhuǎn)速離心5分鐘收集微膠囊，去離子水洗滌2[0051]關(guān)鍵控制：酶包埋率≥90%(液相色譜法檢測未包埋酶殘留<10%);微膠囊表面電荷+20-30mV,利于后續(xù)與負(fù)電荷阿拉伯膠結(jié)合。91、預(yù)混合：酶微膠囊與蛋白功能基質(zhì)按1:5比例投入二維混合機，40rpm混合15分混合均勻度變異系數(shù)<5%。保護蛋白活性?；旌衔锪吓c阿拉伯膠溶液按1:2比例均質(zhì)(25MPa,2次),形成穩(wěn)定乳濁液；進入噴霧干燥塔在進風(fēng)溫度170℃,出風(fēng)溫度85℃,霧化壓力50kPa的條件下，干燥后收集粒徑20-[0055]核心機制說明，其中內(nèi)層海藻酸鈉膠囊保護酶制劑免受外層高溫破壞；外層阿拉伯膠膜包裹整個蛋白基質(zhì)，形成物理屏障和化學(xué)穩(wěn)定雙重保護，能夠?qū)崿F(xiàn)阻氧率95%,阻濕率85%。二次混合：將雙層微膠囊化后的產(chǎn)品與天然香草香精按比例混合，使用三維混合機以50轉(zhuǎn)/分鐘的速度混合10分鐘，確保香精均勻分布。[0057]滅菌處理：采用輻照滅菌(劑量≤8kGy)或濕熱滅菌(121℃,15分鐘)對產(chǎn)品進行滅[0058]包裝：將滅菌后的產(chǎn)品在潔凈車間(潔凈度達到IS07級)內(nèi)進行包裝，采用鋁箔袋充氮包裝，每袋凈含量根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計規(guī)格確定，包裝完成后進行密封性檢測，確保包裝無泄原料驗收：每批次原料需提供檢驗合格證明，對酶活力、蛋白含量、微生物指標(biāo)等進行抽樣檢測。分段混合過程中，每30分鐘檢測一次混合物料的溫度和均勻度。[0061]微膠囊包埋過程中，實時監(jiān)控噴霧干燥的溫度、壓力等參數(shù)，每小時檢測一次微膠囊的粒徑分布和包埋率。重金屬含量等，檢測合格后方可入庫。[0063]然后對上述方案中的材料進行實驗驗證小鼠功能性消化不良模型構(gòu)建與驗證(a)正常對照組(生理鹽水灌胃)(b)模型對照組(0.5%醋酸鉛溶液灌胃，10mg/kg/d,連續(xù)7天)(c)普通奶粉組(模型小鼠+市售配方奶粉灌胃，8g/kg/d)(d)普通酶組(模型小鼠+市售奶粉+未包埋酶制劑灌胃，酶活同配方組)(e)組合物組(模型小鼠+本配方奶粉灌胃，8g/kg/d)(f)陽性對照組(模型小鼠+多潘立酮溶液灌胃，1mg/kg/d)采用醋酸鉛聯(lián)合饑餓法：第1-7天：模型組的c-f組小鼠每日上午禁食12小時，下午灌胃0.5%醋酸鉛溶液(抑制胃蛋白酶活性，文獻證實可致胃排空延遲);第8-14天：造模后各組給予對應(yīng)處理，正常組與模型組灌胃等量生理鹽水。[0064]需要說明的是，嬰幼兒胃蛋白酶分泌量僅為成人的30%-50%,且活性受胃內(nèi)pH影響顯著。醋酸鉛作為重金屬離子，可與胃蛋白酶活性中心的巰基結(jié)合，不可逆抑制其水解酪蛋白的能力，抑制率可達60%-70%。通過連續(xù)7天灌胃0.5%醋酸鉛，可特異性降低胃蛋白酶活性，其中目標(biāo)值<30U/mg,正常小鼠為50±5U/mg,模擬人類因消化酶先天不足或疾病導(dǎo)致的酪蛋白消化障礙。[0065]而每日禁食12小時造成胃排空紊亂，同時饑餓狀態(tài)下胃黏膜前列腺素合成減少，削弱黏膜保護屏障，與醋酸鉛協(xié)同作用，誘發(fā)胃潴留、腸脹氣等功能性消化不良癥狀，符合臨床攻擊-防御失衡病理機制。[0066]其中，正常消化過程中，胃蛋白酶將酪蛋白切割為β-酪蛋白肽段，進入腸道后胰蛋白酶進一步水解為氨基酸。而模型小鼠異常情況是，胃蛋白酶活性被抑制后，酪蛋白僅少量分解，未消化的完整酪蛋白隨胃排空進入腸道，成為產(chǎn)氣菌的發(fā)酵底物，產(chǎn)生氫氣、甲烷等氣體。[0067]本模型通過醋酸鉛作用于胃部，不直接影響腸道乳糖酶表達，但可通過以下途徑間接關(guān)聯(lián)。酪蛋白消化不全導(dǎo)致腸道滲透壓升高，誘發(fā)短暫性腸黏膜水腫，可能輕度降低乳糖酶活性，模擬臨床蛋白質(zhì)消化障礙繼發(fā)乳糖吸收不良場景。檢測項目胃排空率殘留率>60%(正常組<40%)胃蛋白酶活性活性<30U/mg(正常組50±5U/mg)實時熒光定量PCR(檢測16SrRNA)產(chǎn)氣莢膜梭菌>10?CFU/g糞便陽性對照組胃排空率(%)0乳糖酶活性(ALU/g腸黏膜)-短鏈脂肪酸(μmol/g糞便)-*與正常組相比P<0.05;#與模型組相比P<0.01實驗結(jié)果說明：從胃排空率與腸脹氣的實驗結(jié)果預(yù)期來看，模型對照組因醋酸鉛抑制胃蛋白酶活性并結(jié)合饑餓法，導(dǎo)致胃排空率顯著低于正常組，腸脹氣評分明顯升高，符合功能性消化不良模型的預(yù)期病理表現(xiàn)。[0069]普通奶粉組與普通酶組胃排空率和脹氣評