T/CSBMT/CSBM0052—2024基于熒光探針監(jiān)測(cè)生物可降解鎂基金屬降解的方法Methodformonitoringdegradationofbiodegrdablemagnesiumbasedmetalviafluorescentprobe2024-11-25發(fā)布2025-04-01實(shí)施中國(guó)生物材料學(xué)會(huì)發(fā)布I 2 3 3 4 7本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的監(jiān)測(cè)醫(yī)用生物可降解鎂基金屬降解全過(guò)程的定性和定量體外評(píng)價(jià)本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)提請(qǐng)注意，聲明符合本文件時(shí)，可能涉及到附錄A（規(guī)范性）熒光探針PSPA制備與一種原位監(jiān)測(cè)鎂合金動(dòng)態(tài)腐蝕過(guò)程的熒光探針及其制備和應(yīng)用相關(guān)地址：510640廣東省廣州市天河區(qū)五山路3811本文件適用于利用熒光探針監(jiān)測(cè)降解產(chǎn)物包含氫氧化鎂的生物可降解鎂基金屬產(chǎn)品降解全過(guò)程的2規(guī)范性引用文件3.13.23.33.4熒光探針fluorescentpro-yl)sulfinyl)propanoicacidPSPA）在與醫(yī)用鎂合金產(chǎn)品的主要降解產(chǎn)物氫氧化鎂（Mg(OH)2）結(jié)24.2樣品的制備4.2.1一般要求4.2.2樣品形狀4.2.3樣品尺寸樣品尺寸宜為直徑10mm、厚度1mm的圓片或邊長(zhǎng)10mm、厚1mm的方片。4.2.4結(jié)果判定將樣品完全浸泡于腐蝕液中，加入適量按附錄A制備的熒光探針PSPA用于鎂合金主要降解產(chǎn)物氫氧5.2儀器與試劑5.3參考監(jiān)測(cè)條件5.3.1參考熒光顯微鏡觀察條件如下：5.3.2參考手持紫外燈觀察條件如下：5.4溶液制備5.4.1腐蝕液5.4.2熒光探針溶液35.4.3供試品溶液6.1pH），利用熒光顯微鏡采集樣品降解后的熒光圖像，運(yùn)用圖像分析系統(tǒng)，按式（1）計(jì)算樣品表面不同區(qū)P=·············································································(1)S——該區(qū)域面積。注：宜使用ImageJ軟件進(jìn)行分析。d)熒光顯微鏡觀察：分別報(bào)告樣品的熒光分布及降解層厚e)結(jié)果評(píng)價(jià)：對(duì)生物可降解鎂基金屬產(chǎn)品降解定性和定量作4A.1原理通過(guò)Knoevenagel縮合反應(yīng)制備化合物（Z）-2-（2-（4-（3-溴丙氧基）亞芐基）-3-氧代-2,3-二氧代-9H-茚并[2,1-c]吡啶-3-基）硫代）丙酸（3-((1-(4-(3-bromopropoxy)phenyl)-4-cyano-99H-indeno[2,1-c]pyridin-3-yl)thio)propanoicacidPTPA最后經(jīng)氧化制備熒光探針PSPA。A.2儀器與試劑A.2.2真空干燥箱。A.2.73-巰基丙酸。A.3制備A.3.1合成路線123,84%PTPTPA,67%PSPA,5固體化合物Z）-2-（2-（4-（3-溴丙氧基）亞芐基）-3-氧代-2,3-二氫-1H-茚-1-亞基）丙二腈。卻至室溫，沉淀物經(jīng)過(guò)濾并用乙腈洗滌，真A.3.3終產(chǎn)物制備稱取21mgPTPA，溶于5mLCH2Cl2中，加入10mgm-CPBA，在0℃下攪拌2h，沉淀物經(jīng)過(guò)濾、CH2Cl2洗滌凈化后真空干燥得到熒光探針PSPA。A.4測(cè)定A.4.1測(cè)定方法稱取0.008gPSPA探針溶于氘代DMSO中（DMSO-d6用核磁共振波譜儀進(jìn)行核磁氫譜和碳譜表征。A.4.2核磁氫譜和碳譜A.4.2.2熒光探針PSPA在氘代D6A.4.2.3熒光探針PSPA在氘代D一A.4.3高分辨質(zhì)譜541.025775