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2025年醫(yī)衛(wèi)類病理學(xué)技術(shù)(中級(jí))專業(yè)知識(shí)-專業(yè)實(shí)踐能力參考題庫含答案解析一、單選題(共35題)1.在病理組織處理過程中,Bouin固定液最適用于以下哪種組織的固定?【選項(xiàng)】A.淋巴結(jié)活檢組織B.肝臟穿刺標(biāo)本C.睪丸組織D.腦組織【參考答案】C【解析】A選項(xiàng)錯(cuò)誤,淋巴結(jié)固定通常使用中性緩沖福爾馬林;B選項(xiàng)錯(cuò)誤,Bouin液對(duì)肝細(xì)胞有收縮作用,易導(dǎo)致假象;C選項(xiàng)正確,Bouin液含苦味酸能軟化致密結(jié)締組織,特別適用于睪丸、卵巢等富含纖維結(jié)構(gòu)的器官;D選項(xiàng)錯(cuò)誤,腦組織采用福爾馬林固定可保持形態(tài)穩(wěn)定。2.HE染色中酸性染料伊紅主要染色的成分是?【選項(xiàng)】A.細(xì)胞核B.細(xì)胞質(zhì)及間質(zhì)膠原C.彈力纖維D.脂質(zhì)【參考答案】B【解析】A選項(xiàng)錯(cuò)誤,細(xì)胞核由堿性染料蘇木精染色;B選項(xiàng)正確,伊紅為酸性染料,結(jié)合細(xì)胞質(zhì)內(nèi)帶正電荷的蛋白質(zhì)(如血紅蛋白、肌纖維蛋白)及膠原纖維;C選項(xiàng)錯(cuò)誤,彈力纖維需特殊染色(如Verhoeff法);D選項(xiàng)錯(cuò)誤,脂質(zhì)需冷凍切片后特殊染色(如蘇丹Ⅲ)。3.用于顯示基底膜的常用特殊染色方法是?【選項(xiàng)】A.PAS染色B.剛果紅染色C.Masson三色染色D.維多利亞藍(lán)染色【參考答案】A【解析】A選項(xiàng)正確,PAS染色通過顯示基膜糖蛋白成分使其呈紫紅色;B選項(xiàng)錯(cuò)誤,剛果紅用于淀粉樣物質(zhì);C選項(xiàng)錯(cuò)誤,Masson主要用于區(qū)分膠原與肌纖維;D選項(xiàng)錯(cuò)誤,維多利亞藍(lán)針對(duì)彈力纖維。4.免疫組化染色中,內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑通常選用?【選項(xiàng)】A.3%過氧化氫B.鹽酸乙醇C.胰蛋白酶D.檸檬酸鈉緩沖液【參考答案】A【解析】A選項(xiàng)正確,3%H?O?可消除紅細(xì)胞和白細(xì)胞的過氧化物酶活性;B選項(xiàng)錯(cuò)誤,鹽酸乙醇用于分化蘇木精染色;C選項(xiàng)錯(cuò)誤,胰蛋白酶用于抗原修復(fù);D選項(xiàng)錯(cuò)誤,檸檬酸鈉緩沖液為抗原修復(fù)液。5.診斷淀粉樣變性最可靠的特異性染色是?【選項(xiàng)】A.剛果紅染色(偏振光下呈蘋果綠雙折光)B.HE染色(均質(zhì)粉紅色)C.普魯士藍(lán)染色(藍(lán)色顆粒)D.阿辛藍(lán)染色(藍(lán)色黏液)【參考答案】A【解析】A選項(xiàng)正確,剛果紅結(jié)合淀粉樣蛋白后在偏振光下產(chǎn)生特征性雙折光;B選項(xiàng)錯(cuò)誤,HE染色僅顯示非特異性粉染;C選項(xiàng)錯(cuò)誤,普魯士藍(lán)針對(duì)含鐵血黃素;D選項(xiàng)錯(cuò)誤,阿辛藍(lán)用于酸性黏多糖。6.組織脫水時(shí)酒精梯度濃度依次為?【選項(xiàng)】A.低濃度→中濃度→高濃度B.高濃度→低濃度→中濃度C.高濃度→中濃度→低濃度D.任意順序均可【參考答案】A【解析】A選項(xiàng)正確,標(biāo)準(zhǔn)化流程為70%→80%→95%→無水乙醇,避免組織劇烈收縮;B/C選項(xiàng)錯(cuò)誤,從高濃度開始會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞外液滲透壓驟增,引起組織收縮變形;D選項(xiàng)違反脫水基本原則。7.顯示黑色素最有效的染色方法是?【選項(xiàng)】A.伊紅復(fù)染B.Fontana-Masson銀染法C.蘇木精染色D.油紅O染色【參考答案】B【解析】A選項(xiàng)錯(cuò)誤,黑色素在HE中雖可見但特異性低;B選項(xiàng)正確,F(xiàn)ontana-Masson通過銀還原使黑色素呈黑色;C選項(xiàng)錯(cuò)誤,蘇木精無法特異性顯示;D選項(xiàng)錯(cuò)誤,油紅O用于脂質(zhì)。8.下列哪種固定液需避免用于電鏡樣本?【選項(xiàng)】A.戊二醛B.多聚甲醛C.含汞的Zenker固定液D.鋨酸【參考答案】C【解析】A/B/D均為電鏡常用固定液;C選項(xiàng)正確,Zenker液中汞會(huì)干擾電鏡成像且難徹底清除。9.在Masson三色染色中,肌纖維通常呈現(xiàn)的顏色是?【選項(xiàng)】A.藍(lán)色B.綠色C.紅色D.黃色【參考答案】C【解析】A選項(xiàng)錯(cuò)誤,膠原纖維呈藍(lán)色;B選項(xiàng)為早期染色結(jié)果;C選項(xiàng)正確,肌纖維因與麗春紅結(jié)合呈紅色;D選項(xiàng)與染色無關(guān)。10.針對(duì)結(jié)核分枝桿菌的抗酸染色中,脫色步驟使用的試劑是?【選項(xiàng)】A.95%乙醇B.3%鹽酸乙醇C.5%石炭酸D.0.5%高錳酸鉀【參考答案】B【解析】A選項(xiàng)錯(cuò)誤,普通乙醇無脫色能力;B選項(xiàng)正確,3%鹽酸乙醇可脫除非抗酸菌染料保留結(jié)核桿菌紅色;C/D選項(xiàng)為其他染色步驟試劑。11.關(guān)于組織固定液的選擇,下列說法錯(cuò)誤的是?【選項(xiàng)】A.常規(guī)外科病理標(biāo)本首選中性福爾馬林固定B.Bouin固定液特別適用于睪丸、骨髓等組織C.含汞固定液(如Zenker液)需染色前用碘處理去除汞結(jié)晶D.4%多聚甲醛固定速度比10%福爾馬林更快【參考答案】D【解析】1.選項(xiàng)A正確,中性福爾馬林是常規(guī)組織固定金標(biāo)準(zhǔn),能有效保存組織結(jié)構(gòu)。2.選項(xiàng)B正確,Bouin液含飽和苦味酸,對(duì)富含糖原或致密組織(如睪丸)固定效果更佳,但需控制固定時(shí)間以防組織脆化。3.選項(xiàng)C正確,汞鹽類固定液殘留結(jié)晶會(huì)干擾染色,需用Lugol碘液處理后再用硫代硫酸鈉脫碘。4.選項(xiàng)D錯(cuò)誤,4%多聚甲醛的固定速度較10%福爾馬林更慢,因后者含更高濃度甲醛單體,滲透力更強(qiáng)。12.Masson三色染色中,膠原纖維的典型顏色是?【選項(xiàng)】A.紅色B.綠色C.藍(lán)色D.黃色【參考答案】C【解析】1.Masson三色染色用于區(qū)分膠原纖維(藍(lán)色)、肌纖維(紅色)和胞核(深褐色)。2.染色過程:鐵蘇木素染核→麗春紅酸性復(fù)紅染肌纖維→磷鉬酸處理分化→苯胺藍(lán)染膠原纖維。3.易錯(cuò)點(diǎn):若磷鉬酸分化不足,膠原纖維可能殘留紅色;分化過度則肌纖維著色變淺。13.免疫組化染色中“邊緣效應(yīng)”主要由以下哪種原因引起?【選項(xiàng)】A.一抗?jié)舛冗^高B.抗原修復(fù)不充分C.組織干燥D.封片劑過量【參考答案】C【解析】1.邊緣效應(yīng)表現(xiàn)為切片外周染色強(qiáng)于中央?yún)^(qū)域,主要因組織干燥導(dǎo)致抗體非特異性結(jié)合(選項(xiàng)C正確)。2.一抗?jié)舛冗^高會(huì)引起全片背景染色加深(A錯(cuò));抗原修復(fù)不充分導(dǎo)致全片陰性(B錯(cuò));封片劑過量影響觀察但不改變?nèi)旧植迹―錯(cuò))。14.組織脫水透明步驟中,二甲苯的作用是?【選項(xiàng)】A.取代組織中的乙醇并與石蠟互溶B.增強(qiáng)細(xì)胞膜通透性C.去除核酸D.固定蛋白質(zhì)【參考答案】A【解析】1.脫水透明流程:梯度乙醇脫水→二甲苯透明→浸蠟包埋。2.二甲苯作為中間溶劑,既能置換乙醇又能溶解石蠟(A正確),其折射率接近組織蛋白,使組織透明化。3.其他選項(xiàng):TritonX-100可增強(qiáng)膜通透性(B錯(cuò));DNase去除核酸(C錯(cuò));固定由醛類完成(D錯(cuò))。15.HE染色中,若將伊紅與蘇木素染色順序顛倒,切片將呈現(xiàn)?【選項(xiàng)】A.細(xì)胞核藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)紅色(正常)B.細(xì)胞核紅色,細(xì)胞質(zhì)藍(lán)色C.細(xì)胞核與胞質(zhì)均藍(lán)色D.細(xì)胞核與胞質(zhì)均紅色【參考答案】B【解析】1.正確順序:蘇木素染核→分化→伊紅染質(zhì)。2.若先染伊紅(胞質(zhì)染料),后續(xù)酸性蘇木素會(huì)覆蓋伊紅且無法通過鹽酸乙醇有效分化(B正確)。3.鹽酸乙醇僅能分化結(jié)合在核酸上的蘇木素,對(duì)伊紅無作用,故胞核紅色、胞質(zhì)藍(lán)色。16.常用于顯示黏液的染色法是?【選項(xiàng)】A.剛果紅染色B.PAS染色C.維多利亞藍(lán)染色D.普魯士藍(lán)染色【參考答案】B【解析】1.PAS(過碘酸-Schiff)反應(yīng)可將黏多糖中乙二醇基氧化為醛基,再與Schiff試劑結(jié)合呈紫紅色(B正確)。2.剛果紅染淀粉樣物質(zhì)(A錯(cuò));維多利亞藍(lán)染彈性纖維(C錯(cuò));普魯士藍(lán)染含鐵血黃素(D錯(cuò))。17.制備冷凍切片時(shí),最關(guān)鍵的速凍溫度范圍是?【選項(xiàng)】A.-4℃至-10℃B.-15℃至-25℃C.-30℃至-40℃D.-70℃以下【參考答案】B【解析】1.冷凍切片需在-15℃~-25℃(B正確)實(shí)現(xiàn)“玻璃化凍結(jié)”,溫度過高易形成冰晶損傷組織(如>-10℃),過低(如液氮)易致組織脆裂。2.操作要點(diǎn):用OCT包埋劑包裹組織,速凍時(shí)間控制在1分鐘內(nèi)。18.下列封片劑中適用于長期保存的是?【選項(xiàng)】A.甘油明膠B.中性樹膠C.DPXD.Apathy膠【參考答案】B【解析】1.中性樹膠(加拿大樹膠)折射率1.52接近玻璃,不易氧化發(fā)黃,可永久封片(B正確)。2.甘油明膠常用于脂肪染色臨時(shí)封片(A錯(cuò));DPX和Apathy膠易隨時(shí)間老化(C、D錯(cuò))。19.石蠟切片時(shí)發(fā)現(xiàn)組織“發(fā)脆”可能原因是?【選項(xiàng)】A.脫水乙醇濃度梯度過陡B.透明時(shí)間不足C.浸蠟溫度過高D.固定時(shí)間過長【參考答案】C【解析】1.組織發(fā)脆通常因浸蠟溫度>65℃(C正確),導(dǎo)致蛋白質(zhì)過度硬化。2.乙醇梯度不當(dāng)引起收縮(A錯(cuò));透明不足影響浸蠟均勻性(B錯(cuò));固定過長主要影響抗原性(D錯(cuò))。20.下列哪種染色法可特異性顯示黑色素?【選項(xiàng)】A.鍍銀染色B.Masson-Fontana染色C.油紅O染色D.阿爾辛藍(lán)染色【參考答案】B【解析】1.Masson-Fontana法利用黑色素的還原性,使氨銀液被還原為金屬銀呈黑色顆粒(B正確)。2.鍍銀染色用于神經(jīng)纖維(A錯(cuò));油紅O染脂質(zhì)(C錯(cuò));阿爾辛藍(lán)染酸性黏多糖(D錯(cuò))。21.關(guān)于組織固定中福爾馬林的應(yīng)用,下列描述錯(cuò)誤的是?【選項(xiàng)】A.福爾馬林固定可使蛋白質(zhì)交聯(lián)B.過度固定可能導(dǎo)致組織硬化C.固定時(shí)間過長會(huì)增強(qiáng)抗原保存效果D.常用濃度為10%中性緩沖福爾馬林【參考答案】C【解析】①福爾馬林固定通過使蛋白質(zhì)交聯(lián)(A正確)保持組織形態(tài),但過度固定會(huì)致組織硬化(B正確);②10%中性緩沖福爾馬林是常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)固定液(D正確);③固定時(shí)間過長會(huì)遮蔽抗原表位,降低免疫組化中抗原的檢出率(C錯(cuò)誤)。22.下列哪種特殊染色最適合用于黏液的顯示?【選項(xiàng)】A.剛果紅染色B.普魯士藍(lán)染色C.阿爾辛藍(lán)染色D.蘇丹Ⅲ染色【參考答案】C【解析】①阿爾辛藍(lán)染色特異性結(jié)合酸性黏液(如氣管、胃腸道黏液),呈藍(lán)色(C正確);②剛果紅染淀粉樣物質(zhì),普魯士藍(lán)染含鐵血黃素,蘇丹Ⅲ染中性脂肪(A、B、D均不符合題意)。23.HE染色中,分化步驟的主要作用是?【選項(xiàng)】A.增強(qiáng)細(xì)胞核著色B.去除細(xì)胞質(zhì)多余染料C.促進(jìn)組織透明化D.提高切片附著力【參考答案】B【解析】①分化指用1%鹽酸乙醇處理切片,選擇性脫去胞質(zhì)和結(jié)締組織中過度結(jié)合的蘇木素(B正確);②胞核因結(jié)合牢固保留顏色,后經(jīng)藍(lán)化恢復(fù)藍(lán)色(A錯(cuò)誤);透明化與脫水透明步驟相關(guān)(C錯(cuò)誤),附著力與載玻片處理有關(guān)(D錯(cuò)誤)。24.冰凍切片制作中,為減少冰晶形成應(yīng)優(yōu)先采?。俊具x項(xiàng)】A.緩慢降溫至-20℃B.使用OCT包埋劑速凍C.延長固定時(shí)間D.增加切片厚度【參考答案】B【解析】①OCT包埋劑可快速滲透組織并導(dǎo)熱,配合液氮或預(yù)冷異戊烷實(shí)現(xiàn)速凍(B正確);②緩慢降溫會(huì)促進(jìn)冰晶形成(A錯(cuò)誤);冰凍切片無需固定(C錯(cuò)誤),厚度增加會(huì)加劇細(xì)胞變形(D錯(cuò)誤)。25.免疫組化中抗原修復(fù)的常用方法是?【選項(xiàng)】A.胰酶消化法B.高壓加熱法C.微波處理法D.以上均可用【參考答案】D【解析】①抗原修復(fù)方法包括蛋白酶消化(如胰酶)和熱誘導(dǎo)修復(fù)(高壓、微波、水浴加熱)(D正確);②高壓法適用于多數(shù)抗體,微波法操作簡便,酶消化對(duì)某些膜蛋白更有效(A、B、C均為子集)。26.乳腺癌病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(Nottingham系統(tǒng))不包括下列哪項(xiàng)?【選項(xiàng)】A.腺管形成比例B.核多形性程度C.核分裂象計(jì)數(shù)D.脈管侵犯情況【參考答案】D【解析】①Nottingham分級(jí)系統(tǒng)由腺管形成、核多形性、核分裂象三項(xiàng)組成(A、B、C均納入);②脈管侵犯屬于分期指標(biāo)(D錯(cuò)誤)。27.免疫組化檢測(cè)中“內(nèi)對(duì)照”指?【選項(xiàng)】A.已知陽性組織對(duì)照B.待檢組織中的正常細(xì)胞C.空白試劑對(duì)照D.陰性組織對(duì)照【參考答案】B【解析】①內(nèi)對(duì)照指待檢組織內(nèi)應(yīng)表達(dá)待測(cè)抗原的正常細(xì)胞(如淋巴結(jié)中T細(xì)胞為CD3內(nèi)對(duì)照)(B正確);②陽性對(duì)照為獨(dú)立樣本(A錯(cuò)誤);空白對(duì)照檢測(cè)非特異性結(jié)合(C錯(cuò)誤),陰性對(duì)照排除假陽性(D錯(cuò)誤)。28.電子顯微鏡可觀察到的結(jié)構(gòu)是?【選項(xiàng)】A.細(xì)胞核染色質(zhì)分布B.橋粒連接結(jié)構(gòu)C.線粒體嵴形態(tài)D.以上均可【參考答案】D【解析】①電鏡分辨率達(dá)納米級(jí),可觀察染色質(zhì)、細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)及連接裝置(D正確);②光鏡僅能見核輪廓(A不完整),橋粒和線粒體嵴需電鏡觀察(B、C均為子集)。29.脫鈣液選擇錯(cuò)誤的組合是?【選項(xiàng)】A.骨組織——硝酸脫鈣液B.含鈣小標(biāo)本——EDTA脫鈣C.快速脫鈣——甲酸-鹽酸混合液D.保留抗原性——甲酸溶液【參考答案】D【解析】①甲酸會(huì)破壞抗原性,EDTA脫鈣速度慢但能保護(hù)抗原(D錯(cuò)誤);②硝酸適合致密骨(A正確),混合酸加快脫鈣(C正確),小標(biāo)本可用溫和的EDTA(B正確)。30.包埋組織時(shí)最重要的方向要求是?【選項(xiàng)】A.最大面朝下B.最小面朝下C.包含病灶全層D.與切片刀平行【參考答案】C【解析】①包埋需確保切片能完整顯示病灶(如腫瘤浸潤深度)(C正確);②朝向以易切為原則(如皮膚垂直包埋),非固定朝上下面(A、B錯(cuò)誤);組織與刀平行屬切片操作要求(D錯(cuò)誤)。31.在H&E染色過程中,分化的目的是什么?【選項(xiàng)】A.增強(qiáng)染色劑對(duì)細(xì)胞核的親和力B.去除多余的蘇木精染料C.促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)的伊紅染色D.調(diào)節(jié)染液的pH值【參考答案】B【解析】分化是H&E染色關(guān)鍵步驟,目的是通過酸性分化液(如1%鹽酸酒精)選擇性去掉與細(xì)胞質(zhì)結(jié)合的多余蘇木精,保留細(xì)胞核內(nèi)緊密結(jié)合的蘇木精,避免細(xì)胞核與背景過度著色。A錯(cuò)誤,分化不提升核親和力;C錯(cuò)誤,分化針對(duì)核而非質(zhì);D錯(cuò)誤,pH調(diào)節(jié)非分化主要目的。32.PAS染色常用于檢測(cè)組織中的哪種物質(zhì)?【選項(xiàng)】A.膠原纖維B.糖原及中性黏液物質(zhì)C.彈力纖維D.黑色素【參考答案】B【解析】PAS(過碘酸-Schiff反應(yīng))通過過碘酸氧化糖類羥基生成醛基,與Schiff試劑結(jié)合顯紅色,特異性標(biāo)記糖原、中性黏液及基膜等含多糖物質(zhì)。A常用Masson三色染色;C用Verhoeff染色;D需Fontana-Masson染色。33.制作冰凍切片時(shí),組織塊理想的冷凍溫度范圍是?【選項(xiàng)】A.-4℃至0℃B.-10℃至-15℃C.-20℃至-25℃D.-30℃至-40℃【參考答案】C【解析】-20℃至-25℃是常用冷凍溫度,既能保證組織快速凍結(jié)減少冰晶形成,又避免溫度過低導(dǎo)致組織脆性增加。A溫度過高無法凝固;B可能冰晶較多;D易致切片碎裂。34.免疫組化技術(shù)中,用于抗原修復(fù)的酶消化法最常用的是?【選項(xiàng)】A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.核酸酶D.脂肪酶【參考答案】A【解析】胰蛋白酶(常用濃度0.1%消化10分鐘)能水解蛋白交聯(lián),解除甲醛固定引起的抗原遮蔽。B適用于富含膠原的組織;C、D與抗原修復(fù)無關(guān)。35.Masson三色染色可將膠原纖維染成何種顏色?【選項(xiàng)】A.紅色B.藍(lán)色C.綠色D.黃色【參考答案】B【解析】Masson染色中,膠原纖維呈藍(lán)色或綠色(取決于染料配比),肌肉和胞質(zhì)呈紅色,胞核黑藍(lán)色。A為肌纖維;C可能是特殊配比結(jié)果;D常為彈力纖維染色結(jié)果。二、多選題(共35題)1.1.關(guān)于組織固定液的選用,下列說法正確的有:A.Bouin液適用于睪丸組織的固定B.甲醛溶液固定組織時(shí)間越長效果越好C.丙酮常用于快速冷凍切片的固定D.中性緩沖甲醛可較好保存抗原活性E.酒精-甲醛混合液(AF液)可減少組織收縮【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、C、D、E【解析】①Bouin液含苦味酸,對(duì)睪丸、胃腸道等組織固定效果顯著(A正確);②甲醛固定時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致組織過硬、抗原失活(B錯(cuò)誤);③丙酮滲透力強(qiáng),是冷凍切片的常用固定劑(C正確);④中性緩沖甲醛(NBF)能維持pH穩(wěn)定,減少抗原損傷(D正確);⑤AF液中酒精可減少甲醛引起的組織收縮(E正確)。2.2.下列特殊染色方法與主要應(yīng)用匹配錯(cuò)誤的是:A.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)B.六胺銀染色——真菌C.普魯士藍(lán)染色——含鐵血黃素D.PAS染色——中性黏液E.維多利亞藍(lán)染色——彈力纖維【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】B【解析】①六胺銀染色實(shí)際用于基底膜、真菌和抗酸桿菌(B錯(cuò)誤);②剛果紅檢測(cè)淀粉樣物質(zhì)呈現(xiàn)橘紅色(A正確);③普魯士藍(lán)特異性顯示三價(jià)鐵(C正確);④PAS染色可標(biāo)記中性黏液、糖原等(D正確);⑤維多利亞藍(lán)是彈力纖維特異性染色劑(E正確)。3.3.免疫組化技術(shù)中假陰性的產(chǎn)生原因包括:A.抗原修復(fù)不充分B.一抗?jié)舛冗^高C.DAB顯色時(shí)間過長D.組織過固定E.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、D【解析】①抗原修復(fù)不足導(dǎo)致抗原表位暴露不全(A正確);②一抗?jié)舛冗^高會(huì)引起非特異性結(jié)合而非假陰性(B錯(cuò)誤);③DAB顯色過長導(dǎo)致背景過深(C錯(cuò)誤);④過度固定使抗原交聯(lián)失活(D正確);⑤內(nèi)源性酶未阻斷將導(dǎo)致假陽性(E錯(cuò)誤)。4.4.病理實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)措施正確的是:A.銳器直接用手分離針頭與注射器B.處理傳染性標(biāo)本時(shí)戴雙層手套C.甲醛泄漏用10%氨水中和D.生物安全柜內(nèi)進(jìn)行結(jié)核標(biāo)本處理E.標(biāo)本離心后靜置5分鐘再開蓋【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】B、D、E【解析】①銳器分離必須使用器械(A錯(cuò)誤);②雙層手套降低感染風(fēng)險(xiǎn)(B正確);③甲醛泄漏應(yīng)使用活性炭吸附(C錯(cuò)誤);④生物安全柜可有效防護(hù)氣溶膠(D正確);⑤靜置減少氣溶膠擴(kuò)散(E正確)。5.5.分子病理實(shí)驗(yàn)中防止PCR污染的措施是:A.實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作B.使用帶濾芯吸頭C.反應(yīng)體系添加dUTP/UNG酶D.紫外線照射擴(kuò)增產(chǎn)物E.定期更換手套【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、B、C、E【解析】①分區(qū)操作(試劑準(zhǔn)備區(qū)/樣本處理區(qū)/擴(kuò)增區(qū))防止交叉污染(A正確);②濾芯吸頭減少氣溶膠傳遞(B正確);③dUTP/UNG酶可降解既往產(chǎn)物(C正確);④紫外線僅能消除表面污染(D錯(cuò)誤);⑤換手套避免核酸轉(zhuǎn)移(E正確)。6.6.石蠟切片HE染色步驟的正確順序是:A.脫蠟→水化→蘇木素染色→伊紅染色→脫水→透明→封片B.脫蠟→水化→伊紅染色→蘇木素染色→分化→返藍(lán)→脫水封片C.脫蠟→蘇木素染色→分化→返藍(lán)→伊紅染色→脫水透明封片D.脫蠟→水化→蘇木素染色→分化→返藍(lán)→伊紅染色→脫水封片E.水化→脫蠟→蘇木素染色→伊紅染色→脫水→透明→封片【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】D【解析】正確順序:脫蠟→水化→蘇木素染色(細(xì)胞核)→鹽酸酒精分化→返藍(lán)→伊紅染色(細(xì)胞質(zhì))→梯度酒精脫水→二甲苯透明→封片。其他選項(xiàng)中染色順序、分化步驟缺失或顛倒均錯(cuò)誤。7.7.影響冷凍切片質(zhì)量的關(guān)鍵因素包括:A.組織冷凍溫度維持在-25℃B.切片厚度通常為2-3μmC.使用OCT包埋劑減少冰晶D.組織固定后再冷凍E.防卷板溫度高于切片溫度【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、C【解析】①冷凍溫度-20℃~-25℃最適(A正確);②冷凍切片厚度一般4-8μm(B錯(cuò)誤);③OCT包埋劑可優(yōu)化切片質(zhì)量(C正確);④新鮮組織直接冷凍(D錯(cuò)誤);⑤防卷板溫度需低于切片溫度(E錯(cuò)誤)。8.8.組織脫水透明操作規(guī)范是:A.酒精梯度為70%→80%→95%→100%B.二甲苯Ⅰ、Ⅱ缸各作用15分鐘C.大塊組織需延長脫水時(shí)間D.脫水劑出現(xiàn)渾濁立即更換E.透明后組織呈現(xiàn)半透明狀【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、C、D、E【解析】①酒精梯度應(yīng)逐級(jí)遞增(A正確);②二甲苯每缸作用10分鐘足矣(B錯(cuò)誤);③大塊組織需延長脫水時(shí)間至2-4小時(shí)(C正確);④渾濁表明試劑失效(D正確);⑤透明成功的組織呈蠟質(zhì)光澤(E正確)。9.9.熒光顯微鏡使用注意事項(xiàng)正確的是:A.汞燈關(guān)閉后需冷卻15分鐘再重啟B.標(biāo)本觀察時(shí)需用防淬滅劑C.激發(fā)濾光片選擇依據(jù)熒光素發(fā)射波長D.使用油鏡時(shí)選用無熒光鏡油E.定期校準(zhǔn)光路系統(tǒng)【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、B、D、E【解析】①汞燈重啟需冷卻防爆炸(A正確);②防淬滅劑減緩熒光衰減(B正確);③激發(fā)濾光片對(duì)應(yīng)熒光素吸收波長(C錯(cuò)誤);④專用無熒光鏡油避免干擾(D正確);⑤定期校準(zhǔn)保證成像質(zhì)量(E正確)。10.10.關(guān)于微生物特殊染色,說法正確的是:A.抗酸染色中石碳酸復(fù)紅為初染劑B.革蘭氏染色脫色劑為95%酒精C.吉姆薩染色適用于寄生蟲檢測(cè)D.墨汁負(fù)染用于隱球菌莢膜觀察E.弱抗酸染色可鑒別諾卡菌【選項(xiàng)】A,B,C,D,E【參考答案】A、C、D、E【解析】①抗酸染色以石碳酸復(fù)紅初染(A正確);②革蘭氏脫色劑為丙酮酒精混合液(B錯(cuò)誤);③吉姆薩染瘧原蟲、弓形蟲等(C正確);④墨汁負(fù)染凸顯莢膜透明區(qū)(D正確);⑤弱抗酸染色區(qū)分諾卡菌與結(jié)核桿菌(E正確)。11.關(guān)于組織固定液的正確使用,下列描述正確的是?A.中性緩沖甲醛是最常用的組織固定液,能較好保存細(xì)胞結(jié)構(gòu)和抗原性B.戊二醛固定劑適用于需要長期保存的超微結(jié)構(gòu)研究C.Bouin固定液因含苦味酸,特別適用于富含脂肪組織的固定D.鋅-甲醛固定液對(duì)核膜蛋白的保存效果優(yōu)于常規(guī)甲醛E.固定液體積應(yīng)為組織體積的5-10倍,固定時(shí)間不超過24小時(shí)【選項(xiàng)】A.中性緩沖甲醛是最常用的組織固定液,能較好保存細(xì)胞結(jié)構(gòu)和抗原性B.戊二醛固定劑適用于需要長期保存的超微結(jié)構(gòu)研究C.Bouin固定液因含苦味酸,特別適用于富含脂肪組織的固定D.鋅-甲醛固定液對(duì)核膜蛋白的保存效果優(yōu)于常規(guī)甲醛E.固定液體積應(yīng)為組織體積的5-10倍,固定時(shí)間不超過24小時(shí)【參考答案】ABDE【解析】1.A正確:中性緩沖甲醛是病理常規(guī)固定液,pH7.2-7.4可減少人工假象2.B正確:戊二醛能更好保存細(xì)胞超微結(jié)構(gòu),適用于電鏡樣本3.C錯(cuò)誤:Bouin液含醋酸苦味酸,適用于睪丸、胃腸等組織,但會(huì)溶解脂肪4.D正確:鋅-甲醛可改善核膜蛋白保存,減少抗原丟失5.E正確:固定液量需充足,過長固定會(huì)引起組織硬化12.下列哪些特殊染色方法可用于鑒別膠原纖維?A.Masson三色染色B.PAS染色C.維多利亞藍(lán)染色D.VanGieson染色E.剛果紅染色【選項(xiàng)】A.Masson三色染色B.PAS染色C.維多利亞藍(lán)染色D.VanGieson染色E.剛果紅染色【參考答案】AD【解析】1.A正確:Masson染色膠原呈藍(lán)色/綠色,肌纖維紅色2.D正確:VanGieson染色膠原呈紅色,肌纖維黃色3.B錯(cuò)誤:PAS染色顯示糖原和基底膜4.C錯(cuò)誤:維多利亞藍(lán)顯示彈性纖維5.E錯(cuò)誤:剛果紅用于淀粉樣物染色13.關(guān)于免疫組化技術(shù)質(zhì)控,必須包含的對(duì)照是?A.陽性組織對(duì)照B.陰性組織對(duì)照C.空白對(duì)照(一抗替代)D.內(nèi)對(duì)照(組織自身表達(dá))E.同型對(duì)照【選項(xiàng)】A.陽性組織對(duì)照B.陰性組織對(duì)照C.空白對(duì)照(一抗替代)D.內(nèi)對(duì)照(組織自身表達(dá))E.同型對(duì)照【參考答案】ABC【解析】1.A正確:驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)有效性2.B正確:排除非特異性染色3.C正確:確認(rèn)一抗特異性4.D錯(cuò)誤:非必須,僅當(dāng)組織存在已知表達(dá)時(shí)可選5.E錯(cuò)誤:流式常用,免疫組化非必需14.分子病理檢測(cè)中,F(xiàn)FPE樣本可能出現(xiàn)的問題是?A.DNA核酸片段化B.RNA降解嚴(yán)重C.蛋白抗原表位破壞D.存在甲醛交聯(lián)致PCR抑制物E.胞內(nèi)代謝物保存良好【選項(xiàng)】A.DNA核酸片段化B.RNA降解嚴(yán)重C.蛋白抗原表位破壞D.存在甲醛交聯(lián)致PCR抑制物E.胞內(nèi)代謝物保存良好【參考答案】ABCD【解析】1.A正確:石蠟包埋致DNA斷裂成150-200bp片段2.B正確:RNA更易降解,提取需快速3.C正確:甲醛交聯(lián)掩蔽抗原表位4.D正確:交聯(lián)產(chǎn)物抑制Taq酶活性5.E錯(cuò)誤:代謝物在固定過程中基本流失15.下列哪些屬于自動(dòng)組織處理機(jī)的程序參數(shù)?A.脫水乙醇梯度濃度B.透明劑浸泡時(shí)間C.石蠟浸漬溫度D.真空壓力值E.包埋模具預(yù)冷時(shí)間【選項(xiàng)】A.脫水乙醇梯度濃度B.透明劑浸泡時(shí)間C.石蠟浸漬溫度D.真空壓力值E.包埋模具預(yù)冷時(shí)間【參考答案】ABC【解析】1.A正確:標(biāo)準(zhǔn)程序含70%-95%-100%乙醇梯度2.B正確:二甲苯處理時(shí)間需精確設(shè)置3.C正確:石蠟溫度通常設(shè)定在56-60℃4.D錯(cuò)誤:真空處理為可選功能,非基本參數(shù)5.E錯(cuò)誤:屬于包埋環(huán)節(jié),非處理機(jī)控制參數(shù)16.關(guān)于冷凍切片技術(shù)要點(diǎn),正確的是?A.OCT包埋劑需完全覆蓋組織邊緣B.速凍溫度應(yīng)低于-35℃C.切片厚度通常為4-6μmD.室溫放置10分鐘后固定E.甲醇固定優(yōu)于甲醛【選項(xiàng)】A.OCT包埋劑需完全覆蓋組織邊緣B.速凍溫度應(yīng)低于-35℃C.切片厚度通常為4-6μmD.室溫放置10分鐘后固定E.甲醇固定優(yōu)于甲醛【參考答案】ABCE【解析】1.A正確:防止切片時(shí)組織撕裂2.B正確:快速冷凍減少冰晶形成3.C正確:薄切片可提高診斷準(zhǔn)確性4.D錯(cuò)誤:應(yīng)立即固定防止干燥5.E正確:甲醇固定快且不影響后續(xù)免疫染色17.下列匹配正確的特殊染色是?A.抗酸染色——結(jié)核桿菌B.六胺銀染色——真菌C.普魯士藍(lán)染色——含鐵血黃素D.阿爾辛藍(lán)染色——中性黏液E.天狼星紅染色——網(wǎng)狀纖維【選項(xiàng)】A.抗酸染色——結(jié)核桿菌B.六胺銀染色——真菌C.普魯士藍(lán)染色——含鐵血黃素D.阿爾辛藍(lán)染色——中性黏液E.天狼星紅染色——網(wǎng)狀纖維【參考答案】ABC【解析】1.A正確:抗酸桿菌呈紅色2.B正確:GMS染色顯示真菌黑色輪廓3.C正確:鐵離子與亞鐵氰化鉀反應(yīng)呈藍(lán)色4.D錯(cuò)誤:阿爾辛藍(lán)染酸性黏液5.E錯(cuò)誤:天狼星紅染膠原纖維,網(wǎng)狀纖維常用銀染18.影響免疫組化染色強(qiáng)度的因素包括?A.一抗孵育時(shí)間B.抗原修復(fù)方式C.DAB顯色時(shí)間D.組織固定時(shí)間E.切片厚度【選項(xiàng)】A.一抗孵育時(shí)間B.抗原修復(fù)方式C.DAB顯色時(shí)間D.組織固定時(shí)間E.切片厚度【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確:時(shí)間不足致染色弱,過長增加背景2.B正確:高壓修復(fù)/酶消化影響抗原暴露3.C正確:顯色過度致背景加深4.D正確:過長固定降低抗原活性5.E正確:過厚切片致顯色不均勻19.下列哪些情況需進(jìn)行脫鈣處理?A.骨腫瘤標(biāo)本B.動(dòng)脈粥樣硬化血管C.牙齒標(biāo)本D.鈣化淋巴結(jié)E.肝硬化標(biāo)本【選項(xiàng)】A.骨腫瘤標(biāo)本B.動(dòng)脈粥樣硬化血管C.牙齒標(biāo)本D.鈣化淋巴結(jié)E.肝硬化標(biāo)本【參考答案】ABCD【解析】1.A正確:骨組織含大量鈣鹽2.B正確:粥樣斑塊常鈣化3.C正確:牙本質(zhì)需脫鈣處理4.D正確:鈣化影響切片質(zhì)量5.E錯(cuò)誤:肝硬化主要為纖維化,無鈣鹽沉積20.關(guān)于分子病理實(shí)驗(yàn)室分區(qū),正確的配置是?A.標(biāo)本前處理區(qū)獨(dú)立于PCR區(qū)B.核酸提取區(qū)配備負(fù)壓裝置C.PCR擴(kuò)增區(qū)與產(chǎn)物分析區(qū)分開D.測(cè)序儀可放置于產(chǎn)物分析區(qū)E.免疫組化區(qū)需與FISH檢測(cè)區(qū)相鄰【選項(xiàng)】A.標(biāo)本前處理區(qū)獨(dú)立于PCR區(qū)B.核酸提取區(qū)配備負(fù)壓裝置C.PCR擴(kuò)增區(qū)與產(chǎn)物分析區(qū)分開D.測(cè)序儀可放置于產(chǎn)物分析區(qū)E.免疫組化區(qū)需與FISH檢測(cè)區(qū)相鄰【參考答案】ABCD【解析】1.A正確:防止交叉污染2.B正確:降低氣溶膠傳播風(fēng)險(xiǎn)3.C正確:防止擴(kuò)增產(chǎn)物的逆行污染4.D正確:測(cè)序?qū)傧掠畏治霾襟E5.E錯(cuò)誤:免疫組化與FISH技術(shù)無關(guān)聯(lián)性要求21.下列哪些是組織固定過程中可能影響固定效果的因素?【選項(xiàng)】A.固定液的選擇與濃度B.組織塊的厚度C.固定溫度與時(shí)間D.固定液的pH值E.組織新鮮程度【參考答案】ABCDE【解析】固定是病理技術(shù)的關(guān)鍵步驟,影響因素包括:①固定液種類(如中性緩沖甲醛優(yōu)于普通甲醛)及濃度不足導(dǎo)致固定不充分(A正確);②組織塊過厚(>5mm)會(huì)影響固定液滲透(B正確);③低溫延長固定時(shí)間,高溫加速固定但易致組織收縮(C正確);④pH異常(如酸性環(huán)境下形成福爾馬林色素)(D正確);⑤組織離體后未及時(shí)固定導(dǎo)致自溶(E正確)。22.免疫組化染色中,以下哪些操作可能導(dǎo)致非特異性染色?【選項(xiàng)】A.未充分阻斷內(nèi)源性過氧化物酶B.一抗孵育時(shí)間過長C.使用高濃度牛血清白蛋白封閉D.洗滌緩沖液離子強(qiáng)度過低E.顯色底物濃度過高【參考答案】ABDE【解析】非特異性染色的常見原因:①內(nèi)源性酶(如紅細(xì)胞過氧化物酶)未用3%H?O?阻斷(A正確);②一抗過量或孵育過久引起非結(jié)合(B正確);③低離子強(qiáng)度緩沖液降低抗體-抗原結(jié)合特異性(D正確);④底物濃度過高導(dǎo)致顯色背景加深(E正確)。高濃度BSA封閉可減少非特異性結(jié)合(C錯(cuò)誤)。23.進(jìn)行HE染色時(shí),下列哪些步驟順序錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致染色異常?【選項(xiàng)】A.蘇木精染色→鹽酸酒精分化→伊紅染色B.伊紅染色→水洗→蘇木精染色C.脫水→透明→封固D.分化→藍(lán)化→脫水E.脫蠟不全直接入染色液【參考答案】BDE【解析】標(biāo)準(zhǔn)HE流程應(yīng)為:蘇木精→分化→藍(lán)化→伊紅→脫水透明封固。B選項(xiàng)逆序染色會(huì)造成伊紅遮蓋蘇木精(錯(cuò)誤);D選項(xiàng)藍(lán)化應(yīng)在分化后恢復(fù)細(xì)胞核藍(lán)色(順序錯(cuò)誤);E選項(xiàng)脫蠟不徹底阻礙染料滲透(錯(cuò)誤)。A、C為正確步驟。24.特殊染色中,下列染色法與對(duì)應(yīng)物質(zhì)匹配正確的是?【選項(xiàng)】A.普魯士藍(lán)染色——含鐵血黃素B.六胺銀染色——真菌細(xì)胞壁C.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)D.維多利亞藍(lán)染色——彈力纖維E.PAS染色——中性黏液【參考答案】ABCDE【解析】全部正確:①普魯士藍(lán)檢測(cè)三價(jià)鐵(A正確);②六胺銀染真菌/基底膜(B正確);③剛果紅結(jié)合淀粉樣物β折疊結(jié)構(gòu)(C正確);④維多利亞藍(lán)特異性顯示彈力纖維(D正確);⑤PAS染糖原及中性黏液(E正確)。25.關(guān)于冷凍切片技術(shù),以下說法正確的有?【選項(xiàng)】A.速凍可減少冰晶偽影B.組織最佳溫度為-25℃~-20℃C.脂肪組織需延長冷凍時(shí)間D.OCT包埋劑用于支撐組織E.厚度通常為5~8μm【參考答案】ABCDE【解析】全部正確:①速凍(液氮)減少冰晶(A正確);②-25℃~-20℃為常規(guī)切片溫度(B正確);③脂肪組織因?qū)岵钚柩娱L冷凍(C正確);④OCT包埋保持形態(tài)(D正確);⑤標(biāo)準(zhǔn)冷凍切片厚度(E正確)。26.分子病理技術(shù)中,熒光定量PCR的Ct值與哪些因素相關(guān)?【選項(xiàng)】A.起始模板量B.擴(kuò)增效率C.熒光閾值設(shè)定D.引物特異性E.循環(huán)次數(shù)【參考答案】ABCD【解析】Ct值指達(dá)到熒光閾值的循環(huán)數(shù)。影響因素:①模板量越少Ct值越大(A正確);②擴(kuò)增效率低導(dǎo)致Ct延遲(B正確);③閾值高低直接影響Ct讀取(C正確);④引物特異性差降低擴(kuò)增效率(D正確)。循環(huán)次數(shù)固定為實(shí)驗(yàn)參數(shù)(E錯(cuò)誤)。27.石蠟切片脫片常見原因包括?【選項(xiàng)】A.載玻片未涂黏附劑B.烤片溫度不足或時(shí)間過短C.組織脫水不徹底D.切片刀鈍化產(chǎn)生劃痕E.高壓抗原修復(fù)【參考答案】ABCDE【解析】脫片原因全面:①未用多聚賴氨酸處理玻片(A正確);②烤片未充分(需60℃1小時(shí))(B正確);③脫水不足致蠟浸透不全(C正確);④刀痕使組織連續(xù)性破壞(D正確);⑤高壓修復(fù)的物理沖擊(E正確)。28.下列哪些染色可用于顯示神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒?【選項(xiàng)】A.Grimelius銀染B.嗜銀染色(Fontana-Masson)C.免疫組化CgAD.PAS染色E.剛果紅染色【參考答案】ABC【解析】神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒檢測(cè)方法:①Grimelius染嗜銀顆粒(A正確);②Fontana-Masson顯示黑色素及嗜銀顆粒(B正確);③CgA為特異性標(biāo)志物(C正確)。PAS染黏液/糖原(D錯(cuò)誤),剛果紅染淀粉樣物(E錯(cuò)誤)。29.關(guān)于微波抗原修復(fù),正確的描述有?【選項(xiàng)】A.適用于甲醛交聯(lián)掩蓋表位的恢復(fù)B.常用修復(fù)液為pH6.0檸檬酸鹽緩沖液C.高溫可能導(dǎo)致組織脫落D.修復(fù)時(shí)間通常為10-20分鐘E.可替代酶消化法【參考答案】ABCD【解析】微波修復(fù)特點(diǎn):①解除甲醛交聯(lián)(A正確);②pH6.0緩沖液最常用(B正確);③高溫需控制以防脫片(C正確);④標(biāo)準(zhǔn)修復(fù)時(shí)長(D正確)。酶消化與微波修復(fù)原理不同,不可完全替代(E錯(cuò)誤)。30.下列哪些是細(xì)胞學(xué)涂片固定方法?【選項(xiàng)】A.95%乙醇濕固定B.噴霧固定劑C.甲醇固定D.自然風(fēng)干E.10%甲醛浸泡【參考答案】ABC【解析】細(xì)胞學(xué)固定規(guī)范:①95%乙醇為金標(biāo)準(zhǔn)(A正確);②噴霧固定用于現(xiàn)場(chǎng)標(biāo)本(B正確);③甲醇可用于快速固定(C正確)。風(fēng)干導(dǎo)致細(xì)胞變形(D錯(cuò)誤),10%甲醛使細(xì)胞收縮(E錯(cuò)誤)。31.1.關(guān)于組織處理過程中脫水、透明、浸蠟的步驟,下列說法正確的有:A.脫水劑常用梯度乙醇,濃度從低到高逐步更換B.二甲苯透明時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致組織收縮變硬C.浸蠟溫度應(yīng)控制在54-60℃,時(shí)間根據(jù)組織厚度調(diào)整D.丙酮可作為乙醇的替代脫水劑,具有更快的脫水速度【選項(xiàng)】A.A、B、CB.A、C、DC.B、C、DD.A、B、D【參考答案】B【解析】①脫水需梯度乙醇(A正確);②二甲苯透明過長確實(shí)會(huì)引起組織收縮變硬(B正確);③浸蠟溫度范圍52-60℃,常規(guī)采用54-58℃(C正確);④丙酮脫水速度快于乙醇,但收縮性強(qiáng),非常規(guī)推薦(D錯(cuò)誤)。故選B。32.2.HE染色中分化步驟的作用包括:A.去除細(xì)胞核過染的蘇木素B.增強(qiáng)細(xì)胞質(zhì)的伊紅著色C.調(diào)節(jié)染色對(duì)比度D.清除組織內(nèi)殘留的二甲苯【選項(xiàng)】A.A、B、CB.A、C、DC.B、CD.A、C【參考答案】D【解析】①分化液(1%鹽酸乙醇)僅作用于細(xì)胞核,移除過量蘇木素(A正確);②伊紅著色通過后續(xù)藍(lán)化步驟增強(qiáng),與分化無關(guān)(B錯(cuò)誤);③分化可調(diào)節(jié)核質(zhì)染色對(duì)比度(C正確);④二甲苯清除在透明環(huán)節(jié)完成(D錯(cuò)誤)。故選D。33.3.免疫組化染色前需進(jìn)行內(nèi)源性過氧化物酶阻斷,可選用:A.3%過氧化氫甲醇溶液B.1%鹽酸乙醇溶液C.0.3%TritonX-100溶液D.0.01M檸檬酸鹽緩沖液【選項(xiàng)】A.A、BB.A、CC.A、DD.B、C【參考答案】B【解析】①3%H?O?甲醇液是標(biāo)準(zhǔn)阻斷劑(A正確);②鹽酸乙醇用于分化處理(B錯(cuò)誤);③TritonX-100可增強(qiáng)通透性(C正確);④檸檬酸鹽緩沖液用于抗原修復(fù)(D錯(cuò)誤)。故選B。34.4.下列染色方法與結(jié)果配對(duì)錯(cuò)誤的是:A.阿爾辛藍(lán)染色——藍(lán)色黏液物質(zhì)B.油紅O染色——橙紅色中性脂肪C.PAS染色——紫紅色基底膜D.剛果紅染色——綠色淀粉樣物質(zhì)【選項(xiàng)】A.A、DB.C、DC.B、DD.A、B【參考答案】C【解析】①阿爾辛藍(lán)染酸性粘液呈藍(lán)色(A正確);②油紅O染中性脂肪呈紅色(B錯(cuò)誤);③PAS染糖原和基底膜均呈紫紅色(C正確);④剛果紅染淀粉樣物呈磚紅色(D錯(cuò)誤)。故選C(B、D錯(cuò)誤)。35.5.病理診斷報(bào)告必須包含的內(nèi)容是:A.標(biāo)本類型及部位B.巨檢描述C.顯微鏡下特征D.患者家庭住址【選項(xiàng)】A.A、B、CB.A、B、DC.B、C、DD.A、C、D【參考答案】A【解析】①標(biāo)本信息為診斷基礎(chǔ)(A必選);②巨檢與鏡檢是診斷依據(jù)(B、C必選);③患者住址屬隱私非必要項(xiàng)(D排除)。故選A。三、判斷題(共30題)1.中性福爾馬林固定液的常用濃度為10%,適用于大多數(shù)病理組織的固定。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】中性福爾馬林固定液的標(biāo)準(zhǔn)濃度為4%(即10%福爾馬林溶液,實(shí)際甲醛含量為4%)。10%的福爾馬林濃度過高,可能導(dǎo)致組織過度硬化、收縮及染色異常,因此題干表述錯(cuò)誤。2.HE染色中,伊紅主要用于染細(xì)胞核,蘇木精用于染細(xì)胞質(zhì)?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】HE染色中,蘇木精為堿性染料,主要使細(xì)胞核內(nèi)的核酸結(jié)合顯藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)及膠原纖維等顯紅色。題干將二者功能顛倒,故錯(cuò)誤。3.冰凍切片技術(shù)主要用于長期保存組織樣本,避免反復(fù)凍融?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】冰凍切片的核心用途是快速制片以滿足術(shù)中快速病理診斷需求,其組織保存效果差且易受冰晶損傷,不適合長期保存。長期保存應(yīng)選擇石蠟包埋或低溫冷凍庫。4.PAS染色(過碘酸-雪夫染色)能特異性地顯示組織中的中性黏液和基膜?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】PAS染色通過過碘酸氧化多糖的乙二醇基生成醛基,再與雪夫試劑結(jié)合顯紅色,主要顯示糖原、中性黏液物質(zhì)、基膜及真菌等,題干描述符合其應(yīng)用范圍。5.Zenker固定液含汞成分,因此固定后的組織無需特殊處理可直接脫水包埋。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】Zenker固定液含氯化汞,組織固定后必須流水沖洗12~24小時(shí),并用碘酒去除汞沉淀以避免后續(xù)染色干擾。直接脫水包埋將導(dǎo)致組織切片出現(xiàn)黑色汞結(jié)晶沉積。6.免疫組化染色中,陽性對(duì)照的目的是排除因抗體失效導(dǎo)致的假陰性結(jié)果?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】陽性對(duì)照通過已知抗原表達(dá)的陽性組織驗(yàn)證抗體及實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的有效性,若陽性對(duì)照未著色則提示抗體失效或操作失誤,需重新檢測(cè),題干表述正確。7.Masson三色染色中,膠原纖維被染成紅色,肌纖維染成藍(lán)色?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】Masson三色染色中,膠原纖維呈藍(lán)色(苯胺藍(lán)或亮藍(lán)染色),肌纖維、纖維素呈紅色(酸性品紅或麗春紅染色),細(xì)胞核呈黑褐色(鐵蘇木素染色)。題干顏色對(duì)應(yīng)錯(cuò)誤。8.電子顯微鏡標(biāo)本需用戊二醛和鋨酸雙重固定,而光鏡標(biāo)本僅需甲醛固定。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】電鏡標(biāo)本需戊二醛(穩(wěn)定蛋白)和鋨酸(固定脂質(zhì)并增加電子密度)雙重固定以保存超微結(jié)構(gòu);光鏡標(biāo)本常規(guī)采用中性福爾馬林(4%甲醛)固定即可滿足需求。9.封片時(shí)使用中性樹膠的目的是因其與水相容性好,可避免切片褪色?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】中性樹膠為二甲苯溶性封片劑,需在組織脫水透明后使用,其作用是隔絕空氣以防氧化褪色。水性封片劑(如甘油明膠)適用于特殊染色,但保存時(shí)間較短。10.抗原熱修復(fù)常用的緩沖液是檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0),通過高壓加熱暴露被甲醛遮蔽的抗原表位?!具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】甲醛固定可能導(dǎo)致抗原交聯(lián)而遮蔽表位,檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)高壓煮沸可逆轉(zhuǎn)交聯(lián),恢復(fù)抗原活性,是免疫組化抗原修復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。11.中性緩沖甲醛固定液的常用濃度為4%,適用于大多數(shù)常規(guī)病理標(biāo)本的固定。【選項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】錯(cuò)誤【解析】1.臨床常用中性緩沖甲醛濃度為10%(即4%甲醛由10%福爾馬林配制),4%為甲醛實(shí)際濃度,但配制時(shí)需采用10%福爾馬林溶液與磷酸鹽緩沖液混合。2.中性緩沖甲醛通過緩沖系統(tǒng)維持pH7.2-7.4,能更好保存核酸和抗原,而普通甲醛固定易導(dǎo)致核酸降解。12.蘇木精染色液中加入氧化汞可使染色液快速成熟,因此Harris蘇木精配制后需立即使用?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】錯(cuò)誤【解析】1.Harris蘇木精加入氧化汞促進(jìn)氧化成熟,但配制后需煮沸冷卻,靜置24小時(shí)濾過才能使用,未充分氧化的蘇木精染色力不足。2.立即使用會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核染色偏淡且背景殘留氧化汞沉淀。13.Bouin固定液的主要成分包括甲醛、苦味酸和冰醋酸,特別適用于睪丸、骨髓等疏松組織的固定。【選項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】正確【解析】1.Bouin液由75ml飽和苦味酸+25ml甲醛+5ml冰醋酸組成,醋酸收縮膠原纖維,苦味酸軟化組織,尤其適合含軟骨或較硬組織的固定。2.對(duì)糖原保存效果差(因含醋酸),不可用于需PAS染色的標(biāo)本。14.石蠟切片時(shí)組織浸蠟溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在60-62℃,溫度過高會(huì)破壞抗原表位?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】正確【解析】1.石蠟熔點(diǎn)為56-58℃,浸蠟溫度超過65℃可導(dǎo)致組織硬脆、抗原變性。2.標(biāo)準(zhǔn)浸蠟需經(jīng)3缸純蠟(溫度梯度58℃→60℃→62℃),確保完全浸透且不影響后續(xù)免疫組化。15.免疫組化染色中,3%過氧化氫甲醇液的作用是阻斷內(nèi)源性生物素干擾。【選項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】錯(cuò)誤【解析】1.3%H?O?甲醇液用于滅活內(nèi)源性過氧化物酶(如紅細(xì)胞、粒細(xì)胞所含的過氧化物酶)。2.阻斷內(nèi)源性生物素需采用卵白素預(yù)孵育或商品化生物素阻斷劑。16.Masson三色染色中,膠原纖維被染成藍(lán)色,肌纖維染成紅色,可用于鑒別纖維化病變?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】錯(cuò)誤【解析】1.Masson染色結(jié)果:膠原纖維呈綠色或藍(lán)色(不同改良法),肌纖維/胞質(zhì)呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)黑色。2.天狼猩紅染色膠原纖維為紅色,偏振光下顯雙折光性,更宜量化纖維化程度。17.冷凍切片中OCT包埋劑的主要成分是聚乙烯醇和樹脂,使用前需與組織同步預(yù)冷以防冰晶形成?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】錯(cuò)誤【解析】1.OCT主要成分為聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮,作用為支撐組織并減少皺縮。2.OCT需提前置于冷凍箱預(yù)冷至-20℃,但組織應(yīng)單獨(dú)速凍后再包埋,否則OCT滲入組織影響染色。18.Zenker固定液含重鉻酸鉀、升汞和醋酸,固定后組織需流水沖洗12小時(shí)以去除重金屬沉淀?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】錯(cuò)誤【解析】1.Zenker液含重鉻酸鉀、升汞和硫酸鈉(非醋酸),Helly液用甲醛替代醋酸。2.固定后需流水沖洗24小時(shí)并碘酒脫汞處理,否則升汞結(jié)晶干擾染色。19.PAS染色中過碘酸的作用是將多糖的乙二醇基氧化為醛基,Schiff試劑與醛基結(jié)合呈紫紅色?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】正確【解析】1.過碘酸氧化多糖/黏液物質(zhì)中1,2-乙二醇基生成雙醛基,醛基與Schiff試劑無色品紅結(jié)合形成紫紅色化合物。2.需設(shè)淀粉酶消化對(duì)照以區(qū)分糖原(消化后陰性)與其他多糖。20.免疫組化染色設(shè)置陽性對(duì)照時(shí),應(yīng)選擇已知靶抗原高表達(dá)的組織切片與待測(cè)標(biāo)本同步染色?!具x項(xiàng)】正確()錯(cuò)誤()【參考答案】正確【解析】1.陽性對(duì)照可驗(yàn)證抗體有效性及染色系統(tǒng)正常運(yùn)作,如用正常扁桃體作CD20對(duì)照。2.陰性對(duì)照需采用同型非特異性抗體或PBS替代一抗,排除非特異性結(jié)合干擾。21.Mass
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