2025年醫(yī)衛(wèi)類病理學(xué)技術(shù)(士)基礎(chǔ)知識-專業(yè)實(shí)踐能力參考題庫含答案解析一、單選題（共35題）1.關(guān)于組織固定液的選擇，下列哪項(xiàng)描述是正確的？【選項(xiàng)】A.10%中性緩沖福爾馬林是常規(guī)病理標(biāo)本的首選固定液B.Bouin液適用于需保存細(xì)胞核細(xì)微結(jié)構(gòu)的組織C.丙酮固定對脂類物質(zhì)保存效果最佳D.酒精固定可最大程度減少組織收縮【參考答案】A【解析】1.A正確：10%中性緩沖福爾馬林能有效保存蛋白質(zhì)和核酸結(jié)構(gòu)，且滲透性強(qiáng)，是常規(guī)病理標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)固定液。2.B錯(cuò)誤：Bouin液適用于結(jié)締組織染色（如Masson染色），但酸性成分會破壞細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，Zenker液更適宜保存細(xì)胞核。3.C錯(cuò)誤：丙酮主要用于冷凍切片固定，脂類保存最佳應(yīng)選用甲醛-鈣溶液。4.D錯(cuò)誤：高濃度酒精會導(dǎo)致組織明顯收縮，常用于特殊染色（如糖原染色）而非常規(guī)固定。2.HE染色中蘇木素的作用靶點(diǎn)主要是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的堿性蛋白B.細(xì)胞核內(nèi)的DNA雙螺旋C.細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層D.線粒體內(nèi)膜【參考答案】B【解析】1.B正確：蘇木素為堿性染料，通過明礬媒染后與DNA磷酸基團(tuán)結(jié)合，使細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色。2.A錯(cuò)誤：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)堿性蛋白由伊紅染色（酸性染料）特異性結(jié)合。3.C/D錯(cuò)誤：細(xì)胞膜和線粒體結(jié)構(gòu)在HE染色中主要通過伊紅呈現(xiàn)粉紅色，非蘇木素靶點(diǎn)。3.制備石蠟切片時(shí)，組織脫水不徹底最可能導(dǎo)致？【選項(xiàng)】A.切片碎裂B.染色不均C.組織皺縮D.脫片現(xiàn)象【參考答案】B【解析】1.B正確：脫水不徹底會使石蠟無法充分滲透，導(dǎo)致切片染色時(shí)染料分布不均。2.A錯(cuò)誤：切片碎裂多與組織硬度不足或刀片角度不當(dāng)相關(guān)。3.C錯(cuò)誤：組織皺縮主要因高濃度酒精脫水速度過快引起。4.D錯(cuò)誤：脫片現(xiàn)象常因載玻片處理不當(dāng)或組織含脂肪過多所致。4.免疫組化中用于阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的是？【選項(xiàng)】A.正常山羊血清B.3%過氧化氫甲醇液C.疊氮鈉溶液D.蛋白酶K【參考答案】B【解析】1.B正確：3%過氧化氫甲醇液能有效滅活紅細(xì)胞和粒細(xì)胞中的內(nèi)源性過氧化物酶，減少假陽性。2.A錯(cuò)誤：正常血清用于封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。3.C錯(cuò)誤：疊氮鈉用于抑制堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)的內(nèi)源性酶。4.D錯(cuò)誤：蛋白酶K用于抗原修復(fù)，與酶阻斷無關(guān)。5.下列哪種特殊染色可特異性顯示淀粉樣變性？【選項(xiàng)】A.剛果紅染色B.PAS染色C.Masson三色染色D.維多利亞藍(lán)染色【參考答案】A【解析】1.A正確：剛果紅染色后淀粉樣物質(zhì)在偏振光下呈蘋果綠色雙折光，具有確診價(jià)值。2.B錯(cuò)誤：PAS染色主要用于顯示糖原和基底膜。3.C錯(cuò)誤：Masson染色用于區(qū)分膠原纖維與肌纖維。4.D錯(cuò)誤：維多利亞藍(lán)用于顯示彈性纖維。6.快速冰凍切片的最適厚度范圍是？【選項(xiàng)】A.1-2μmB.4-6μmC.8-10μmD.15-20μm【參考答案】B【解析】1.B正確：4-6μm既能保證細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性，又避免過厚導(dǎo)致的染色模糊（常規(guī)石蠟切片要求3-5μm，冰凍切片稍厚）。2.A錯(cuò)誤：1-2μm為電鏡超薄切片厚度。3.C/D錯(cuò)誤：超過8μm會顯著影響顯微鏡下細(xì)胞層次觀察。7.DNA提取過程中加入蛋白酶K的主要作用是？【選項(xiàng)】A.降解RNAB.消化細(xì)胞膜C.滅活核酸酶D.水解核蛋白【參考答案】D【解析】1.D正確：蛋白酶K可特異性水解組蛋白等核蛋白，釋放基因組DNA。2.A錯(cuò)誤：RNA降解需用RNase處理。3.B錯(cuò)誤：細(xì)胞膜破壞通過SDS等去污劑實(shí)現(xiàn)。4.C錯(cuò)誤：核酸酶滅活需EDTA等金屬離子螯合劑。8.病理診斷中采用微波抗原修復(fù)時(shí)，常用修復(fù)液的pH值是？【選項(xiàng)】A.pH3.0B.pH6.0C.pH8.0D.pH10.0【參考答案】B【解析】1.B正確：pH6.0檸檬酸鹽緩沖液是抗原修復(fù)的國際通用標(biāo)準(zhǔn)，能有效逆轉(zhuǎn)甲醛交聯(lián)。2.A錯(cuò)誤：酸性條件（如pH3.0）多用于特定病毒抗原檢測。3.C/D錯(cuò)誤：強(qiáng)堿性條件（pH>8）易導(dǎo)致組織脫片和抗原破壞。9.制作細(xì)胞涂片時(shí)，防止細(xì)胞堆積的關(guān)鍵操作是？【選項(xiàng)】A.延長固定時(shí)間B.控制涂片角度C.調(diào)節(jié)細(xì)胞懸液濃度D.提高離心速度【參考答案】C【解析】1.C正確：細(xì)胞懸液濃度需調(diào)整至（1-2）×10?/mL，過濃導(dǎo)致堆積，過稀則細(xì)胞量不足。2.B錯(cuò)誤：涂片角度僅影響細(xì)胞分布形態(tài)。3.A/D錯(cuò)誤：固定時(shí)間和離心速度與細(xì)胞密度均勻性無直接關(guān)聯(lián)。10.分子病理實(shí)驗(yàn)中，RNA樣本保存應(yīng)選用？【選項(xiàng)】A.DEPC水溶解后-20℃保存B.生理鹽水溶解后4℃保存C.Trizol裂解液-80℃保存D.中性福爾馬林固定【參考答案】C【解析】1.C正確：Trizol可有效抑制RNase活性，-80℃能長期保存RNA完整性。2.A錯(cuò)誤：DEPC水僅用于器具處理，溶解后RNA仍需低溫保存。3.B錯(cuò)誤：生理鹽水無法抑制RNase，4℃僅能短期保存。4.D錯(cuò)誤：福爾馬林會導(dǎo)致RNA與蛋白質(zhì)交聯(lián)降解。11.下列哪種固定液最適用于電鏡標(biāo)本的制備？【選項(xiàng)】A.10%中性緩沖福爾馬林B.4%多聚甲醛-戊二醛混合液C.Bouin固定液D.Zenker固定液【參考答案】B【解析】1.電鏡標(biāo)本要求極好的超微結(jié)構(gòu)保存，4%多聚甲醛-戊二醛混合液能快速穿透組織并穩(wěn)定蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，是電鏡制樣的標(biāo)準(zhǔn)固定液。2.A選項(xiàng)10%中性緩沖福爾馬林適用于常規(guī)病理活檢，但無法滿足電鏡分辨率要求。3.C選項(xiàng)Bouin液含苦味酸，易致組織收縮且殘留結(jié)晶干擾電鏡觀察。4.D選項(xiàng)Zenker液含汞鹽，毒性強(qiáng)且需特殊處理，不適用于電鏡。12.HE染色中蘇木精染色后需用哪種溶液分化？【選項(xiàng)】A.0.5%鹽酸乙醇B.1%氨水C.70%乙醇D.伊紅染液【參考答案】A【解析】1.分化步驟使用0.5%鹽酸乙醇可選擇性去除胞漿等非細(xì)胞核區(qū)域過染的蘇木精，使核質(zhì)對比清晰。2.B選項(xiàng)氨水用于藍(lán)化，使蘇木精由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的藍(lán)色。3.C選項(xiàng)70%乙醇主要用于脫水流程，無分化作用。4.D選項(xiàng)伊紅為后續(xù)復(fù)染步驟，與分化無關(guān)。13.石蠟切片過程中二甲苯的作用是？【選項(xiàng)】A.脫水B.透明C.固定D.包埋【參考答案】B【解析】1.二甲苯為透明劑，使組織呈現(xiàn)透明狀態(tài)，便于石蠟滲透。2.A選項(xiàng)脫水由梯度乙醇完成（如70%-100%）。3.C選項(xiàng)固定發(fā)生于組織處理初始階段（如福爾馬林）。4.D選項(xiàng)包埋需使用熔融石蠟。14.測核酸時(shí)最常用的染色方法是？【選項(xiàng)】A.PAS染色B.六胺銀染色C.Feulgen染色D.蘇丹Ⅲ染色【參考答案】C【解析】1.Feulgen染色通過酸水解暴露DNA醛基，與Schiff試劑反應(yīng)呈紫紅色，特異性顯示DNA。2.A選項(xiàng)PAS染色用于糖原和黏液物質(zhì)。3.B選項(xiàng)六胺銀染色針對真菌和基底膜。4.D選項(xiàng)蘇丹Ⅲ為脂類染色劑。15.免疫組化中內(nèi)源性過氧化物酶的阻斷試劑是？【選項(xiàng)】A.3%過氧化氫甲醇液B.正常山羊血清C.DAB顯色液D.檸檬酸鹽緩沖液【參考答案】A【解析】1.3%過氧化氫甲醇液可消除紅細(xì)胞、粒細(xì)胞等內(nèi)源性過氧化物酶活性，降低非特異性背景。2.B選項(xiàng)血清用于封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。3.C選項(xiàng)DAB為顯色底物。4.D選項(xiàng)檸檬酸鹽用于抗原熱修復(fù)。16.制備冷凍切片時(shí)，組織最佳冷凍溫度范圍是？【選項(xiàng)】A.-4℃至-10℃B.-15℃至-25℃C.-30℃至-40℃D.-70℃以下【參考答案】B【解析】1.-15℃至-25℃是常規(guī)組織冷凍的適宜溫度，既能快速凍結(jié)減少冰晶，又避免過度硬化導(dǎo)致切片碎裂。2.A選項(xiàng)溫度過高，組織無法充分凍結(jié)。3.C、D選項(xiàng)溫度過低會使組織過硬，切片易產(chǎn)生裂隙。17.Masson三色染色中膠原纖維呈？【選項(xiàng)】A.紅色B.綠色C.藍(lán)色D.黑色【參考答案】C【解析】1.Masson染色中膠原纖維被苯胺藍(lán)或亮藍(lán)染成藍(lán)色。2.A選項(xiàng)紅色為肌纖維（麗春紅染色）。3.B選項(xiàng)綠色為特殊染色如維多利亞藍(lán)的結(jié)果。4.D選項(xiàng)中彈性纖維常用黑色顯示（如Verhoeff染色）。18.哪項(xiàng)是網(wǎng)狀纖維染色的金標(biāo)準(zhǔn)方法？【選項(xiàng)】A.Grimelius銀染B.Gomori銀染C.Foot銀染D.Wilder銀染【參考答案】B【解析】1.Gomori銀氨法通過氨銀溶液使網(wǎng)狀纖維吸附銀離子，經(jīng)甲醛還原呈黑色，是經(jīng)典網(wǎng)狀纖維染色法。2.A選項(xiàng)用于神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒。3.C選項(xiàng)可顯示網(wǎng)狀纖維但特異性較低。4.D選項(xiàng)現(xiàn)較少使用。19.HE染色中細(xì)胞漿被伊紅染成？【選項(xiàng)】A.藍(lán)紫色B.粉紅色C.無色D.棕色【參考答案】B【解析】1.伊紅為酸性染料，與胞漿內(nèi)帶正電荷的氨基酸結(jié)合呈粉紅色。2.A選項(xiàng)藍(lán)紫色為細(xì)胞核（蘇木精堿性染色結(jié)果）。3.C、D選項(xiàng)為特殊染色或未染色的表現(xiàn)。20.脫水機(jī)中乙醇梯度順序正確的是？【選項(xiàng)】A.70%→80%→95%→100%B.50%→70%→90%→100%C.80%→95%→100%→100%D.95%→100%→100%→二甲苯【參考答案】A【解析】1.梯度脫水需從低濃度（70%）逐步過渡至高濃度（100%乙醇），避免組織劇烈收縮變形。2.B選項(xiàng)起始濃度過低（50%）可能引起組織膨脹。3.C選項(xiàng)缺少中等濃度過渡。4.D選項(xiàng)中二甲苯不屬于脫水劑，為透明步驟。21.在常規(guī)石蠟切片制作過程中，組織固定的主要目的是什么？【選項(xiàng)】A.增強(qiáng)組織硬度便于切片B.防止組織自溶和腐敗C.提高組織對染料的親和力D.消除組織內(nèi)氣泡【參考答案】B【解析】組織固定的首要目的是迅速終止細(xì)胞代謝，防止組織自溶和腐敗，保持細(xì)胞形態(tài)與原位結(jié)構(gòu)一致。A選項(xiàng)是固定的間接效果而非主要目的；C選項(xiàng)涉及后續(xù)染色步驟；D選項(xiàng)屬于脫水透明環(huán)節(jié)的輔助目標(biāo)。22.PAS染色（過碘酸希夫染色）主要用于顯示組織內(nèi)的什么成分？【選項(xiàng)】A.膠原纖維B.糖原和中性黏液物質(zhì)C.黑色素顆粒D.彈性纖維【參考答案】B【解析】PAS染色通過過碘酸氧化糖類中的乙二醇基，與希夫試劑反應(yīng)生成紫紅色沉淀，特異性標(biāo)記糖原、中性黏液及基底膜。A項(xiàng)常用Masson三色染色；C項(xiàng)可用Fontana-Masson染色；D項(xiàng)需維多利亞藍(lán)或彈性纖維特殊染色。23.免疫組織化學(xué)染色中，抗原修復(fù)的常用方法不包括以下哪項(xiàng)？【選項(xiàng)】A.微波加熱法B.高壓鍋熱修復(fù)法C.蛋白酶消化法D.酸性蘇木精處理法【參考答案】D【解析】抗原修復(fù)旨在暴露被甲醛交聯(lián)遮蔽的抗原表位，主要方法包括熱修復(fù)（A、B）、酶消化（C）。D項(xiàng)中酸性蘇木精是核染色試劑，不參與抗原修復(fù)流程。24.HE染色中，細(xì)胞核被染成藍(lán)色的原理是基于蘇木精的哪種性質(zhì)？【選項(xiàng)】A.與DNA的磷酸基團(tuán)結(jié)合B.與核酸的堿基發(fā)生嵌合反應(yīng)C.通過媒染劑形成帶正電荷的色淀D.直接特異性結(jié)合組蛋白【參考答案】C【解析】蘇木精本身無染色能力，需經(jīng)氧化為蘇木紅后與媒染劑（如鋁離子）結(jié)合形成帶正電的色淀，與DNA磷酸骨架負(fù)電荷結(jié)合染核。A項(xiàng)描述為堿性染料的機(jī)制（如亞甲藍(lán)），B、D項(xiàng)為干擾項(xiàng)。25.病理組織脫水流程中，二甲苯的作用是？【選項(xiàng)】A.溶解脂肪B.徹底清除水分C.作為透明劑使石蠟滲入組織D.固定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)【參考答案】C【解析】脫水后透明是石蠟包埋的關(guān)鍵步驟，二甲苯可置換乙醇并與石蠟互溶，增強(qiáng)組織透光性（透明），便于石蠟浸透。A項(xiàng)為氯仿或丙酮的功能；B項(xiàng)由梯度乙醇完成；D項(xiàng)屬于固定階段目標(biāo)。26.診斷淀粉樣變性的特殊染色方法是？【選項(xiàng)】A.剛果紅染色B.普魯士藍(lán)染色C.油紅O染色D.阿爾新藍(lán)染色【參考答案】A【解析】剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后呈橘紅色，偏振光下顯示蘋果綠雙折光，為淀粉樣變性的金標(biāo)準(zhǔn)。B項(xiàng)檢測鐵離子；C項(xiàng)標(biāo)記脂質(zhì)；D項(xiàng)針對酸性黏多糖。27.中性甲醛緩沖液的最佳pH范圍應(yīng)為？【選項(xiàng)】A.5.0-6.0B.6.8-7.2C.7.5-8.0D.8.5-9.0【參考答案】B【解析】中性甲醛緩沖液需維持pH6.8-7.2以避免酸性甲醛導(dǎo)致核染色質(zhì)凝聚或形成福爾馬林色素沉淀，影響后續(xù)觀察與染色結(jié)果。28.Masson三色染色中，膠原纖維呈現(xiàn)的顏色是？【選項(xiàng)】A.紅色B.綠色C.藍(lán)色D.黃色【參考答案】C【解析】Masson染色中膠原纖維被苯胺藍(lán)或亮藍(lán)染成藍(lán)色，肌纖維和紅細(xì)胞呈紅色，細(xì)胞核為藍(lán)黑色。該染色廣泛用于區(qū)分纖維化病變與肌組織。29.冷凍切片時(shí)出現(xiàn)冰晶偽影的最主要原因是？【選項(xiàng)】A.組織未完全凍結(jié)B.切片厚度過薄C.冷凍速度過慢D.刀刃溫度過高【參考答案】C【解析】冷凍速度過慢會導(dǎo)致組織內(nèi)水分緩慢結(jié)晶，形成大冰晶破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。A項(xiàng)可能引發(fā)切片碎裂；B、D項(xiàng)主要影響切片完整性而非冰晶形成。30.免疫組化染色中，內(nèi)源性過氧化物酶的阻斷劑通常選用？【選項(xiàng)】A.3%過氧化氫甲醇溶液B.1%牛血清白蛋白C.正常山羊血清D.0.1%疊氮鈉【參考答案】A【解析】3%H?O?甲醇液通過氧化還原反應(yīng)消除紅細(xì)胞、粒細(xì)胞等內(nèi)源性過氧化物酶活性，避免DAB顯色時(shí)產(chǎn)生假陽性。B、C項(xiàng)用于減少非特異性結(jié)合；D項(xiàng)抑制酶活性但安全性低。31.關(guān)于常規(guī)石蠟切片制作的基本流程，下列哪項(xiàng)順序正確？【選項(xiàng)】A.固定→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→染色B.脫水→固定→透明→浸蠟→包埋→切片→染色C.透明→固定→脫水→浸蠟→包埋→切片→染色D.固定→透明→脫水→浸蠟→包埋→切片→染色【參考答案】A【解析】1.固定是第一步，防止組織自溶腐爛，常用10%中性福爾馬林。2.脫水使用梯度乙醇（70%→80%→95%→100%）去除水分。3.透明采用二甲苯使組織透亮，便于浸蠟。4.浸蠟和包埋使組織硬化為蠟塊，便于切片。5.切片后用HE染色（蘇木精-伊紅染色）觀察結(jié)構(gòu)。其他順序均違背病理技術(shù)操作規(guī)范。32.HE染色中，蘇木精的主要作用是？【選項(xiàng)】A.染細(xì)胞質(zhì)紅色B.染細(xì)胞核藍(lán)色C.增強(qiáng)組織硬度D.去除脂質(zhì)成分【參考答案】B【解析】1.蘇木精為堿性染料，通過媒染劑（如硫酸鋁銨）結(jié)合DNA/RNA，使細(xì)胞核呈藍(lán)色。2.伊紅為酸性染料，染細(xì)胞質(zhì)及膠原纖維等紅色（排除A）。3.增強(qiáng)組織硬度需通過脫水透明和浸蠟（排除C），去除脂質(zhì)依賴脫脂步驟（排除D）。33.下列哪種疾病最適用剛果紅染色進(jìn)行病理診斷？【選項(xiàng)】A.結(jié)核性肉芽腫B.淀粉樣變性C.脂肪變性D.黏液瘤【參考答案】B【解析】1.剛果紅染色是淀粉樣物質(zhì)特異性染色，偏振光下呈蘋果綠雙折光（B正確）。2.結(jié)核性肉芽腫需抗酸染色（排除A）；脂肪變性用蘇丹III染色（排除C）；黏液瘤常用阿爾辛藍(lán)染色（排除D）。34.中性福爾馬林緩沖液的pH值通常為？【選項(xiàng)】A.5.0-5.5B.6.0-6.5C.7.0-7.4D.8.0-8.5【參考答案】C【解析】1.中性福爾馬林緩沖液pH=7.0-7.4，避免酸性環(huán)境導(dǎo)致組織收縮或形成福爾馬林色素沉淀。2.pH<7.0可能影響抗原保存（排除A、B），pH>7.4會加速組織硬化（排除D）。35.免疫組化中，消除內(nèi)源性過氧化物酶活性的常用試劑是？【選項(xiàng)】A.3%過氧化氫B.1%鹽酸乙醇C.0.5%苦味酸D.5%冰醋酸【參考答案】A【解析】1.3%H?O?能阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，減少非特異性背景染色（A正確）。2.鹽酸乙醇用于脫鈣（排除B），苦味酸為固定液成分（排除C），冰醋酸用于特殊染色（排除D）。二、多選題（共35題）1.以下關(guān)于組織處理流程的描述，正確的是？（多選題）【選項(xiàng)】A.固定時(shí)中性緩沖甲醛是最常用固定液B.脫水常用梯度酒精濃度依次為70%、80%、90%、100%C.透明劑二甲苯可被環(huán)保型替代品如松節(jié)油取代D.浸蠟溫度應(yīng)控制在65-70℃E.快速冰凍切片需使用液氮預(yù)冷【參考答案】ABCD【解析】A正確：中性緩沖甲醛能保持抗原性，是常規(guī)病理首選固定液；B正確：梯度酒精脫水可減少組織收縮變形，濃度梯度符合標(biāo)準(zhǔn)流程；C正確：松節(jié)油、環(huán)保透明劑已逐步替代毒性較高的二甲苯；D正確：石蠟熔點(diǎn)為56-58℃，65-70℃既能熔化石蠟又避免破壞組織；E錯(cuò)誤：快速冰凍切片常用OCT包埋劑，液氮預(yù)冷適用于特殊研究而非常規(guī)病理。2.HE染色中導(dǎo)致細(xì)胞核染色過深的可能原因包括？（多選題）【選項(xiàng)】A.蘇木精染色時(shí)間過長B.分化液濃度過高C.藍(lán)化時(shí)間不足D.伊紅染色后脫水不充分E.切片厚度超過5μm【參考答案】ABCE【解析】A正確：蘇木精超時(shí)使核染色結(jié)合過量；B正確：高濃度分化液過度脫色導(dǎo)致核染色殘留不均；C正確：藍(lán)化不足使蘇木精呈紅色而非藍(lán)色，對比度降低；D錯(cuò)誤：伊紅染色問題主要影響胞質(zhì)；E正確：厚切片光穿透差導(dǎo)致核染色視覺加深。3.下列特殊染色與顯示目標(biāo)匹配正確的是？（多選題）【選項(xiàng)】A.剛果紅—淀粉樣物質(zhì)B.PAS—糖原C.維多利亞藍(lán)—彈性纖維D.普魯士藍(lán)—網(wǎng)狀纖維E.磷鎢酸蘇木精—橫紋肌【參考答案】ABCE【解析】A正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)β折疊結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合；B正確：PAS反應(yīng)中高碘酸氧化糖原的1,2-乙二醇基形成醛基，與Schiff試劑結(jié)合；C正確：維多利亞藍(lán)與彈性纖維中彈性蛋白結(jié)合；D錯(cuò)誤：普魯士藍(lán)顯示含鐵血黃素，網(wǎng)狀纖維常用銀染；E正確：PTAH染色使橫紋肌的Z線呈藍(lán)紫色。4.免疫組化假陽性的常見原因有？（多選題）【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷B.抗體濃度過高C.組織自發(fā)熒光D.抗原熱修復(fù)過度E.非特異性蛋白吸附【參考答案】ABDE【解析】A正確：紅細(xì)胞、粒細(xì)胞含過氧化物酶可催化DAB顯色；B正確：高濃度抗體導(dǎo)致非特異性結(jié)合；C錯(cuò)誤：自發(fā)熒光影響熒光標(biāo)記法，與常規(guī)IHC無關(guān)；D正確：過度修復(fù)暴露相似抗原表位；E正確：富含電荷組織易吸附無關(guān)抗體。5.病理切片制作時(shí)出現(xiàn)組織皺縮可能由于？（多選題）【選項(xiàng)】A.脫水劑濃度驟變B.浸蠟溫度過高C.透明時(shí)間不足D.固定液pH值異常E.切片刀卷刃【參考答案】ABC【解析】A正確：酒精梯度脫水可緩沖濃度變化導(dǎo)致的滲透壓差異；B正確：高溫使石蠟過度滲透壓迫組織；C正確：透明不徹底阻礙石蠟浸入使組織回縮；D錯(cuò)誤：固定液pH異常主要影響抗原保存；E錯(cuò)誤：刀片問題導(dǎo)致切片厚薄不均而非組織皺縮。6.下列關(guān)于巴氏染色的描述，正確的是？（多選題）【選項(xiàng)】A.適用于宮頸細(xì)胞學(xué)檢查B.胞質(zhì)染色分EA36和OG6兩種染液C.細(xì)胞核主要被蘇木精染色D.分色需用0.5%鹽酸酒精E.染色后需用樹膠封片【參考答案】ABCD【解析】A正確：巴氏染色是宮頸癌篩查的金標(biāo)準(zhǔn)；B正確：EA36染角質(zhì)化胞質(zhì)，OG6染非角質(zhì)化胞質(zhì)；C正確：蘇木精使核DNA顯藍(lán)色；D正確：0.5%鹽酸酒精分化去除多余蘇木精；E錯(cuò)誤：巴氏染色用水溶性封片劑（如甘油）。7.用于顯示神經(jīng)組織的染色方法包括？（多選題）【選項(xiàng)】A.Luxol快藍(lán)B.Bielschowsky銀染C.Masson三色D.Nissl染色E.油紅O染色【參考答案】ABD【解析】A正確：Luxol快藍(lán)顯示髓鞘；B正確：Bielschowsky法染神經(jīng)原纖維；C錯(cuò)誤：Masson用于膠原纖維與肌纖維鑒別；D正確：Nissl染色顯示神經(jīng)元尼氏體；E錯(cuò)誤：油紅O為脂類染色劑。8.影響冰凍切片質(zhì)量的關(guān)鍵因素有？（多選題）【選項(xiàng)】A.組織速凍溫度B.切片厚度C.防卷板調(diào)節(jié)角度D.冷凍臺溫度穩(wěn)定性E.冷凍包埋劑類型【參考答案】ABCDE【解析】A正確：-20℃至-25℃最適溫度可減少冰晶；B正確：5-8μm為理想厚度；C正確：防卷板角度不當(dāng)導(dǎo)致切片褶皺；D正確：溫度波動引致切片斷裂；E正確：OCT包埋劑黏度影響切片平整度。9.免疫熒光技術(shù)中需阻斷的非特異性反應(yīng)包括？（多選題）【選項(xiàng)】A.Fc受體結(jié)合B.疏水相互作用C.內(nèi)源性生物素D.電荷吸附E.二抗種屬交叉反應(yīng)【參考答案】ABCDE【解析】A正確：使用正常血清封閉Fc受體；B正確：添加BSA減少疏水結(jié)合；C正確：生物素阻斷劑用于ABC法；D正確：牛血清白蛋白阻斷電荷吸附；E正確：二抗需與一抗種屬嚴(yán)格匹配。10.下列固定液特性匹配正確的是？（多選題）【選項(xiàng)】A.Carnoy液—快速穿透/核酸保存B.Bouin液—結(jié)締組織染色/苦味酸C.Zenker液—骨髓活檢/含汞D.4%多聚甲醛—電鏡標(biāo)本/交聯(lián)固定E.丙酮—酶組織化學(xué)/沉淀蛋白【參考答案】ABCDE【解析】A正確：Carnoy液（乙醇:氯仿:冰醋酸=6:3:1）能快速固定并保留RNA；B正確：Bouin液含苦味酸、甲醛、乙酸，利于結(jié)締組織染色；C正確：Zenker液含升汞，適用于造血組織；D正確：多聚甲醛滲透慢但超微結(jié)構(gòu)保存好；E正確：丙酮非交聯(lián)固定劑，可保存酶活性。11.關(guān)于組織固定液的選擇和使用，下列哪些說法是正確的？A.中性福爾馬林緩沖液是病理標(biāo)本最常用的固定劑B.甲醛固定液的常規(guī)濃度為10%，pH值需維持在7.2-7.4C.乙醚-酒精固定液適用于常規(guī)石蠟切片的組織固定D.多聚甲醛滲透力強(qiáng)，常用于電鏡標(biāo)本的固定E.戊二醛固定液主要用于酶組織化學(xué)染色【選項(xiàng)】A.中性福爾馬林緩沖液是病理標(biāo)本最常用的固定劑B.甲醛固定液的常規(guī)濃度為10%，pH值需維持在7.2-7.4C.乙醚-酒精固定液適用于常規(guī)石蠟切片的組織固定D.多聚甲醛滲透力強(qiáng)，常用于電鏡標(biāo)本的固定E.戊二醛固定液主要用于酶組織化學(xué)染色【參考答案】ABDE【解析】A正確：中性福爾馬林緩沖液因其穩(wěn)定性和減少人工假象的特點(diǎn)，成為病理常規(guī)固定劑。B正確：甲醛固定液濃度為10%（實(shí)際為4%甲醛溶液，由40%甲醛原液稀釋而成），中性pH可減少組織收縮。C錯(cuò)誤：乙醚-酒精（卡諾固定液）主要用于細(xì)胞學(xué)涂片固定，不適合石蠟切片的組織塊固定。D正確：多聚甲醛分子量小、滲透快，常用于電鏡標(biāo)本的預(yù)固定。E正確：戊二醛能較好保存酶活性，適用于酶組織化學(xué)染色。12.HE染色過程中，下列哪些操作步驟或試劑作用描述正確？A.蘇木精染色后需用1%鹽酸酒精分化B.伊紅染色前需用弱堿性溶液返藍(lán)C.分化作用是去除胞漿過量染液D.脫水步驟中需依次使用梯度酒精E.封片前需用中性樹膠進(jìn)行透明處理【選項(xiàng)】A.蘇木精染色后需用1%鹽酸酒精分化B.伊紅染色前需用弱堿性溶液返藍(lán)C.分化作用是去除胞漿過量染液D.脫水步驟中需依次使用梯度酒精E.封片前需用中性樹膠進(jìn)行透明處理【參考答案】ADE【解析】A正確：鹽酸酒精可去除細(xì)胞核外多余的蘇木精著色。B錯(cuò)誤：返藍(lán)應(yīng)在蘇木精染色后、伊紅染色前，使用流水或弱堿性溶液（如氨水）。C錯(cuò)誤：分化針對細(xì)胞核染色（蘇木精），而非胞漿（伊紅）。D正確：脫水需梯度酒精（如70%-80%-95%-100%）避免組織收縮。E正確：二甲苯透明后，中性樹膠封片可長期保存。13.下列特殊染色技術(shù)與對應(yīng)靶物質(zhì)的組合，哪些是正確的？A.PAS染色——糖原和中性黏液物質(zhì)B.蘇丹III染色——黑色素C.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)D.維多利亞藍(lán)染色——彈性纖維E.阿爾辛藍(lán)染色——酸性黏液物質(zhì)【選項(xiàng)】A.PAS染色——糖原和中性黏液物質(zhì)B.蘇丹III染色——黑色素C.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)D.維多利亞藍(lán)染色——彈性纖維E.阿爾辛藍(lán)染色——酸性黏液物質(zhì)【參考答案】ACDE【解析】A正確：PAS反應(yīng)可顯示糖原、中性黏液及基底膜等糖蛋白。B錯(cuò)誤：蘇丹III用于脂質(zhì)染色（橘紅色），黑色素常用Fontana-Masson法。C正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后呈磚紅色，偏振光下蘋果綠雙折光。D正確：維多利亞藍(lán)是彈性纖維的特異性染色劑（藍(lán)綠色）。E正確：阿爾辛藍(lán)在pH2.5時(shí)特異性顯示酸性黏液物質(zhì)（如羧酸基黏多糖）。14.免疫組織化學(xué)技術(shù)中，抗原修復(fù)的正確方法包括：A.蛋白酶K消化修復(fù)B.高壓加熱修復(fù)法C.微波加熱修復(fù)法D.酸水解抗原修復(fù)E.低溫冷凍修復(fù)法【選項(xiàng)】A.蛋白酶K消化修復(fù)B.高壓加熱修復(fù)法C.微波加熱修復(fù)法D.酸水解抗原修復(fù)E.低溫冷凍修復(fù)法【參考答案】ABC【解析】A正確：蛋白酶K可分解掩蓋抗原的蛋白質(zhì)。B正確：高壓加熱（121℃）能暴露出福爾馬林遮蔽的抗原表位。C正確：微波加熱通過分子振動打開抗原結(jié)合位點(diǎn)。D錯(cuò)誤：酸水解用于DNA暴露（如Feulgen染色），非抗原修復(fù)。E錯(cuò)誤：低溫冷凍用于組織保存，不參與抗原修復(fù)。15.下列關(guān)于組織脫水劑的描述，正確的選項(xiàng)是：A.乙醇脫水能力隨濃度梯度遞增B.丙酮脫水速度快但易導(dǎo)致組織脆硬C.正丁醇可與石蠟混溶，減少組織收縮D.甘油適用于特殊組織的緩慢脫水E.異丙醇脫水效果優(yōu)于乙醇且毒性更低【選項(xiàng)】A.乙醇脫水能力隨濃度梯度遞增B.丙酮脫水速度快但易導(dǎo)致組織脆硬C.正丁醇可與石蠟混溶，減少組織收縮D.甘油適用于特殊組織的緩慢脫水E.異丙醇脫水效果優(yōu)于乙醇且毒性更低【參考答案】ABCD【解析】A正確：常規(guī)脫水流程從低濃度（70%）到高濃度（100%）乙醇逐步置換水分。B正確：丙酮脫水快但過度使用會導(dǎo)致組織收縮脆化。C正確：正丁醇兼具脫水和透明作用，與石蠟相容性好。D正確：甘油常用于骨組織等難脫水樣本的溫和處理。E錯(cuò)誤：異丙醇脫脂能力強(qiáng)但滲透性較差，不適合常規(guī)組織脫水。16.石蠟切片制作流程中必須包含的步驟是：A.組織固定→脫水→透明→浸蠟→包埋B.切片厚度通常為4-6μmC.展片水溫應(yīng)控制在45-50℃D.烤片溫度需達(dá)60-65℃以增強(qiáng)附著力E.未染色切片可長期室溫保存【選項(xiàng)】A.組織固定→脫水→透明→浸蠟→包埋B.切片厚度通常為4-6μmC.展片水溫應(yīng)控制在45-50℃D.烤片溫度需達(dá)60-65℃以增強(qiáng)附著力E.未染色切片可長期室溫保存【參考答案】ABCD【解析】A正確：此為石蠟切片的標(biāo)準(zhǔn)預(yù)處理流程順序。B正確：4-6μm厚度可兼顧結(jié)構(gòu)完整性與染色通透性。C正確：此溫度范圍使蠟帶充分展開且不破壞組織。D正確：適度加熱使切片緊密粘附于載玻片。E錯(cuò)誤：未染色切片需避光防潮冷藏，室溫保存易脫片或變質(zhì)。17.下列哪些是細(xì)胞內(nèi)色素沉著的常見類型？A.含鐵血黃素B.膽紅素C.脂褐素D.黑色素E.鈣鹽沉積【選項(xiàng)】A.含鐵血黃素B.膽紅素C.脂褐素D.黑色素E.鈣鹽沉積【參考答案】ABCD【解析】A正確：含鐵血黃素為血紅蛋白分解產(chǎn)物，見于巨噬細(xì)胞。B正確：膽紅素為膽汁代謝產(chǎn)物，瘀膽時(shí)見于肝細(xì)胞。C正確：脂褐素為細(xì)胞自噬溶酶體的未消化殘?bào)w，見于衰老細(xì)胞。D正確：黑色素由黑色素細(xì)胞合成，存在于表皮及黑色素瘤。E錯(cuò)誤：鈣鹽為無機(jī)鹽沉積，不屬于色素范疇。18.用于顯示微生物的特殊染色方法包括：A.抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）B.Gram染色C.Grocott六胺銀染色D.Warthin-Starry銀染E.過碘酸雪夫（PAS）染色【選項(xiàng)】A.抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）B.Gram染色C.Grocott六胺銀染色D.Warthin-Starry銀染E.過碘酸雪夫（PAS）染色【參考答案】ABCD【解析】A正確：抗酸染色用于結(jié)核分枝桿菌（紅色）。B正確：Gram染色區(qū)分革蘭陽性（紫色）/陰性（紅色）菌。C正確：六胺銀染色顯示真菌（黑色）和肺孢子菌。D正確：Warthin-Starry法顯示螺旋體（如梅毒螺旋體）及幽門螺桿菌。E錯(cuò)誤：PAS主要用于糖原和黏液物質(zhì)，雖可染真菌胞壁但非特異性方法。19.免疫組化假陽性的常見原因包括：A.內(nèi)源性生物素干擾B.抗原擴(kuò)散現(xiàn)象C.一抗?jié)舛冗^高D.組織自身熒光E.顯色時(shí)間過長【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性生物素干擾B.抗原擴(kuò)散現(xiàn)象C.一抗?jié)舛冗^高D.組織自身熒光E.顯色時(shí)間過長【參考答案】ABCE【解析】A正確：肝、腎等組織含內(nèi)源性生物素需提前阻斷。B正確：壞死區(qū)抗原彌散至周圍細(xì)胞形成假陽性定位。C正確：抗體過量導(dǎo)致非特異性結(jié)合增多。D錯(cuò)誤：自身熒光導(dǎo)致自發(fā)熒光假陽性，多見于免疫熒光法，而非常規(guī)免疫組化。E正確：DAB顯色超時(shí)會使背景加深形成假陽性。20.在分子病理學(xué)技術(shù)中，F(xiàn)ISH（熒光原位雜交）的特點(diǎn)是：A.可檢測DNA序列拷貝數(shù)變化B.需依賴PCR擴(kuò)增靶序列C.探針標(biāo)記采用熒光素直接標(biāo)記D.能同時(shí)檢測多個(gè)基因位點(diǎn)E.分辨率高于常規(guī)核型分析【選項(xiàng)】A.可檢測DNA序列拷貝數(shù)變化B.需依賴PCR擴(kuò)增靶序列C.探針標(biāo)記采用熒光素直接標(biāo)記D.能同時(shí)檢測多個(gè)基因位點(diǎn)E.分辨率高于常規(guī)核型分析【參考答案】ACDE【解析】A正確：FISH可檢測基因擴(kuò)增（如HER2）或缺失（如1p/19q）。B錯(cuò)誤：FISH直接雜交無需PCR擴(kuò)增（與PCR-FISH不同）。C正確：常用熒光素（如FITC、Cy3）標(biāo)記核酸探針。D正確：多色FISH可同步檢測不同染色體異常。E正確：分辨率可達(dá)1-10Mb，優(yōu)于核型分析（≥5Mb）。21.下列關(guān)于組織固定液中乙醇的描述，哪些是正確的？（）【選項(xiàng)】A.高濃度乙醇可溶解脂肪，適用于脂肪組織的固定B.70%-80%的乙醇滲透力最弱，固定效果差C.乙醇固定可保存組織內(nèi)的抗原性，適合免疫組化染色D.單純乙醇固定易導(dǎo)致組織收縮硬化E.95%乙醇可有效固定糖原【參考答案】D、E【解析】A錯(cuò)誤：高濃度乙醇（如95%）能沉淀蛋白質(zhì)和糖原，但溶解脂肪作用弱，脂肪組織固定常用甲醛或特殊固定劑。B錯(cuò)誤：70%-80%乙醇滲透力較強(qiáng)，但仍是脫水劑而非理想的固定劑主體。C錯(cuò)誤：乙醇會破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，顯著降低抗原性，免疫組化常用中性緩沖甲醛或特定冷凍固定。D正確：乙醇固定會使組織明顯收縮硬化，尤其高濃度時(shí)更明顯，故較少單獨(dú)使用。E正確：95%乙醇是糖原固定常用試劑，配合冰醋酸效果更佳（如Carnoy液）。22.HE染色中關(guān)于分化步驟的描述，正確的包括？（）【選項(xiàng)】A.分化指去除過度結(jié)合的蘇木素B.鹽酸乙醇分化后可立即水洗終止反應(yīng)C.分化程度需在顯微鏡下控制至細(xì)胞質(zhì)無色D.分化后需充分藍(lán)化以使染色質(zhì)清晰E.過度分化會導(dǎo)致細(xì)胞核染色過淺【參考答案】A、B、D、E【解析】C錯(cuò)誤：分化應(yīng)控制在細(xì)胞核清晰而細(xì)胞質(zhì)/結(jié)締組織背景近乎無色，僅“細(xì)胞質(zhì)無色”表述不全面（膠原纖維等也需脫色）。B正確：鹽酸乙醇分化后需流水沖洗10-15分鐘以終止酸性環(huán)境，促進(jìn)蘇木素轉(zhuǎn)為藍(lán)色。D正確：藍(lán)化（堿性環(huán)境）使蘇木素與DNA穩(wěn)定結(jié)合，增強(qiáng)核染色對比度。23.下列哪種組合屬于特殊染色技術(shù)與其主要應(yīng)用領(lǐng)域的正確匹配？（）【選項(xiàng)】A.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)檢測B.PAS染色——中性黏液物質(zhì)及基膜顯示C.Masson三色染色——膠原纖維與肌纖維區(qū)分D.磷鎢酸蘇木素（PTAH）——橫紋肌橫紋顯示E.油紅O染色——黑色素顆粒標(biāo)記【參考答案】A、B、C、D【解析】E錯(cuò)誤：油紅O為脂溶性染料，用于顯示脂肪組織；黑色素常用Fontana-Masson銀染法。A正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后呈橙紅色，偏振光下顯蘋果綠色雙折光。B正確：PAS（過碘酸-Schiff）可染糖原、中性黏液及基膜中的糖蛋白。24.關(guān)于石蠟切片操作的注意事項(xiàng)，正確的有？（）【選項(xiàng)】A.組織脫水應(yīng)遵循低濃度到高濃度乙醇梯度B.透明劑（如二甲苯）處理不足會導(dǎo)致石蠟滲透障礙C.浸蠟溫度超過65℃可能引起組織脆化D.切片時(shí)室溫低于20℃易導(dǎo)致蠟塊碎裂E.切片厚度通常為1-2μm以滿足高分辨率觀察【參考答案】A、B、C【解析】D錯(cuò)誤：室溫過低（如<15℃）會導(dǎo)致蠟塊過硬而切片碎裂，但20℃屬常規(guī)操作溫度。E錯(cuò)誤：常規(guī)病理切片厚度為4-6μm，超薄切片（1-2μm）用于特殊研究而非常規(guī)診斷。B正確：透明不徹底會阻礙石蠟浸潤，導(dǎo)致切片時(shí)組織松散或出現(xiàn)裂隙。25.下列哪些是免疫組化染色中內(nèi)源性過氧化物酶阻斷的關(guān)鍵步驟？（）【選項(xiàng)】A.使用3%過氧化氫甲醇溶液處理切片B.處理時(shí)間需控制在20分鐘以內(nèi)C.阻斷后可消除紅細(xì)胞及粒細(xì)胞假陽性D.僅需在DAB顯色前進(jìn)行E.微波修復(fù)抗原后可省略此步驟【參考答案】A、C【解析】B錯(cuò)誤：阻斷時(shí)間通常為10-30分鐘，需根據(jù)組織類型調(diào)整，如富含血細(xì)胞的組織需延長。D錯(cuò)誤：阻斷應(yīng)在抗體孵育**前**完成，避免內(nèi)源性酶干擾后續(xù)反應(yīng)。E錯(cuò)誤：抗原修復(fù)不影響內(nèi)源性酶活性，阻斷步驟不可省略。26.顯微鏡使用中，下列哪些操作可提高分辨率？（）【選項(xiàng)】A.增大物鏡的數(shù)值孔徑（NA）B.使用波長更短的光源C.降低聚光鏡的高度D.在物鏡與標(biāo)本間滴加香柏油E.縮小光闌以增強(qiáng)景深【參考答案】A、B、D【解析】分辨率公式為R=0.61λ/NA（λ為波長）。A增大NA、B減小λ均可提高分辨率。D中油鏡通過增加介質(zhì)折射率提升NA。C錯(cuò)誤：聚光鏡需升至與物鏡NA匹配的位置，過低會降低有效NA。E錯(cuò)誤：縮小光闌會減少NA，反而降低分辨率（雖可增加對比度）。27.關(guān)于組織脫水機(jī)的使用規(guī)范，錯(cuò)誤的有？（）【選項(xiàng)】A.脂肪組織應(yīng)延長脫水時(shí)間至常規(guī)組織的2倍B.骨組織需先脫鈣后再進(jìn)行脫水處理C.脫水程序結(jié)束后應(yīng)立即進(jìn)行透明步驟D.大標(biāo)本與小標(biāo)本可混合裝載以提高效率E.乙醇梯度中80%濃度適用于絕大多數(shù)軟組織【參考答案】A、D【解析】A錯(cuò)誤：脂肪組織脫水時(shí)間過長會加劇硬化，宜采用丙酮或氯仿等專用流程。D錯(cuò)誤：大小標(biāo)本混裝導(dǎo)致脫水/透明不均勻，應(yīng)分類處理。B正確：骨組織須徹底脫鈣（如10%EDTA）后才能進(jìn)入脫水流程。28.下列哪種病理染色技術(shù)需使用重金屬鹽作為媒染劑？（）【選項(xiàng)】A.Gram染色B.Warthin-Starry銀染C.Grocott六胺銀染色D.Ziehl-Neelsen抗酸染色E.Giemsa染色【參考答案】B、C【解析】B中Warthin-Starry染色用硝酸銀與對苯二酚，銀離子為媒染劑，用于螺旋體及幽門螺桿菌。C中六胺銀染色以硝酸銀和硼氫化鈉為試劑，染真菌及卡氏肺孢子蟲。A/D/E均使用苯胺染料，無需金屬媒染。29.關(guān)于冷凍切片的操作要點(diǎn)，正確的有？（）【選項(xiàng)】A.組織速凍溫度以-25℃至-30℃為宜B.切片厚度通常設(shè)定為8-10μmC.未固定新鮮組織需在30分鐘內(nèi)完成切片D.防卷板角度不當(dāng)會導(dǎo)致切片褶皺E.貼片后應(yīng)立即用95%乙醇固定【參考答案】B、D【解析】A錯(cuò)誤：速凍推薦-40℃以下（如液氮預(yù)冷異戊烷）以減少冰晶形成。C錯(cuò)誤：冷凍切片無需限時(shí)，但長期冷凍會致組織脫水變性。E錯(cuò)誤：固定常用中性甲醛或丙酮，95%乙醇主要用于細(xì)胞學(xué)涂片。30.在病理診斷中，下列哪些結(jié)構(gòu)需通過特殊染色鑒別？（）【選項(xiàng)】A.纖維素與淀粉樣物質(zhì)B.黑色素與含鐵血黃素C.黏液與糖原D.膠原纖維與彈力纖維E.細(xì)菌與真菌【參考答案】B、D、E【解析】B需普魯士藍(lán)（含鐵血黃素）與Fontana-Masson（黑色素）區(qū)分；D需VanGieson（膠原）與Verhoeff（彈力）染色；E需Gram/PAS等鑒別菌種。A中纖維素常用HE或MSB染色，淀粉樣物用剛果紅，無需組合染色鑒別；C中黏液（AB/PAS）與糖原（PAS+淀粉酶消化）可用相同染色區(qū)分。31.在病理組織固定過程中，下列哪些固定劑屬于常用固定劑？（）【選項(xiàng)】A.10%中性緩沖甲醛B.95%乙醇C.苦味酸溶液D.生理鹽水E.4%多聚甲醛【參考答案】A、B、E【解析】1.10%中性緩沖甲醛是病理學(xué)最常用的固定劑之一，能有效保存組織形態(tài)并減少人工假象。2.95%乙醇屬于醛類固定劑的替代品，適用于特定組織（如細(xì)胞涂片）的快速固定。3.4%多聚甲醛常用于電鏡樣本固定及免疫組織化學(xué)研究。4.苦味酸溶液（如Bouin液）雖可用于特殊組織固定，但非常規(guī)首選。5.生理鹽水無固定作用，僅用于組織短期保存或運(yùn)輸。32.關(guān)于石蠟包埋組織的脫水處理，以下哪些酒精濃度梯度是合理的？（）【選項(xiàng)】A.70%→80%→95%→無水乙醇B.50%→70%→90%→無水乙醇C.無水乙醇→95%→85%→70%D.95%→90%→80%→70%E.85%→90%→95%→無水乙醇【參考答案】A、E【解析】1.標(biāo)準(zhǔn)脫水順序需循序漸進(jìn)以減少組織收縮變形，通常從低濃度（70%）逐步升至無水乙醇（A正確）。2.選項(xiàng)E中85%→90%→95%→無水乙醇雖然跨度略大，但仍符合梯度原則（較高濃度區(qū)間適用）。3.B選項(xiàng)起始濃度過低（50%）易導(dǎo)致脫水不充分；C、D為逆向梯度，違反脫水基本原理。33.HE染色中，下列哪些步驟屬于關(guān)鍵質(zhì)量控制點(diǎn)？（）【選項(xiàng)】A.蘇木精染色時(shí)間控制B.伊紅分化液濃度選擇C.鹽酸酒精分化時(shí)長D.梯度酒精脫水徹底性E.中性樹膠封固厚度【參考答案】A、C、D【解析】1.蘇木精染色時(shí)間直接影響核著色程度（A正確）；鹽酸酒精分化時(shí)長決定染色對比度（C正確）。2.梯度酒精脫水不徹底會導(dǎo)致切片透明度下降（D正確）。3.伊紅分化液常為預(yù)配標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度調(diào)整非日常操作（B錯(cuò)誤）；封固厚度主要影響鏡檢而非染色質(zhì)量（E錯(cuò)誤）。34.進(jìn)行PAS染色時(shí)，可顯示陽性的物質(zhì)包括？（）【選項(xiàng)】A.糖原B.中性黏液C.真菌細(xì)胞壁D.膠原纖維E.基底膜【參考答案】A、B、C、E【解析】1.PAS反應(yīng)利用高碘酸氧化多糖類物質(zhì)的乙二醇基，與Schiff試劑結(jié)合顯紅色。2.糖原（A）、中性黏液（B）、真菌胞壁多糖（C）及基底膜糖蛋白（E）均含豐富多糖成分。3.膠原纖維主要成分為蛋白質(zhì)，需用VanGieson等特殊染色顯示（D錯(cuò)誤）。35.免疫組織化學(xué)染色出現(xiàn)非特異性著色的可能原因有哪些？（）【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷B.一抗?jié)舛冗^高C.組織干燥D.脫蠟不徹底E.DAB顯色時(shí)間過長【參考答案】A、B、C、D、E【解析】1.內(nèi)源性酶（如紅細(xì)胞）會催化DAB產(chǎn)生假陽性（A正確）；一抗?jié)舛冗^高導(dǎo)致非特異性結(jié)合（B正確）。2.組織干燥使蛋白質(zhì)變性增加背景著色（C正確）；脫蠟不殘留石蠟阻礙抗體結(jié)合（D正確）。3.DAB顯色過度會加深背景顯色（E正確）。以上均為常見非特異著色原因。三、判斷題（共30題）1.組織固定時(shí)使用10%中性緩沖甲醛溶液，其最佳固定時(shí)間為48小時(shí)，超過該時(shí)間會導(dǎo)致組織過度硬化，影響后續(xù)制片質(zhì)量?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】10%中性緩沖甲醛的最佳固定時(shí)間通常為24-48小時(shí)，但短時(shí)間固定（如6小時(shí)）可能導(dǎo)致固定不充分，而超過48小時(shí)（如1周內(nèi)）對常規(guī)制片無明顯影響。組織硬化主要因甲醛濃度過高或固定時(shí)間過長（數(shù)周以上）引起，非嚴(yán)格限定于48小時(shí)。2.HE染色中蘇木精染液主要用于細(xì)胞質(zhì)的著色，伊紅染液用于細(xì)胞核的著色?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】蘇木精為堿性染料，主要使細(xì)胞核內(nèi)的核酸及核蛋白等酸性結(jié)構(gòu)染成藍(lán)紫色；伊紅為酸性染料，使細(xì)胞質(zhì)、膠原纖維等堿性成分染成粉紅色。題干描述的功能完全相反。3.石蠟包埋技術(shù)中，組織脫水需依次經(jīng)過70%、80%、95%、100%乙醇的梯度處理，以徹底置換水分?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】脫水階梯一般為70%→80%→95%→100%乙醇（可設(shè)兩缸無水乙醇），逐步置換水分避免組織劇烈收縮。若跳過低濃度乙醇直接使用高濃度，易導(dǎo)致組織變形或脫水不均。4.冰凍切片制作時(shí)，若需長期保存組織，最佳溫度為-80℃，切片厚度一般為2-3μm?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】冰凍切片的常規(guī)保存溫度為-20℃至-40℃，-80℃多用于長期保存未切塊組織。其標(biāo)準(zhǔn)厚度為5-10μm（診斷常用6-8μm），2-3μm為石蠟切片厚度。5.Masson三色染色中，膠原纖維被染成藍(lán)色，肌纖維染成紅色，可用于鑒別纖維組織增生與肌組織病變?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】Masson染色原理：麗春紅+酸性品紅染肌纖維為紅色，苯胺藍(lán)染膠原纖維為藍(lán)色，常用于區(qū)分纖維化區(qū)域（藍(lán)）與肌組織（紅），如肝硬化、心肌纖維化等病變分析。6.免疫組化染色中，抗原熱修復(fù)需使用pH6.0的檸檬酸緩沖液，高壓修復(fù)法的溫度應(yīng)控制在100℃以內(nèi)?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】檸檬酸緩沖液常用pH值為6.0（部分抗體適用pH9.0EDTA緩沖液）。高壓修復(fù)法通常在121℃、103kPa條件下進(jìn)行，高溫高壓可充分暴露被遮蔽的抗原表位。7.巴氏染色中，橙黃G6染液可特異性標(biāo)記角化上皮細(xì)胞，使其胞質(zhì)呈現(xiàn)橘黃色?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】巴氏染色中，橙黃G6主要染角化前細(xì)胞及角化細(xì)胞胞質(zhì)（橘黃色），EA36/EA50染非角化上皮細(xì)胞（藍(lán)綠色）。該特性對宮頸癌篩查中細(xì)胞分化程度判斷具有關(guān)鍵意義。8.電子顯微鏡樣品制備時(shí)，鋨酸后固定的主要作用是增強(qiáng)組織導(dǎo)電性，減少樣本荷電效應(yīng)?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】鋨酸后固定的核心功能是：①穩(wěn)定脂質(zhì)結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞膜）；②增加樣本電子密度。導(dǎo)電性提升需依賴后續(xù)金屬鍍膜（如噴金），非鋨酸作用范疇。9.原位雜交技術(shù)檢測HPV-DNA時(shí)，蛋白酶K消化時(shí)間過長可能導(dǎo)致核酸降解，建議控制在30分鐘以內(nèi)?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】蛋白酶K的典型工作濃度為20μg/ml，孵育時(shí)間約15-30分鐘（37℃）。過度消化會破壞組織形態(tài)并切斷靶核酸，導(dǎo)致雜交信號減弱或消失。10.顯微攝影時(shí)，柯勒照明調(diào)節(jié)的關(guān)鍵步驟包括：視野光闌調(diào)至最小，聚光鏡中心對準(zhǔn)光軸，再擴(kuò)大光闌至視野邊緣外?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】標(biāo)準(zhǔn)柯勒照明調(diào)節(jié)流程：①關(guān)閉場光闌；②聚焦樣品；③收小孔徑光闌；④調(diào)節(jié)聚光鏡中心；⑤打開場光闌至剛好超出視野。該操作可消除雜散光，提升成像對比度。11.HE染色中，伊紅可使細(xì)胞核染成紅色，細(xì)胞質(zhì)染成藍(lán)色?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】HE染色中，蘇木精（Hematoxylin）使細(xì)胞核染成藍(lán)色，伊紅（Eosin）使細(xì)胞質(zhì)、膠原纖維等染成紅色。題干描述的顏色對應(yīng)關(guān)系完全顛倒，屬于常見易混淆點(diǎn)。12.中性緩沖甲醛是病理組織常規(guī)固定的首選固定液，其常用濃度為10%。【選項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】中性緩沖甲醛（pH7.2-7.4）能有效保存組織形態(tài)并減少人工假象，10%濃度（即4%甲醛溶液）為國際通用標(biāo)準(zhǔn)。該知識點(diǎn)為病理技術(shù)基礎(chǔ)操作的核心考點(diǎn)。13.冷凍切片技術(shù)中，組織的最佳切片厚度通常為10-15微米?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】冷凍切片標(biāo)準(zhǔn)厚度為5-10微米。過厚（如10-15微米）會導(dǎo)致細(xì)胞重疊影響診斷，此數(shù)值為操作規(guī)范中的易錯(cuò)記憶點(diǎn)。14.Masson三色染色法中，膠原纖維被染成藍(lán)色，肌肉纖維染成紅色。【選項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】Masson染色是鑒別結(jié)締組織的重要方法：膠原纖維呈藍(lán)色，肌肉、纖維素呈紅色，細(xì)胞核呈黑藍(lán)色。色彩對應(yīng)關(guān)系是特殊染色技術(shù)的典型考點(diǎn)。15.組織脫水過程中，無水乙醇的濃度應(yīng)梯度遞增，通常從70%開始?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】標(biāo)準(zhǔn)脫水程序從低濃度乙醇（如75%）逐步過渡到高濃度（95%、100%），直接使用70%以下濃度會導(dǎo)致組織收縮過度，此為技術(shù)操作中的關(guān)鍵步驟。16.抗酸桿菌染色（Ziehl-Neelsen法）中，石炭酸復(fù)紅染色后需用3%鹽酸乙醇脫色?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】脫色步驟是該染色法的核心：抗酸桿菌因含分枝菌酸抵抗脫色而呈紅色，非抗酸菌被脫色后經(jīng)亞甲基藍(lán)復(fù)染呈藍(lán)色。此原理為微生物染色的重難點(diǎn)。17.免疫組織化學(xué)染色中，抗原熱修