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文檔簡介
《魚類種質(zhì)檢驗第14部分:DNA含量的測定》
編制(修訂)說明
一、工作簡況,包括任務來源、制定背景、起草過程等;
1.任務來源
為落實《國家標準化管理委員會關于開展推薦性國家標準復審工作的通
知》(國標委發(fā)〔2022〕10號)要求,提高標準復審質(zhì)量,2022年3月29
日,全國水產(chǎn)標準化技術委員會會同淡水養(yǎng)殖和海水養(yǎng)殖分技術委員會以視
頻形式組織召開了水產(chǎn)養(yǎng)殖術語及種質(zhì)檢驗方法標準研討會。來自科研、教
學、檢驗、標準化管理以及標準起草單位等相關方面的專家對水產(chǎn)養(yǎng)殖術語
及種質(zhì)檢驗方法系列水產(chǎn)國家標準的適用性、時效性、規(guī)范性、協(xié)調(diào)性以及
實施效果等進行了認真復審、研討,決定對《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》(GB/T18654)
等15個標準進行修訂。
2.制定背景
水產(chǎn)種質(zhì)資源是農(nóng)業(yè)種質(zhì)資源的重要組成部分,是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、水產(chǎn)育
種和漁業(yè)科技活動的遺傳材料和物質(zhì)基礎。自上世紀80年代開始,我國較系
統(tǒng)地研究了主要水產(chǎn)養(yǎng)殖對象的種質(zhì)參數(shù),歷經(jīng)“六五”、“七五”、“八五”和“九
五”科技攻關的努力,取得了很大進展和成果。在此基礎上,已制定與發(fā)布了
多項水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的種質(zhì)標準,為開展養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢測提供了科學依據(jù)。
同時,制定了《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準,并于2008年頒布
實施,這些系列標準為養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)檢測提供了操作性強的統(tǒng)一的科學方
法。該系列標準在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)、教學、科研及貿(mào)易等方面得以廣泛應用,
1
也適用于物種資源調(diào)查與保護、水產(chǎn)原良種場建設與種質(zhì)保存,以及水產(chǎn)新
品種的研發(fā)與審定等活動。該系列標準發(fā)布實施已十余年,在標準實際應用
中,部分內(nèi)容已不能滿足檢測生產(chǎn)的需要,需做適當?shù)恼{(diào)整與修訂,以更好
地服務于漁業(yè)科技發(fā)展。
3.起草過程
2022年3月29日全國水產(chǎn)標準化技術委員會組織相關技術專家,對原
《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準進行復審,復審結果決定對原系
列標準內(nèi)容進行修訂。
2022年4月在淡水養(yǎng)殖分技術委員會協(xié)調(diào)下,上海海洋大學承擔了該
系列標準中《第4部分:年齡與生長的測定》《第5部分:食性分析》《第6
部分:繁殖性能的測定》《第7部分:生態(tài)特性分析》《第13部分:同工酶
電泳》《第14部分:DNA含量的測定》6項標準的編制(修訂)任務,經(jīng)與
長江水產(chǎn)研究所、東海水產(chǎn)研究所進行溝通交流,并確定了各方參與人員與
分工任務。
2022年5月向淡水養(yǎng)殖分技術委員會報送《國家標準立項建議書》;
承擔單位開始進行調(diào)研,收集資料,著手《第14部分:DNA含量的測定》
標準的修訂任務。
2022年9月完成《第14部分:DNA含量的測定》標準修訂稿和標準
編制(修訂)說明。
4.協(xié)作單位
中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所和上海海洋大學是原《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)
檢驗》GB/T18654系列標準的起草編制單位。為更廣泛地征求修訂意見,本
2
次修訂邀請中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所共同參與。在本次標準修訂
中,經(jīng)各方協(xié)商,由上海海洋大學負責其中6項修訂任務,中國水產(chǎn)科學研
究院長江水產(chǎn)研究所和中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所作為協(xié)作單位。
上海海洋大學負責項目任務書的申報,制定具體的實施方案,進行調(diào)研,
收集資料,起草標準修訂草案和編制說明,并負責意見的匯總處理。中國水
產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所、中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所參與方
案的制定,參與標準文本修訂草案和編制說明的起草。
5.標準主要起草人及其所作的工作
趙金良(上海海洋大學,原標準起草人):項目負責人,制定方案,進
行調(diào)研,收集資料,起草標準草案和編制說明。
唐首杰(上海海洋大學):主要承擔者,參與標準修訂起草、編制說明
的起草。
趙巖(上海海洋大學):主要承擔者,進行調(diào)研,收集資料,參與標
準修訂起草、編制說明的起草。
劉永濤(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
周劍光(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
張林(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
張濤(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
3
周瑞瓊(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
衛(wèi)宇星(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
來琦芳(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
么宗利(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編
制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。
二、國家標準編制原則、主要內(nèi)容及其確定依據(jù),修訂國家標準時,還包括
修訂前后技術內(nèi)容的對比
1標準編制原則
本標準修訂過程按照工作計劃實施,并遵循“科學性、合理性、先進性、
實用性、普遍性”原則。對標準從全面性、簡便性、可操作性等方面進行了綜
合考慮,確保標準發(fā)布實施后能夠得到有效應用。
本標準修訂參照GB/T1.1-2020標準化工作導則第1部分:標準化文件
的結構和起草規(guī)則要求。
2主要內(nèi)容及其確定依據(jù)
本次修訂中,將原標準名稱《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》更改為《魚類種質(zhì)檢
驗》,擴大了標準的適用范圍,有利于水產(chǎn)種質(zhì)檢測技術的應用和推廣。
原《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》由15個部分組成。經(jīng)專家討論后,合并了其中
2項標準,刪除了1項標準,對其他部分要求進行技術內(nèi)容更新。修訂后,
GB/T18654擬由13個部分組成。
4
——第1部分:檢驗規(guī)則。
——第2部分:抽樣方法。
——第3部分:性狀測定。
——第4部分:年齡與生長的測定。
——第5部分:食性分析。
——第6部分:繁殖性能的測定。
——第7部分:生態(tài)特性分析。
——第8部分:耗氧率與臨界窒息點的測定。
——第9部分:含肉率測定。
——第10部分:肌肉營養(yǎng)成分的測定。
——第12部分:染色體組型分析。
——第13部分:同工酶電泳分析。
——第14部分:DNA含量的測定。
《第14部分:DNA含量的測定》規(guī)定了魚類DNA含量測定的通用方法。
描述了魚類紅細胞DNA含量測定的試劑與材料、儀器和設備、抽樣方法和分
析步驟。適用于魚類種質(zhì)鑒定與檢測。
本次修訂中,主要技術變化如下:
(1)更改了標準名稱
原標準《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》名稱,更改為《魚類種質(zhì)檢驗》。
(2)更改了范圍內(nèi)容(見第1章,見2008年版的第1章)
標準名稱修改后,不再局限于養(yǎng)殖魚類,標準適用范圍擴大。
5
(3)更改了分析步驟內(nèi)容(見7.1.2、7.1.4、7.3.1、7.3.2、7.3.3,見2008
年版的6.1.2、6.1.4、6.3.1、6.3.2、6.3.3)
根據(jù)魚類血細胞種類命名原則,原標準中“紅血球”為非規(guī)范性術語,故將
“紅血球”統(tǒng)一更改為“紅細胞”。
(4)刪除了結果判定內(nèi)容(見2008年版的第7章)
本部分為技術方法,不包含結果判定。
3新舊標準水平的對比
與舊標準相比,新標準主要更改了標準名稱、范圍,對部分技術內(nèi)容進
行了更新或刪除,使新標準的操作性強、準確性提高。
三、試驗驗證的分析、綜述報告,技術經(jīng)濟論證,預期的經(jīng)濟效益、社會效
益和生態(tài)效益
1試驗或驗證的分析
本次修訂內(nèi)容中,更換了非專業(yè)性術語,將“紅血球”更改為“紅細胞”。
其他修訂內(nèi)容,均為文字表述性修訂。
研究人員利用本標準中規(guī)定的DNA含量測定方法,成功測定了麥穗魚
(Pseudorasboraparva)、紅羅非魚、哲羅魚(Huchotaimen)、俄羅斯鱘(Acipenser
gueldenstaedtii)、西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)、史氏鱘(Acipenserschrencki)、
小體鱘(Acipenserruthenus)和達氏鰉(Husodauricus)等魚類體細胞DNA含量。
例如,楊坤等(2012)以麥穗魚(Pseudorasboraparva)外周血細胞為樣本,雞血
細胞DNA為標準(2.30pg),使用流式細胞儀測得麥穗魚二倍體細胞的DNA含
量為雞血對照的1.38倍,絕對含量為3.18pg。黃永春等(2011)以紅羅非魚(Red
6
Tilapia)血細胞為樣本,以雞血細胞為DNA標準(2.50pg),使用流式細胞儀測
得紅羅非魚血細胞DNA含量為(2.5354±0.1152)pg。薛淑群等(2010)采用流
式細胞分析儀測定了哲羅魚(Huchotaimen)的DNA含量,與雞血細胞標準對
照的比值為2.23±0.17,以雞紅細胞DNA含量2.30pg計,測得哲羅魚的體
細胞DNA含量為5.12pg。
參考文獻:
楊坤,王子健,祝東梅,等.麥穗魚的組型分析和DNA含量測定[J].華中
農(nóng)業(yè)大學學報,2012,31(3):371-375.
黃永春,李文靜,林祥日,等.星洲紅魚形態(tài)、染色體組型及細胞核DNA
含量的分析[J].淡水漁業(yè),2011,41(5):3-8.
薛淑群,尹洪濱,尹家勝.哲羅魚(Huchotaimen)染色體組型與DNA含
量分析[J].廣東海洋大學學報,2010,30(3):6-10.
尹洪濱,孫中武,孫大江.五種養(yǎng)殖鱘、鰉魚DNA含量的比較[J].上海水
產(chǎn)大學學報,2004,13(2):111-114.
2綜合報告
原標準在起草編制階段,參考了大量的國內(nèi)外著作與文獻資料。魚類DNA
含量的測定,采集魚類血液,紅細胞分離、染色,流式細胞儀測定消光值,
以雞血紅細胞(2C=2.3pg)做標準DNA對照,計算出DNA含量。由此,形
成了成熟的魚類DNA含量的測定方法,并在國內(nèi)外許多魚類遺傳特性研究中
進行了驗證,且作為國內(nèi)各級水產(chǎn)原良種場認定管理、水產(chǎn)新品種審定的技
術依據(jù)而廣泛應用。
本次修訂稿中,未對DNA含量測定方法內(nèi)容進行更改,該方法在魚類資
7
源評估、養(yǎng)殖生產(chǎn)、原良種保存、水產(chǎn)種質(zhì)檢測等中仍完全適用。
3技術經(jīng)濟論證
本修訂標準為檢測方法類。魚類種質(zhì)資源是魚類生物多樣性、資源與保
護、水產(chǎn)養(yǎng)殖、水產(chǎn)遺傳育種和漁業(yè)科技活動的遺傳材料和物質(zhì)基礎,開展
魚類種質(zhì)資源研究、保護與利用,需要建立一套規(guī)范的、可操作的技術方法。
因而,本技術標準可為魚類生物學、生物多樣性、魚類資源與保護提供標準
化的技術,同時,也為魚類繁育與養(yǎng)殖、魚類遺傳改良以及水產(chǎn)新品種生產(chǎn)
的科學化、標準化、系列化及產(chǎn)業(yè)化提供基礎技術服務。
4預期的經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效益
本修訂標準,將促進我國魚類種質(zhì)資源研究的廣度和深度,科學開展我
國魚類生物多樣性的保護與利用,具有明顯的社會、經(jīng)濟、生態(tài)效果。同時,
該標準也為教學、科研、漁業(yè)生產(chǎn)與管理等提供科學方法。
本修訂標準可在漁業(yè)資源持續(xù)利用、魚類繁育與養(yǎng)殖、魚類品種改良以
及新品種生產(chǎn)與應用等方面,實現(xiàn)經(jīng)濟效果。
四、與國際、國外同類標準技術內(nèi)容的對比情況,或者與測試的國外樣品、
樣機的有關數(shù)據(jù)對比情況
本標準預期達到國際、國外的先進水平。
本修訂的標準中,未見有同類的國際標準。國外研究人員利用本標準中
規(guī)定的DNA含量測定方法,成功測定了虹鱒(Oncorhynchusmykiss)(Dolezelet
al.,2003)、恒河青鳉(Oryziasdancena)(In-Seoketal.,2016)等魚類體細胞DNA
含量。
8
參考文獻
DolezelJ,BartosJ,GreilhuberJ,etal.NuclearDNAcontentandgenomesize
oftroutandhuman[J].CytometryPartA,2003,51A(2):127-128.
In-SeokP,NamYK,KoMG.CytogeneticStudyofDiploidandTriploid
MarineMedaka,Oryziasdancena[J].KoreanJournalofIchthyology,2016,28(4):
215-222.
五、以國際標準為基礎的起草情況,以及是否合規(guī)引用或者采用國際國外標
準,并說明未采用國際標準的原因;
本修訂的標準中,未見有同類的國際標準,因此,未采用國際標準和國
外先進標準。
六、與有關法律、行政法規(guī)及相關標準的關系
目前,我國現(xiàn)行法律、法規(guī)中,尚沒有規(guī)定魚類種質(zhì)檢驗性狀測定的有關
條款;現(xiàn)行的魚類種質(zhì)標準中,也僅規(guī)定了某些性狀參數(shù)的檢驗方法,但尚
不完整,也存在可操作性差,因此,本標準目的在于規(guī)范國內(nèi)魚類種質(zhì)檢驗
的統(tǒng)一方法,便于各種魚類種質(zhì)標準和種質(zhì)檢驗使用,提高魚類種質(zhì)標準的
完整性和科學性。
本標準與有關現(xiàn)行法律、法規(guī)和強制性標準之間不存在任何矛盾和不協(xié)調(diào)
之處。
七、重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù)
9
本標準修訂中,未發(fā)生重大分歧意見。
八、涉及專利的有關說明;
本標準修訂中,未涉及專利。
九、實施國家標準的要求,以及組織措施、技術措施、過渡期和實施日期的
建議等措施建議
原國標《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準,是作為推薦性標準
頒布實施。
現(xiàn)修訂的《魚類種質(zhì)檢驗》系列標準是方法標準。由于我國魚類種類資
源十分豐富,生物學性狀多樣;養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)性狀特征,不僅南北地理差
異較大,不同養(yǎng)殖水體、人工養(yǎng)殖技術條件下差異也大;加上我們對魚類種
質(zhì)的基礎研究不夠深入,魚類種質(zhì)檢驗的技術方法有不完善之處,這些標準
的可操作性和適用性也可能會存在有局限性或片面性。因此,建議本次修訂
的標準仍作為推薦性標準,實施期滿后視情況再作修訂。
標準發(fā)布后,建議由全國水產(chǎn)標準化技術委員會組織宣傳貫徹,定期為
全國各級水產(chǎn)種質(zhì)檢測中心人員舉辦培訓班和實際操演,使他們熟悉標準,
掌握標準,提高魚類種質(zhì)檢測水平。
在標準使用過程中,建議各方注意收集在每次檢測中遇到的問題,并把
問題或意見,反饋給標準編制單位,以便標準修訂時不斷完善。
十、其他應當說明的事項
10
無。
標準編制(修訂)小組
2024年4月5日
11
《魚類種質(zhì)檢驗第14部分:DNA含量的測定》
編制(修訂)說明
一、工作簡況,包括任務來源、制定背景、起草過程等;
1.任務來源
為落實《國家標準化管理委員會關于開展推薦性國家標準復審工作的通
知》(國標委發(fā)〔2022〕10號)要求,提高標準復審質(zhì)量,2022年3月29
日,全國水產(chǎn)標準化技術委員會會同淡水養(yǎng)殖和海水養(yǎng)殖分技術委員會以視
頻形式組織召開了水產(chǎn)養(yǎng)殖術語及種質(zhì)檢驗方法標準研討會。來自科研、教
學、檢驗、標準化管理以及標準起草單位等相關方面的專家對水產(chǎn)養(yǎng)殖術語
及種質(zhì)檢驗方法系列水產(chǎn)國家標準的適用性、時效性、規(guī)范性、協(xié)調(diào)性以及
實施效果等進行了認真復審、研討,決定對《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》(GB/T18654)
等15個標準進行修訂。
2.制定背景
水產(chǎn)種質(zhì)資源是農(nóng)業(yè)種質(zhì)資源的重要組成部分,是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、水產(chǎn)育
種和漁業(yè)科技活動的遺傳材料和物質(zhì)基礎。自上世紀80年代開始,我國較系
統(tǒng)地研究了主要水產(chǎn)養(yǎng)殖對象的種質(zhì)參數(shù),歷經(jīng)“六五”、“七五”、“八五”和“九
五”科技攻關的努力,取得了很大進展和成果。在此基礎上,已制定與發(fā)布了
多項水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的種質(zhì)標準,為開展養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢測提供了科學依據(jù)。
同時,制定了《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準,并于2008年頒布
實施,這些系列標準為養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)檢測提供了操作性強的統(tǒng)一的科學方
法。該系列標準在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)、教學、科研及貿(mào)易等方面得以廣泛應用,
1
也適用于物種資源調(diào)查與保護、水產(chǎn)原良種場建設與種質(zhì)保存,以及水產(chǎn)新
品種的研發(fā)與審定等活動。該系列標準發(fā)布實施已十余年,在標準實際應用
中,部分內(nèi)容已不能滿足檢測生產(chǎn)的需要,需做適當?shù)恼{(diào)整與修訂,以更好
地服務于漁業(yè)科技發(fā)展。
3.起草過程
2022年3月29日全國水產(chǎn)標準化技術委員會組織相關技術專家,對原
《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準進行復審,復審結果決定對原系
列標準內(nèi)容進行修訂。
2022年4月在淡水養(yǎng)殖分技術委員會協(xié)調(diào)下,上海海洋大學承擔了該
系列標準中《第4部分:年齡與生長的測定》《第5部分:食性分析》《第6
部分:繁殖性能的測定》《第7部分:生態(tài)特性分析》《第13部分:同工酶
電泳》《第14部分:DNA含量的測定》6項標準的編制(修訂)任務,經(jīng)與
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分工任務。
2022年5月
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