演講人：日期:咽拭子的采集流程CATALOGUE目錄01采集前準(zhǔn)備02患者指導(dǎo)03咽部定位04標(biāo)本采集操作05標(biāo)本后處理06質(zhì)量控制01采集前準(zhǔn)備所需材料清點(diǎn)無(wú)菌咽拭子套裝包含無(wú)菌拭子桿（通常為聚酯纖維或尼龍材質(zhì)）、密封運(yùn)輸管（內(nèi)含病毒保存液或細(xì)菌培養(yǎng)基），需檢查包裝完整性及有效期。02040301標(biāo)識(shí)與記錄工具預(yù)先打印的樣本標(biāo)簽（含患者信息、條形碼）、防水記號(hào)筆、樣本登記表或電子采集系統(tǒng)，以避免信息混淆。個(gè)人防護(hù)裝備包括一次性醫(yī)用口罩、防護(hù)面屏/護(hù)目鏡、無(wú)菌手套、隔離衣或防護(hù)服，確保符合生物安全二級(jí)（BSL-2）標(biāo)準(zhǔn)。醫(yī)療廢棄物容器專用銳器盒和生物危害垃圾袋，用于規(guī)范處理使用后的防護(hù)用品及采樣工具。環(huán)境消毒要求采樣區(qū)域選擇采樣臺(tái)、門把手等高頻接觸區(qū)域需使用含氯消毒劑（如500mg/L有效氯）或75%乙醇擦拭，作用時(shí)間不少于5分鐘。物體表面消毒空氣消毒措施終末消毒流程應(yīng)在通風(fēng)良好、相對(duì)獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，避免人員流動(dòng)，優(yōu)先選擇負(fù)壓采樣間或臨時(shí)搭建的隔離空間。采樣前后使用紫外線燈照射30分鐘，或采用動(dòng)態(tài)空氣消毒機(jī)持續(xù)運(yùn)行，降低氣溶膠傳播風(fēng)險(xiǎn)。每日采樣結(jié)束后，需對(duì)地面、墻壁進(jìn)行噴灑消毒，并規(guī)范處理醫(yī)療廢棄物，確保環(huán)境無(wú)污染殘留。操作者防護(hù)措施標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)穿戴嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生后，依次佩戴醫(yī)用防護(hù)口罩（N95/KN95）、帽子、護(hù)目鏡、隔離衣及雙層手套，確保無(wú)皮膚暴露。采樣過(guò)程規(guī)范操作時(shí)與患者保持1米以上距離，避免正面相對(duì)，指導(dǎo)患者摘下口罩僅暴露口腔，采樣后立即密閉運(yùn)輸管并消毒外表面。防護(hù)裝備脫卸按從污染到清潔順序脫卸，先摘外層手套→手消毒→脫隔離衣→摘護(hù)目鏡→摘內(nèi)層手套→手消毒→摘口罩帽子，全程避免接觸污染面。職業(yè)暴露應(yīng)急若發(fā)生樣本濺灑或手套破損，立即用0.5%碘伏沖洗暴露部位15分鐘，并上報(bào)感染管理部門進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與后續(xù)監(jiān)測(cè)。02患者指導(dǎo)體位擺放說(shuō)明頸部與肩部放松指導(dǎo)患者放松頸部及肩部肌肉，避免因緊張導(dǎo)致肌肉僵硬，影響拭子進(jìn)入咽部的深度和角度。避免突然移動(dòng)明確告知患者在采樣過(guò)程中保持靜止，防止因突然移動(dòng)造成咽部黏膜損傷或采樣失敗。坐位或半臥位選擇患者需保持坐位或半臥位，頭部輕微后仰，使咽峽部充分暴露，便于采樣人員操作。若患者為兒童或行動(dòng)不便者，需由家屬輔助固定體位。030201口腔張開(kāi)指導(dǎo)最大程度張口要求患者盡量張大口腔，呈“啊”字型發(fā)音狀態(tài)，使軟腭上提、舌根下壓，充分暴露咽后壁及扁桃體區(qū)域。舌位控制技巧建議患者將舌自然平貼于口腔底部，或使用壓舌板輕壓舌前2/3處，避免舌體遮擋采樣區(qū)域。持續(xù)時(shí)間要求需維持張口動(dòng)作5-10秒，確保采樣人員有足夠時(shí)間完成拭子擦拭動(dòng)作，避免重復(fù)操作。鼻呼吸指導(dǎo)在拭子接觸咽部瞬間，提示患者短暫屏氣1-2秒，減少咽反射（惡心反應(yīng)）的發(fā)生概率。短暫屏氣時(shí)機(jī)咳嗽抑制方法對(duì)于敏感患者，可指導(dǎo)其在采樣前做吞咽動(dòng)作或含少量冰水，降低咽部敏感性，減少咳嗽干擾。采樣前訓(xùn)練患者通過(guò)鼻腔平穩(wěn)呼吸，避免因口腔呼吸導(dǎo)致咽部干燥或分泌物減少，影響樣本質(zhì)量。呼吸配合方法03咽部定位解剖標(biāo)識(shí)識(shí)別懸雍垂定位咽后壁識(shí)別腭弓與扁桃體窩懸雍垂（俗稱“小舌頭”）是咽部中線位置的軟組織垂?fàn)罱Y(jié)構(gòu)，作為采集時(shí)的重要視覺(jué)標(biāo)記，需在患者張口發(fā)“啊”音時(shí)清晰暴露。兩側(cè)腭弓（舌腭弓與咽腭弓）及扁桃體窩是常見(jiàn)病原體定植區(qū)域，需通過(guò)壓舌板輕壓舌根后觀察其充血、腫脹或分泌物情況。咽后壁黏膜光滑且血管豐富，需避免過(guò)度刺激導(dǎo)致出血，同時(shí)注意是否有偽膜或潰瘍等病理改變。拭子插入深度標(biāo)準(zhǔn)插入范圍拭子頭端應(yīng)進(jìn)入口腔至咽后壁或扁桃體區(qū)域，深度約6-8厘米（成人），兒童需根據(jù)年齡調(diào)整至4-6厘米，避免觸及會(huì)厭或喉部引發(fā)嘔吐反射。深度驗(yàn)證可通過(guò)患者出現(xiàn)輕微惡心反應(yīng)（咽反射）判斷是否到達(dá)目標(biāo)區(qū)域，但需避免過(guò)度深入引發(fā)劇烈嘔吐。角度控制拭子應(yīng)與舌面平行緩慢推進(jìn)，與咽部呈30-45度角，避免垂直插入導(dǎo)致黏膜損傷或采樣無(wú)效。目標(biāo)區(qū)域選取化膿性感染采樣若存在扁桃體化膿，需重點(diǎn)在膿苔或滲出物表面旋轉(zhuǎn)拭子3-5次，確保采集足量病原體。彌漫性炎癥采樣對(duì)急性咽炎患者，應(yīng)擦拭咽后壁及雙側(cè)腭弓黏膜，覆蓋炎癥反應(yīng)最顯著的區(qū)域。無(wú)癥狀攜帶者篩查如新冠檢測(cè)，需在咽后壁及扁桃體隱窩處反復(fù)涂抹，提高病毒載量捕獲率。04標(biāo)本采集操作拭子旋轉(zhuǎn)技巧多角度旋轉(zhuǎn)擦拭控制旋轉(zhuǎn)力度采集時(shí)需將拭子頭部在咽后壁及扁桃體隱窩處呈45度角旋轉(zhuǎn)3-5圈，確保充分接觸黏膜分泌物，避免遺漏病原體富集區(qū)域。避免單一方向摩擦單向擦拭可能導(dǎo)致樣本量不足或分布不均，旋轉(zhuǎn)動(dòng)作可增加細(xì)胞脫落率，提高檢測(cè)靈敏度。過(guò)度用力可能損傷黏膜導(dǎo)致出血，影響檢測(cè)結(jié)果；力度不足則可能無(wú)法獲取足量上皮細(xì)胞，需保持適度壓力。接觸時(shí)間控制3-5秒最佳窗口期研究表明，拭子與黏膜接觸時(shí)間短于3秒可能導(dǎo)致采樣不充分，超過(guò)5秒則易引發(fā)患者惡心反射，需精準(zhǔn)把握時(shí)間。分段計(jì)時(shí)法低溫環(huán)境下黏膜收縮，需延長(zhǎng)1-2秒接觸時(shí)間以確保樣本吸附量，夏季可適當(dāng)縮短。對(duì)于配合度差的患者，可分兩次采集（每次2秒），間隔10秒以緩解不適，累計(jì)接觸時(shí)間仍需達(dá)標(biāo)。環(huán)境溫度影響輕柔提取手法采樣后應(yīng)沿咽腔中線垂直緩慢取出拭子，避免觸碰舌面或頰黏膜造成二次污染。在退出過(guò)程中于懸雍垂部位稍作停頓，利用毛細(xì)作用吸附殘留分泌物，提升樣本濃度。提取時(shí)拭子桿部需保持15cm以上懸空距離，防止手套或操作者衣物接觸樣本頭端。垂直退出路徑斷點(diǎn)式停頓技術(shù)防污染操作規(guī)范05標(biāo)本后處理拭子放置容器采集后的咽拭子需立即放入無(wú)菌、防漏的專用轉(zhuǎn)運(yùn)容器中，容器內(nèi)通常含有病毒保存液或細(xì)菌培養(yǎng)基，以確保樣本活性并防止交叉污染。無(wú)菌密封容器容器需具備抗震、防漏特性，避免運(yùn)輸過(guò)程中液體滲漏導(dǎo)致樣本失效或生物安全隱患，同時(shí)容器材質(zhì)應(yīng)符合生物安全二級(jí)（BSL-2）標(biāo)準(zhǔn)。防震防漏設(shè)計(jì)容器容量需與拭子長(zhǎng)度匹配，確保拭子頭部完全浸入保存液，避免干燥或暴露影響病原體檢出率。容量適配性患者基本信息需注明疑似診斷（如“急性咽炎”）、檢測(cè)項(xiàng)目（如“細(xì)菌培養(yǎng)”或“核酸檢測(cè)”）及特殊要求（如“厭氧菌培養(yǎng)”），便于實(shí)驗(yàn)室針對(duì)性處理。臨床診斷與目的采集者信息記錄采集人員姓名及科室，以便后續(xù)溯源或復(fù)核，同時(shí)標(biāo)注樣本優(yōu)先級(jí)（如“緊急”或“常規(guī)”）。標(biāo)簽需清晰標(biāo)注患者姓名、性別、年齡、病歷號(hào)及采集日期時(shí)間，確保樣本與患者信息一一對(duì)應(yīng)，避免混淆。標(biāo)簽信息記錄細(xì)菌培養(yǎng)樣本需在4℃冷藏運(yùn)輸，避免常溫下雜菌過(guò)度繁殖；病毒檢測(cè)樣本需在-20℃或-70℃冷凍保存，以維持核酸穩(wěn)定性。運(yùn)輸保存條件溫度控制樣本需在采集后2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，若延遲需使用專用保存液（如UTM病毒運(yùn)輸培養(yǎng)基）并確保低溫鏈不斷裂。時(shí)效性要求運(yùn)輸需采用三層包裝系統(tǒng)（樣本容器+吸水材料+外包裝），符合UN3373生物安全運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)，外箱標(biāo)注“感染性物質(zhì)”警示標(biāo)識(shí)。生物安全包裝06質(zhì)量控制常見(jiàn)錯(cuò)誤避免采樣深度不足咽拭子未觸及咽后壁或扁桃體隱窩，導(dǎo)致樣本中病原體載量過(guò)低，可能造成假陰性結(jié)果。需將拭子緊貼黏膜表面旋轉(zhuǎn)擦拭至少5秒，確保采集到脫落細(xì)胞及分泌物。拭子材質(zhì)選擇錯(cuò)誤使用棉簽等纖維易脫落材質(zhì)會(huì)干擾PCR檢測(cè)。必須采用聚酯纖維或尼龍植絨拭子，確保樣本釋放效率及核酸提取純度。采樣時(shí)機(jī)不當(dāng)患者進(jìn)食、飲水或刷牙后1小時(shí)內(nèi)采樣可能稀釋病原體濃度。建議在晨起空腹或餐后2小時(shí)進(jìn)行，以提高檢測(cè)靈敏度。污染預(yù)防措施環(huán)境消毒管理采樣臺(tái)面需用含氯消毒劑擦拭，紫外線空氣消毒每日≥2次。樣本轉(zhuǎn)運(yùn)箱應(yīng)配備生物安全密封袋及冰袋，保持4℃低溫防止細(xì)菌增殖。操作者防護(hù)規(guī)范采樣者需佩戴N95口罩、面屏及無(wú)菌手套，避免飛沫或氣溶膠污染樣本。每例采樣后必須更換手套并使用速干手消毒劑進(jìn)行手衛(wèi)生。交叉污染控制拭子管開(kāi)封后限用1次，禁止重復(fù)蘸取。樣本編號(hào)需雙重核對(duì)，避免標(biāo)簽混淆導(dǎo)致結(jié)果誤判。內(nèi)參基因檢測(cè)通過(guò)β-肌動(dòng)蛋白或RNaseP基因擴(kuò)增判斷樣本中是否含足量人類細(xì)胞，排除唾液稀釋或采樣失敗情