152023-12-29發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定I北蟲草菌種制作技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程用液體培養(yǎng)基在生物發(fā)酵罐等容器中，通過深124.2場(chǎng)地選擇水電便利，通風(fēng)良好、空間充足，配料室配磅秤、天平、攪拌機(jī)，分裝室潔凈、水電暢通、通風(fēng)良好，配有恒溫培養(yǎng)箱或培養(yǎng)架、搖床、發(fā)酵罐、空調(diào)、殺菌設(shè)備等。3水電暢通，配有顯微鏡、pH計(jì)、菌落計(jì)數(shù)器等。玻璃試管(18mm×180mm或20mm×200mm)或平板培養(yǎng)皿，(90mm×90mm),試管塞帶有砂芯或者不帶砂芯的硅膠塞。耐高溫高壓的透明潔凈搖瓶或聚丙烯塑料瓶。4.4.3栽培種耐高溫高壓的帶有透氣蓋(膜)玻璃瓶、聚丙烯塑料瓶或不同容積規(guī)格發(fā)酵罐。4.5原料葡萄糖、蛋白胨、硫酸鎂、磷酸二氫鉀等化學(xué)試劑，馬鈴薯、小麥、麥麩等要求新鮮、干燥、無蟲、無霉變。5菌種制備5.1培養(yǎng)基制備配方為馬玲薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、瓊脂20g、蛋白胨5g、牛肉膏0.5g、酵母粉5g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.5g,加水定容1000mL,pH6.5～7.0。分裝至試管中，分裝量掌握在試管長(zhǎng)度的配方為馬玲薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、蛋白胨5g、牛肉膏0.5g、酵母粉5g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.5g,加水定容1000mL,pH6.5～7.0。將液體培養(yǎng)基分裝至容器內(nèi)，分裝量不超總?cè)莘e的3/5。5.1.3栽培種制備配方和方法同原種，分裝量不超過搖床培養(yǎng)容器或發(fā)酵罐總?cè)莘e的3/5。培養(yǎng)基采用常壓或高壓滅菌，在高壓121℃~123℃(0.11MPa～0.15MPa)條件下滅菌20min~25min,常壓100℃~105℃滅菌10h～12h,自然冷卻到50℃左右時(shí)，取出試管，擺放斜面，原種和栽培種取出備用。在超凈工作臺(tái)上，取一段消毒好的子實(shí)體或培養(yǎng)的菌絲體放入試管培養(yǎng)基質(zhì)中間部位，操作過程按照NY/T1731的規(guī)定執(zhí)行。4每升接入4～5塊(2mm×2mm)母種，迅速置于原種培養(yǎng)基內(nèi)，及時(shí)蓋上瓶蓋，所有操作按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。5.3.3栽培種按栽培培養(yǎng)基體積的2%取原種，迅速放入栽培種培養(yǎng)基內(nèi)，及時(shí)蓋上瓶蓋，所有操作按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。5.4培養(yǎng)將接好的試管置于20℃的恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)6d～8d,長(zhǎng)至4cm~5cm時(shí)使用，或轉(zhuǎn)置于光照強(qiáng)度為200Lx下培養(yǎng)2d～3d轉(zhuǎn)色后使用。5.4.2原種和栽培種置于18℃~22℃、120r/min~150r/min可控溫?fù)u床上或發(fā)酵罐中暗培養(yǎng)5d~7d,當(dāng)培養(yǎng)基顏色變?yōu)樽厣螯S白色，且有大量菌絲碎片，不渾濁。取少量培養(yǎng)后的菌種在顯微鏡上進(jìn)行檢測(cè)，無雜菌、無異味，有北蟲草菌種特有的清香味即合