2025人民醫(yī)院「流式細(xì)胞術(shù)」在血液病中應(yīng)用資格認(rèn)證一、單選題（共20題，每題1分）1.流式細(xì)胞術(shù)在血液病診斷中，主要用于檢測哪種細(xì)胞群的異質(zhì)性？A.紅細(xì)胞B.淋巴細(xì)胞C.嗜酸性粒細(xì)胞D.血小板2.以下哪種熒光染料常用于標(biāo)記CD19抗原，以輔助診斷B淋巴細(xì)胞白血??？A.PE-Cy7B.FITCC.APCD.PerCP3.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選（FACS）時(shí)，常用的分選參數(shù)是？A.DNA含量B.表面標(biāo)志物C.細(xì)胞大小和顆粒度D.細(xì)胞內(nèi)酶活性4.急性髓系白血?。ˋML）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注哪種髓系標(biāo)志物？A.CD3B.CD20C.CD13或CD33D.CD195.在混合細(xì)胞系（如T細(xì)胞和髓系細(xì)胞混合）的血液病診斷中，哪種方法可提高檢測靈敏度？A.增加樣本量B.使用多色熒光標(biāo)記C.提高激光功率D.延長孵育時(shí)間6.流式細(xì)胞術(shù)檢測白血病細(xì)胞時(shí)，常用的同型對照是為了排除哪種干擾？A.淋巴細(xì)胞污染B.非特異性熒光C.標(biāo)記抗體失效D.樣本溶血7.以下哪種指標(biāo)可用于評估急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）的免疫分型？A.堿性磷酸酶（ALP）染色B.細(xì)胞周期分布（DNA直方圖）C.糖原染色（PAS染色）D.過氧化物酶（POX）染色8.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行骨髓細(xì)胞分選時(shí)，常用的分選策略是？A.根據(jù)細(xì)胞大小分選B.根據(jù)熒光強(qiáng)度分選C.根據(jù)細(xì)胞內(nèi)顆粒度分選D.以上都是9.在慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注哪種標(biāo)志物？A.CD5和CD23B.CD19和CD20C.CD13和CD33D.CD34和CD11710.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡時(shí)，常用的標(biāo)志物是？A.CD95（Fas）B.CD34C.CD13D.CD1911.在血液病微小殘留?。∕RD）檢測中，流式細(xì)胞術(shù)的檢測靈敏度通常達(dá)到？A.10^-4B.10^-6C.10^-3D.10^-512.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測時(shí)，常用的封閉劑是？A.肝素鈉B.乙二胺四乙酸（EDTA）C.聚山梨酯-80（吐溫-80）D.蛋清白蛋白13.在急性早幼粒細(xì)胞白血?。∕3）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注哪種標(biāo)志物？A.CD34B.PML-RARA融合基因C.CD19D.CD314.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，常用的分選純度要求是？A.80%B.95%C.50%D.99%15.在血液病免疫分型中，T細(xì)胞亞群的分型通常包括哪些標(biāo)志物？A.CD3、CD4、CD8B.CD19、CD20、CD22C.CD13、CD33、CD34D.CD16、CD56、CD1916.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)抗原時(shí)，常用的處理方法是？A.直接染色B.非特異性封閉C.磷酸緩沖鹽溶液（PBS）洗滌D.蛋白酶K處理17.在混合細(xì)胞系（如白血病與正常細(xì)胞混合）的檢測中，流式細(xì)胞術(shù)的補(bǔ)償設(shè)置主要解決？A.熒光串色B.標(biāo)記抗體失效C.樣本溶血D.細(xì)胞崩解18.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞周期分析時(shí)，常用的染料是？A.PI（碘化丙啶）B.FITCC.PED.APC19.在血液病骨髓細(xì)胞檢測中，常使用哪種方法排除技術(shù)污染？A.同型對照設(shè)置B.增加樣本量C.提高激光功率D.延長孵育時(shí)間20.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物時(shí)，常用的孵育時(shí)間是？A.15分鐘B.30分鐘C.60分鐘D.120分鐘二、多選題（共10題，每題2分）1.流式細(xì)胞術(shù)在血液病診斷中的優(yōu)勢包括哪些？A.高通量檢測B.定量分析C.細(xì)胞分選D.快速出結(jié)果2.在急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）的免疫分型中，常關(guān)注的標(biāo)志物包括？A.CD19B.CD20C.CD10D.CD223.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行骨髓細(xì)胞分選時(shí)，常用的分選參數(shù)包括？A.細(xì)胞大小B.熒光強(qiáng)度C.細(xì)胞內(nèi)顆粒度D.細(xì)胞表面標(biāo)志物4.在慢性髓系白血病（CML）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注的標(biāo)志物包括？A.CD34B.CD117C.CD13D.BCR-ABL融合基因5.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡時(shí)，常用的標(biāo)志物包括？A.CD95（Fas）B.AnnexinVC.PI（碘化丙啶）D.caspase-36.在血液病微小殘留病（MRD）檢測中，常用的方法包括？A.多色流式細(xì)胞術(shù)B.實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）C.染色體核型分析D.流式細(xì)胞術(shù)分選7.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測時(shí)，常用的熒光染料包括？A.FITCB.PEC.APCD.PerCP8.在急性髓系白血病（AML）的免疫分型中，常關(guān)注的標(biāo)志物包括？A.CD13B.CD33C.CD34D.MPO（髓過氧化物酶）9.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，常用的質(zhì)量控制指標(biāo)包括？A.分選純度B.分選回收率C.分選細(xì)胞活力D.分選細(xì)胞數(shù)量10.在血液病免疫分型中，B細(xì)胞亞群的分型通常包括哪些標(biāo)志物？A.CD19B.CD20C.CD22D.CD10三、判斷題（共10題，每題1分）1.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物時(shí)，直接染色法比間接染色法更靈敏。（×）2.在慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，CD5陽性細(xì)胞比例越高，預(yù)后越好。（×）3.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，分選純度越高，回收率越高。（×）4.急性早幼粒細(xì)胞白血病（M3）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注CD34陽性細(xì)胞比例。（×）5.在血液病骨髓細(xì)胞檢測中，同型對照主要用于排除非特異性熒光干擾。（√）6.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡時(shí)，AnnexinV陽性細(xì)胞說明細(xì)胞已發(fā)生膜脂質(zhì)過氧化。（√）7.在慢性髓系白血?。–ML）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，CD34陽性細(xì)胞比例通常低于急性髓系白血?。ˋML）。（√）8.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞周期分析時(shí)，PI染料主要用于評估細(xì)胞DNA含量。（√）9.在血液病微小殘留?。∕RD）檢測中，流式細(xì)胞術(shù)的檢測靈敏度通常低于實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）。（×）10.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測時(shí)，封閉劑主要用于封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。（√）四、簡答題（共5題，每題4分）1.簡述流式細(xì)胞術(shù)在急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）診斷中的主要應(yīng)用。2.解釋流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選（FACS）的原理及常用參數(shù)。3.描述流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡的常用方法及標(biāo)志物。4.說明流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行骨髓細(xì)胞分選時(shí)的質(zhì)量控制指標(biāo)。5.比較流式細(xì)胞術(shù)與實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）在微小殘留病（MRD）檢測中的優(yōu)缺點(diǎn)。五、論述題（共2題，每題10分）1.詳細(xì)闡述流式細(xì)胞術(shù)在血液病免疫分型中的原理、常用標(biāo)志物及臨床意義。2.結(jié)合臨床實(shí)例，說明流式細(xì)胞術(shù)在血液病微小殘留?。∕RD）檢測中的應(yīng)用價(jià)值及注意事項(xiàng)。答案與解析一、單選題答案與解析1.B解析：流式細(xì)胞術(shù)在血液病診斷中，主要檢測淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞的異質(zhì)性，其中淋巴細(xì)胞是重點(diǎn)檢測對象。2.A解析：PE-Cy7是常用的熒光染料，常用于標(biāo)記CD19抗原，以輔助診斷B淋巴細(xì)胞白血病。3.C解析：流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選（FACS）時(shí)，主要根據(jù)細(xì)胞大小和顆粒度進(jìn)行分選，以提高目標(biāo)細(xì)胞純度。4.C解析：急性髓系白血?。ˋML）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注CD13或CD33等髓系標(biāo)志物。5.B解析：使用多色熒光標(biāo)記可提高檢測靈敏度，減少假陰性結(jié)果。6.B解析：同型對照是為了排除非特異性熒光干擾，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。7.B解析：細(xì)胞周期分布（DNA直方圖）可用于評估急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）的免疫分型。8.D解析：流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行骨髓細(xì)胞分選時(shí)，可根據(jù)細(xì)胞大小、熒光強(qiáng)度、顆粒度等參數(shù)進(jìn)行分選。9.A解析：慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注CD5和CD23陽性細(xì)胞比例。10.A解析：CD95（Fas）是細(xì)胞凋亡的主要標(biāo)志物之一。11.B解析：流式細(xì)胞術(shù)檢測微小殘留?。∕RD）的靈敏度通常達(dá)到10^-6水平。12.D解析：聚山梨酯-80（吐溫-80）是常用的封閉劑，可減少非特異性結(jié)合。13.B解析：急性早幼粒細(xì)胞白血?。∕3）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注PML-RARA融合基因。14.B解析：流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，分選純度通常要求達(dá)到95%。15.A解析：T細(xì)胞亞群的分型通常包括CD3、CD4、CD8等標(biāo)志物。16.D解析：細(xì)胞內(nèi)抗原檢測常需蛋白酶K處理，以暴露細(xì)胞內(nèi)抗原。17.A解析：流式細(xì)胞術(shù)的補(bǔ)償設(shè)置主要解決熒光串色問題。18.A解析：PI（碘化丙啶）是常用的細(xì)胞周期分析染料。19.A解析：同型對照設(shè)置可排除技術(shù)污染，確保結(jié)果可靠性。20.C解析：流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物時(shí)，常用的孵育時(shí)間是60分鐘。二、多選題答案與解析1.A、B、C解析：流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)勢包括高通量檢測、定量分析和細(xì)胞分選，但出結(jié)果速度相對較慢。2.A、B、C解析：急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）的免疫分型常關(guān)注CD19、CD20和CD10等標(biāo)志物。3.A、B、C、D解析：流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行骨髓細(xì)胞分選時(shí)，可根據(jù)細(xì)胞大小、熒光強(qiáng)度、顆粒度和表面標(biāo)志物等參數(shù)進(jìn)行分選。4.A、B、C解析：慢性髓系白血?。–ML）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注CD34、CD117和CD13等標(biāo)志物。5.A、B、C解析：流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡時(shí)，常用CD95（Fas）、AnnexinV和PI等標(biāo)志物。6.A、B解析：流式細(xì)胞術(shù)和多色流式細(xì)胞術(shù)常用于MRD檢測，而qPCR檢測靈敏度更高。7.A、B、C、D解析：流式細(xì)胞術(shù)常用的熒光染料包括FITC、PE、APC和PerCP等。8.A、B、C、D解析：急性髓系白血?。ˋML）的免疫分型常關(guān)注CD13、CD33、CD34和MPO等標(biāo)志物。9.A、B、C、D解析：流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，需關(guān)注分選純度、回收率、細(xì)胞活力和數(shù)量等指標(biāo)。10.A、B、C、D解析：B細(xì)胞亞群的分型通常包括CD19、CD20、CD22和CD10等標(biāo)志物。三、判斷題答案與解析1.×解析：間接染色法比直接染色法更靈敏，但直接染色法操作更簡便。2.×解析：CD5陽性細(xì)胞比例越高，通常預(yù)后越差。3.×解析：分選純度越高，回收率可能降低。4.×解析：急性早幼粒細(xì)胞白血病（M3）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，常關(guān)注CD34陰性細(xì)胞比例。5.√解析：同型對照主要用于排除非特異性熒光干擾。6.√解析：AnnexinV陽性細(xì)胞說明細(xì)胞已發(fā)生膜脂質(zhì)過氧化，提示細(xì)胞凋亡。7.√解析：慢性髓系白血?。–ML）的流式細(xì)胞術(shù)診斷中，CD34陽性細(xì)胞比例通常低于急性髓系白血病（AML）。8.√解析：PI染料主要用于評估細(xì)胞DNA含量，以進(jìn)行細(xì)胞周期分析。9.×解析：流式細(xì)胞術(shù)檢測微小殘留病（MRD）的靈敏度通常高于實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）。10.√解析：封閉劑主要用于封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，提高檢測特異性。四、簡答題答案與解析1.流式細(xì)胞術(shù)在急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）診斷中的主要應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)通過多色熒光標(biāo)記檢測ALL細(xì)胞的表面和細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志物，如CD19、CD20、CD10、CD22、CD5、CD7等，以確定細(xì)胞類型和分化階段。此外，還可進(jìn)行細(xì)胞周期分析、細(xì)胞凋亡檢測和微小殘留病（MRD）監(jiān)測，輔助診斷和預(yù)后評估。2.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選（FACS）的原理及常用參數(shù)原理：流式細(xì)胞術(shù)通過激光照射細(xì)胞，檢測其大小、顆粒度和熒光強(qiáng)度，根據(jù)設(shè)定的閾值進(jìn)行分選，將目標(biāo)細(xì)胞分離出來。常用參數(shù)包括細(xì)胞大小（FSC）、顆粒度（SSC）和熒光強(qiáng)度（FL1-FL7）。3.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡的常用方法及標(biāo)志物常用方法包括：①AnnexinV-FITC/PI雙染法；②細(xì)胞內(nèi)caspase-3活性檢測；③細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化檢測（如CD95-FITC）。常用標(biāo)志物包括CD95（Fas）、AnnexinV、PI等。4.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行骨髓細(xì)胞分選時(shí)的質(zhì)量控制指標(biāo)質(zhì)量控制指標(biāo)包括：①分選純度（≥95%）；②分選回收率（≥70%）；③細(xì)胞活力（≥95%）；④分選細(xì)胞數(shù)量（≥1×10^6）。5.流式細(xì)胞術(shù)與實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）在微小殘留?。∕RD）檢測中的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：①流式細(xì)胞術(shù)可檢測多種標(biāo)志物，靈敏度高；②qPCR檢測靈敏度高，但需特定引物設(shè)計(jì)。缺點(diǎn)：①流式細(xì)胞術(shù)易受技術(shù)干擾；②qPCR需標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)。五、論述題答案與解析1.流式細(xì)胞術(shù)在血液病免疫分型中的原理、常用標(biāo)志物及臨床意義原理：流式細(xì)胞術(shù)通過多色熒光標(biāo)記檢測細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志物，如CD3、CD19、CD20、CD5、CD10等，以確定細(xì)胞類型和分化階段。常用標(biāo)志物包括：①淋巴細(xì)胞標(biāo)志物（CD3、CD4、CD8）；②B細(xì)胞標(biāo)志物（CD19、CD20、CD22）；③髓系細(xì)胞標(biāo)志物（C