生物安全實驗室消毒技術(shù)指南新疆維吾爾自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心提出。本文件由新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生健康委員會歸口。本文件起草單位：新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心、新疆維吾爾自治區(qū)標(biāo)準(zhǔn)化研究院、新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院、烏魯木齊市血液中心、新疆醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院、新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院、天康生物制藥有限公司、烏魯木齊市第四人民醫(yī)院、新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)疾病預(yù)防控制中心。本文件主要起草人：張燕、黃佳、樊玉娟、陳敏、哈麗旦·艾比布拉、石佳瑋、曹雪卉、馬嵋、曹都拉、羅玲娟、何華、張裴雯。本文件實施應(yīng)用中的疑問，請咨詢新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心。對本文件的修改意見及建議，請反饋至新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心(烏魯木齊市堿泉一街380號)、新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生健康委員會(烏魯木齊市龍泉街191號)、新疆維吾爾自治區(qū)市場監(jiān)督管理局(烏魯木齊市新華南路167號)。新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心聯(lián)系電話傳真郵編：830002新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生健康委員會聯(lián)系電話傳真郵編：830001新疆維吾爾自治區(qū)市場監(jiān)督管理局聯(lián)系電話傳真郵編：83000412規(guī)范性引用文件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)實驗室生物安全通用要求醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生規(guī)范殺滅或清除傳播媒介上一切微生物的處理。[來源：GB1598224.1.2明確人員崗位職責(zé)，保障安全管理。應(yīng)加強(qiáng)對實驗、工作人員培訓(xùn)，培訓(xùn)應(yīng)包括但不4.1.3應(yīng)急預(yù)案完整有效，意外事件處置反應(yīng)迅速。應(yīng)形成完整的預(yù)案管理文件體系，針對各類可能4.2.1實驗室所有人員應(yīng)參4.3.1應(yīng)對消毒滅菌設(shè)備器械的應(yīng)用34.3.2應(yīng)根據(jù)消毒工作技術(shù)內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)，制定設(shè)備器械維護(hù)保障制度及相關(guān)工作流程，全流程監(jiān)管消毒設(shè)備器械管理工作。4.4方法的選擇4.4.1根據(jù)病原微生物對消毒因子的抵抗力選擇消毒方法。對由芽孢菌、真菌孢子、分枝桿菌和經(jīng)血傳播病原體(乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等)污染的物品，應(yīng)選用高水平消毒或滅菌的方法；對由真菌、親水病毒、螺旋體，支原體、衣原體等病原微生物污染的物品，應(yīng)選用中水平消毒以上的消毒方法；對由一般細(xì)菌和親脂病毒等病原微生物污染的物品，可選用中水平消毒或低水平消毒的方法。4.4.2根據(jù)消毒物品的性質(zhì)選擇消毒方法。應(yīng)考慮保護(hù)消毒物品不受或少受損壞，且消毒方法易于發(fā)揮作用。耐高溫、耐潮濕的物品和器材，應(yīng)首選壓力蒸汽滅菌；對耐高溫的玻璃器材、油劑類和干粉類等可選擇干熱滅菌；不耐熱、不耐濕，以及貴重物品，可選擇環(huán)氧乙烷或低溫等離子體消毒、滅菌；光滑物體表面消毒可選擇紫外線消毒器近距離照射，或液體消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法。4.5個人防護(hù)消毒時應(yīng)注意個人安全防護(hù)，包括但不限于：1)配制、分裝和稀釋消毒液時應(yīng)戴手套及口罩；2)化學(xué)消毒劑應(yīng)按要求運輸和保存；3)使用消毒器械時應(yīng)注意用電安全，并避免消毒因子的傷害。4)應(yīng)按消毒要求增加特殊防護(hù)，并加強(qiáng)安全性評估。4.6效果的評價及監(jiān)測4.6.1應(yīng)采取正確可靠的方法進(jìn)行消毒效果監(jiān)測與評價，包括但不限于實驗室評價、模擬現(xiàn)場與現(xiàn)場評價。4.6.2預(yù)防性消毒后，消毒對象中自然菌的殺滅率應(yīng)≥90%,如以模擬實驗來評價，以試驗菌的殺滅率≥99.9%為合格標(biāo)準(zhǔn)，并依據(jù)GB15979、GB15982開展相關(guān)細(xì)菌菌落總數(shù)、致病菌的檢測。4.6.3終末消毒后，物體表面自然菌殺滅率應(yīng)≥90%,并不得檢出實驗用病原微生物；空氣中自然菌殺滅率應(yīng)≥90%,并不得檢出乙型溶血鏈球菌和其他病原微生物；可根據(jù)傳播途徑選擇物體表面、空氣等監(jiān)測對象開展指示微生物消毒效果評價，相應(yīng)致病菌與相關(guān)指示菌的采樣、分離與鑒定，參見有關(guān)傳染病診斷、消毒等國家標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，由具備檢測能力的專業(yè)實驗室進(jìn)行。4.6.4壓力蒸汽滅菌效果評價可采用物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法、生物監(jiān)測法等。4.6.5實驗室應(yīng)定期對實驗室環(huán)境進(jìn)行檢查與監(jiān)測，總結(jié)分析與反饋，如發(fā)現(xiàn)問題立即糾正。4.7產(chǎn)品的使用管理4.7.1根據(jù)消毒目的選擇消毒產(chǎn)品。對于預(yù)防性消毒，由于消毒對象的病原微生物污染不清楚，一般選用中水平或低水平消毒劑，也可選用性能溫和的高水平消毒劑；對于終末消毒，應(yīng)根據(jù)傳染病的種類、病原微生物對消毒劑的抵抗力選擇相應(yīng)的消毒劑。4.7.2首先選擇安全有效及環(huán)保性高的消毒產(chǎn)品，其次通過價格、使用濃度、作用時間選擇經(jīng)濟(jì)實用4.7.3在消毒產(chǎn)品的采購、運輸、貯存和使用過程中，應(yīng)符合國家有關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范等管理規(guī)定，并按照批準(zhǔn)或規(guī)定的范圍和方法使用、遠(yuǎn)輸和存放?；瘜W(xué)消毒劑應(yīng)存放在陰涼、通風(fēng)、干燥處，并經(jīng)常檢查消毒劑的安全狀況。4.7.4嚴(yán)格按照消毒產(chǎn)品使用說明書要求的劑量、濃度、作用時間和其他條件使用。本文件各部分中4度不一致時，以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。4.7.5使用消毒產(chǎn)品時，工作人員應(yīng)有自我保護(hù)意識，并采取相應(yīng)防護(hù)措施，以防止消毒事故發(fā)生和4.7.6消毒液使用和存放過程中，應(yīng)注意觀察其5.1.1.1干熱滅菌法包括焚燒、燒灼及干熱空氣滅菌等。焚燒適用于動物尸體或廢棄的污染物品；燒灼常用于小件金屬器械如接種環(huán)、鑷子和剪刀等的滅菌；干熱空氣滅菌常用于高溫下不變不蒸發(fā)的物品滅菌，但熱穿透性較差，條件較高(需要160℃~180℃,1h～2h)。5.1.1.2濕熱滅菌法包括壓力蒸汽滅菌法、巴氏消毒法及煮沸消毒法等。壓力蒸汽滅菌法適用于耐高在水中加入2%的碳酸氫鈉，既可以提高沸點至105℃,也可增強(qiáng)消毒效果。5.1.2.1紫外線消毒以C波段殺菌效果最好，可以殺滅多種微生物，但輻照能量較低，穿透力弱，僅燈對室內(nèi)空氣消毒時常用數(shù)量為平均1.5W/m3,照射時間不少于30min;物體表面消毒時可按殺滅細(xì)菌繁殖體不低于10000μW·s/cm2,殺滅細(xì)菌芽孢不低于100000μW·s/cm2,殺滅真菌孢子不低于6005.1.3過濾滅菌。適用于對熱不穩(wěn)定的溶液、氣體、水等物品的滅菌。滅菌用過濾器應(yīng)有較高的過濾5.2.1高效消毒劑。包括過氧化物類、含氯類、醛類56.1.1.1通風(fēng)。通風(fēng)時間應(yīng)根據(jù)室內(nèi)溫度及空氣流通條件確定。夏每日通風(fēng)1次～2次，每次20min～30min;使用換氣扇通風(fēng)時，新風(fēng)量應(yīng)滿足20m3/(h·人)～306.1.1.2循環(huán)式空氣消毒機(jī)消毒。紫外線空氣消毒機(jī)可用于有人情低于0.1mg/m3;消毒式中央空調(diào)和靜電吸附式空氣消毒機(jī)也可用于有人情況下室內(nèi)空氣消毒；臭氧空氣消毒機(jī)消毒時必須無人，臭氧濃度≥20mg/m3,消毒時間≥30消毒機(jī)循環(huán)風(fēng)量(m/h)應(yīng)是房間體積的8倍以上。6.1.1.3紫外線照射消毒。室內(nèi)無人的情況下，可采取米不少于1.5W,照射時間應(yīng)大于30min;紫外線燈管應(yīng)保持清潔，一般每2周用75%酒精擦拭1次；6.1.1.4化學(xué)消毒劑熏蒸或噴霧消毒。無人情況下可用過氧化氫15mg/m3~20mg/m3噴霧，密閉作用6.1.2.1物理消毒法。循環(huán)式空氣消毒機(jī)、紫外線燈照射使用安裝等基本要求與6.1.1.2、6.1.1.3相6.1.2.2化學(xué)消毒噴霧或熏蒸消毒法。只用于室內(nèi)無人情況下的留消毒劑，人員方可進(jìn)入。噴霧可使用100mg/L二氧化氯30mL/m3,作用30min或15000mg/L過氧化氫15mL/m3~30mL/m3,作用60min;熏蒸可使用5000mg/L～10000mg/L過氧乙酸加熱蒸發(fā)，當(dāng)室溫下相對濕度60%～80%時，用量1g/m3,作用60min。雙鏈和單鏈季銨鹽配以增效劑和穩(wěn)定劑制成的空氣消毒劑，只用于一般細(xì)菌繁殖體和親脂病毒污染的空氣消毒，10mg/m3作用30min,不能用于6.1.2.3空氣消毒所用消毒劑應(yīng)符合GB2796.2.1.1物體表面。實驗操作臺面應(yīng)保持清潔?？捎煤行然蛴行т?50mg/L～500mg/L、二氧化氯100mg/L溶液擦拭或噴酒；實驗器材、設(shè)備表面可用75%乙醇或異丙醇擦拭消毒，也可使用消毒濕巾擦拭消毒；織物可煮沸30min,或流通蒸汽消毒30min,或用250mg/L～500mg/L二溴海因或二氧化氯消毒劑浸泡30min后清洗晾干備用。66.2.1.2地面。地面無明顯污染情況下，可采用濕式拖掃，每日1次～2次；當(dāng)?shù)孛婵赡苁艿讲≡廴緯r，可用含有效氯500mg/L、有效溴250mg/L、二氧化氯100mg/L或過氧乙酸1000mg/L的消毒劑溶液拖擦或噴灑，用量以噴濕為度，作用15min～30min。6.2.1.3墻壁、門窗、天花板。一般情況下污染情況輕于地面，通常不需要進(jìn)行消毒；當(dāng)可能受到病原微生物污染時，可用含有效氯500mg/L、有效溴250mg/L、二氧化氯250mg/L或1000mg/L過氧乙酸消毒劑溶液噴酒或擦洗，以噴濕為度，作用15min,墻面消毒至2.0m高，后用6.2.1.4衛(wèi)生間。衛(wèi)生間地面、墻面等物體表面可用含有效氯或有效溴500mg/或過氧乙酸1000mg/L消毒劑溶液拖擦或噴酒，作用15min～30min,然后用清水擦拭，每日1次~2次；衛(wèi)生潔具和便具可用1000mg/L～2000mg/L的過氧乙酸、500mg/L的含溴消毒劑或二氧化氯溶液、500mg/L～2000mg/L的含氯消毒溶液浸泡，作用30min。衛(wèi)生間和清潔區(qū)的拖把不得混用，使用后應(yīng)選用上述消毒液浸泡30min,再用清水洗凈懸掛晾干。a)一般污染的表面，可用500mg/L二溴海因或二氧化氯均勻噴灑，作用30min;對肝炎病毒和結(jié)核桿菌污染的表面，用1000mg/L二氧化氯均勻噴灑，作用60min;對艾滋病實驗的臺面、儀器表面等也可用70%乙醇或1000mg/L～10000mg/L次氯酸鈉消毒。b)若被明顯污染，立即使用1000mg/L～2000mg/L的有效氯溶液或2000mg/L～5000mg/L過氧乙酸溶液灑于污染表面，并使消毒液浸過污染物表面，作用30min～60min;若已知被肝炎病毒或結(jié)核桿菌污染，應(yīng)用2000mg/L有效氯溶液或5000mg/L過氧乙酸溶液或500mg/L二氧化氯擦拭，若結(jié)核桿菌標(biāo)本污染，也可用紗布或衛(wèi)生紙吸滿5%的苯酚溶液或70%酒c)可通過空氣與物體表面一體化的噴霧、熏蒸法消毒，參照6.1.2.2執(zhí)行。d)懸吊式或移動式紫外線燈照射時，距離污染表面不宜超過1m,消毒有效區(qū)為燈管周圍1.5m~2m;高強(qiáng)度便攜式紫外線燈近距離照射(≤3cm),一般細(xì)菌繁殖體照射3s~5s。e)化學(xué)品熏蒸對人有毒性刺激性，應(yīng)嚴(yán)格控制溫濕度及注意人6.2.2.2地面。通常采用二溴海因消毒劑500mg/L作用30min;致病性芽孢菌污染可用1000mg/L作用60min;對結(jié)核菌污染的表面，可用5000mg/L過氧乙酸、1000mg/L含氯或含溴消毒劑溶液擦洗，作用30min;對烈性傳染病病原體污染的表面，如霍亂、炭疽等可用有效溴或有效氯1000mg/L,分別作用30min(霍亂)和60min(炭疽)。6.2.2.3墻面。可采用化學(xué)消毒劑噴霧或擦洗消毒。對細(xì)菌繁殖體、肝炎病毒、芽孢污染者，分別用含二溴海因或二氧化氯250mg/L～500mg/L、1000mg/L～2000mg/L的消毒劑溶液作噴霧和擦洗處理。噴霧量根據(jù)墻面結(jié)構(gòu)不同，以濕潤為度，用量50ml/m2~200ml/m2,高度至2.0m～2.5m。6.2.2.4實驗器材銳利的刀剪受污染后不宜燒灼滅菌，可煮沸10min～30min或用2%堿性/中性戊二醛溶液浸應(yīng)立即投入洗滌劑或肥皂液中，再煮沸15min～30min,反復(fù)洗刷瀝干，30℃~60℃烘干，或用1000mg/L有效氯/溴的消毒液浸泡30min。熱塑料器材及橡膠制品可用洗滌劑或肥皂液煮沸15min～30min,洗凈后121℃,102.9kPa下滅菌20min～30min;不耐熱的塑料制品可用5000mg/L過氧乙酸或有效氯為1000mg/L7的消毒劑中浸泡30min~60min,一般血清學(xué)反應(yīng)使用過的塑料板可直接浸入1%鹽酸溶液中，作用2h以上；工作衣等紡織品放污物袋內(nèi)用70℃以上熱水加洗滌劑洗滌，如有明顯污染時，可隨時用有效氯或有效溴500mg/L的消毒液浸泡30min~60min,或壓力蒸汽121℃15min～30min滅菌。c)儀器設(shè)備。顯微鏡、分光光度計、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、細(xì)胞計數(shù)器、氣相色譜儀、冰箱、培養(yǎng)箱等不宜加熱、不能用消毒劑浸泡的儀器，局部輕度污染時，可用75%乙醇或異丙醇、2%堿性或中性戊二醛溶液、0.5%醋酸氯己定-乙醇溶液或消毒濕巾重復(fù)擦拭2次消毒；如污染嚴(yán)重，可將所需消毒儀器集中在密閉房內(nèi)，使用5000mg/L～10000mg/L過氧乙酸15mL/m3~30mL/m3噴霧，作用60min。d)紙張類。污染記錄單送出前可用高強(qiáng)度紫外線消毒器距檢驗單面不高于3.0cm緩慢移動，照射3s~5s,兩面照射；也可用專用甲醛消毒器或環(huán)氧乙烷消毒柜薰蒸消毒；無應(yīng)用價值的可焚燒處理。6.3.1預(yù)防性消毒。實驗室工作完畢后應(yīng)立即進(jìn)行手部清洗和消毒。盡量采用自動洗手設(shè)備，按照七步洗手法，使用瓶裝液體皂或洗手液洗手。6.3.2終末消毒。懷疑被病原微生物污染時，可用手消毒劑涂擦、浸泡、噴灑雙手，如選用75%乙醇、0.3%～0.5%碘伏或60%異丙醇作用1min～3min、酸性氧化電位水原液作用3min~5min、2000mg/L～5000mg/L季銨鹽類手消毒液作用5min～10min。6.3.3手衛(wèi)生的管理與基本要求可按照WS/T313的要求執(zhí)行。6.3.4手消毒劑的選擇和使用按照GB27950的要求執(zhí)行。6.4個人防護(hù)用品6.4.1一次性用品，包括防護(hù)帽、口罩、手套、防護(hù)服等防護(hù)用品使用后應(yīng)放入醫(yī)療廢棄物袋，參照6.2.2.1對袋表面消毒后，高壓滅菌處理。6.4.2擬回收再用的不耐熱用品可用0.5%過氧乙酸噴灑、1000mg/L有效氯或有效溴的消毒液浸泡60min,或用5000mg/L～10000mg/L過氧乙酸15mL/m3~30mL/m3噴霧，作用60min,然后清水洗滌瀝干；擬回收再用的耐熱用品，按要求打包、表面消毒后，121℃15min～30min(根據(jù)微生物特性而定)高壓滅菌處理。6.4.3橡膠手套等受污染后可用121℃15min壓力蒸汽滅菌處理后，0.5%～1.0%皂液或洗滌劑溶液清洗，然后清水瀝干后可用。6.4.4可重復(fù)使用的工作服、帽子、鞋襪等按其性質(zhì)參照6.2.2.4處理。6.4.5正壓防護(hù)服和正壓生物防護(hù)面罩。可使用有效氯或有效溴500mg/L～1000mg/L消毒劑淋浴消毒后放入過氧化氫等離子體滅菌柜內(nèi)熏蒸滅菌，清水洗凈瀝干存放待用；呼吸器可使用75%乙醇擦拭、噴灑或浸泡30min以上或參照產(chǎn)品說明書進(jìn)行消毒處理。6.5生物安全柜6.5.1預(yù)防性消毒?？蓞⒄?.2.1.1對臺面和內(nèi)壁擦拭消毒，也可開啟紫外燈照射消毒30min。6.5.2終末消毒。當(dāng)發(fā)生污染事故、生物安全柜移動或更換過濾器時，應(yīng)進(jìn)行生物