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2025年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模擬習(xí)題及答案一、單項(xiàng)選擇題(每題2分,共30分)1.下列實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,屬于近交系小鼠的典型代表是:A.ICR小鼠B.C57BL/6小鼠C.KM小鼠D.NIH小鼠答案:B解析:近交系動(dòng)物需經(jīng)過(guò)至少20代以上連續(xù)兄妹交配,基因純合度高。C57BL/6是經(jīng)典近交系小鼠,常用于腫瘤、神經(jīng)科學(xué)研究;ICR、KM、NIH均為封閉群小鼠,基因雜合度較高。2.SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)大鼠的微生物學(xué)等級(jí)要求中,必須排除的病原體是:A.小鼠肝炎病毒(MHV)B.仙臺(tái)病毒(Sendaivirus)C.大鼠細(xì)小病毒(RPV)D.淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒(LCMV)答案:C解析:根據(jù)GB14922.2-2011《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》,SPF級(jí)大鼠必須排除的病原體包括大鼠細(xì)小病毒(RPV)、支氣管敗血波氏桿菌等;仙臺(tái)病毒是SPF級(jí)小鼠需排除的病原體,MHV主要感染小鼠,LCMV為清潔級(jí)及以上大鼠需排除的病原。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查中,“3R原則”不包括:A.Replacement(替代)B.Reduction(減少)C.Refinement(優(yōu)化)D.Regulation(規(guī)范)答案:D解析:3R原則由Russell和Burch于1959年提出,核心是替代(使用非活體材料或低等動(dòng)物)、減少(降低動(dòng)物使用數(shù)量)、優(yōu)化(改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法減輕動(dòng)物痛苦),不包含“規(guī)范”。4.常用于建立阿爾茨海默病模型的轉(zhuǎn)基因小鼠品系是:A.APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠B.NOD/SCID小鼠C.裸小鼠(Nu/Nu)D.BALB/c小鼠答案:A解析:APP(淀粉樣前體蛋白)和PS1(早老素1)基因突變可誘導(dǎo)β-淀粉樣蛋白沉積,是阿爾茨海默病的典型病理特征;NOD/SCID用于免疫缺陷研究,裸小鼠缺乏T細(xì)胞,BALB/c為普通近交系。5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境控制中,屏障系統(tǒng)的空氣潔凈度要求為:A.100級(jí)B.1000級(jí)C.10000級(jí)D.100000級(jí)答案:C解析:屏障系統(tǒng)用于飼養(yǎng)清潔級(jí)及SPF級(jí)動(dòng)物,空氣潔凈度需達(dá)到萬(wàn)級(jí)(≥0.5μm粒子數(shù)≤352000個(gè)/m3);百級(jí)為超凈工作臺(tái)標(biāo)準(zhǔn),十萬(wàn)級(jí)為普通環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。6.實(shí)驗(yàn)兔耳緣靜脈注射時(shí),正確的操作順序是:①輕提兔耳,用酒精擦拭血管部位②左手固定兔耳,右手持針與血管呈15°~30°進(jìn)針③回抽見(jiàn)血后緩慢推注藥物④用棉球按壓針孔止血A.①→②→③→④B.②→①→③→④C.①→③→②→④D.③→①→②→④答案:A解析:靜脈注射需先消毒(①),暴露血管后固定(②),確認(rèn)回血(③)后注射,最后止血(④)。7.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳質(zhì)量控制的描述,錯(cuò)誤的是:A.近交系動(dòng)物需定期進(jìn)行基因型檢測(cè)(如微衛(wèi)星標(biāo)記分析)B.封閉群動(dòng)物應(yīng)保持群體大小≥25對(duì)以避免近交C.突變系動(dòng)物可通過(guò)基因編輯技術(shù)(如CRISPR/Cas9)構(gòu)建D.雜交F1代動(dòng)物的表型一致性低于近交系答案:D解析:雜交F1代(如C57BL/6×BALB/cF1)因基因型雜合但一致,表型一致性高于封閉群,接近近交系;近交系因基因純合,表型更穩(wěn)定。8.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物突發(fā)烈性傳染?。ㄈ绾顱病毒感染)時(shí),首要處理措施是:A.立即上報(bào)主管部門并啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案B.對(duì)感染動(dòng)物進(jìn)行安樂(lè)死并焚燒處理C.對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行終末消毒D.對(duì)接觸人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察答案:A解析:根據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》,發(fā)生烈性傳染病時(shí),需首先向當(dāng)?shù)乜萍?、衛(wèi)生部門報(bào)告,啟動(dòng)應(yīng)急響應(yīng),再進(jìn)行后續(xù)處理(如撲殺、消毒、人員防護(hù))。9.常用于糖尿病研究的自發(fā)突變大鼠品系是:A.Zucker大鼠(fa/fa)B.Wistar大鼠C.SD大鼠D.Lewis大鼠答案:A解析:Zucker大鼠攜帶瘦素受體基因突變(fa/fa),表現(xiàn)為肥胖、胰島素抵抗,是2型糖尿病經(jīng)典模型;Wistar、SD為普通封閉群,Lewis用于自身免疫病研究。10.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物墊料的衛(wèi)生要求中,揮發(fā)性有機(jī)物(VOCs)含量應(yīng)≤:A.5mg/kgB.10mg/kgC.20mg/kgD.50mg/kg答案:B解析:根據(jù)GB/T35892-2018《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物墊料》,墊料中VOCs(如甲醛、苯系物)含量需≤10mg/kg,避免對(duì)動(dòng)物呼吸系統(tǒng)產(chǎn)生刺激。11.下列關(guān)于無(wú)菌動(dòng)物(GF)的描述,正確的是:A.需在隔離器中飼養(yǎng),無(wú)任何可檢測(cè)到的微生物B.腸道免疫功能發(fā)育正常,與普通動(dòng)物無(wú)差異C.常用于研究微生物-宿主互作機(jī)制D.對(duì)病原體感染的抵抗力強(qiáng)于SPF動(dòng)物答案:C解析:無(wú)菌動(dòng)物需在嚴(yán)格隔離環(huán)境中飼養(yǎng),體內(nèi)外無(wú)微生物定植(A錯(cuò)誤);因缺乏微生物刺激,其腸道淋巴組織發(fā)育不良(B錯(cuò)誤);因無(wú)正常菌群保護(hù),對(duì)病原體更敏感(D錯(cuò)誤);常用于研究微生物對(duì)代謝、免疫的影響(C正確)。12.實(shí)驗(yàn)犬麻醉前禁食禁水的時(shí)間分別為:A.禁食8~12小時(shí),禁水4小時(shí)B.禁食4~6小時(shí),禁水2小時(shí)C.禁食12~24小時(shí),禁水6小時(shí)D.禁食2~4小時(shí),禁水1小時(shí)答案:A解析:犬為食肉動(dòng)物,胃排空時(shí)間較長(zhǎng),麻醉前需禁食8~12小時(shí)預(yù)防嘔吐誤吸,禁水4小時(shí)避免胃內(nèi)液體過(guò)多。13.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體處理應(yīng)遵循的原則是:A.直接丟棄至普通垃圾站B.高壓蒸汽滅菌后按醫(yī)療廢物處理C.深埋于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施附近D.焚燒后灰燼隨意傾倒答案:B解析:根據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體需經(jīng)高壓滅菌(121℃,30分鐘)或焚燒處理,滅菌后按醫(yī)療廢物由專業(yè)機(jī)構(gòu)回收,禁止隨意丟棄或深埋。14.建立人源腫瘤異種移植模型(PDX)時(shí),最佳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇是:A.免疫缺陷小鼠(如NOD/SCID)B.普通BALB/c小鼠C.近交系大鼠D.清潔級(jí)豚鼠答案:A解析:PDX模型需將人腫瘤組織移植到免疫缺陷動(dòng)物體內(nèi),避免宿主免疫排斥;NOD/SCID小鼠因T、B、NK細(xì)胞功能缺陷,是常用模型。15.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境溫度控制中,小鼠的適宜溫度范圍是:A.18~22℃B.20~26℃C.22~28℃D.16~20℃答案:A解析:根據(jù)GB14925-2010《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》,小鼠(體重≤20g)適宜溫度為18~22℃,大鼠為20~26℃,兔為18~22℃。二、簡(jiǎn)答題(每題8分,共40分)1.簡(jiǎn)述SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的定義及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。答案:SPF級(jí)(無(wú)特定病原體級(jí))實(shí)驗(yàn)動(dòng)物指在屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng),無(wú)國(guó)際公認(rèn)的、對(duì)實(shí)驗(yàn)研究有干擾的特定病原體(如細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)),但可攜帶非致病微生物的動(dòng)物。其應(yīng)用優(yōu)勢(shì)包括:①排除特定病原干擾,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性高;②避免動(dòng)物因感染致病影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù);③適用于疫苗效力評(píng)價(jià)、腫瘤研究、免疫功能分析等對(duì)微生物背景要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn);④符合國(guó)際科研論文發(fā)表的動(dòng)物質(zhì)量要求,提升研究成果的可信度。2.比較近交系與封閉群實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳特征及應(yīng)用場(chǎng)景。答案:遺傳特征:近交系通過(guò)≥20代兄妹交配,基因純合度>98.6%,個(gè)體間基因型一致;封閉群通過(guò)隨機(jī)交配,保持群體基因雜合度(通?!?5對(duì)繁殖群),個(gè)體間基因型存在差異但群體遺傳穩(wěn)定。應(yīng)用場(chǎng)景:近交系因表型一致,適用于基因功能研究、藥物反應(yīng)一致性實(shí)驗(yàn)(如抗癌藥篩選);封閉群因遺傳多樣性接近自然群體,適用于毒性試驗(yàn)、人類復(fù)雜疾病模擬(如高血壓、糖尿?。?。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查的核心內(nèi)容包括哪些?請(qǐng)列舉5項(xiàng)關(guān)鍵審查要點(diǎn)。答案:核心內(nèi)容是確保動(dòng)物實(shí)驗(yàn)符合“3R原則”,保障動(dòng)物福利。關(guān)鍵審查要點(diǎn):①實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡目茖W(xué)性與必要性(是否有替代方法);②動(dòng)物數(shù)量的合理性(是否符合最小使用原則);③實(shí)驗(yàn)操作的痛苦程度(是否需麻醉/鎮(zhèn)痛);④飼養(yǎng)環(huán)境的福利條件(籠具大小、墊料、富集設(shè)施);⑤安樂(lè)死方法的人道性(是否符合AVMA指南);⑥人員資質(zhì)(是否經(jīng)過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)培訓(xùn))。4.簡(jiǎn)述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)監(jiān)測(cè)的常用方法及頻率要求。答案:常用方法:①細(xì)菌檢測(cè):無(wú)菌采集樣本(如糞便、鼻腔拭子)進(jìn)行分離培養(yǎng),鑒定到屬或種(如沙門氏菌、支原體);②病毒檢測(cè):PCR(檢測(cè)核酸)、ELISA(檢測(cè)抗體或抗原);③寄生蟲(chóng)檢測(cè):直接鏡檢(如蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵)、免疫學(xué)方法(如弓形蟲(chóng)抗體)。頻率要求:SPF級(jí)動(dòng)物每3個(gè)月檢測(cè)1次,清潔級(jí)每6個(gè)月檢測(cè)1次,普通級(jí)每12個(gè)月檢測(cè)1次;新引入動(dòng)物需在隔離期內(nèi)完成全項(xiàng)檢測(cè)。5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料的營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)滿足哪些基本要求?請(qǐng)說(shuō)明蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素的作用。答案:基本要求:符合GB14924系列標(biāo)準(zhǔn),營(yíng)養(yǎng)成分(蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、維生素、礦物質(zhì))均衡,無(wú)霉變、重金屬(如鉛≤5mg/kg)、農(nóng)藥殘留(如黃曲霉毒素B1≤20μg/kg)。蛋白質(zhì):提供必需氨基酸,支持動(dòng)物生長(zhǎng)、免疫功能;脂肪:提供能量和必需脂肪酸(如亞油酸),維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu);纖維素:促進(jìn)腸道蠕動(dòng),預(yù)防便秘,維持腸道菌群平衡(尤其對(duì)兔、豚鼠等草食動(dòng)物)。三、案例分析題(每題15分,共30分)案例1:某實(shí)驗(yàn)室計(jì)劃開(kāi)展“新型抗腫瘤藥物A對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞移植瘤的療效研究”,需建立人源腫瘤異種移植模型(PDX)。(1)請(qǐng)選擇合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系并說(shuō)明理由;(2)列出模型構(gòu)建的關(guān)鍵步驟;(3)需關(guān)注哪些動(dòng)物福利措施?答案:(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇:NOD/SCID小鼠(或更高級(jí)的NSG小鼠)。理由:該品系存在嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(T、B細(xì)胞缺失,NK細(xì)胞功能低下),可避免對(duì)人腫瘤組織的免疫排斥,保證移植瘤存活。(2)關(guān)鍵步驟:①人結(jié)腸癌細(xì)胞(或手術(shù)切除的患者腫瘤組織)獲取,經(jīng)無(wú)菌處理(PBS清洗,剪碎成1~2mm3組織塊);②小鼠麻醉(異氟醚吸入或腹腔注射戊巴比妥鈉);③背部皮下或腎包膜下接種腫瘤組織(細(xì)胞接種量5×10^6~1×10^7個(gè)/只);④術(shù)后觀察(每日檢查傷口愈合、體重變化);⑤腫瘤體積監(jiān)測(cè)(用游標(biāo)卡尺測(cè)量,公式:體積=長(zhǎng)×寬2×0.5);⑥藥物干預(yù)(待腫瘤體積達(dá)100~200mm3時(shí)開(kāi)始給藥)。(3)動(dòng)物福利措施:①麻醉前禁食4小時(shí),減少誤吸風(fēng)險(xiǎn);②手術(shù)過(guò)程中維持體溫(使用恒溫墊);③術(shù)后給予鎮(zhèn)痛(如布托啡諾皮下注射);④單籠飼養(yǎng)避免打斗損傷腫瘤;⑤設(shè)定humaneendpoint(如腫瘤體積>2000mm3、體重下降>20%時(shí)實(shí)施安樂(lè)死);⑥操作過(guò)程中動(dòng)作輕柔,減少動(dòng)物應(yīng)激。案例2:某SPF級(jí)大鼠飼養(yǎng)室近期出現(xiàn)多只大鼠體重下降、呼吸困難,剖檢可見(jiàn)肺部充血、支氣管內(nèi)有黏液。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大鼠呼吸道存在支氣管敗血波氏桿菌(Bordetellabronchiseptica)感染。(1)分析可能的感染來(lái)源;(2)提出應(yīng)急處理措施;(3)如何預(yù)防類似事件再次發(fā)生?答案:(1)感染來(lái)源可能包括:①新引入大鼠未嚴(yán)格隔離檢測(cè),攜帶病原;②飼養(yǎng)人員操作不規(guī)范(如未更換消毒工作服),帶入外界病原;③飼料/墊料被污染(如運(yùn)輸過(guò)程中接觸野鼠);④通風(fēng)系統(tǒng)故障導(dǎo)致空氣交叉污染(如屏障系統(tǒng)壓差異常)。(2)應(yīng)急處理措施:①立即隔離發(fā)病大鼠,對(duì)同籠動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)記;②對(duì)全群大鼠進(jìn)行病原檢測(cè)(PCR檢測(cè)支氣管敗血波氏桿菌),確定感染范圍;③對(duì)感染大鼠實(shí)施安樂(lè)死(CO?吸入法),尸體高壓滅菌后按醫(yī)療廢物處理;④對(duì)飼養(yǎng)籠具、設(shè)施進(jìn)行終末消毒(0.5%過(guò)氧乙酸噴霧,紫外線照射30分鐘);⑤檢測(cè)通風(fēng)系統(tǒng)壓差(應(yīng)維持≥15Pa正壓)、空氣過(guò)濾效率(高效過(guò)濾器完整性);⑥對(duì)飼養(yǎng)人員進(jìn)行培訓(xùn),
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