微生物復習2

1、微生物的概念

微生物是一類體積微小、結構簡單、肉眼直接看不見，務必用光學顯微鏡或者者電了?顯微鏡

放大后才能看得見的微小生物的總稱。

2、微生物的生物學特點

微生物的六大共性：

1、體積小，面枳大（基礎、微米納米、物質(zhì)交換）

2、汲取多，代謝旺

3、食譜雜，易培養(yǎng)

4、生長旺，繁殖快

5、習慣強，易變異

6、分布廣，種類多

3、原核微生物與真核微生物的概念及區(qū)別

原核微生物是指細胞核分化程度低，僅有原始核質(zhì)，沒有核膜與核仁；細胞器不完善的原始

單細胞生物。

通常有細菌、螺旋體、支原體、立克次體、衣原體與放線菌這幾種分類

真核微生物是一類具有真正細胞核，具有核膜與核仁分化的較高等的微生物。

真核微生物包含除藍藻以外的藻類、酵母菌、霉菌、原生動物、微型后生動物等。

真核微生物：有一至多條線形染色體。

2.細胞分裂

原核微牛物：二分裂（無性繁殖、裂殖）.

真核微生物：有絲分裂，減數(shù)分裂，產(chǎn)生抱子（有性、無性）

3.生理特性

原核微生物：化能合成作用、生物固氮能力、專性厭氧生活、細胞膜進行呼吸

與光合作用

真核微生物：線粒體葉綠體進行呼吸與光合作用，但真菌沒光合色素

原核微生物:有中體只有核糖體一個細胞器

真核微生物:無中體有維胞器:有線粒體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、葉綠體、中心體。

原核微生物：70S（在細胞質(zhì)中）。

原核微生物：80S(在細胞質(zhì)中)；70S(在某些細胞器中)。

原核微生物：肽聚糖或者脂多糖。

真核微生物：幾丁質(zhì)、多聚糖或者寡糖。

7.運動器官

真核微生物：較粗鞭毛或者纖毛(9+2結構)。

8.細胞大小

原核微生物：較小，1—l()um。1

真核微生物：較大，10—lOOum1

4、革蘭氏染色的步驟、原理及關鍵步驟

5.革蘭氏染色、要緊步驟、結果及實際意義如下：

操作過程如下：涂片一干燥一固定一草酸鉉結晶紫染色(Imin)一水洗一路哥氏碘液媒染

(Imin)一水洗一95%乙醇脫色(30s)一水洗一番紅復染(Imin)一水洗一干燥一鏡檢。

(2)染色結果是：G+菌呈紫色，G一菌呈紅色。

(3)革蘭染色的意義：有助于鑒定細菌、指導用藥、研究與熟悉細菌的染色性、致病性

等。

原理：革蘭氏陽性細菌細胞壁肽聚糖含量高，肽聚糖層較薄厚，類脂質(zhì)含量低，乙醇處

理使細胞壁脫水，肽聚糖層孔徑變小，細胞壁通透性降低，結晶紫-碘復合物被保留在細胞

內(nèi)，因此小被脫色。

革蘭氏陰性菌細抱壁類脂質(zhì)含量高，肽聚糖含量低，肽聚糖層較薄，乙醇溶解

了類脂質(zhì)，使細胞壁通透性增加，結晶紫--碘復合物被洗脫出來，因此被脫色。

G+:特有磷壁酸

G-：特有脂多糖

類脂質(zhì)不等于脂多糖

3細菌、放線菌、醉母菌與霉菌的細胞結構、繁殖方式與菌落特征

表3-5四大類盤生物菌落和細絲形態(tài)特征的比較

類別單細胞微生物菌絲狀微生物

菌落特細胞酵母菌放線菌毒菌

主菌含水狀態(tài)很濕或較濕較濕干像或較干燃干像

要落外觀形態(tài)小而突起或大大而突起小而緊密大而疏松或

特而平坦大而致密

征相互關系單個分散或有單個分散或絲狀交縱絲狀交狼

細一定排列方式假絲狀

胞形態(tài)特征小而均勻*,個大而分化細而均勻粗而分化

別有芽泡

菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明

菌落與培養(yǎng)基結不結合不結合牢固結合較牢固結合

合程度

菌落顏色多樣單調(diào)，一般呈十分多樣十分多樣

參乳脂或曠燭

考色，少數(shù)紅或

特黑色

征菌落正反面顏色相同相同一般不同一瓶不同

的差別

菌落邊絳**一般看不到細可見球狀、卵有時可見細絲可見粗絲狀

胞圓狀或假絲狀細胞細胞

狀細胞

細胞生長速度一般很快較快慢一般較快

氣味一般有臭味多帶酒香味常有泥腥味往往有霉味

*“均勻”指在高倍鏡下看到的細胞只是均勻一團；而“分化”指可看到細胞

內(nèi)部的一些模糊結構。

**用低倍鏡觀察。

4、噬菌體的繁殖過程

A.噬菌體將自己的DNA注入到細菌體內(nèi)

B.噬菌體的DNA利用細菌體內(nèi)的成分復制出DNA與蛋白質(zhì)外殼

C.新合成的DNA與蛋白質(zhì)外殼構成裝成子代噬菌體

D.釋放子代噬菌體

雙選，請說出為什么

問題補充：

噬菌體侵染細菌的過程中能說明DNA分子是遺傳物質(zhì)的關鍵步驟

5、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)、營養(yǎng)類型與營養(yǎng)物質(zhì)的汲取方式

微生物的營養(yǎng)物質(zhì)六大類要素：碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽、水

（1）碳源；

能提供微生物營養(yǎng)所需碳（元）素或者碳架的營養(yǎng)物質(zhì)禰之碳源。（提供細胞生命活動所需

的能量，提供合成產(chǎn)物的碳架）。關于為數(shù)眾多的化能異養(yǎng)微生物來說，碳源兼有能源功能

的雙功能營養(yǎng)物。

碳源在制作微生物培養(yǎng)基或者細胞培養(yǎng)基時有重要的作用，為微生物或者細胞的正常生長,

分裂提供物質(zhì)基礎。

（2）能源：

提供微生物生命活動所需的營養(yǎng)物質(zhì)。

（3）氮源：

提供細胞原生質(zhì)與其他結構物質(zhì)中的夙源，通常不作為能源使用。但化能自養(yǎng)細菌中的亞硝

化細菌能從氨與二氧化氮等還原無機含氮化合物氧化中獲得其生命活動所需的能源，因此對

它來說氮源兼有氮源與能源雙重功能。

（4）無機鹽：

A）提供微生物細胞化學構成中（除碳與氮外）的重要元素；B）參與并穩(wěn)固微生物細胞的

結構；C）鎂、銅與鋅等是許多酶的激活劑，固氮酶含F(xiàn)e、M。輔因子；D）調(diào)節(jié)與維持微生

物生長過程中諸如滲透壓、氫離子濃度與氧化還原電位等條件：E）用作某些化能自養(yǎng)細菌

的能源物質(zhì)；F）用作呼吸末端的氫受體。

（5）生長因子與生長抑制因子：

指在組織培養(yǎng)中，除了氨基酸、維生索、葡萄糖與尢機鹽等止常成分之外，其能夠代替

培養(yǎng)基血清高分子物質(zhì)的而促進細胞生長的物質(zhì)。具有刺激細胞生長活性的細胞因子。

（6）水：

水是營養(yǎng)物質(zhì)代謝產(chǎn)物的良好溶劑，營養(yǎng)物質(zhì)與代謝產(chǎn)物都是通過溶解與分散在水中而進

出細胞的。水還可保證細胞內(nèi)的溫度不可能因代謝過程中釋放的能量驟然上升。它還有利于

生物大分子結構的穩(wěn)固。

營養(yǎng)五大類型

I.光能無機自養(yǎng)型（光能自養(yǎng)型）

能以C02為唯一或者要緊碳源；進行光合作用獲取生長所需要的能量；以無機物如H2、

H2S、S、H20等作為供氫體或者電子供體，使C02還原為細胞物質(zhì)；

比如：藻類及藍細菌等與植物一樣，以水為電子供體（供氫體），進行產(chǎn)氧型的光合作用，

合成細胞物質(zhì)。紅硫細菌，以H2s為電子供體，產(chǎn)生細胞物質(zhì)，并伴隨硫元素的產(chǎn)生，

2.光能有機異養(yǎng)型（光能異養(yǎng)型）

不能以CO2為要緊或者唯一的碳源；以有機物作為供氫體，利用光能將CO2還原為

細胞物質(zhì)；在生長時大多數(shù)需要外源的生長因子；

比如，紅螺菌屬中的一些細菌能利用異丙醇作為供氫體，將CO2還原成細胞物質(zhì)，同

時積存丙酮。

3.化能無機自養(yǎng)型（化能自養(yǎng)型）

生長所需要的能量來自無機物氧化過程中放出的化學能；以CO2或者碳酸鹽作為唯一

或者要緊碳源進行生長時，利用H2、H2S、Fe2+、NH3或者N02-等無機物作為電子供體使

CO2還原成細胞物質(zhì)。

4.化能有機異養(yǎng)型（化能異養(yǎng)型）

生K所需要的能量均來自有機物氧化過程中放出的化學能：生長所需要的碳源要紫是一

些有機化合物，如淀粉、糖類、纖維素、有機酸等。

5.營養(yǎng)缺陷型

某些菌株發(fā)生突變〔自然突變或者人工誘變）后，失去合成某種（或者某些）對該菌

株生長必不可少的物質(zhì)（通常是生長因子如氨基酸、維生素）的能力，務必從外界環(huán)境獲得

該物質(zhì)才能生長繁殖，這種突變型菌株稱之營養(yǎng)缺陷型，相應的野生型菌株稱之原養(yǎng)型。

營養(yǎng)物質(zhì)的汲取方式：

6、培養(yǎng)基的概念及配制原則

培養(yǎng)基是經(jīng)人工配制而成的、適合微生物生長繁殖或者產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。

配制原則：I、目的明確2、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)3、選擇適宜的原料來源4、選擇適宜的滅

菌方法5、操縱營養(yǎng)物質(zhì)的比例及濃度6、操縱適宜的酸堿度7、操縱氧化還原電位

7、培養(yǎng)基的類型

L按照培養(yǎng)基的成分可分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基與半合成培養(yǎng)基三類。

2.按照培養(yǎng)基的物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基三類

3.按照培養(yǎng)基用途可分為基礎培養(yǎng)基與加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基、生產(chǎn)培養(yǎng)

基五類

8、微生物生長量的測定方法

一、直接計數(shù)法（特點：測定死菌與活菌數(shù)）

I.顯微鏡計數(shù)法：

（1）血球計數(shù)板法血球汁數(shù)板中央有一個體積一定的計數(shù)室（O.lmm3）。將菌懸液或者擔子懸

液在顯微鏡下計數(shù)，然后冉按一定公式計算出細菌總數(shù).

（2）涂片計數(shù)法將一定體積（0.1ml）的樣品，均勻地涂在載片的一定面積內(nèi)（lcm2）。在顯微鏡

下計算細胞數(shù)量，推算1cm2所含細胞數(shù)目。

2、比濁法：菌體細胞培養(yǎng)液混濁，在一定范圍內(nèi)，菌體數(shù)量與渾濁成正比，故可通過分光

光度計或者比色計求出渾濁度，通過與標準曲線對比，求出樣品中菌液濃度，算出個體數(shù)。

二、間接計數(shù)法（特點：僅測定活菌數(shù)）

3.平板菌落計數(shù)法：

是通過測定樣品在培養(yǎng)基上形成的菌落數(shù)來間接確定其活菌數(shù)的方法.故又稱平板計數(shù)法。

（I）涂布平板法用滅菌的涂布器將一定體積（不大于0.1ml）的適當稀釋度的菌液涂布在瓊脂

培養(yǎng)基的表面，然后保溫培養(yǎng)有到菌落出現(xiàn)，記錄菌落的數(shù)目并換算成每亳升試樣中的活細

胞數(shù)量。

（2）倒平板法將樣品稀釋到一定濃度，取一定體積（0.1—1ml）倒入冷卻至45℃的固體培養(yǎng)

基混合，制成平板，培養(yǎng)后，出現(xiàn)菌落，由菌落數(shù)推算出的菌總數(shù)。

4、薄膜過濾計數(shù)法：樣品同過微孔濾膜后，細菌收集在濾膜上，然后將濾膜放在培養(yǎng)基中

培養(yǎng)，通過菌落計數(shù)求出樣品活菌落。

5、液體稀釋最大概率數(shù)法

三、重量;去（特點：適合與菌體濃度高的樣品。表示菌體生長量

I.濕重法：將單位體積微生物培養(yǎng)液離心，收集沉淀物，然后再稱重。

2.干重法：將肉心得到的細胞沉淀物,置于100—105°。的烘箱中干燥過夜除去水分，然后

再稱重。

成分：

3、含氮量測定法：N在細胞內(nèi)穩(wěn)固，測定總N量，粗蛋白=N*6.25g。

4、DNA測定法：微生物細胞DNA含量穩(wěn)固，使用熒光指示劑或者染色劑與菌體DNA作

用熒光比色或者分光光度法測得DNA的含量。

9、微生物生長曲線及其生長特點

各個時期的特點是：停滯期:（1）細胞物質(zhì)開始增加；（2）有的細胞開始不習慣環(huán)境而死亡;

<3）細菌總數(shù)下降；（4）停滯期末期，細胞代謝活動能力強，細胞中RNA含量高，嗜堿

性強。對不良環(huán)境條件較敏感，呼吸速度、核酸及蛋白質(zhì)的合成速度接近對數(shù)細胞，并開始

細胞分裂。

穩(wěn)固期:（1）生長速率下降，死亡率上升；（2）細胞數(shù)達到最大值，新生的細菌數(shù)與死亡的

細菌數(shù)相當。

衰亡期：（1）死亡率增加，細菌少繁殖或者不繁殖；（2）細菌常出現(xiàn)多形態(tài)、畸形或者衰退

型，有的會產(chǎn)生芽扎1。

10、微生物的分離技術方法

11、滅菌鍋的操作步驟及使用的注意事項

12、菌種保藏的目的是使菌種被保藏后不死亡、不變異、不被雜菌污染，并保持

其優(yōu)良性狀，以利于生產(chǎn)與科研應用。

13、菌種的保藏方法及其優(yōu)缺點。

14、食品衛(wèi)生標準中微生物指標有細菌總數(shù)、大腸菌群、致病菌的

檢測。

15、細菌與酵母菌在食品中的應用。

酵母菌在釀造、食品、醫(yī)藥等工業(yè)上占有重要的地位。

酵母菌的維生素、蛋白質(zhì)含量高，可作食用、藥用與飼料用

16、油鏡的使用注意問題。

A、將標木片放載物臺上，用標本推進器固定，將欲檢部分移至接物鏡下。先用低倍鏡找出

標本的位置，然后提高鏡簡，在標本的待檢部位滴鏡油一滴，再換油鏡觀察.

B、轉動粗調(diào)節(jié)器使載物臺徐徐上升（或者使鏡筒慢慢下降），直至油鏡頭浸沒至油中。

如今眼睛應從側面觀察，以免壓碎標本片與損壞鏡頭。

C、然后雙眼移至接目鏡，一面從接目鏡觀察，一面反方向緩慢地轉動粗調(diào)節(jié)器（下降

載物臺，或者上升鏡筒），當出現(xiàn)模糊物象時，換用細調(diào)節(jié)器，轉動至物象清晰為I匕

D、觀察完畢，應先提高鏡筒，并