血細胞分析在臨床中的應用

第一頁，共九十三頁。血細胞分析的發(fā)展近年來,隨著科學技術的飛速發(fā)展及計算機在血液分析儀中的廣泛應用,各種先進的血液分析儀逐漸普及.第二頁，共九十三頁。1953年，第一臺血細胞計數(shù)儀問世，標志著這一項目拋棄了作坊式手段；1913-1998ModelAHighspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzer第三頁，共九十三頁。

原理血液分析儀主要是利用阻抗原理進行細胞計數(shù)的.不同體積的血細胞,因其電阻大小不同,而產生相應大小的脈沖,分別進入到儀器設置的不同通道第四頁，共九十三頁。第五頁，共九十三頁。CBC(全血細胞計數(shù))+DIFF(WBC分類)模式下WBC計數(shù)分類WBC/DIFF通道對WBC計數(shù)和分類時,使用的兩個信號:細胞經半導體激光激發(fā)產生側向熒光強度側向散射光強度信號第六頁，共九十三頁。使用的兩種試劑:溶血素(4DL):將RBC完全溶解,同時在WBC膜表面打孔熒光染料(4DS,聚次甲基熒光染料)通過小孔進入WBC內,對胞漿和胞核中的核酸物質進行染色第七頁，共九十三頁。測定經過核酸熒光染色后的WBC在633nm激光的照射下,產生側向熒光信號和側向散射光信號。側向熒光強度與WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,側向散射光強度反映了細胞內容物的復雜程度(核的分葉,胞漿顆粒的大小,數(shù)量,分布均勻程度)。第八頁，共九十三頁。123459鞘流技術激光計數(shù)原理示意圖1流通池2梭頭3樣本頭4鞘流頭5透鏡6吸收光7低角度散射光檢測8高角度散射光檢測9光源876第九頁，共九十三頁。第十頁，共九十三頁。第十一頁，共九十三頁。SideScatter(Internalstructure)淋巴細胞單核細胞嗜中性細胞

嗜酸細胞

Fluorescence(RNA,DNA)RBCghost嗜堿細胞第十二頁，共九十三頁。RBC和PLT檢測原理全血標本稀釋后分配到RBC/PLT計數(shù)池,鞘流技術產生的層流使這個電阻信號轉化為脈沖信號記錄下來,脈沖的高度反映了細胞的大小,每個脈沖信號代表一個細胞,收集信號得到RBC和PLT的直方圖。第十三頁，共九十三頁。第十四頁，共九十三頁。第十五頁，共九十三頁。SLS血紅蛋白檢測方法檢測使用的主要成份為十二烷基磺酸鈉表面活性劑先將RBC溶解，釋放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化為Fe3+，與SLS結合形成SLS-Hb有色基團，在535nm有最大吸收峰。第十六頁，共九十三頁。SLS血紅蛋白檢測方法特點不含氰化物，無毒具有環(huán)保性SLS是一種脂溶性試劑，可減少脂血和高WBC總數(shù)造成的濁度對血紅蛋白檢測的影響第十七頁，共九十三頁。數(shù)據(jù)異常信息第十八頁，共九十三頁。中性粒細胞增多感染（急性細菌感染）組織損傷（心肌梗塞.手術）惡性血液病藥物使用(腎上腺素.類固醇)生理性增高第十九頁，共九十三頁。淋巴細胞增多惡性血液病感染(百日咳.傳單.病毒性風疹)應激狀態(tài)(急性心衰.心臟梗塞.過敏反應)自身免疫性疾病.腫瘤.吸煙第二十頁，共九十三頁。單核細胞增多感染(細胞性.敗血癥)膠原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病惡性腫瘤第二十一頁，共九十三頁。嗜酸性細胞增多過敏反應(藥物.尋麻疹)寄生蟲病皮膚病纖維瘤內分泌病感染(結核病)第二十二頁，共九十三頁。中性粒細胞減少嚴重的細菌感染白血病.腫瘤骨髓轉移藥物血液惡液質過敏性休克.酒精中毒第二十三頁，共九十三頁。淋巴細胞減少流行性感冒.敗血病藥物(抗腫瘤藥物.腎上腺皮質激素)腫瘤晚期.霍奇金氏病膠原性疾病(系統(tǒng)性紅斑狼瘡.類風濕性關節(jié)炎)第二十四頁，共九十三頁。干擾因素造成假性增高(降低)第二十五頁，共九十三頁。WBC假性增高PLT聚集冷凝集有核紅細胞難溶紅細胞冷球蛋白第二十六頁，共九十三頁。PLT假性增高紅細胞碎片小紅細胞冷白蛋白第二十七頁，共九十三頁。PLT假性降低血小板聚集巨大血小板第二十八頁，共九十三頁。RBC假性增高白細胞增多巨大血小板第二十九頁，共九十三頁。RBC假性降低紅細胞碎片冷凝集小紅細胞第三十頁，共九十三頁。急性粒細胞白血病Auer小體第三十一頁，共九十三頁。出現(xiàn)原始粒細胞DIFF散點圖顯示:淋巴細胞.單核細胞和原始細胞區(qū)域出現(xiàn)大量散點且連成一片,大部分原始細胞由于異常增殖含有過多的DNA/RNA第三十二頁，共九十三頁。出現(xiàn)異常淋巴細胞散點圖顯示:有大量的異常淋巴細胞,熒光強度較弱而側向散射光強度稍強第三十三頁，共九十三頁。RBC雙峰分布表示出現(xiàn)大小不同的兩群紅細胞第三十四頁，共九十三頁。缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后

直方圖動態(tài)變化-療效觀察

鐵劑治療2周后鐵劑治療4周后第三十五頁，共九十三頁。特發(fā)性PLT減少性紫癲(ITP)PLT直方圖分布上,在40fl附近出現(xiàn)一個高峰,提示有大型PLT,因此反映細胞大小的直方圖無法將PLT準確檢測出來,許多大的PLT被計數(shù)成RBC第三十六頁，共九十三頁。需要鏡檢的情況第三十七頁，共九十三頁。、國際血液學復檢專家組推薦的41條自動CBC和DC復檢規(guī)則：

1.新生兒：（1）復檢條件：首次檢測標本；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細胞（Ret）：（1）復檢條件：超出線性范圍；（2）復檢要求：稀釋標本后重新測定。

3.WBC、PLT：（1）復檢條件：低于實驗室確認的儀器線性范圍；（2）復檢要求：按實驗室標準操作規(guī)程（SOP）進行。第三十八頁，共九十三頁。4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）復檢條件：無結果；（2）復檢要求：①檢查標本是否有凝塊，②重測標本，③如果維持不變，用替代方法計數(shù)。

5.WBC：（1）復檢條件：首次結果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

6.WBC：（1）復檢條件：3天內Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

第三十九頁，共九十三頁。7.PLT：（1）復檢條件：首次結果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

8.PLT：（1）復檢條件：Delta值超限的任何結果；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

9.Hb：（1）復檢條件：首次結果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L；（2）復檢要求：①涂片鏡檢，②確認標本是否符合要求。

10.平均紅細胞體積（MCV）：（1）復檢條件：24h內標本的首次結果<75fl或>105fl（成人）；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

第四十頁，共九十三頁。11.MCV：（1）復檢條件：24小時以上的成人標本>105fl；（2）復檢要求：①涂片鏡檢觀察大紅細胞相關變化，②如無大紅細胞相關變化，要求重送新鮮血標本，③如無新鮮血標本，報告中注明。

12.MCV：（1）復檢條件：24h內標本的Delta值超限的任何結果；（2）復檢要求：確認標本是否符合要求。

13.平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）：（1）復檢條件：≥參考范圍上限20g/L；（2）復檢要求：檢查標本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細胞。

第四十一頁，共九十三頁。16～22條為白細胞分類的復檢規(guī)則：

16.無白細胞分類計數(shù)（DC）結果或DC結果不全：（1）復檢條件：無條件復檢；（2）復檢要求：人工分類和涂片鏡檢。

17.中性粒細胞絕對計數(shù)（Neut＃）：（1）復檢條件：首次結果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

18.淋巴細胞絕對計數(shù)（Lym＃）：（1）復檢條件：首次結果>5.0x10e9/L（成人）或>7.0x10e9/L（<12歲）；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

第四十二頁，共九十三頁。19.單核細胞絕對計數(shù)（Mono＃）：（1）復檢條件：首次結果>1.5x10e9/L（成人）或>3.0x10e9/L（<12歲）；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

20.嗜酸粒細胞絕對計數(shù)（Eos＃）：（1）復檢條件：首次結果>2.0x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

21.嗜堿粒細胞絕對計數(shù)（Baso＃）：（1）復檢條件：首次結果>0.5x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

第四十三頁，共九十三頁。22.有核紅細胞絕對計數(shù)（NRBC＃）：（1）復檢條件：首次出現(xiàn)任何結果；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

23條為網(wǎng)織紅細胞的復檢規(guī)則：

23.網(wǎng)織紅細胞絕對計數(shù)（Ret＃）：（1）復檢條件：首次結果>0.10x10e9/L；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

第四十四頁，共九十三頁。24～41條為可以提示的復檢規(guī)則：

24.懷疑性報警[不成熟粒細胞(IG)/桿狀核中性粒細胞（Band）報警提示除外]：（1）復檢條件：首次成人結果出現(xiàn)陽性報警；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

25.懷疑性報警：（1）復檢條件：首次兒童結果出現(xiàn)陽性報警；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

26.WBC結果不可靠報警：（1）復檢條件：陽性報警；（2）復檢要求：①確認標本是否符合要求并重測標本，②如出現(xiàn)同樣報警提示，檢查儀器，③如需要，進行人工分類。

27.RBC碎片：（1）復檢條件：陽性報警；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

28.雙形RBC：（1）復檢條件：首次結果出現(xiàn)陽性報警；（2）復檢要求：涂片鏡檢。

第四十五頁，共九十三頁。注意事項儀器為篩選試驗,不能從測定結果直接診斷疾病遇到異常提示時及時鏡檢儀器定期保養(yǎng),保證日常工作正常進行第四十六頁，共九十三頁。第四十七頁，共九十三頁。第四十八頁，共九十三頁。（二）血細胞形態(tài)變化的一般規(guī)律1.細胞大小及形態(tài)

大小：由大到小。2個例外：巨核細胞及早幼粒細胞。

形態(tài)：紅細胞始終圓形，粒細胞圓形或橢圓形，單核細胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形，巨核細胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。2.細胞核

大?。河纱蟮叫?。巨核細胞除外。

核形：各系細胞有不同表現(xiàn)。

核位置：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴細胞核一側著邊，僅一側有胞漿。第四十九頁，共九十三頁。核染色質：顏色由淺到深，染色質由細致疏松到粗糙密集，最后緊縮成塊。核膜：不明顯到明顯。核仁：清晰、模糊、消失。3.細胞漿量：由少到多。顏色：粒、紅、巨核由深藍或淺藍到淺紅；淋巴、單核保持淺藍或灰藍色；漿細胞由灰藍變?yōu)樯钏{。顆粒：從無到有，由非特異性到特異性。第五十頁，共九十三頁。第五十一頁，共九十三頁。㈢、血細胞的正常形態(tài)學特征1、紅細胞系統(tǒng)原紅（normoblast）早幼紅（basophilicnormoblast）中幼紅（polychromaticnormoblast）晚幼紅（orthochromaticnormoblast）原紅細胞：早幼紅細胞：中幼紅細胞第五十二頁，共九十三頁。2、粒細胞系統(tǒng)原粒（myeloblast）早幼粒（promyelocyte）中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜堿晚幼粒（metamyelocyte）桿狀核粒（stabgranulocyte,bandgranulocyte）分葉核（Segmenteelgranulocyte）原粒細胞早幼粒細胞中性中幼粒細胞晚幼粒細胞桿狀核粒細胞第五十三頁，共九十三頁。嗜酸粒細胞（中幼、晚幼、桿狀核、分葉核第五十四頁，共九十三頁。嗜堿粒細胞（早幼、中幼、晚幼、桿狀核、分葉核）第五十五頁，共九十三頁。3、淋巴細胞系統(tǒng)原淋（Lymphoblast）幼淋（prolymphocyte）淋巴（lymphocyte）大淋巴細胞小淋巴細胞原淋巴細胞幼淋巴細胞：大淋巴細胞小淋巴細胞第五十六頁，共九十三頁。4、漿細胞系統(tǒng)原漿（plasmablast）幼漿（proplasmacyte）漿細胞（plasmacyte）原漿細胞幼漿細胞漿細胞第五十七頁，共九十三頁。5、單核細胞系統(tǒng)A.原單（monoblast）B.幼單（promonocyte）C.單核（monocyte）D.吞噬（maerophage）ABC原單核細胞幼單核細胞單核細胞第五十八頁，共九十三頁。6、巨核細胞系統(tǒng)原巨（megakaryoblast）幼巨（promegakaryocyte）顆粒巨（granularmegakaryocyte）產板巨（thrombacytogenousmegakaryocyte）裸核（nakednucleous）原巨核細胞幼巨核細胞顆粒型巨核細胞產血小板型巨核細胞第五十九頁，共九十三頁。推片推片、染片的質量

第六十頁，共九十三頁。正常骨髓象（油鏡）第六十一頁，共九十三頁。缺鐵性貧血骨髓象第六十二頁，共九十三頁。溶血性貧血骨髓象第六十三頁，共九十三頁。巨幼細胞性貧血骨髓象第六十四頁，共九十三頁。地中海貧血

第六十五頁，共九十三頁。慢性ITP骨髓象（高倍鏡）第六十六頁，共九十三頁。幼紅細胞形態(tài)異常第六十七頁，共九十三頁。核間橋（細胞內）第六十八頁，共九十三頁。第六十九頁，共九十三頁。核間橋（細胞外）第七十頁，共九十三頁。第七十一頁，共九十三頁。核出芽第七十二頁，共九十三頁。不對稱雙核第七十三頁，共九十三頁。三核幼紅