ICS65.020.30

B43

DB52

貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB52/T269—2019

代替DB52/T269-1991

牛冷凍精液人工授精技術(shù)規(guī)程

RegulationofArtificialInseminationofFrozen

SemenforBovine

2019-12-31發(fā)布2020-06-01實施

貴州省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB52/T269—2019

牛冷凍精液人工授精技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了種牛凍精選擇、冷凍精液運輸與貯存、母牛發(fā)情鑒定、輸精準(zhǔn)備、輸精操作、母牛妊

娠檢查、記錄等技術(shù)要求。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于貴州省養(yǎng)牛場及養(yǎng)殖戶母牛冷凍精液人工授精。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB4143牛冷凍精液

NY/T1335牛人工授精技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

冷凍精液

將原精液用稀釋液稀釋、平衡后快速冷凍，在液氮中保存。冷凍精液包括顆粒和細(xì)管凍精兩種劑型。

3.2

解凍

冷凍精液使用前使冷凍精子復(fù)蘇重新并恢復(fù)活力的處理方法。

3.3

人工授精

用人工方法采集公牛精液，經(jīng)檢查處理后，輸入發(fā)情母牛子宮頸內(nèi)，使其受孕的技術(shù)。

3.4

發(fā)情鑒定

通過外部觀察或其它方式確定母牛發(fā)情程度的方法。

4母牛及精液

1

DB52/T269—2019

4.1母牛

選擇健康、繁殖機能正常的未妊娠母牛。

4.2精液

應(yīng)符合GB4143的規(guī)定。

5冷凍精液運輸與貯存

5.1運輸

在運輸冷凍精液和液氮時，應(yīng)使用生物貯存容器，并在原有保護套外，另加木箱或其它保護裝置加

以固定。

5.2貯存

冷凍精液應(yīng)貯存在裝有足夠液氮的生物貯存容器中，定期檢查和添加液氮，保證容器內(nèi)的冷凍精液

置于液氮面下方。

5.3轉(zhuǎn)移

貯存的冷凍精液向另一容器轉(zhuǎn)移時，冷凍精液應(yīng)浸泡在液氮中進(jìn)行。冷凍精液在空氣中暴露的時間

不得超過5秒。

5.4提取

從容器內(nèi)取冷凍精液時，只能將提筒置于容器內(nèi)，用長柄鑷夾取冷凍精液，如5秒內(nèi)尚未取放完畢，

應(yīng)將提筒放回液氮中浸泡一下再繼續(xù)提取。

6母牛發(fā)情鑒定

6.1外部觀察法

6.1.1發(fā)情初期：母牛興奮不安，哞叫，游走，采食量減少，追逐、爬跨其它母牛，但不接受爬跨；

陰戶腫脹、松弛、充血、發(fā)亮，有稀薄透明黏液流出，黏液不呈牽絲狀。

6.1.2發(fā)情盛期：母牛溫順，其它牛爬跨時站立不動、后肢張開，接受爬跨，頻頻舉尾。陰戶腫脹、

紅潤，有大量透明而黏稠的黏液流出，呈牽絲狀。

6.1.3發(fā)情末期：母牛興奮度降低，平靜，拒絕爬跨；陰戶腫脹消退并起皺，尾根緊貼陰門，黏液量

減少、黏稠，牽絲較短。

6.2直腸檢查法

6.2.1發(fā)情初期：卵巢變軟，光滑，有時略有增大，卵泡直徑0.5cm左右。

6.2.2發(fā)情盛期：一側(cè)卵巢增大，卵泡直徑0.5cm～1.0cm，呈圓形，明顯突出于卵巢表面。

6.2.3發(fā)情末期：卵泡增大，波動感明顯，泡壁變薄，緊張度增加，有一觸即破之感。

2

DB52/T269—2019

7輸精準(zhǔn)備

7.1輸精器具清洗和消毒

7.1.1輸精槍、輸精針及玻璃器皿等，先用清洗液清洗，再用清水洗凈，用紗布分類包扎，置消毒鍋

內(nèi)煮沸1h后，干燥備用。

7.1.2輸精槍用后清洗、消毒后方可再次使用，采用一次性塑料外套管。

7.2冷凍精液解凍和精液質(zhì)量

冷凍精液解凍方法和精液質(zhì)量應(yīng)符合GB4143的規(guī)定。

7.3輸精槍使用

輸精槍主要用于細(xì)管冷凍精液的輸精。將解凍的細(xì)管剪去頂部封口，剪切面整齊，迅速裝入輸精槍

管內(nèi)。具體步驟為：剪去頂部封口為前端，輸精槍推桿后退，細(xì)管裝至輸精槍內(nèi)，將塑料外套套在輸精

槍管外，輸精槍管口頂緊外塑料套管固定圈，輸精槍管前推到頭，塑料外套管后部在輸精槍后部螺紋處

擰緊，緊密結(jié)合。

7.4牛體衛(wèi)生

輸精前，輸精員帶上一次性塑料手套，用手掏凈母牛直腸糞便后，再用溫水清洗母牛外陰部并擦拭

干凈，不應(yīng)用消毒液清洗。

8輸精操作

8.1輸精時間確定

8.1.1母牛出現(xiàn)發(fā)情盛期表現(xiàn)6h～10h或卵泡壁薄、滿而軟、有彈性和波動感明顯接近成熟排卵時

為適宜輸精時間。

8.1.2發(fā)情母牛一個情期輸精2次，間隔時間8h～12h。

8.2直腸把握輸精

輸精人員將手指并握，呈圓錐形從母牛肛門伸進(jìn)直腸內(nèi)，動作要輕柔，尋找并握住子宮頸的外口端，

手臂往下按壓使陰門裂開，另一只手把準(zhǔn)備好的輸精槍自陰門向斜上方約45°角輕輕插入5cm～10cm，

避開尿道口，再改為平插，把輸精槍送到子宮頸外口，雙手配合，輕輕旋轉(zhuǎn)插進(jìn)，使輸精槍緩緩越過子

宮頸管中的皺壁輪1cm～2cm，到達(dá)子宮體部位，注入精液前略后退0.5cm，把輸精槍推桿緩緩向前推，

將精液注入子宮頸內(nèi)。

9母牛妊娠檢查

9.1外部觀察法

9.1.1母牛配種后2～3個情期內(nèi)未出現(xiàn)發(fā)情者，可初步判定為妊娠。

9.1.2母牛妊娠外部表現(xiàn)，性情變得溫和，食欲增加，毛色潤澤。妊娠5～6個月后，腹圍增大，右側(cè)

腹壁突出，可在腹壁觸到或看到胎動。

3

DB52/T269—2019

9.2直腸檢查法

9.2.1輸精后2個情期未發(fā)情，通過直腸觸摸可查出兩側(cè)子宮角不對稱，角間溝清晰。孕側(cè)子宮角較

粗大、柔軟，有液體波動感，彎曲度變小。

9.2.2輸精2個月后，通過直腸觸摸可查出妊娠子宮增大并能感覺到胎兒和胎膜，同側(cè)卵巢較另側(cè)略

大，并有妊娠黃體，頂端可觸感突起物。

10記錄

10.1記錄內(nèi)容

記錄內(nèi)容詳見附錄A。

10.2情期受胎率、受胎率和繁殖率

應(yīng)符合NY/T1335的要求。

4

DB52/T269—2019

AA

附錄A

（規(guī)范性附錄）

母牛配種記錄表

母牛凍精發(fā)情輸精復(fù)配產(chǎn)犢輸精

畜主住址預(yù)產(chǎn)期備注

編號品種年齡胎次品種編號來源時間時間時間日期人員