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生物選修課程重點(diǎn)知識(shí)總結(jié)一、選修一:生物技術(shù)實(shí)踐核心主題:以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ),掌握傳統(tǒng)與現(xiàn)代生物技術(shù)的操作流程及原理,強(qiáng)調(diào)“實(shí)踐應(yīng)用”。(一)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1.培養(yǎng)基的配制與類(lèi)型基本成分:碳源(提供能量,如葡萄糖)、氮源(合成蛋白質(zhì),如NH??、牛肉膏)、水、無(wú)機(jī)鹽(維持滲透壓,如NaCl)、生長(zhǎng)因子(必需有機(jī)物,如維生素、氨基酸,用于營(yíng)養(yǎng)缺陷型微生物)。類(lèi)型:按物理狀態(tài):固體培養(yǎng)基(加瓊脂,用于分離、鑒定)、液體培養(yǎng)基(用于擴(kuò)大培養(yǎng))、半固體培養(yǎng)基(用于觀察運(yùn)動(dòng)、保藏菌種)。按功能:選擇培養(yǎng)基(篩選特定微生物,如加青霉素篩選酵母菌、霉菌)、鑒別培養(yǎng)基(鑒定微生物,如伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌,呈黑色帶金屬光澤)。2.無(wú)菌技術(shù)消毒:殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),常用方法:70%酒精擦拭、碘伏消毒、巴氏消毒(62-65℃,30分鐘,用于牛奶)。滅菌:殺死所有微生物(包括芽孢和孢子),常用方法:高壓蒸汽滅菌(121℃,15-30分鐘,用于培養(yǎng)基、玻璃器皿);干熱滅菌(____℃,2-3小時(shí),用于玻璃器皿);灼燒滅菌(酒精燈火焰,用于接種環(huán)、接種針)。3.微生物接種與計(jì)數(shù)接種方法:平板劃線法:通過(guò)連續(xù)劃線將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞,最終獲得單菌落(不能計(jì)數(shù),用于分離純化)。稀釋涂布平板法:將菌液稀釋后涂布,形成單菌落(可計(jì)數(shù)活菌,結(jié)果比實(shí)際值低,因多個(gè)細(xì)胞可能形成一個(gè)菌落)。計(jì)數(shù)方法:活菌計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(血球計(jì)數(shù)板,包括死菌和活菌)。(二)發(fā)酵技術(shù)實(shí)踐1.果酒與果醋制作果酒:菌種:酵母菌(兼性厭氧,真菌)。原理:無(wú)氧呼吸(C?H??O?→2C?H?OH+2CO?+能量)。條件:溫度18-25℃,無(wú)氧環(huán)境(前期有氧促進(jìn)繁殖,后期無(wú)氧發(fā)酵)。果醋:菌種:醋酸菌(好氧,細(xì)菌)。原理:有氧呼吸(C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O+能量)。條件:溫度30-35℃,有氧環(huán)境(需持續(xù)通氣)。2.腐乳與泡菜制作腐乳:菌種:毛霉(好氧,真菌)。原理:毛霉產(chǎn)生的蛋白酶分解蛋白質(zhì)為小分子肽和氨基酸,脂肪酶分解脂肪為甘油和脂肪酸。工藝:豆腐切塊→接種毛霉→加鹽腌制(析出水分,抑制雜菌)→加酒(12%左右,殺菌、調(diào)味)→加香辛料(調(diào)味、防腐)→發(fā)酵成熟。泡菜:菌種:乳酸菌(厭氧,細(xì)菌)。原理:無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸(C?H??O?→2乳酸+能量)。注意:亞硝酸鹽含量變化(腌制初期上升,后期下降),檢測(cè)用比色法(鹽酸萘乙二胺顯色,與標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)比)。(三)植物有效成分的提取成分提取方法原理注意事項(xiàng)玫瑰精油水蒸氣蒸餾法易揮發(fā)、難溶于水、穩(wěn)定蒸餾溫度不宜過(guò)高,時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)橘皮精油壓榨法易焦糊,水蒸氣蒸餾效果差石灰水浸泡(破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),提高出油率)胡蘿卜素萃取法易溶于有機(jī)溶劑用石油醚(沸點(diǎn)高、不溶于水)作萃取劑;萃取后需濃縮(蒸餾去除溶劑)二、選修三:現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題核心主題:以“基因-細(xì)胞-胚胎-生態(tài)”為主線,掌握現(xiàn)代生物科技的原理與應(yīng)用,強(qiáng)調(diào)“技術(shù)創(chuàng)新”。(一)基因工程(DNA重組技術(shù))1.工具酶與載體限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶):來(lái)源:原核生物(防御噬菌體感染)。功能:識(shí)別特定核苷酸序列(通常為回文序列,如EcoRⅠ識(shí)別GAATTC),切割磷酸二酯鍵,產(chǎn)生粘性末端或平末端。DNA連接酶:功能:連接DNA片段的磷酸二酯鍵(恢復(fù)被限制酶切割的鍵)。類(lèi)型:E·coliDNA連接酶(僅連粘性末端)、T4DNA連接酶(連粘性末端和平末端)。載體:功能:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(需能自我復(fù)制、有標(biāo)記基因、多個(gè)限制酶切點(diǎn))。常用載體:質(zhì)粒(細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的環(huán)狀DNA,最常用)、噬菌體(如λ噬菌體)、動(dòng)植物病毒(如農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒)。2.操作步驟目的基因的獲?。簭幕蛭膸?kù)中提取(基因組文庫(kù)、cDNA文庫(kù),cDNA文庫(kù)無(wú)內(nèi)含子);人工合成(化學(xué)合成法,用于小基因;反轉(zhuǎn)錄法,以mRNA為模板合成cDNA);PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增目的基因,需耐高溫的TaqDNA聚合酶、引物、dNTP)?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建(核心步驟):組成:目的基因+啟動(dòng)子(RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn),啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄)+終止子(終止轉(zhuǎn)錄)+標(biāo)記基因(篩選重組細(xì)胞,如抗生素抗性基因)。方法:用相同限制酶切割目的基因和載體,產(chǎn)生相同粘性末端,再用DNA連接酶連接。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:植物細(xì)胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(最常用,Ti質(zhì)粒的T-DNA可整合到植物基因組)、基因槍法、花粉管通道法;動(dòng)物細(xì)胞:顯微注射法(將目的基因注入受精卵);微生物細(xì)胞:感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca2?處理大腸桿菌,使其吸收DNA)。目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平:DNA水平:DNA分子雜交(檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入,用放射性標(biāo)記的目的基因作探針);RNA水平:核酸分子雜交(檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄,用放射性標(biāo)記的cDNA作探針);蛋白質(zhì)水平:抗原-抗體雜交(檢測(cè)目的基因是否翻譯,用相應(yīng)抗體檢測(cè)蛋白質(zhì))。個(gè)體水平:抗蟲(chóng)鑒定(如轉(zhuǎn)Bt基因棉花抗棉鈴蟲(chóng))、抗病鑒定(如轉(zhuǎn)抗病毒基因煙草抗煙草花葉病毒)。3.應(yīng)用轉(zhuǎn)基因生物:抗蟲(chóng)棉(Bt基因)、抗除草劑大豆(EPSPS基因)、轉(zhuǎn)基因奶牛(生產(chǎn)人乳鐵蛋白);基因治療:將正?;?qū)牖颊呒?xì)胞,治療遺傳?。ㄈ珑牭缎图?xì)胞貧血癥、囊性纖維病);生物制藥:用工程菌生產(chǎn)胰島素、干擾素、乙肝疫苗(工程菌是指導(dǎo)入目的基因的微生物)。(二)細(xì)胞工程1.植物細(xì)胞工程原理:植物細(xì)胞的全能性(已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能)。植物組織培養(yǎng)(核心技術(shù)):步驟:外植體(如莖尖、葉片)消毒→脫分化(形成愈傷組織,需生長(zhǎng)素+細(xì)胞分裂素比例適中)→再分化(形成根、芽,生長(zhǎng)素多生根,細(xì)胞分裂素多發(fā)芽)→試管苗移栽。應(yīng)用:快速繁殖(如蘭花、香蕉)、作物脫毒(用分生區(qū)組織,如莖尖,因分生區(qū)無(wú)病毒)、人工種子(胚狀體+人工種皮,保持優(yōu)良性狀)、單倍體育種(花藥離體培養(yǎng)→單倍體→秋水仙素處理→純合子,縮短育種年限)。植物體細(xì)胞雜交:步驟:去壁(用纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞)→原生質(zhì)體融合(用聚乙二醇PEG或電融合法)→雜種細(xì)胞篩選→植物組織培養(yǎng)→雜種植株。意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(如番茄-馬鈴薯雜種植株)。2.動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(基礎(chǔ)技術(shù)):原理:細(xì)胞增殖(有絲分裂)。步驟:取動(dòng)物組織(胚胎或幼齡動(dòng)物,因分裂能力強(qiáng))→剪碎→胰蛋白酶/膠原蛋白酶處理(分散成單個(gè)細(xì)胞)→原代培養(yǎng)(貼壁生長(zhǎng)、接觸抑制)→傳代培養(yǎng)(10-50代后可能發(fā)生癌變,成為細(xì)胞系)。條件:無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境(培養(yǎng)液加抗生素,定期更換培養(yǎng)液)、營(yíng)養(yǎng)(血清/血漿、氨基酸、葡萄糖)、溫度(36.5±0.5℃)、pH(7.2-7.4)、氣體環(huán)境(95%空氣+5%CO?,CO?維持pH)。應(yīng)用:生產(chǎn)生物制品(如疫苗、干擾素)、檢測(cè)有毒物質(zhì)(通過(guò)細(xì)胞形態(tài)變化判斷毒性)、研究細(xì)胞生理(如細(xì)胞凋亡)。動(dòng)物細(xì)胞核移植:步驟:取去核卵母細(xì)胞(減數(shù)第二次分裂中期,因細(xì)胞質(zhì)有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì))→取供體細(xì)胞(如體細(xì)胞)→核移植(將供體細(xì)胞核注入去核卵母細(xì)胞)→重組細(xì)胞培養(yǎng)→胚胎移植→克隆動(dòng)物。實(shí)例:多莉羊(供體細(xì)胞核來(lái)自綿羊乳腺細(xì)胞,去核卵母細(xì)胞來(lái)自另一只綿羊,受體是第三只綿羊)。動(dòng)物細(xì)胞融合:原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。方法:聚乙二醇PEG、電融合法、滅活病毒(如仙臺(tái)病毒,最常用)。應(yīng)用:制備單克隆抗體(雜交瘤細(xì)胞,由B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成,既能分泌特異性抗體,又能無(wú)限增殖)。(三)胚胎工程1.胚胎發(fā)育過(guò)程受精卵→桑椹胚(32細(xì)胞左右,全能性高,可分割移植)→囊胚(內(nèi)細(xì)胞團(tuán)+滋養(yǎng)層,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)發(fā)育成胎兒各種組織,滋養(yǎng)層發(fā)育成胎盤(pán)、胎膜)→原腸胚(三個(gè)胚層:外胚層→皮膚、神經(jīng);中胚層→肌肉、骨骼;內(nèi)胚層→消化、呼吸系統(tǒng))。2.胚胎移植(核心技術(shù))意義:充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力(如高產(chǎn)奶牛)。步驟:供體超數(shù)排卵(用促性腺激素,如促卵泡激素FSH)→配種或人工授精→胚胎收集(沖卵,收集囊胚或桑椹胚)→胚胎檢查→胚胎移植(注入受體子宮)→受體飼養(yǎng)觀察。關(guān)鍵條件:供體與受體同期發(fā)情(用孕激素,使子宮環(huán)境一致)、供體與受體遺傳背景相似(同一物種)。3.胚胎分割與干細(xì)胞胚胎分割:將桑椹胚或囊胚分割成多份,每份發(fā)育成一個(gè)個(gè)體(屬于無(wú)性繁殖,保持優(yōu)良性狀)。干細(xì)胞:胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞):來(lái)自囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán),全能性高(可分化為任何組織細(xì)胞),應(yīng)用于細(xì)胞治療(如治療帕金森病)、組織工程(如人造器官);成體干細(xì)胞:來(lái)自成體組織(如造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞),多能性(可分化為特定組織細(xì)胞),應(yīng)用于白血病治療(骨髓移植)。(四)生態(tài)工程1.基本原理物質(zhì)循環(huán)再生原理:核心原理,如沼氣池(秸稈→沼氣→沼渣肥田,實(shí)現(xiàn)物質(zhì)循環(huán));物種多樣性原理:增加物種豐富度,提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性,如森林生態(tài)系統(tǒng)(比草原生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定);協(xié)調(diào)與平衡原理:控制種群數(shù)量,避免過(guò)度放牧(如草原載畜量);整體性原理:考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)三者統(tǒng)一,如農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程(?;~(yú)塘);系統(tǒng)學(xué)與工程學(xué)原理:系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理(如?;~(yú)塘的食物鏈結(jié)構(gòu),提高能量利用率);系統(tǒng)整體性原理(如地衣,藻類(lèi)與真菌共生,1+1>2)。2.實(shí)例農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程:?;~(yú)塘(?!Q→魚(yú)→泥→桑,物質(zhì)循環(huán)利用);小流域綜合治理生態(tài)工程:退耕還林還草(治理水土流失);大區(qū)域生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)工程:三北防護(hù)林(防風(fēng)固沙);濕地生態(tài)恢復(fù)工程:退耕還濕(保護(hù)濕地生態(tài)系統(tǒng),如紅樹(shù)林);礦區(qū)廢棄地生態(tài)恢復(fù)工程:植被恢復(fù)(種植耐貧瘠植物,如沙棘)。三、選修二:生物科學(xué)與社會(huì)核心主題:聯(lián)系社會(huì)實(shí)際,探討生物科學(xué)與人類(lèi)社會(huì)的關(guān)系,強(qiáng)調(diào)“倫理與應(yīng)用”。(一)生物資源的合理利用森林資源:可持續(xù)采伐(如擇伐,保留幼樹(shù)),避免皆伐;草原資源:劃區(qū)輪牧(合理分配放牧區(qū)域,恢復(fù)草原生產(chǎn)力);水資源:節(jié)水農(nóng)業(yè)(如滴灌、噴灌,減少水資源浪費(fèi));生物多樣性保護(hù):就地保護(hù)(最有效,如自然保護(hù)區(qū)、國(guó)家公園);易地保護(hù)(如動(dòng)物園、植物園);離體保護(hù)(如種子庫(kù)、基因庫(kù))。(二)生物倫理與安全轉(zhuǎn)基因生物的安全性:食物安全(如轉(zhuǎn)基因大豆是否含有過(guò)敏原);生物安全(如轉(zhuǎn)基因作物是否會(huì)成為入侵物種);環(huán)境安全(如轉(zhuǎn)基因作物是否會(huì)影響非目標(biāo)生物);克隆人的倫理問(wèn)題:生殖性克?。◤?fù)制人類(lèi)個(gè)體,違反倫理)vs治療性克?。ㄓ每寺〖夹g(shù)生產(chǎn)組織器官,用于醫(yī)療);試管嬰兒的倫理問(wèn)題:性別選擇(可能導(dǎo)致性別比例失衡)、多胎妊娠(增加母嬰風(fēng)險(xiǎn));基因檢測(cè)的倫理問(wèn)題:隱私保護(hù)(如基因信息泄露可能導(dǎo)致歧視)、基因歧視(如保險(xiǎn)公司拒絕承保攜帶致病基因的人)。四、復(fù)習(xí)建議1.抓核心概念:重點(diǎn)掌握基因工程的工具與步驟、細(xì)胞工程的原理與應(yīng)用、胚胎工程的核心技術(shù)(胚胎移植)、生態(tài)工程的原理,這些是高考的高頻考點(diǎn)。2.重實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié):選修一的實(shí)驗(yàn)操作(如無(wú)菌技術(shù)、接種方法、提取方法)、選修三的技術(shù)流程(如基因表達(dá)載體的構(gòu)建、植物組織培養(yǎng)的步驟
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