生理學(xué)試驗匯報

試驗一坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備

[1]試驗?zāi)康?/p>

1.學(xué)習(xí)機能學(xué)試驗基本的組織分離技術(shù)；

2.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的措施；

3.理解刺激的種類。

[2]試驗原理

蛙類的某些基本生命活動和生理功能與恒溫動物相似，若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任

氏液中，其興奮性在幾種小時內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次合適刺激，可在神經(jīng)和

肌肉上產(chǎn)生一種動作電位，肉眼可看到肌肉收縮和舒張一次，表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次

興奮。在機能學(xué)試驗中常運用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性，

刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特性等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是機能學(xué)試驗的一項基

本操作技術(shù)。

[3]試驗對象

蛙

[4]試驗藥物

任氏液

[5]儀器與器械

一般剪刀、手術(shù)剪、眼科銀（或尖頭無齒銀）、金屬探針（解剖針）、玻璃分針、蛙板

（或玻璃板X蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、電子刺激器。

[6]試驗措施與環(huán)節(jié)

①破壞腦、脊髓

取蛙一只，用自來水沖洗潔凈（勿用手搓X左手握住蛙，使其背部向上，用大拇指或

食指使頭前俯（以頭顱后緣稍稍拱起為宜）。右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入

椎管（圖3-1-1X然后將深針改向前刺入顱腔內(nèi)，左右攪動探針2~3次，搗毀腦組織。

假如探針在顱腔內(nèi)，應(yīng)有碰及顱底骨的感覺。

再將探針退回至枕骨大孔，使針尖轉(zhuǎn)向尾端，捻動探針使其刺入椎管，搗毀脊髓。此

時應(yīng)注意將脊柱保持平直。針進入椎管的感覺是，進針時有一定的阻力，并且伴隨進針蛙

出現(xiàn)下肢僵直或尿失禁現(xiàn)象。若腦和脊髓破壞完全，蛙下頜呼吸運動消失，四肢完全松軟,

失去一切反射活動。此時可將探針反向捻動，退出椎管。如蛙仍有反射活動，表達腦和脊

髓破壞不徹底，應(yīng)重新破壞。

圖2-1-1搗毀蟾蛛脊髓

②剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟

用左手捏住蛙的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷（圖

3-1-2）,然后左手握住蛙的后肢，緊靠脊柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去（注意避開坐骨神經(jīng)）,

并剪去肛門周圍的皮膚，留下脊柱和后肢（圖2-1-3\

圖2-1-2橫斷脊柱圖2-1-3剪除軀干上部及內(nèi)臟

柱的兩側(cè)，到尾端（肛門處）繞過坐骨聯(lián)合，抵達后肢背側(cè)，行走于梨狀肌下的股二頭肌

和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝內(nèi)，抵達膝關(guān)節(jié)胴窩處有分支進入腓腸肌。

⑥游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌

用蛙釘或左手的兩個手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨

神經(jīng)，然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)與周圍的結(jié)締組織分

離直到胭窩，但不要傷及神經(jīng)，其分支待后來用手術(shù)剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與

其下的結(jié)締組織分離并在其跟腱處穿線、結(jié)扎。

⑦剪去其他不用的組織，操作應(yīng)從脊柱向小腿方向進行。

（a）剪去多出的脊柱和肌肉

將后肢標(biāo)本腹面向上，將坐骨神經(jīng)連同2~3節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來。再將

標(biāo)本背面向上，用鏡子輕輕提起脊椎，自上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支，直至胴

窩（圖3-1-5A）,并搭放在腓腸肌上。沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉，并將股骨刮凈，用

粗剪刀剪去股骨上端的1/3（保留2/3）,制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本。

（b）完畢坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本

將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下，提起腓腸肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)

節(jié)如下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本（圖3-1-5BX

⑧檢查標(biāo)本

用鎰子夾持坐骨神經(jīng)中樞端，如啡腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮，闡明標(biāo)本的興奮性良

好。標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中備用。

圖2-1-5分離坐骨神經(jīng)（A）和坐骨神經(jīng)腓腸標(biāo)本（B）

[7]注意事項

①在操作過程中，應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響標(biāo)本的興奮

②標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘，使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定，再開始試驗效果會很

好。

[8]試的圖像

l

?

s

r

*

8

B

8

0

L

L

-

-

S

O

畫G回

「

■

『

E

I，

A

^

F同

I

H

F

-

芍

，H

T

I

h

-

■

i?

二二一

?0

?G?

■?

■

■

T

工■

喘■—

,

>

s

二-

p

:

???

》r?

p

：：.

?

8

?，*

l

4

W?田

￡

4

?-

_

4

^

?，■

a?臺

n；口

□

s

0

-年

.

3〔

:

?

■

n

-

r

:

=

R

M

,

?

4

E

，E

A

0

E

號I

e

l

v

l

K

?a

8韶

K

2

A

q

-

^

，l

^

H：

>

i

T

I

s

s

N

J

2

g

?

I

-

￡

H

q

G

3

w

B

N】

y

i

s

M

8

對w

r

e

r

s

3，

r

?