(19)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局(71)申請(qǐng)人吉林大學(xué)地址130012吉林省長(zhǎng)春市朝陽(yáng)區(qū)前進(jìn)大街2699號(hào)(72)發(fā)明人張楠韓銘書張西臣王大成李建華宮鵬濤王曉岑李新(74)專利代理機(jī)構(gòu)北京瑞盛銘杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11617專利代理師郝丹丹A61K31/395(2006.01)(54)發(fā)明名稱普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用本發(fā)明適用于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，提供了普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用。還提供了一種抗雞球蟲病藥物，所述藥物包括普樂沙福。本發(fā)明針對(duì)當(dāng)前養(yǎng)禽業(yè)抗球蟲藥物的嚴(yán)重耐藥性問題，研究并證實(shí)了普樂沙福在抗雞球蟲上的效果，為抗球蟲藥物的研發(fā)提供了新的先導(dǎo)化合物。21.普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述雞球蟲病的病原體為艾美爾屬球蟲，所述艾美爾屬球蟲為柔嫩艾美爾球蟲。3.一種抗雞球蟲病藥物，其特征在于，所述藥物包括普樂沙福。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于，所述藥物還包括一種或多種載體。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物，其特征在于，所述載體包括藥學(xué)上可接受的稀釋劑、潤(rùn)6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于，所述藥物的劑型為散劑、水溶性粉劑、溶液劑、微囊劑中的一種。3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)背景技術(shù)[0002]普樂沙福(Plerixafor),又名1,1'-[1,4-亞苯基(亞甲基)]-二-1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷，分子量為502.78,CAS號(hào)為155148-31-5,分子式為C?8H54N?,普樂沙福是一種小分子趨化因子受體CXCR4的阻斷劑，可促進(jìn)CD34+造血干細(xì)胞釋放入血，是一種造血干細(xì)胞動(dòng)員劑，現(xiàn)有技術(shù)中公開了，普樂沙?？梢哉{(diào)動(dòng)干細(xì)胞從骨髓進(jìn)入血流，為需干細(xì)胞移植的非何杰金淋巴瘤(NHL)和多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者增加血液循環(huán)中的干細(xì)胞數(shù)。[0003]雞球蟲病是由艾美爾科艾美爾屬的一種或多種球蟲寄生于雞腸道內(nèi)引起的一種寄生性原蟲病，該病廣泛分布，給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的損失，其中柔嫩艾美爾球蟲(Eimeriatenella)是艾美爾屬球蟲中致病性最強(qiáng)的一種，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，柔嫩艾美爾球蟲已成為研究雞球蟲病防治的代表性蟲種。目前，化學(xué)藥物和疫苗是防治雞球蟲病的重要手段，抗球蟲藥物主要包括抗生素類藥物和化學(xué)合成類藥物等，雖然這些藥物在球蟲病防治中取得了一定成效，但同時(shí)也引發(fā)了耐藥性問題和藥物殘留問題。因此，研發(fā)新藥物以替代或輔助現(xiàn)有抗球蟲藥物顯得尤為重要。[0004]目前，尚未有將普樂沙福應(yīng)用在抗雞球蟲病中的研究。發(fā)明內(nèi)容[0005]本發(fā)明實(shí)施例的目的在于提供普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用，旨在解決普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用。[0006]本發(fā)明實(shí)施例是這樣實(shí)現(xiàn)的，普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用。[0007]優(yōu)選地，所述雞球蟲病的病原體為艾美爾屬球蟲，所述艾美爾屬球蟲為柔嫩艾美爾球蟲。[0008]本發(fā)明實(shí)施例的另一目的在于提供一種抗雞球蟲病藥物，所述藥物包括普樂沙[0012]本發(fā)明實(shí)施例提供的普樂沙福在制備抗雞球蟲病藥物中的應(yīng)用，針對(duì)當(dāng)前養(yǎng)禽業(yè)抗球蟲藥物的嚴(yán)重耐藥性問題，研究并證實(shí)了普樂沙福在抗雞球蟲上的作用，為抗球蟲藥物的研發(fā)提供了新的先導(dǎo)化合物。4附圖說明[0013]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1提供的普樂沙福與雞球蟲病相關(guān)靶標(biāo)對(duì)接的結(jié)合能；圖2為本發(fā)明實(shí)施例1提供的普樂沙福與EGFR的對(duì)接的示意圖；圖3為本發(fā)明實(shí)施例1提供的普樂沙福與PTGS2的對(duì)接的示意圖。具體實(shí)施方式[0014]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。[0015]本發(fā)明實(shí)施例提出的抗球蟲病的藥物以普樂沙福作為有效成分，還可以根據(jù)實(shí)際甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包括如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鎂、聚乙二醇劑包括如亞硫酸鹽、抗壞血酸、沒食子酸及其鹽類等；金屬絡(luò)合劑包括如乙二胺四乙酸二可以理解的是，普樂沙?？梢耘c合適種類的載體、輔料結(jié)合，制備成不同形態(tài)的藥劑(包括水?dāng)U散性粉劑及水溶性顆粒劑)、溶液劑(主要是水溶液，也有混懸液、乳濁液等)、微囊劑等；可以理解的是，藥物的給藥方式包括但不限于群體給藥、個(gè)體給藥以及群體給藥和個(gè)體給藥相結(jié)合的方式；普樂沙?；诓煌妮d體、不同的劑型，相應(yīng)的其給藥的方式也[0016]以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)現(xiàn)進(jìn)行詳細(xì)描述。[0017]實(shí)施例1、普樂沙福與雞球蟲病相關(guān)靶標(biāo)的分子對(duì)接分析：通過NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中的SRA子數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索了感染柔嫩艾美爾球蟲的雞盲腸組織轉(zhuǎn)使用RNA-Seq工具分析其中的差異基因靶標(biāo)，獲得與雞球蟲病相關(guān)的靶2、普樂沙福靶標(biāo)的預(yù)測(cè)、篩選與雞球蟲病相關(guān)疾病的交集靶通過Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)(/)查詢所有次級(jí)代謝產(chǎn)物的SMILE編號(hào)，在SwissTargetPrediction物靶標(biāo)，篩選并留存潛在(Probability>0)的靶標(biāo)；將普樂沙福的藥物靶標(biāo)與雞球蟲病相5關(guān)疾病靶標(biāo)進(jìn)行比對(duì)，篩選出兩者的交集靶標(biāo)；通過比對(duì)，篩選出普樂沙福和雞球蟲病相關(guān)的5個(gè)交集靶標(biāo)：EGFR、PTGS2、CA4、沙福與靶點(diǎn)可能具有更強(qiáng)烈的結(jié)合活性，結(jié)果顯示，分子對(duì)接能量范圍為-6.32~-8.61kcal/mol,一般認(rèn)為，對(duì)接能量值<-4.25kcal/mol表示兩者間有一定的結(jié)合活性，<-5.0kcal/mol表示有較好的結(jié)合活性，<-7.0kcal/mol表示有強(qiáng)烈的結(jié)合活性；結(jié)果表明，2組對(duì)接具有強(qiáng)烈的結(jié)合活性，3組對(duì)接具有較好的結(jié)合活性；普樂沙福形成Pi-Sulfur相互作用(如圖2所示);普樂沙福-PTGS2(-8.61kcal/mol):PTGS2蛋白受體上的Ala199、Thr206、[0019]實(shí)施例2、普樂沙?？闺u球蟲病感染的效果分析：實(shí)驗(yàn)材料：1日齡雛雞：購(gòu)自長(zhǎng)春市某種雞場(chǎng)，在專用動(dòng)物房?jī)?nèi)飼養(yǎng)至7日齡；雛雞體內(nèi)復(fù)壯；普樂沙福粉劑：購(gòu)自阿拉丁生化科技股份有限公司；常規(guī)抗球蟲藥物：地克珠利溶液，購(gòu)自中龍神力動(dòng)物藥業(yè)有限公司。[0020]實(shí)驗(yàn)過程：將180只7日齡雛雞隨機(jī)分為6組，分組如下：G1為空白對(duì)照組、G2為感染對(duì)照組，G3組每只雛雞經(jīng)口感染5×10?個(gè)卵囊；感染球蟲卵囊后，在G3組飲水中添加地克珠利溶液，G4、G5、G6組飲水中分別添加不同濃度的普樂沙福，保證飲水充足，連續(xù)7天，具體分組處理如表1所示：表1組別藥物感染劑量(卵囊/只)不感染不給藥基礎(chǔ)飼喂6感染不給藥基礎(chǔ)飼喂0.5%地克珠利溶液普樂沙福普樂沙福普樂沙福為球蟲感染引起死亡則病變記分為4分，所有雛雞于感染后第8天逐只稱重、剖檢、進(jìn)行盲腸病變記分，收集各組糞便計(jì)算卵囊數(shù)量。[0021]抗球蟲指數(shù)(ACI)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：ACI=(相對(duì)增重率+存活率)-(盲腸病變值+卵囊值),判斷標(biāo)準(zhǔn)：ACI≥180為高效抗球蟲水平，140≤ACI<180為中效抗球蟲水平，120≤ACI<140為低效抗球蟲水平，ACI<120為無(wú)效；相對(duì)增重率(%)=(試驗(yàn)組的平均增重/空白組平均增重)×100%;存活率=處死前存活數(shù)/攻蟲前存活數(shù)×100%;卵囊值由每克糞便卵囊數(shù)(OPG)換算而來(lái)；參照以下病變?cè)u(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組雛雞盲腸病變進(jìn)行評(píng)分：1分：盲腸壁有很少量散在淤點(diǎn)，腸壁不增厚，內(nèi)容物正常；2分：病變數(shù)量較多，盲腸內(nèi)容物明顯帶血，盲腸壁稍增厚，內(nèi)容物正常；3分：盲腸內(nèi)有多量血液或盲腸芯，盲腸壁肥厚明顯；4分：因充滿大量血液或腸芯而盲腸腫大。兩側(cè)盲腸病變不一致時(shí)，以嚴(yán)重的一側(cè)為準(zhǔn)；參照以下公式計(jì)算各組雛雞盲腸病變值：病變值=平均病變?cè)u(píng)分×10。[0022]結(jié)果分析：臨床癥狀觀察：接種球蟲卵囊后第4天，感染對(duì)照組(G2)的病雞精神萎靡，縮頸閉眼，羽毛蓬亂，食欲減退。第6天，G2出現(xiàn)明顯血便，并出現(xiàn)死亡情況，隨后血便逐漸減少。其余各組雞只無(wú)異常狀態(tài)。分別計(jì)算各組的抗球蟲指數(shù)，結(jié)果如表2所示：組別存活率(%)相對(duì)增重率(%)盲腸病變值卵囊值抗球蟲指數(shù)組的抗球蟲指數(shù)是163.42,100μg/L普樂沙福(G6)組的抗球蟲指數(shù)可達(dá)到140以上，均具有中效抗球蟲水平。[0023]