2025年病原微生物實驗室生物安全技能提升培訓題庫及答案一、生物安全基礎知識1.單選題：根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，我國將病原微生物分為四類，其中第一類病原微生物的定義是？答案：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。2.多選題：BSL-3實驗室（生物安全三級實驗室）的核心防護要求包括哪些？A.實驗室應設置獨立的送排風系統(tǒng)，保證負壓梯度B.工作人員需穿戴正壓防護服C.所有操作需在II級或III級生物安全柜中進行D.實驗室內(nèi)應配備雙扉高壓滅菌器答案：ACD（BSL-3實驗室工作人員通常穿戴一次性防護服+呼吸防護裝備，正壓防護服為BSL-4實驗室要求）3.判斷題：高致病性病原微生物是指第一類和第二類病原微生物，其運輸必須經(jīng)省級以上衛(wèi)生或獸醫(yī)主管部門批準。答案：正確（依據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》第二十一條）4.簡答題：簡述實驗室生物安全防護水平（BSL）與動物生物安全防護水平（ABSL）的主要區(qū)別。答案：BSL針對操作感染性微生物的實驗室，防護重點是防止微生物泄漏至環(huán)境；ABSL針對感染性微生物或寄生蟲感染動物的實驗室，需額外考慮動物活動、抓咬、分泌物排泄等帶來的風險，通風系統(tǒng)需更高換氣次數(shù)（通常10-15次/小時），設施需防動物逃逸（如防咬籠具、密封門窗）。二、實驗室操作規(guī)范5.單選題：在BSL-2實驗室進行細菌培養(yǎng)操作時，以下哪項行為不符合生物安全要求？A.使用后吸管直接放入銳器盒B.開啟培養(yǎng)皿前用75%酒精噴霧表面C.離心管未完全平衡即啟動離心機D.操作結束后用含氯消毒液（有效氯500mg/L）擦拭臺面答案：C（未平衡的離心管可能導致離心機故障，引發(fā)氣溶膠泄漏）6.多選題：關于生物安全柜的使用，正確的操作包括？A.操作前需運行生物安全柜至少5分鐘B.手臂快速進出安全柜以減少干擾C.柜內(nèi)物品擺放遵循“清潔區(qū)→操作區(qū)→污染區(qū)”單向原則D.操作時物品距前窗玻璃內(nèi)側10-15cm答案：ACD（手臂應緩慢進出，避免破壞氣流平衡）7.判斷題：實驗室高壓蒸汽滅菌時，為提高效率，可將多個物品緊密堆疊放置于滅菌器內(nèi)。答案：錯誤（緊密堆疊會阻礙蒸汽穿透，導致滅菌不徹底，需留出間隙保證蒸汽循環(huán)）8.簡答題：簡述實驗室廢棄物分類處理流程（以BSL-2實驗室為例）。答案：①感染性廢棄物：包括培養(yǎng)物、被污染的耗材（如吸管、培養(yǎng)皿）等，需裝入防滲漏黃色醫(yī)療廢物袋，袋口扎緊后標注“感染性廢物”，置于專用暫存容器；②銳器：針頭、玻璃碎片等放入防穿刺銳器盒，裝滿3/4時密封；③化學性廢物：如廢棄試劑（非感染性），分類收集至專用容器（如有機廢液、無機廢液）；④所有廢棄物需經(jīng)高壓蒸汽滅菌（121℃，30分鐘）或化學消毒（如含氯消毒液浸泡）后，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢物處理單位轉(zhuǎn)運。三、生物安全應急處置9.單選題：實驗室發(fā)生樣本潑濺（如含結核分枝桿菌的痰液），以下處理步驟最合理的順序是？①用布或紙巾覆蓋潑濺物②向主管報告③穿戴防護裝備（手套、護目鏡、防護服）④沿覆蓋物周圍噴灑含氯消毒液（有效氯2000mg/L）⑤靜置30分鐘后清理A.③→①→④→⑤→②B.②→③→①→④→⑤C.③→④→①→⑤→②D.①→③→④→⑤→②答案：A（優(yōu)先保護自身安全，穿戴防護后處理，最后報告）10.多選題：工作人員被污染的針頭刺傷手指（暴露源為HIV陽性樣本），正確的應急處理包括？A.立即從近心端向遠心端擠壓傷口，盡可能擠出污血B.用肥皂水和流動水沖洗傷口15分鐘C.用75%酒精或0.5%碘伏消毒傷口D.24小時內(nèi)啟動暴露后預防（PEP）用藥答案：ABCD（所有步驟均符合《血源性病原體職業(yè)暴露防護指南》要求）11.判斷題：實驗室發(fā)生火災時，若火勢較小且為酒精等液體燃燒，應立即使用二氧化碳滅火器滅火；若為電路火災，需先切斷電源再滅火。答案：正確（液體火災可用二氧化碳或干粉滅火器，電路火災需斷電以避免觸電風險）12.案例分析題：某BSL-2實驗室進行沙門氏菌分離培養(yǎng)時，實驗員未關閉生物安全柜前窗即進行操作，導致培養(yǎng)皿傾覆，樣本濺至安全柜外臺面。請分析該事件中的違規(guī)操作，并列出正確的處置流程。答案：違規(guī)操作：①未關閉生物安全柜前窗（標準操作要求前窗高度不超過18cm，操作時保持穩(wěn)定）；②未在安全柜內(nèi)鋪吸水紙或防溢墊；③操作時未佩戴護目鏡（可能因潑濺導致面部暴露）。正確處置流程：①實驗員立即停止操作，穿戴額外防護（雙層手套、護目鏡、防護服）；②用紗布或吸水紙覆蓋潑濺區(qū)域，沿周圍噴灑含氯消毒液（有效氯2000mg/L），靜置30分鐘；③用鑷子夾取污染材料放入感染性廢物袋，用新的消毒液擦拭臺面3次（每次間隔10分鐘）；④記錄事件經(jīng)過、暴露人員、處理措施，報告實驗室負責人；⑤對實驗員進行暴露后醫(yī)學觀察（沙門氏菌潛伏期6-72小時，監(jiān)測發(fā)熱、腹瀉等癥狀）；⑥組織全員培訓，強調(diào)生物安全柜操作規(guī)范。四、實驗室管理與法規(guī)13.單選題：根據(jù)《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008），實驗室生物安全委員會的主要職責不包括？A.審查實驗室生物安全管理制度B.審批高風險實驗項目C.參與實驗室事故調(diào)查D.負責實驗耗材采購答案：D（采購屬于后勤管理職責，生物安全委員會側重安全風險管控）14.多選題：實驗室人員準入的基本要求包括？A.完成生物安全培訓并考核合格B.進行健康體檢（重點排查免疫缺陷、皮膚破損等）C.簽署生物安全責任承諾書D.具有本科以上學歷答案：ABC（學歷非強制要求，關鍵是能力和安全意識）15.判斷題：實驗室風險評估應至少每年進行一次，當實驗活動、設施設備、人員結構發(fā)生重大變化時需重新評估。答案：正確（動態(tài)風險評估是生物安全管理的核心要求）16.簡答題：簡述實驗室生物安全記錄的主要內(nèi)容及保存期限。答案：記錄內(nèi)容包括：①人員培訓記錄（培訓時間、內(nèi)容、考核結果）；②設備運行記錄（生物安全柜、高壓滅菌器等的檢測、維護時間）；③實驗活動記錄（樣本來源、操作步驟、廢棄物處理）；④應急事件記錄（時間、原因、處理過程、后續(xù)措施）；⑤環(huán)境監(jiān)測記錄（壓差、換氣次數(shù)、空氣微生物檢測）。保存期限：一般記錄保存3年，高風險實驗相關記錄（如BSL-3實驗室）需保存10年以上，涉及法律糾紛的記錄永久保存。五、高級技能與前沿知識17.單選題：在BSL-3實驗室操作經(jīng)氣溶膠傳播的高致病性病原微生物（如炭疽桿菌），應選擇的生物安全柜類型是？A.I級生物安全柜B.II級A1型生物安全柜C.II級B2型生物安全柜D.III級生物安全柜答案：C（II級B2型為全排型，外排氣流100%，適用于高風險氣溶膠操作；III級為手套箱型，主要用于BSL-4實驗室）18.多選題：新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）的生物安全防護要點包括？A.病毒培養(yǎng)需在BSL-3實驗室進行B.樣本滅活（如56℃30分鐘）后可在BSL-2實驗室檢測C.操作時需佩戴N95/KN95口罩或PAPR（動力送風呼吸器）D.廢棄物處理前需經(jīng)134℃高壓滅菌30分鐘答案：ABCD（依據(jù)《新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第三版）》）19.判斷題：基于風險的生物安全管理（RBBS）強調(diào)“以風險為核心”，通過識別、評估、控制風險，實現(xiàn)從“合規(guī)導向”到“風險導向”的轉(zhuǎn)變。答案：正確（RBBS是當前國際生物安全管理的主流理念，注重動態(tài)調(diào)整防護措施）20.論述題：結合實際，談談如何通過培訓提升實驗室人員的生物安全“行為意識”。答案：提升生物安全行為意識需多維度干預：①情景化培訓：通過模擬操作（如生物安全柜使用、銳器處理）、VR虛擬演練（如樣本泄漏處置），讓人員在實踐中掌握正確行為；②案例警示教育：分析歷史事故（如2004年某實驗室SARS病毒泄漏事件），強調(diào)違規(guī)操作的后果；③日常監(jiān)督反饋：設置生物安全督導員，實時糾正不規(guī)范行為（如未戴手套接觸樣本），并記錄納