2025年生物醫(yī)學實驗技術(shù)應用答案及解析一、單項選題1.以下哪種技術(shù)常用于基因表達水平的檢測（）A.WesternblottingB.RT-PCRC.ELISAD.免疫熒光2.細胞培養(yǎng)過程中，常用的胰蛋白酶的作用是（）A.消化細胞間的連接蛋白B.提供營養(yǎng)物質(zhì)C.維持細胞的滲透壓D.防止細胞污染3.流式細胞術(shù)可以檢測細胞的（）A.大小和形狀B.表面抗原C.內(nèi)部結(jié)構(gòu)D.以上都是4.免疫組化技術(shù)主要用于（）A.檢測細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)B.檢測細胞內(nèi)的核酸C.檢測細胞的代謝產(chǎn)物D.檢測細胞的形態(tài)5.以下哪種實驗技術(shù)可用于蛋白質(zhì)相互作用的研究（）A.酵母雙雜交B.基因敲除C.RNA干擾D.定點突變6.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9的作用靶點是（）A.DNAB.RNAC.蛋白質(zhì)D.多糖7.細胞凋亡的檢測方法不包括（）A.AnnexinV染色B.TUNEL染色C.MTT法D.流式細胞術(shù)8.以下哪種技術(shù)可用于蛋白質(zhì)的純化（）A.親和層析B.離子交換層析C.凝膠過濾層析D.以上都是9.實時熒光定量PCR技術(shù)可以用于（）A.基因表達的定量分析B.基因突變的檢測C.基因分型D.以上都是10.細胞融合技術(shù)常用于（）A.制備單克隆抗體B.基因治療C.細胞培養(yǎng)D.蛋白質(zhì)表達二、多項選題1.以下屬于分子生物學實驗技術(shù)的有（）A.聚合酶鏈式反應（PCR）B.核酸雜交技術(shù)C.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（Westernblotting）D.免疫沉淀技術(shù)2.細胞培養(yǎng)的基本條件包括（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.一定的氣體環(huán)境D.無菌操作3.流式細胞術(shù)的應用范圍包括（）A.細胞分選B.細胞周期分析C.細胞凋亡檢測D.細胞表面標志物檢測4.免疫組化技術(shù)中常用的標記物有（）A.熒光素B.酶C.放射性核素D.膠體金5.基因編輯技術(shù)的應用包括（）A.基因功能研究B.疾病模型構(gòu)建C.基因治療D.藥物研發(fā)6.細胞凋亡的特征包括（）A.細胞皺縮B.核固縮C.細胞膜內(nèi)陷形成凋亡小體D.細胞壞死7.蛋白質(zhì)純化的方法有（）A.鹽析B.等電點沉淀C.層析技術(shù)D.電泳技術(shù)8.實時熒光定量PCR技術(shù)的優(yōu)點有（）A.特異性強B.靈敏度高C.定量準確D.操作簡單三、填空題1.基因表達調(diào)控的主要方式包括_____、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控、翻譯調(diào)控和翻譯后調(diào)控。2.細胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基有_____培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基。3.免疫熒光技術(shù)中常用的熒光素有_____和羅丹明。4.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9系統(tǒng)由_____和Cas9蛋白組成。5.細胞凋亡的途徑主要有_____途徑和死亡受體途徑。6.蛋白質(zhì)的分離和純化技術(shù)包括_____、電泳、層析和超速離心等。7.實時熒光定量PCR技術(shù)中常用的熒光染料有_____和TaqMan探針。8.細胞融合的方法有_____、化學融合法和電融合法。四、判斷題（√/×）1.Westernblotting可用于檢測細胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)的表達水平。（）2.細胞培養(yǎng)過程中，支原體污染不會影響細胞的生長和實驗結(jié)果。（）3.流式細胞術(shù)只能檢測細胞的表面抗原，不能檢測細胞內(nèi)的抗原。（）4.免疫組化技術(shù)可以用于定位細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。（）5.基因編輯技術(shù)可以精確地對基因組進行修飾。（）6.細胞凋亡是一種程序性細胞死亡，對生物體的發(fā)育和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定具有重要意義。（）7.蛋白質(zhì)純化的目的是獲得高純度、高活性的蛋白質(zhì)。（）8.實時熒光定量PCR技術(shù)可以同時檢測多個基因的表達水平。（）五、簡答題1.簡述基因表達調(diào)控的主要機制。六、案例分析患者，男，50歲，因“反復咳嗽、咳痰10年，加重伴喘息1周”入院?；颊?0年前開始出現(xiàn)反復咳嗽、咳痰，每年發(fā)作3個月以上，多在冬春季發(fā)作，近1周來咳嗽、咳痰加重，伴有喘息，活動后明顯，無發(fā)熱、盜汗等癥狀。既往有吸煙史30年，每天20支。問題1：該患者最可能的診斷是什么？問題2：為明確診斷，還需要進行哪些檢查？試卷答案一、單項選題（答案）1.答案：B解析：RT-PCR可用于檢測基因表達水平，Westernblotting用于檢測蛋白質(zhì)，ELISA用于檢測抗原或抗體，免疫熒光用于定位蛋白質(zhì)。2.答案：A解析：胰蛋白酶消化細胞間連接蛋白，使細胞分散。營養(yǎng)物質(zhì)由培養(yǎng)基提供，滲透壓靠緩沖液維持，防止污染用抗生素等。3.答案：D解析：流式細胞術(shù)可檢測細胞大小、形狀、表面抗原、內(nèi)部結(jié)構(gòu)等多種參數(shù)。4.答案：A解析：免疫組化技術(shù)主要用于檢測細胞內(nèi)蛋白質(zhì)，通過標記抗體與抗原結(jié)合來定位和檢測。5.答案：A解析：酵母雙雜交用于研究蛋白質(zhì)相互作用，基因敲除研究基因功能，RNA干擾沉默基因表達，定點突變改變基因序列。6.答案：A解析：CRISPR-Cas9作用靶點是DNA，通過引導RNA與目標DNA結(jié)合，Cas9蛋白切割DNA。7.答案：C解析：MTT法用于檢測細胞活力，AnnexinV染色、TUNEL染色、流式細胞術(shù)均可檢測細胞凋亡。8.答案：D解析：親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析都是常用的蛋白質(zhì)純化方法。9.答案：D解析：實時熒光定量PCR可用于基因表達定量分析、基因突變檢測、基因分型等多種應用。10.答案：A解析：細胞融合技術(shù)常用于制備單克隆抗體，將免疫的B細胞與骨髓瘤細胞融合。二、多項選題（答案）1.答案：ABCD解析：PCR、核酸雜交、Westernblotting、免疫沉淀都屬于分子生物學實驗技術(shù)。2.答案：ABCD解析：細胞培養(yǎng)需合適培養(yǎng)基、適宜溫度、一定氣體環(huán)境和無菌操作。3.答案：ABCD解析：流式細胞術(shù)可用于細胞分選、周期分析、凋亡檢測、表面標志物檢測等。4.答案：ABCD解析：免疫組化常用標記物有熒光素、酶、放射性核素、膠體金等。5.答案：ABCD解析：基因編輯技術(shù)可用于基因功能研究、疾病模型構(gòu)建、基因治療、藥物研發(fā)等。6.答案：ABC解析：細胞凋亡特征為細胞皺縮、核固縮、細胞膜內(nèi)陷形成凋亡小體，細胞壞死與凋亡不同。7.答案：ABCD解析：蛋白質(zhì)純化方法包括鹽析、等電點沉淀、層析、電泳等。8.答案：ABCD解析：實時熒光定量PCR特異性強、靈敏度高、定量準確、操作簡單。三、填空題（答案）1.答案：轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控解析：基因表達調(diào)控主要在轉(zhuǎn)錄水平進行，還有轉(zhuǎn)錄后、翻譯和翻譯后調(diào)控。2.答案：含血清解析：細胞培養(yǎng)常用含血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基。3.答案：異硫氰酸熒光素（FITC）解析：免疫熒光常用FITC和羅丹明等熒光素。4.答案：向?qū)NA（gRNA）解析：CRISPR-Cas9系統(tǒng)由gRNA和Cas9蛋白組成。5.答案：線粒體解析：細胞凋亡途徑主要有線粒體途徑和死亡受體途徑。6.答案：離心解析：蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)包括離心、電泳、層析、超速離心等。7.答案：SYBRGreenI解析：實時熒光定量PCR常用SYBRGreenI和TaqMan探針。8.答案：病毒誘導融合法解析：細胞融合方法有病毒誘導、化學融合、電融合法。四、判斷題（答案）1.答案：√解析：Westernblotting可檢測特定蛋白質(zhì)表達水平。2.答案：×解析：支原體污染會影響細胞生長和實驗結(jié)果。3.答案：×解析：流式細胞術(shù)可檢測細胞內(nèi)抗原。4.答案：√解析：免疫組化可定位細胞內(nèi)蛋白質(zhì)。5.答案：√解析：基因編輯技術(shù)可精確修飾基因組。6.答案：√解析：細胞凋亡對生物體發(fā)育和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定重要。7.答案：√解析：蛋白質(zhì)純化目的是獲高純度、高活性蛋白質(zhì)。8.答案：√解析：實時熒光定量PCR可同時檢測多個基因表達水平。五、簡答題（答案）1.答：基因表達調(diào)控主要機制包括轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控，如轉(zhuǎn)錄因子與啟動子、增強子等順式作用元件結(jié)合調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始；轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，如mRNA的加工、運輸、穩(wěn)定性等；翻譯調(diào)控，如mRNA的翻譯起始、延伸、終止等；翻譯后調(diào)控，如蛋白質(zhì)的修飾、折疊、