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檢驗(yàn)科樣品采集與運(yùn)輸規(guī)范操作流程引言樣品采集與運(yùn)輸是檢驗(yàn)前質(zhì)量控制的核心環(huán)節(jié),直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性,進(jìn)而影響臨床診斷、治療決策及患者安全。依據(jù)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》(ISO____:2022)、《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄》(2023版)及美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)相關(guān)指南,本文梳理檢驗(yàn)科樣品采集與運(yùn)輸?shù)囊?guī)范操作流程,旨在為臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員提供可遵循的操作規(guī)范,保障檢驗(yàn)質(zhì)量。一、樣品采集前準(zhǔn)備(一)患者準(zhǔn)備1.飲食控制:空腹項(xiàng)目(如血糖、血脂、肝功能、腎功能等):患者需禁食8-12小時(shí),禁飲含酒精、咖啡因的飲料;避免采集前24小時(shí)內(nèi)進(jìn)食高脂、高蛋白食物(如肥肉、雞蛋),以免影響血脂、膽紅素等結(jié)果。特殊項(xiàng)目:如血氨檢測(cè)需禁食6小時(shí),避免進(jìn)食高蛋白食物;尿膽原檢測(cè)需避免進(jìn)食胡蘿卜、橘子等富含色素的食物。2.藥物影響:采集前需詢問(wèn)患者用藥史,尤其是影響檢驗(yàn)結(jié)果的藥物(如抗生素影響微生物培養(yǎng)、維生素C影響尿隱血試驗(yàn)、華法林影響凝血功能)。若無(wú)法停藥,需在申請(qǐng)單上標(biāo)注藥物名稱及劑量,便于檢驗(yàn)人員解讀結(jié)果。3.運(yùn)動(dòng)與情緒:采集前30分鐘避免劇烈運(yùn)動(dòng)(如跑步、搬運(yùn)重物),避免情緒激動(dòng)(如爭(zhēng)吵、哭泣),以免影響心率、血壓及某些生化指標(biāo)(如肌酸激酶、乳酸)。4.其他準(zhǔn)備:尿液、糞便樣品采集前需清潔會(huì)陰部,避免尿液混入白帶、糞便混入尿液;痰液采集前需漱口,避免唾液污染。(二)器材準(zhǔn)備1.容器選擇:血液樣品:根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目選擇合適的抗凝管或促凝管(見(jiàn)表1),容器需無(wú)破損、無(wú)裂紋,標(biāo)簽清晰(含患者姓名、ID號(hào)、采集時(shí)間等信息)。尿液樣品:使用清潔、干燥的一次性尿杯,微生物培養(yǎng)需用無(wú)菌尿杯;24小時(shí)尿標(biāo)本需用帶蓋的塑料容器,加入防腐劑(如甲苯、濃鹽酸)時(shí)需遵循說(shuō)明書。糞便樣品:使用一次性糞便采集盒,如需寄生蟲檢查需用帶固定液的容器(如甲醛溶液)。無(wú)菌樣品(如腦脊液、胸腹水、組織活檢):使用無(wú)菌容器,避免污染。表1常見(jiàn)血液樣品容器選擇檢測(cè)項(xiàng)目容器類型抗凝劑/添加劑血常規(guī)紫色帽管EDTA-K2(1.5-2.2mg)凝血功能藍(lán)色帽管枸櫞酸鈉(1:9比例)血糖、電解質(zhì)灰色帽管氟化鈉+草酸鉀肝功能、腎功能紅色帽管/黃色帽管促凝劑(如凝血酶)血培養(yǎng)黃色/紫色帽管無(wú)(需用專用血培養(yǎng)瓶)2.器材檢查:采集前需檢查器材有效期(如抗凝管、尿杯),避免使用過(guò)期產(chǎn)品;檢查注射器針頭是否鋒利、無(wú)彎曲,避免溶血。無(wú)菌器材(如血培養(yǎng)瓶、腦脊液管)需檢查包裝是否完好,有無(wú)漏氣、破損。(三)人員準(zhǔn)備1.培訓(xùn)要求:采集人員需經(jīng)專業(yè)培訓(xùn),熟悉各類樣品采集方法、抗凝劑使用規(guī)則及注意事項(xiàng);掌握無(wú)菌操作技術(shù)(如血培養(yǎng)采集、腦脊液采集)。2.個(gè)人防護(hù):采集前需洗手,戴一次性手套、口罩;接觸傳染性樣品(如乙肝患者血液、結(jié)核患者痰液)時(shí)需戴護(hù)目鏡、穿隔離衣,避免交叉感染。二、常見(jiàn)樣品采集規(guī)范(一)血液樣品采集1.靜脈血采集(最常用):操作步驟:1.核對(duì)患者信息(姓名、ID號(hào)、申請(qǐng)單),確認(rèn)采集項(xiàng)目。2.選擇采集部位:優(yōu)先選擇肘正中靜脈、貴要靜脈或頭靜脈;兒童可選擇手背靜脈、足背靜脈。3.扎止血帶:在采集部位上方5-10cm處扎止血帶,時(shí)間不超過(guò)1分鐘(避免靜脈淤血導(dǎo)致溶血)。4.消毒:用75%乙醇或碘伏消毒皮膚,待干后穿刺。5.穿刺:持注射器針頭與皮膚成30°-45°角刺入靜脈,見(jiàn)回血后降低角度(10°-15°)繼續(xù)推進(jìn)0.5cm,固定針頭。6.采血:松開止血帶,緩慢抽取血液至所需量(如血常規(guī)需2ml,凝血功能需3ml)。7.拔針:用干棉簽按壓穿刺點(diǎn)5-10分鐘(避免揉擦),囑患者保持手臂伸直。注意事項(xiàng):避免在輸液側(cè)手臂采集(如正在輸葡萄糖、生理鹽水),以免稀釋樣品;若必須采集,需在輸液對(duì)側(cè)手臂或輸液結(jié)束30分鐘后采集。避免溶血:注射器針頭不宜過(guò)細(xì)(≤22G),采血速度不宜過(guò)快,避免劇烈震蕩樣品;血液注入抗凝管后需立即輕輕顛倒混勻(5-8次),避免凝固。避免凝血:抗凝管采集后需及時(shí)混勻,避免放置過(guò)久(如EDTA管需在采集后1小時(shí)內(nèi)送檢)。2.動(dòng)脈血采集(用于血?dú)夥治觯翰僮鞑襟E:1.選擇采集部位:優(yōu)先選擇橈動(dòng)脈(搏動(dòng)明顯、易壓迫),其次為股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈。2.消毒:用75%乙醇消毒皮膚,待干后戴無(wú)菌手套。3.穿刺:用動(dòng)脈血?dú)忉槪ê嗡兀┽橆^與皮膚成45°-60°角刺入動(dòng)脈,見(jiàn)回血后固定針頭,抽取1-2ml血液。4.拔針:用干棉簽按壓穿刺點(diǎn)10-15分鐘(避免出血),立即將樣品注入血?dú)夥治鰞x或密封保存(避免空氣進(jìn)入)。注意事項(xiàng):采集前需確認(rèn)患者呼吸狀態(tài)(如是否吸氧、機(jī)械通氣),并在申請(qǐng)單上標(biāo)注(如吸氧濃度、呼吸頻率)。樣品需立即送檢(15分鐘內(nèi)),避免放置過(guò)久導(dǎo)致CO?逸出、pH值升高。(二)尿液樣品采集1.隨機(jī)尿:操作步驟:患者留取中段尿(排尿初期棄去10-20ml,留取中間段尿液),裝入清潔尿杯,量約10-20ml。注意事項(xiàng):避免混入白帶、糞便、衛(wèi)生紙等污染物;采集后1小時(shí)內(nèi)送檢(夏季需冷藏),避免細(xì)菌繁殖導(dǎo)致尿比重、尿糖結(jié)果異常。2.晨尿:操作步驟:患者晨起后第一次排尿,留取中段尿,裝入清潔尿杯。適用項(xiàng)目:尿蛋白、尿沉渣、尿妊娠試驗(yàn)等(晨尿濃縮,結(jié)果更準(zhǔn)確)。3.24小時(shí)尿:操作步驟:1.第一天早晨7點(diǎn)排空膀胱(棄去),開始收集此后24小時(shí)內(nèi)的所有尿液(包括次日早晨7點(diǎn)的最后一次排尿)。2.將尿液裝入帶蓋的塑料容器,加入防腐劑(如甲苯10ml/1000ml尿,用于尿蛋白、尿糖檢測(cè);濃鹽酸10ml/1000ml尿,用于尿17-羥皮質(zhì)類固醇檢測(cè))。3.采集結(jié)束后搖勻樣品,量取總尿量,取10-20ml裝入尿杯送檢。注意事項(xiàng):防腐劑需在采集前加入容器,避免尿液變質(zhì);采集期間避免劇烈運(yùn)動(dòng)、飲酒。(三)糞便樣品采集1.常規(guī)糞便:操作步驟:患者用一次性糞便采集盒留取新鮮糞便(約蠶豆大小),挑取有膿血、黏液或異常顏色(如黑色、紅色)的部分。注意事項(xiàng):避免混入尿液、衛(wèi)生紙;采集后1小時(shí)內(nèi)送檢(夏季需冷藏),避免寄生蟲卵死亡、細(xì)菌繁殖。2.寄生蟲糞便:操作步驟:留取新鮮糞便(約5-10g),裝入帶固定液的容器(如10%甲醛溶液),搖勻后送檢。注意事項(xiàng):如需檢查阿米巴原蟲,需留取溫暖的糞便(37℃),立即送檢(30分鐘內(nèi)),避免原蟲死亡。(四)無(wú)菌樣品采集(腦脊液、胸腹水、組織活檢)1.腦脊液采集(腰椎穿刺):操作步驟:由臨床醫(yī)生進(jìn)行腰椎穿刺,采集腦脊液3-5ml,分別裝入3支無(wú)菌管(第一管用于細(xì)菌培養(yǎng),第二管用于生化檢測(cè),第三管用于細(xì)胞計(jì)數(shù))。注意事項(xiàng):采集后立即送檢(15分鐘內(nèi)),避免凝固(如細(xì)胞計(jì)數(shù)需用EDTA管)、細(xì)菌死亡(如腦膜炎奈瑟菌需保溫送檢)。2.胸腹水采集:操作步驟:由臨床醫(yī)生進(jìn)行胸腔穿刺或腹腔穿刺,采集胸腹水5-10ml,裝入無(wú)菌管(如需生化檢測(cè)需加入肝素抗凝)。注意事項(xiàng):避免混入血液(如穿刺損傷血管),如需細(xì)胞學(xué)檢查需留取20-50ml樣品,立即送檢(1小時(shí)內(nèi))。3.組織活檢樣品:操作步驟:由臨床醫(yī)生通過(guò)手術(shù)或穿刺獲取組織樣品(如淋巴結(jié)、肝組織),裝入無(wú)菌容器(如需病理檢查需加入10%福爾馬林固定液)。注意事項(xiàng):固定液需淹沒(méi)組織(體積比10:1),避免組織干燥;如需微生物培養(yǎng),需用無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)的紗布包裹,立即送檢。三、樣品采集后處理(一)標(biāo)記與記錄1.樣品標(biāo)記:采集后需立即在樣品容器上標(biāo)注患者信息(姓名、ID號(hào)、性別、年齡)、采集時(shí)間(年/月/日/時(shí)/分)、樣品類型(如靜脈血、中段尿)、采集部位(如肘正中靜脈、橈動(dòng)脈)。標(biāo)記需清晰、不易脫落(如用防水筆書寫),避免混淆。2.記錄:采集人員需在申請(qǐng)單上記錄采集時(shí)間、采集部位、樣品量、患者狀態(tài)(如空腹、吸氧)及特殊情況(如溶血、凝固)。(二)離心與分離1.血清/血漿分離:促凝管(紅色帽管)采集后需靜置30分鐘(20-25℃),待血液凝固后離心(3000rpm,10分鐘),分離血清。抗凝管(如EDTA管、枸櫞酸鈉管)采集后需立即離心(3000rpm,10分鐘),分離血漿。分離后的血清/血漿需轉(zhuǎn)移至干凈的塑料管中,標(biāo)注患者信息,避免反復(fù)凍融。2.尿液離心:尿液樣品需離心(1500rpm,5分鐘),取沉渣用于尿沉渣檢查;上清液用于尿生化檢測(cè)。(三)保存與暫存1.保存條件:需根據(jù)樣品類型選擇合適的保存溫度(見(jiàn)表2),避免樣品變質(zhì)。短期保存(≤24小時(shí)):可置于4℃冰箱(如血清、尿液);長(zhǎng)期保存(>24小時(shí)):需置于-20℃或-80℃冰箱(如激素、基因檢測(cè)樣品)。表2常見(jiàn)樣品保存條件樣品類型保存溫度保存時(shí)間血清/血漿4℃≤24小時(shí)尿液(常規(guī))4℃≤24小時(shí)糞便(常規(guī))4℃≤24小時(shí)血培養(yǎng)20-25℃≤2小時(shí)腦脊液4℃≤1小時(shí)激素(如胰島素)-20℃≤1個(gè)月基因檢測(cè)樣品-80℃≤6個(gè)月2.暫存注意事項(xiàng):保存容器需密封,避免樣品泄漏或污染;避免與其他樣品混放(如傳染性樣品需單獨(dú)存放)。需在樣品容器上標(biāo)注保存溫度及保存時(shí)間,便于追溯。四、樣品運(yùn)輸規(guī)范(一)運(yùn)輸條件1.溫度控制:需根據(jù)樣品類型選擇合適的運(yùn)輸溫度(如血液樣品需保持4℃,血?dú)夥治鰳悠沸璞3?0-25℃)。運(yùn)輸過(guò)程中需使用溫度控制設(shè)備(如冰袋、保溫箱、干冰),避免溫度波動(dòng)(如夏季運(yùn)輸需用冰袋,冬季需用保溫箱)。2.運(yùn)輸時(shí)間:需根據(jù)樣品類型控制運(yùn)輸時(shí)間(見(jiàn)表3),避免樣品放置過(guò)久導(dǎo)致結(jié)果異常。表3常見(jiàn)樣品運(yùn)輸時(shí)間要求樣品類型運(yùn)輸時(shí)間要求靜脈血(血常規(guī))≤2小時(shí)凝血功能≤2小時(shí)血?dú)夥治觥?5分鐘尿液(常規(guī))≤1小時(shí)腦脊液≤15分鐘血培養(yǎng)≤2小時(shí)3.運(yùn)輸包裝:樣品容器需裝入密封袋(如自封袋),避免泄漏;密封袋外需標(biāo)注“生物危害”標(biāo)志(如GB____規(guī)定的生物安全標(biāo)志)。運(yùn)輸箱需防漏、防震(如用泡沫墊填充),避免樣品破損。(二)運(yùn)輸流程1.交接:采集人員需與運(yùn)輸人員核對(duì)樣品信息(患者姓名、ID號(hào)、樣品類型、采集時(shí)間),確認(rèn)樣品狀態(tài)(如無(wú)溶血、無(wú)凝固、無(wú)泄漏)。運(yùn)輸人員需在交接記錄上簽字,記錄交接時(shí)間、運(yùn)輸人員姓名、樣品數(shù)量。2.運(yùn)輸:運(yùn)輸過(guò)程中需保持樣品直立(如血液樣品避免倒置),避免劇烈震蕩(如尿液樣品避免搖晃)。需使用溫度記錄儀(如藍(lán)牙溫度標(biāo)簽)監(jiān)控運(yùn)輸溫度,確保溫度符合要求(如4℃樣品運(yùn)輸過(guò)程中溫度波動(dòng)不超過(guò)±2℃)。3.接收:實(shí)驗(yàn)室接收人員需核對(duì)樣品信息(與申請(qǐng)單一致),檢查樣品狀態(tài)(如無(wú)溶血、無(wú)凝固、無(wú)泄漏)、運(yùn)輸溫度(如溫度記錄儀數(shù)據(jù))及運(yùn)輸時(shí)間(如是否在規(guī)定時(shí)間內(nèi)送達(dá))。若樣品合格,需在接收記錄上簽字,記錄接收時(shí)間、接收人員姓名;若樣品不合格(如溶血、凝固、運(yùn)輸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)),需標(biāo)注原因,通知采集人員重新采集。四、質(zhì)量控制與異常處理(一)質(zhì)量控制1.采集過(guò)程質(zhì)量檢查:采集人員需在采集后立即檢查樣品狀態(tài)(如血液樣品是否溶血、凝固,尿液樣品是否有污染),若發(fā)現(xiàn)異常,需重新采集。定期對(duì)采集器材(如抗凝管、注射器)進(jìn)行質(zhì)量檢查(如有效期、無(wú)菌性),避免使用不合格器材。2.運(yùn)輸過(guò)程質(zhì)量監(jiān)控:實(shí)驗(yàn)室需定期對(duì)運(yùn)輸人員進(jìn)行培訓(xùn)(如溫度控制、樣品包裝),考核運(yùn)輸流程的規(guī)范性。定期review運(yùn)輸溫度記錄(如每周統(tǒng)計(jì)溫度異常次數(shù)),分析原因(如冰袋數(shù)量不足、運(yùn)輸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)),采取改進(jìn)措施(如增加冰袋數(shù)量、縮短運(yùn)輸時(shí)間)。3.不合格樣品處理:實(shí)驗(yàn)室需制定不合格樣品判定標(biāo)準(zhǔn)(如溶血、凝固、運(yùn)輸時(shí)間超過(guò)規(guī)定、樣品量不足),并明確處理流程(見(jiàn)表4)。表4不合格樣品處理流程不合格原因處理措施溶血(血液樣品)重新采集,標(biāo)注“溶血”凝固(抗凝管)重新采集,標(biāo)注“凝固”運(yùn)輸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)重新采集,標(biāo)注“超時(shí)”樣品量不足重新采集,標(biāo)注“量少”污染(尿液/糞便)重新采集,標(biāo)注“污染”(二)應(yīng)急處理1.樣品泄漏:運(yùn)輸過(guò)程中若發(fā)生樣品泄漏(如血液、尿液泄漏),運(yùn)輸人員需立即停止運(yùn)輸,用消毒紙巾(如含氯消毒液)擦拭泄漏區(qū)域,戴手套避免接觸污染物;將泄漏樣品裝入密封袋,標(biāo)注“泄漏”,通知實(shí)驗(yàn)室處理。實(shí)驗(yàn)室需對(duì)泄漏樣品進(jìn)行消毒(如用含氯消毒液浸泡),避免交叉感染。2.樣品丟失:若運(yùn)輸過(guò)程中樣品丟失,運(yùn)輸人員需立即查找(如檢查運(yùn)輸箱、聯(lián)系快遞公司),若無(wú)法找到,需通知采集人員及患者,重新采集樣品,并記錄丟失情況(如丟失時(shí)間、地點(diǎn)、原因)。3.溫度異常:若運(yùn)輸過(guò)程中溫度異常(如4℃樣品運(yùn)輸溫度超過(guò)8℃),運(yùn)輸人員需立即通知實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)室需評(píng)估溫度異常對(duì)結(jié)果的影響(如血糖會(huì)因溫度升高而降低),若影響較大,需重新采集樣品。五、結(jié)論樣品采集與運(yùn)輸是檢驗(yàn)前質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié),其規(guī)范性直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與臨床應(yīng)用價(jià)值。臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員需嚴(yán)格遵循本文所述的操作流程,加強(qiáng)采集前準(zhǔn)備、規(guī)范采集操作、做好采集后處理、控制運(yùn)輸條件,并通過(guò)質(zhì)量控制與應(yīng)急處
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