實(shí)驗(yàn)動物模擬題與參考答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.以下關(guān)于實(shí)驗(yàn)動物等級的描述，正確的是：A.普通級動物允許存在條件致病菌B.SPF級動物需排除所有內(nèi)源性病毒C.無菌級動物腸道中無任何微生物定植D.清潔級動物的微生物控制標(biāo)準(zhǔn)高于SPF級2.常用于制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)動物是：A.豚鼠B.倉鼠C.小鼠D.兔3.以下哪種實(shí)驗(yàn)動物對結(jié)核桿菌高度敏感，常用于結(jié)核病研究？A.大鼠B.犬C.豚鼠D.猴4.實(shí)驗(yàn)動物倫理審查中“3R原則”的“優(yōu)化（Refinement）”主要指：A.用非活體材料替代動物實(shí)驗(yàn)B.減少實(shí)驗(yàn)所需動物數(shù)量C.改進(jìn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)以減輕動物痛苦D.選擇低等動物替代高等動物5.小鼠的妊娠期通常為：A.16-18天B.19-21天C.25-27天D.30-32天6.SPF級實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境的溫度應(yīng)控制在：A.16-20℃B.18-26℃C.22-28℃D.25-30℃7.以下哪種動物因缺乏嘔吐反射，常用于藥物催吐實(shí)驗(yàn)的陰性對照？A.大鼠B.犬C.貓D.兔8.實(shí)驗(yàn)動物飼料中蛋白質(zhì)含量需根據(jù)動物種類調(diào)整，生長發(fā)育期小鼠飼料的蛋白質(zhì)含量一般不低于：A.12%B.18%C.25%D.30%9.用于腫瘤移植實(shí)驗(yàn)的裸鼠（NudeMouse）最主要的生物學(xué)特性是：A.先天性無胸腺，T細(xì)胞免疫缺陷B.毛色基因純合，表型一致C.對病原體高度敏感，需無菌飼養(yǎng)D.繁殖能力強(qiáng)，產(chǎn)仔數(shù)多10.以下關(guān)于實(shí)驗(yàn)動物微生物檢測的描述，錯誤的是：A.普通級大鼠需檢測沙門氏菌B.SPF級小鼠需排除仙臺病毒C.清潔級兔需檢測泰澤病原體D.無菌級動物需定期檢測所有微生物二、填空題（每空1分，共20分）1.實(shí)驗(yàn)動物按遺傳背景可分為近交系、封閉群、______和______四大類。2.常用實(shí)驗(yàn)動物中，______的聽覺敏銳，對20000Hz以上的超聲波敏感；______的視覺較差，主要依賴嗅覺和觸覺。3.實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境的空氣潔凈度等級中，普通環(huán)境對應(yīng)______級，屏障環(huán)境對應(yīng)______級（以潔凈室標(biāo)準(zhǔn)劃分）。4.大鼠的尾靜脈注射常用于______實(shí)驗(yàn)；兔的耳緣靜脈注射常用于______實(shí)驗(yàn)。5.實(shí)驗(yàn)動物倫理審查的核心是______原則，具體包括替代（Replacement）、______（Reduction）和優(yōu)化（Refinement）。6.小鼠的動情周期為______天，其中______期陰道涂片可見大量角化上皮細(xì)胞。7.常用實(shí)驗(yàn)動物麻醉劑中，戊巴比妥鈉對大鼠的腹腔注射劑量為______mg/kg；氯胺酮對小鼠的肌肉注射劑量為______mg/kg。8.實(shí)驗(yàn)動物常見寄生蟲病中，______可導(dǎo)致小鼠脫毛、皮膚瘙癢；______可引起兔肝膿腫。9.轉(zhuǎn)基因動物制備中，常用的基因?qū)敕椒ò╛_____（如顯微注射法）和______（如逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法）。10.實(shí)驗(yàn)動物尸體處理應(yīng)遵循______原則，常用方法包括______和化學(xué)處理法。三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述實(shí)驗(yàn)動物選擇的基本原則，并舉例說明種屬差異對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。2.解釋SPF級實(shí)驗(yàn)動物的定義及其微生物控制標(biāo)準(zhǔn)，說明其在生物醫(yī)學(xué)研究中的優(yōu)勢。3.實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)環(huán)境的主要參數(shù)（溫度、濕度、換氣次數(shù)、光照周期）應(yīng)如何控制？請分別列出標(biāo)準(zhǔn)范圍及依據(jù)。4.什么是實(shí)驗(yàn)動物的“標(biāo)準(zhǔn)化”？包括哪些具體內(nèi)容？5.舉例說明實(shí)驗(yàn)動物倫理審查中“3R原則”的具體應(yīng)用（需涵蓋替代、減少、優(yōu)化三個方面）。四、案例分析題（共20分）某實(shí)驗(yàn)室計劃開展一項(xiàng)新型抗腫瘤藥物的藥效學(xué)研究，需建立人源腫瘤異種移植模型（PDX模型）。實(shí)驗(yàn)設(shè)計如下：-實(shí)驗(yàn)動物：選擇6-8周齡普通級BALB/c小鼠（體重18-22g），雌雄各半，共50只。-飼養(yǎng)環(huán)境：普通動物房（溫度28℃，濕度30%，每日光照12小時）。-操作流程：通過皮下注射接種腫瘤細(xì)胞，未使用麻醉劑，術(shù)后未進(jìn)行疼痛管理。-倫理審查：僅提交了實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛣游飻?shù)量，未說明替代方案。請根據(jù)實(shí)驗(yàn)動物學(xué)相關(guān)知識，分析該實(shí)驗(yàn)設(shè)計中存在的問題，并提出改進(jìn)建議。參考答案一、單項(xiàng)選擇題1.C（解析：普通級動物允許存在非致病微生物，條件致病菌需控制；SPF級排除特定病原微生物，非所有內(nèi)源性病毒；清潔級標(biāo)準(zhǔn)低于SPF級；無菌級動物腸道無任何微生物定植。）2.C（解析：小鼠是單克隆抗體制備的主要宿主，通過雜交瘤技術(shù)獲得。）3.C（解析：豚鼠對結(jié)核桿菌高度敏感，感染后癥狀與人類相似，是結(jié)核病研究的經(jīng)典模型。）4.C（解析：優(yōu)化指改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，如使用麻醉劑、減少操作次數(shù)，以減輕動物痛苦。）5.B（解析：小鼠妊娠期約19-21天，大鼠21-23天，兔30-32天。）6.B（解析：根據(jù)GB14925-2010，SPF級動物環(huán)境溫度18-26℃，濕度40-70%。）7.A（解析：大鼠因嘔吐反射缺失，常用于催吐實(shí)驗(yàn)的陰性對照，犬、貓則有明顯嘔吐反應(yīng)。）8.C（解析：生長發(fā)育期小鼠需高蛋白飼料，蛋白質(zhì)含量一般≥25%，維持期可降至18%。）9.A（解析：裸鼠因Foxn1基因突變導(dǎo)致無胸腺，T細(xì)胞免疫缺陷，是腫瘤移植的理想模型。）10.D（解析：無菌級動物需證明無任何微生物，而非“定期檢測所有微生物”，因無法檢測所有種類。）二、填空題1.雜交群（F1代）、突變系2.大鼠；小鼠3.非潔凈；萬級（或10000級）4.藥物注射；采血或給藥5.3R；減少6.4-5；動情7.30-50；80-1008.疥螨；肝球蟲9.原核顯微注射法；胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法（或病毒載體法）10.無害化；焚燒法三、簡答題1.基本原則：①生物學(xué)特性匹配（如選擇兔做發(fā)熱實(shí)驗(yàn)，因其體溫調(diào)節(jié)與人相似）；②實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪m應(yīng)性（如心血管研究選犬，因其循環(huán)系統(tǒng)與人類接近）；③標(biāo)準(zhǔn)化（使用SPF級動物避免微生物干擾）；④倫理合規(guī)（符合3R原則）。種屬差異舉例：犬對嗎啡敏感（表現(xiàn)為抑制），而貓對嗎啡敏感（表現(xiàn)為興奮）；兔缺乏膽固醇轉(zhuǎn)化酶，喂高膽固醇飼料易形成動脈粥樣硬化，適合高血脂模型，而大鼠不易形成。2.定義：SPF（無特定病原體）級動物指在屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)，無特定病原微生物和寄生蟲感染，允許攜帶非致病微生物的實(shí)驗(yàn)動物。微生物控制標(biāo)準(zhǔn)：需排除的病原包括細(xì)菌（如沙門氏菌、支氣管敗血波氏桿菌）、病毒（如小鼠肝炎病毒、仙臺病毒）、寄生蟲（如腦原蟲、卡氏肺孢子蟲）。優(yōu)勢：減少微生物干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果（如病毒感染可能影響免疫指標(biāo)）；提高實(shí)驗(yàn)重復(fù)性（微生物狀態(tài)一致）；符合倫理要求（減少動物因感染導(dǎo)致的痛苦）。3.環(huán)境參數(shù)控制：-溫度：普通級18-26℃，SPF級20-26℃（依據(jù)GB14925-2010，溫度過高導(dǎo)致動物代謝率升高、繁殖力下降；過低則增加能量消耗）。-濕度：40-70%（低于40%易導(dǎo)致動物呼吸道黏膜干燥、籠具粉塵增加；高于70%易滋生真菌）。-換氣次數(shù)：普通環(huán)境8-10次/小時，屏障環(huán)境15-20次/小時（維持空氣質(zhì)量，減少氨氣等有害氣體濃度）。-光照周期：12小時光照/12小時黑暗（模擬自然節(jié)律，維持動物正常生理周期，如小鼠夜間活動，光照過強(qiáng)或周期紊亂影響繁殖）。4.標(biāo)準(zhǔn)化定義：指實(shí)驗(yàn)動物的遺傳、微生物、環(huán)境及營養(yǎng)條件均符合統(tǒng)一規(guī)范，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。具體內(nèi)容：①遺傳標(biāo)準(zhǔn)化（近交系、封閉群的基因純度控制）；②微生物標(biāo)準(zhǔn)化（按等級排除特定病原）；③環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)化（溫度、濕度、潔凈度等參數(shù)符合標(biāo)準(zhǔn)）；④營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化（飼料成分、能量、添加劑符合動物需求）；⑤操作標(biāo)準(zhǔn)化（飼養(yǎng)、實(shí)驗(yàn)操作流程統(tǒng)一）。5.3R原則應(yīng)用舉例：-替代（Replacement）：使用人源腫瘤細(xì)胞系體外培養(yǎng)替代動物實(shí)驗(yàn)（如MTT法檢測藥物cytotoxicity）；或用斑馬魚胚胎替代哺乳動物（因胚胎期不視為獨(dú)立生命體）。-減少（Reduction）：通過統(tǒng)計學(xué)設(shè)計優(yōu)化樣本量（如使用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計減少個體差異）；共享實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（多實(shí)驗(yàn)室合作使用同一批動物數(shù)據(jù)）。-優(yōu)化（Refinement）：手術(shù)中使用吸入式麻醉（異氟醚）替代腹腔注射（減少注射痛苦）；術(shù)后提供鎮(zhèn)痛劑（如布托啡諾）；采用非侵入性檢測技術(shù)（如活體成像替代解剖）。四、案例分析題存在問題及改進(jìn)建議：1.實(shí)驗(yàn)動物選擇不當(dāng)：-問題：普通級BALB/c小鼠可能攜帶病原體（如小鼠肝炎病毒），影響腫瘤生長（病毒感染可激活免疫系統(tǒng)，抑制腫瘤）。-改進(jìn)：應(yīng)選擇SPF級BALB/c裸鼠（Nude小鼠），因其T細(xì)胞免疫缺陷，更易接受人源腫瘤移植，且微生物狀態(tài)可控。2.飼養(yǎng)環(huán)境不符合要求：-問題：溫度28℃（超過SPF級上限26℃）可能導(dǎo)致小鼠代謝率升高、應(yīng)激；濕度30%（低于40%）易引發(fā)呼吸道黏膜干燥、籠具粉塵增加，影響動物健康。-改進(jìn)：調(diào)整環(huán)境溫度至20-26℃，濕度40-70%；使用屏障系統(tǒng)飼養(yǎng)（萬級潔凈度），控制微生物污染。3.操作流程缺乏倫理關(guān)懷：-問題：未使用麻醉劑（接種腫瘤細(xì)胞屬于侵入性操作，會引起疼痛）；術(shù)后未進(jìn)行疼痛管理（可能導(dǎo)致動物痛苦，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）。-改進(jìn)：接種前使用麻醉劑（如腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg）；術(shù)后給予鎮(zhèn)痛劑（如皮下注射布托啡諾0.1mg/kg），并觀察動物行為（如活動減少、弓背等疼痛指標(biāo)）。4.倫理審查不完整：-問題：僅提交實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛣游飻?shù)量，未說明替代方案（如是否可用類器官模型部分替代）、減少措施（如樣