生物實驗室安全考試題庫及答案一、單項選擇題（每題2分，共40分）1.以下關于生物安全柜的使用規(guī)范，錯誤的是：A.操作前需開機運行1015分鐘，確保氣流穩(wěn)定B.操作時手臂應緩慢進出，避免干擾柜內(nèi)氣流C.柜內(nèi)物品應盡量靠近前窗，方便操作D.操作結束后需用75%乙醇擦拭臺面，關閉風機前運行5分鐘答案：C解析：生物安全柜內(nèi)物品應避免遮擋回風口，需與前窗保持1015cm距離，以維持有效氣流屏障；靠近前窗會破壞氣流平衡，增加污染風險。2.高壓蒸汽滅菌的標準條件是：A.100℃，30分鐘B.121℃，1520分鐘C.134℃，5分鐘D.160℃，2小時答案：B解析：高壓蒸汽滅菌通過高溫高壓使微生物蛋白質(zhì)變性，常規(guī)培養(yǎng)基、器械等需在121℃（1.05kg/cm2）下維持1520分鐘；134℃為快速滅菌條件（適用于耐高溫小件物品），160℃為干熱滅菌條件。3.實驗室中處理感染性銳器（如接種環(huán)、針頭）時，正確的操作是：A.使用后直接用手拆卸針頭B.放入專用防刺銳器盒，裝滿3/4時封口處理C.用75%乙醇浸泡后丟棄于普通垃圾桶D.重復使用前用酒精燈火焰灼燒3秒答案：B解析：銳器需放入防刺、防滲漏的專用容器，裝滿3/4即封口，避免過滿導致刺傷；直接用手拆卸針頭易引發(fā)暴露；感染性銳器需先高壓滅菌再處理，不可直接丟棄；灼燒接種環(huán)需持續(xù)至紅熱（約510秒），確保滅菌徹底。4.關于實驗室化學品儲存，下列說法錯誤的是：A.強酸與強堿需分柜存放B.易揮發(fā)的有機溶劑（如乙醚）應存于防爆冰箱C.固體試劑與液體試劑可混放于同一層貨架D.劇毒化學品需雙人雙鎖管理，建立使用登記制度答案：C解析：固體與液體試劑應分開放置，避免液體泄漏污染固體；強酸與強堿接觸可能劇烈反應，需隔離；易揮發(fā)溶劑需防爆儲存；劇毒化學品需嚴格管控。5.進行細胞培養(yǎng)操作時，若培養(yǎng)瓶不慎跌落破碎，正確的處理流程是：A.立即用紙巾擦拭碎片，倒入普通垃圾桶B.穿戴手套、護目鏡，用鑷子收集碎片至銳器盒，污染區(qū)域用10%次氯酸鈉溶液浸泡30分鐘后擦拭C.直接用掃帚清理，地面用清水沖洗D.用75%乙醇噴灑后立即清理答案：B解析：破碎的感染性材料需先防護（手套、護目鏡），銳器碎片放入專用容器，污染區(qū)域用有效氯濃度≥10000ppm的次氯酸鈉（10%）消毒30分鐘，確保殺滅病原微生物；75%乙醇對細菌繁殖體有效，但對芽孢、病毒效果有限，不能替代次氯酸鈉。6.生物實驗室廢棄物分類中，不屬于感染性廢物的是：A.用過的細胞培養(yǎng)板B.含HBV陽性血清的離心管C.實驗動物的墊料（接觸過病原體）D.未開封的無菌移液管包裝紙答案：D解析：感染性廢物指被病原微生物污染的物品，包括培養(yǎng)物、樣本接觸材料、實驗動物相關廢物等；未開封的包裝紙未接觸生物危害物，屬于普通廢物。7.實驗室發(fā)生皮膚被帶菌針頭刺傷后，應急處理第一步是：A.立即用肥皂水和流動水沖洗傷口B.從近心端向遠心端擠壓傷口，擠出少量血液C.用75%乙醇或0.5%碘伏消毒D.報告實驗室負責人并填寫暴露記錄答案：B解析：暴露后應先擠壓傷口（近心端向遠心端），促進污染血液排出，減少吸收；隨后沖洗、消毒，最后報告并評估風險。8.關于實驗室個人防護裝備（PPE）的使用，正確的是：A.戴手套后可直接觸摸手機、門把手B.一次性手套破損后，可翻轉繼續(xù)使用C.進行PCR擴增時需佩戴N95口罩D.離開實驗室前需脫去手套、白大褂，洗手后再接觸公共物品答案：D解析：PPE僅在實驗區(qū)域使用，離開前需脫除并洗手，避免污染公共區(qū)域；手套破損應立即更換，不可重復使用；普通分子實驗（如PCR）無需N95口罩，一般操作佩戴一次性外科口罩即可。9.下列哪種微生物屬于BSL2級實驗室操作范圍？A.天花病毒（BSL4）B.金黃色葡萄球菌（BSL2）C.結核分枝桿菌（BSL3）D.埃博拉病毒（BSL4）答案：B解析：BSL2實驗室處理中等危害微生物（如常見致病菌），BSL3處理高危害（經(jīng)呼吸道傳播），BSL4處理最高危害（無疫苗/治療手段）。10.實驗室冰箱內(nèi)禁止存放的物品是：A.滅菌后的培養(yǎng)基B.分裝的試劑（標注清晰）C.個人食品和飲料D.凍存的細胞株（標記日期）答案：C解析：實驗室冰箱僅用于儲存實驗相關物品，禁止存放個人食品，避免交叉污染和誤食風險。11.配置強酸（如濃硫酸）溶液時，正確的操作是：A.將水緩慢倒入濃硫酸中，邊倒邊攪拌B.將濃硫酸緩慢倒入水中，邊倒邊攪拌C.直接在容量瓶中稀釋濃硫酸D.在通風櫥外操作，避免吸入酸霧答案：B解析：濃硫酸稀釋時會釋放大量熱量，需將酸倒入水中（“酸入水”），避免水沸騰濺出；應在燒杯中稀釋，冷卻后再轉移至容量瓶；需在通風櫥內(nèi)操作，防止酸霧擴散。12.實驗室火災發(fā)生時，若燃燒物為活潑金屬（如鈉、鉀），應使用的滅火器是：A.二氧化碳滅火器B.水基型滅火器C.干粉滅火器（普通型）D.專用金屬火災滅火器（D類）答案：D解析：活潑金屬與水、二氧化碳反應會加劇燃燒，需用D類滅火器（如氯化鈉基、石墨基）；普通干粉滅火器（BC類）對金屬火災無效。13.關于實驗室氣體鋼瓶的管理，錯誤的是：A.氧氣鋼瓶與氫氣鋼瓶分開放置，間距≥5米B.鋼瓶應固定在專用支架上，防止傾倒C.減壓閥需專用，氧氣減壓閥可用于氫氣D.空瓶與滿瓶標識清晰，定期檢查閥門密封性答案：C解析：不同氣體減壓閥不可混用（如氧氣減壓閥禁用于可燃氣體），避免因油脂殘留（氧氣）或壓力不匹配引發(fā)爆炸。14.進行動物實驗時，不符合倫理要求的是：A.實驗前評估動物數(shù)量，采用最小有效樣本量B.麻醉后未完全蘇醒的動物直接處死C.使用鎮(zhèn)痛劑緩解術后疼痛D.實驗結束后對動物實施安樂死答案：B解析：動物實驗需遵循“3R原則”（替代、減少、優(yōu)化），未蘇醒動物直接處死會導致痛苦，應待其蘇醒或在深度麻醉下實施安樂死。15.實驗室生物安全等級（BSL）的劃分依據(jù)不包括：A.微生物的傳染性B.實驗室的建筑結構C.實驗人員的操作熟練程度D.防護措施的有效性答案：C解析：BSL劃分基于微生物危害程度、傳播途徑及所需防護水平（如建筑、設備、操作規(guī)范），與人員操作熟練程度無關（但需培訓合格）。16.處理含氰化物的廢液時，正確的方法是：A.直接倒入下水道，用大量水沖洗B.加入過量次氯酸鈉溶液，調(diào)節(jié)pH至10以上，反應24小時后排放C.與酸性廢液混合中和后處理D.儲存于普通廢液桶，定期由專業(yè)公司回收答案：B解析：氰化物需先氧化解毒（如次氯酸鈉在堿性條件下生成無毒的氰酸鹽），不可與酸混合（產(chǎn)生HCN毒氣）；需專業(yè)處理或按規(guī)范解毒后排放。17.關于超凈工作臺的使用，正確的是：A.用于處理BSL3級微生物B.操作時需關閉紫外燈，開啟風機C.實驗前后用95%乙醇擦拭臺面D.可以替代生物安全柜進行病原微生物操作答案：B解析：超凈工作臺僅提供潔凈空氣，無防護操作者的功能，不可用于處理感染性材料（需生物安全柜）；操作時需關閉紫外燈（避免輻射傷害），開啟風機；消毒用75%乙醇（95%乙醇殺菌效果差）。18.實驗室電烘箱使用時，禁止烘烤的物品是：A.玻璃器皿（已洗凈）B.塑料離心管（標注耐溫120℃）C.含少量水分的紗布D.金屬器械（無腐蝕性）答案：B解析：電烘箱溫度通?！?00℃，塑料離心管（如聚丙烯）耐溫一般≤120℃，但長期高溫會變形或釋放有毒物質(zhì)；玻璃、金屬、干燥紗布可烘烤。19.實驗過程中若眼睛被化學試劑濺入，應立即：A.用手揉眼睛，促進淚液沖洗B.到洗眼器處，翻開眼瞼，用流動水沖洗15分鐘以上C.滴入眼藥水后繼續(xù)實驗D.報告導師后等待處理答案：B解析：化學濺眼需立即用大量流動水沖洗（洗眼器或自來水），持續(xù)15分鐘以上，確保徹底清除試劑；不可揉眼，避免損傷加重。20.關于實驗室應急預案，錯誤的是：A.每個實驗室需張貼緊急聯(lián)絡電話（消防、醫(yī)院、安全負責人）B.定期進行消防演練和生物安全暴露演練C.發(fā)生大規(guī)模感染性材料泄漏時，立即自行清理D.應急物資（如急救箱、滅火器、消毒溶液）需定期檢查補充答案：C解析：大規(guī)模泄漏（如BSL3級材料）需啟動應急預案，封鎖區(qū)域，報告上級，由專業(yè)人員處理，不可自行清理。二、判斷題（每題1分，共15分）1.實驗室可將廢棄的一次性手套清洗后重復使用。（×）解析：一次性手套使用后可能被污染，清洗無法保證無菌，需按感染性廢物處理。2.進行PCR擴增時，可在開放實驗臺上操作樣本，無需生物安全柜。（√）解析：PCR模板通常為提取的核酸（無活的病原微生物），在清潔臺或開放臺面操作即可；若處理活菌樣本需在生物安全柜內(nèi)。3.實驗室冰箱應定期除霜、清潔，避免結冰影響溫度均勻性。（√）解析：冰箱結冰會導致散熱不良，影響儲存效果，需定期維護。4.未使用完的試劑（如培養(yǎng)基、化學試劑）可倒回原瓶，避免浪費。（×）解析：倒回原瓶可能污染剩余試劑，需按廢棄處理。5.實驗動物籠具可先用清水沖洗，再高壓滅菌。（√）解析：籠具需先去除排泄物等污染物，再滅菌，提高效率。6.實驗室安全色中，黃色代表“警告”，綠色代表“安全”。（√）解析：安全色標準：紅（禁止）、黃（警告）、藍（指令）、綠（安全）。7.離心操作時，可將不同規(guī)格的離心管對稱放置以平衡轉子。（×）解析：需使用相同規(guī)格、等量液體的離心管對稱放置，避免轉子不平衡導致設備損壞或樣本飛濺。8.配制培養(yǎng)基時，可直接用自來水溶解試劑，無需使用去離子水。（×）解析：自來水中的離子可能影響培養(yǎng)基成分，需用去離子水或蒸餾水配制。9.實驗室發(fā)生火災時，若火勢較小，可自行用滅火器撲滅；若火勢較大，應立即撤離并報警。（√）解析：遵循“先保命后救物”原則，無法控制時及時撤離。10.轉基因生物實驗需在專用實驗室進行，并遵守《基因工程安全管理辦法》。（√）解析：轉基因生物可能具有潛在風險，需按法規(guī)在相應等級實驗室操作。11.實驗結束后，可將剩余的細胞培養(yǎng)液倒入下水道，用大量水沖洗。（×）解析：含活細胞或病原微生物的培養(yǎng)液需高壓滅菌后再處理，不可直接排放。12.佩戴護目鏡時，需確保鏡片覆蓋整個眼部區(qū)域，與面部緊密貼合。（√）解析：松垮的護目鏡無法有效防護液體噴濺或碎片沖擊。13.實驗室高壓滅菌器需定期校驗壓力表和溫度傳感器，確保滅菌效果。（√）解析：設備準確性直接影響滅菌質(zhì)量，需定期校準。14.進行免疫熒光染色時，熒光染料需避光保存，避免光照分解。（√）解析：熒光物質(zhì)易受光降解，需避光儲存（如鋁箔包裹）。15.實驗室鑰匙可隨意借給其他人員使用，無需登記。（×）解析：鑰匙需嚴格管理，外借可能導致非授權人員進入，引發(fā)安全事故。三、填空題（每題2分，共20分）1.實驗室生物安全防護的核心原則是________和________。（答案：屏障防護；管理控制）2.感染性廢物的處理流程包括________、________、________。（答案：分類收集；高壓滅菌；專業(yè)焚燒）3.實驗室常用的化學消毒方法中，75%乙醇主要用于________消毒，10%次氯酸鈉用于________消毒。（答案：皮膚/物體表面；感染性材料）4.生物安全柜根據(jù)氣流方向和防護水平分為________級，其中________級適用于處理BSL3級微生物。（答案：三；Ⅲ）5.實驗室電器設備使用時，禁止________、________，以免引發(fā)短路或火災。（答案：超負荷用電；私拉亂接電線）6.實驗動物的“3R原則”指________、________、________。（答案：替代；減少；優(yōu)化）7.危險化學品的“五雙管理”是指雙人驗收、雙人保管、雙人領用、________、________。（答案：雙鎖；雙賬）8.實驗室發(fā)生銳器傷后，需在________小時內(nèi)報告實驗室負責人，并在________小時內(nèi)完成暴露記錄填寫。（答案：2；24）9.高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測方法包括________（物理監(jiān)測）、________（化學監(jiān)測）和________（生物監(jiān)測）。（答案：溫度記錄儀；化學指示卡/膠帶；嗜熱脂肪芽孢桿菌測試）10.實驗室應急物資中的“急救箱”應包含________、________、________等物品（至少3種）。（答案：消毒棉簽；創(chuàng)可貼；碘伏棉球；止血帶等，合理即可）四、簡答題（每題5分，共15分）1.簡述實驗室微生物培養(yǎng)操作的基本安全規(guī)范。答案：①操作前：穿戴白大褂、手套、護目鏡；檢查生物安全柜運行狀態(tài)（提前開機1015分鐘）；用75%乙醇擦拭臺面。②操作中：避免手直接接觸培養(yǎng)物；銳器使用后立即放入銳器盒；禁止在操作區(qū)域飲食、化妝；樣本轉移時使用移液器（禁止用嘴吸）。③操作后：關閉生物安全柜風機前運行5分鐘；高壓滅菌培養(yǎng)物及接觸過的物品；用75%乙醇再次擦拭臺面；脫去防護裝備，洗手并記錄操作過程。2.列舉5類實驗室常見的生物危害源，并說明其防護措施。答案：①病原微生物（如細菌、病毒）：在生物安全柜內(nèi)操作，佩戴手套、口罩，樣本滅活后處理。②實驗動物（如小鼠、大鼠）：使用動物專用籠具，操作時戴手套、護目鏡，接觸后洗手。③細胞培養(yǎng)物（如腫瘤細胞系）：在無菌環(huán)境中操作，廢棄培養(yǎng)物高壓滅菌。④血液/體液樣本（含病原體）：按BSL2級防護，避免飛濺，使用防漏容器運輸。⑤轉基因生物（如重組質(zhì)粒）：在專用實驗室操作，防止擴散至環(huán)境。3.說明實驗室化學品泄漏的應急處理步驟（以濃硫酸泄漏為例）。答案：①個人防護：穿戴防酸堿