實驗四四大類微生物菌落及個體形態(tài)觀察

一、實驗?zāi)康模罕容^四大類微生物菌落特征;學(xué)習(xí)自制水浸片觀察霉菌的個體形態(tài).二、實驗原理1、菌落觀察微生物菌落即微生物聚集在一起的群體結(jié)構(gòu)。在自然界中，我們?nèi)庋鬯姷降奈⑸锒际且跃錉顟B(tài)存在，不同種類的微生物有其特定的群體結(jié)構(gòu)。因此，根據(jù)群體結(jié)構(gòu)（菌落特征），我們可以初步把它們“分門別類”作粗略鑒定。本實驗通過對細菌、放線菌、酵母菌，霉菌等四大類微生物菌落特征的觀察，學(xué)習(xí)以菌落特征來區(qū)分四大類微生物的基本方法。3、霉菌觀察霉菌的營養(yǎng)體是分枝的絲狀體。其個體比細菌和放線菌大得多，分為基內(nèi)菌絲和氣生菌絲。氣生菌絲中又可分化出繁殖絲。不同霉菌的繁殖菌絲可以形成不同的孢子。孢子的著生方式及繁殖菌絲的形態(tài)是霉菌重要的分類依據(jù).霉菌菌絲較粗大，可以直接挑取生長在平板中的霉菌菌體制水浸片觀察。三、實驗器材：1、活材料：培養(yǎng)2天的細菌平板;培養(yǎng)7-15天的5406放線菌平板；培養(yǎng)7天的根霉（Rhizpussp.）、青霉（Penicillumsp.）、曲霉（Aspergillussp.）平板；2、器材：酒精燈、鑷子、載玻片、蓋玻片、解剖針、顯微鏡等。四、實驗步驟（一）菌落特征的觀察用肉眼觀察生長在瓊脂平板上的各種霉菌菌落，并根據(jù)下列要求對每種霉菌的菌落特征加以描述。

1.菌落的大?。壕窒奚L或蔓延生長，菌落的直徑和高度。

2.菌落的顏色：正面和背面的顏色，培養(yǎng)基的顏色變化。

3.菌落的形態(tài)：棉絮狀、網(wǎng)狀、疏松或緊密、同心輪紋、放線狀的皺褶等。真菌的菌落細菌的菌落真菌的菌落特征可作為分類依據(jù)之一：四大類微生物菌落比較表培養(yǎng)基細菌放線菌酵母菌霉菌牛肉膏高氏一號馬鈴薯馬鈴薯菌落形狀小點狀，多為圓形，個別呈根狀，輻射狀圓形輻射狀多為原形大小一般較小較小比細菌大而厚大顏色多樣（乳白、灰白、灰、紅、熒光等）正反面顏色相同多樣（灰白、白紅、粉紅、藍、紫、橙等）正反面顏色不同多為乳白色多樣（白，灰藍、綠黑、粉紅等）正反面一般顏色不同表面狀態(tài)光滑或粗糙，濕潤或干燥，較粘初期似細菌菌落，晚期為粉狀干燥表面濕潤粘稠絨毛狀，粉狀，棉絮狀，蜘蛛網(wǎng)狀，菌絲疏松生長速度一般較快慢較快快與基質(zhì)結(jié)合程度不牢牢固，不易挑取不牢較牢生長范圍有限有限有限多為無限氣味往往有臭味有泥腥味常有酒香味往往有霉味（二）個體形態(tài)特征的觀察——插片法

接種和分離工具1．接種針2.接種環(huán)3.接種鉤4.5.玻璃涂棒6.接種圈7.接種鋤8.小解剖刀

（二）個體形態(tài)特征的觀察——插片法（以放線菌為例）①接種：挑取菌種在培養(yǎng)基平板上密集劃線接種或取0.2ml菌液涂布平板；②插片：無菌操作用鑷子取滅菌蓋玻片以約45°角插入平板瓊脂接種線上；③培養(yǎng)：將平板倒置，于28℃培養(yǎng)3-5天；④鏡檢：用鑷子小心取出蓋玻片，用紙擦去背面培養(yǎng)物，有菌面朝上放在載玻片上，通過顯微鏡直接用低倍鏡和高倍鏡鏡檢觀察（在蓋玻片菌體附著部位低價0.1%呂氏堿性美藍染色后觀察效果更好）。（三）霉菌觀察方法制水浸制片觀察法：在載玻片上滴加一滴蒸餾水，用解剖針從生長有霉菌的平板中挑取少量帶有孢子的霉菌菌絲，放入載玻片上的水滴中,蓋上蓋玻片（勿使產(chǎn)生氣泡，且不要再移動蓋玻片）.標(biāo)本片制好后，先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡。注意觀察菌絲有無隔膜，有無假根、足細胞等特殊形態(tài)的菌絲。注意其無性繁殖器官的形狀和構(gòu)造，孢子著生的方式和孢子的形態(tài)、大小等。根霉（Rhizopus)曲霉(Aspergillus)青霉（Penicil