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文檔簡介

《魚類種質(zhì)檢驗第14部分:DNA含量的測定》

編制(修訂)說明

一、工作簡況,包括任務來源、制定背景、起草過程等;

1.任務來源

為落實《國家標準化管理委員會關于開展推薦性國家標準復審工作的通

知》(國標委發(fā)〔2022〕10號)要求,提高標準復審質(zhì)量,2022年3月29

日,全國水產(chǎn)標準化技術委員會會同淡水養(yǎng)殖和海水養(yǎng)殖分技術委員會以視

頻形式組織召開了水產(chǎn)養(yǎng)殖術語及種質(zhì)檢驗方法標準研討會。來自科研、教

學、檢驗、標準化管理以及標準起草單位等相關方面的專家對水產(chǎn)養(yǎng)殖術語

及種質(zhì)檢驗方法系列水產(chǎn)國家標準的適用性、時效性、規(guī)范性、協(xié)調(diào)性以及

實施效果等進行了認真復審、研討,決定對《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》(GB/T18654)

等15個標準進行修訂。

2.制定背景

水產(chǎn)種質(zhì)資源是農(nóng)業(yè)種質(zhì)資源的重要組成部分,是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、水產(chǎn)育

種和漁業(yè)科技活動的遺傳材料和物質(zhì)基礎。自上世紀80年代開始,我國較系

統(tǒng)地研究了主要水產(chǎn)養(yǎng)殖對象的種質(zhì)參數(shù),歷經(jīng)“六五”、“七五”、“八五”和“九

五”科技攻關的努力,取得了很大進展和成果。在此基礎上,已制定與發(fā)布了

多項水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的種質(zhì)標準,為開展養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢測提供了科學依據(jù)。

同時,制定了《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準,并于2008年頒布

實施,這些系列標準為養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)檢測提供了操作性強的統(tǒng)一的科學方

法。該系列標準在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)、教學、科研及貿(mào)易等方面得以廣泛應用,

1

也適用于物種資源調(diào)查與保護、水產(chǎn)原良種場建設與種質(zhì)保存,以及水產(chǎn)新

品種的研發(fā)與審定等活動。該系列標準發(fā)布實施已十余年,在標準實際應用

中,部分內(nèi)容已不能滿足檢測生產(chǎn)的需要,需做適當?shù)恼{(diào)整與修訂,以更好

地服務于漁業(yè)科技發(fā)展。

3.起草過程

2022年3月29日全國水產(chǎn)標準化技術委員會組織相關技術專家,對原

《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準進行復審,復審結果決定對原系

列標準內(nèi)容進行修訂。

2022年4月在淡水養(yǎng)殖分技術委員會協(xié)調(diào)下,上海海洋大學承擔了該

系列標準中《第4部分:年齡與生長的測定》《第5部分:食性分析》《第6

部分:繁殖性能的測定》《第7部分:生態(tài)特性分析》《第13部分:同工酶

電泳》《第14部分:DNA含量的測定》6項標準的編制(修訂)任務,經(jīng)與

長江水產(chǎn)研究所、東海水產(chǎn)研究所進行溝通交流,并確定了各方參與人員與

分工任務。

2022年5月向淡水養(yǎng)殖分技術委員會報送《國家標準立項建議書》;

承擔單位開始進行調(diào)研,收集資料,著手《第14部分:DNA含量的測定》

標準的修訂任務。

2022年9月完成《第14部分:DNA含量的測定》標準修訂稿和標準

編制(修訂)說明。

4.協(xié)作單位

中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所和上海海洋大學是原《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)

檢驗》GB/T18654系列標準的起草編制單位。為更廣泛地征求修訂意見,本

2

次修訂邀請中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所共同參與。在本次標準修訂

中,經(jīng)各方協(xié)商,由上海海洋大學負責其中6項修訂任務,中國水產(chǎn)科學研

究院長江水產(chǎn)研究所和中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所作為協(xié)作單位。

上海海洋大學負責項目任務書的申報,制定具體的實施方案,進行調(diào)研,

收集資料,起草標準修訂草案和編制說明,并負責意見的匯總處理。中國水

產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所、中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所參與方

案的制定,參與標準文本修訂草案和編制說明的起草。

5.標準主要起草人及其所作的工作

趙金良(上海海洋大學,原標準起草人):項目負責人,制定方案,進

行調(diào)研,收集資料,起草標準草案和編制說明。

唐首杰(上海海洋大學):主要承擔者,參與標準修訂起草、編制說明

的起草。

趙巖(上海海洋大學):主要承擔者,進行調(diào)研,收集資料,參與標

準修訂起草、編制說明的起草。

劉永濤(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

周劍光(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

張林(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

張濤(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

3

周瑞瓊(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

衛(wèi)宇星(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

來琦芳(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

么宗利(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所):主要承擔者,參與編

制方案的制定、標準修訂和編制說明的起草。

二、國家標準編制原則、主要內(nèi)容及其確定依據(jù),修訂國家標準時,還包括

修訂前后技術內(nèi)容的對比

1標準編制原則

本標準修訂過程按照工作計劃實施,并遵循“科學性、合理性、先進性、

實用性、普遍性”原則。對標準從全面性、簡便性、可操作性等方面進行了綜

合考慮,確保標準發(fā)布實施后能夠得到有效應用。

本標準修訂參照GB/T1.1-2020標準化工作導則第1部分:標準化文件

的結構和起草規(guī)則要求。

2主要內(nèi)容及其確定依據(jù)

本次修訂中,將原標準名稱《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》更改為《魚類種質(zhì)檢

驗》,擴大了標準的適用范圍,有利于水產(chǎn)種質(zhì)檢測技術的應用和推廣。

原《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》由15個部分組成。經(jīng)專家討論后,合并了其中

2項標準,刪除了1項標準,對其他部分要求進行技術內(nèi)容更新。修訂后,

GB/T18654擬由13個部分組成。

4

——第1部分:檢驗規(guī)則。

——第2部分:抽樣方法。

——第3部分:性狀測定。

——第4部分:年齡與生長的測定。

——第5部分:食性分析。

——第6部分:繁殖性能的測定。

——第7部分:生態(tài)特性分析。

——第8部分:耗氧率與臨界窒息點的測定。

——第9部分:含肉率測定。

——第10部分:肌肉營養(yǎng)成分的測定。

——第12部分:染色體組型分析。

——第13部分:同工酶電泳分析。

——第14部分:DNA含量的測定。

《第14部分:DNA含量的測定》規(guī)定了魚類DNA含量測定的通用方法。

描述了魚類紅細胞DNA含量測定的試劑與材料、儀器和設備、抽樣方法和分

析步驟。適用于魚類種質(zhì)鑒定與檢測。

本次修訂中,主要技術變化如下:

(1)更改了標準名稱

原標準《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》名稱,更改為《魚類種質(zhì)檢驗》。

(2)更改了范圍內(nèi)容(見第1章,見2008年版的第1章)

標準名稱修改后,不再局限于養(yǎng)殖魚類,標準適用范圍擴大。

5

(3)更改了分析步驟內(nèi)容(見7.1.2、7.1.4、7.3.1、7.3.2、7.3.3,見2008

年版的6.1.2、6.1.4、6.3.1、6.3.2、6.3.3)

根據(jù)魚類血細胞種類命名原則,原標準中“紅血球”為非規(guī)范性術語,故將

“紅血球”統(tǒng)一更改為“紅細胞”。

(4)刪除了結果判定內(nèi)容(見2008年版的第7章)

本部分為技術方法,不包含結果判定。

3新舊標準水平的對比

與舊標準相比,新標準主要更改了標準名稱、范圍,對部分技術內(nèi)容進

行了更新或刪除,使新標準的操作性強、準確性提高。

三、試驗驗證的分析、綜述報告,技術經(jīng)濟論證,預期的經(jīng)濟效益、社會效

益和生態(tài)效益

1試驗或驗證的分析

本次修訂內(nèi)容中,更換了非專業(yè)性術語,將“紅血球”更改為“紅細胞”。

其他修訂內(nèi)容,均為文字表述性修訂。

研究人員利用本標準中規(guī)定的DNA含量測定方法,成功測定了麥穗魚

(Pseudorasboraparva)、紅羅非魚、哲羅魚(Huchotaimen)、俄羅斯鱘(Acipenser

gueldenstaedtii)、西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)、史氏鱘(Acipenserschrencki)、

小體鱘(Acipenserruthenus)和達氏鰉(Husodauricus)等魚類體細胞DNA含量。

例如,楊坤等(2012)以麥穗魚(Pseudorasboraparva)外周血細胞為樣本,雞血

細胞DNA為標準(2.30pg),使用流式細胞儀測得麥穗魚二倍體細胞的DNA含

量為雞血對照的1.38倍,絕對含量為3.18pg。黃永春等(2011)以紅羅非魚(Red

6

Tilapia)血細胞為樣本,以雞血細胞為DNA標準(2.50pg),使用流式細胞儀測

得紅羅非魚血細胞DNA含量為(2.5354±0.1152)pg。薛淑群等(2010)采用流

式細胞分析儀測定了哲羅魚(Huchotaimen)的DNA含量,與雞血細胞標準對

照的比值為2.23±0.17,以雞紅細胞DNA含量2.30pg計,測得哲羅魚的體

細胞DNA含量為5.12pg。

參考文獻:

楊坤,王子健,祝東梅,等.麥穗魚的組型分析和DNA含量測定[J].華中

農(nóng)業(yè)大學學報,2012,31(3):371-375.

黃永春,李文靜,林祥日,等.星洲紅魚形態(tài)、染色體組型及細胞核DNA

含量的分析[J].淡水漁業(yè),2011,41(5):3-8.

薛淑群,尹洪濱,尹家勝.哲羅魚(Huchotaimen)染色體組型與DNA含

量分析[J].廣東海洋大學學報,2010,30(3):6-10.

尹洪濱,孫中武,孫大江.五種養(yǎng)殖鱘、鰉魚DNA含量的比較[J].上海水

產(chǎn)大學學報,2004,13(2):111-114.

2綜合報告

原標準在起草編制階段,參考了大量的國內(nèi)外著作與文獻資料。魚類DNA

含量的測定,采集魚類血液,紅細胞分離、染色,流式細胞儀測定消光值,

以雞血紅細胞(2C=2.3pg)做標準DNA對照,計算出DNA含量。由此,形

成了成熟的魚類DNA含量的測定方法,并在國內(nèi)外許多魚類遺傳特性研究中

進行了驗證,且作為國內(nèi)各級水產(chǎn)原良種場認定管理、水產(chǎn)新品種審定的技

術依據(jù)而廣泛應用。

本次修訂稿中,未對DNA含量測定方法內(nèi)容進行更改,該方法在魚類資

7

源評估、養(yǎng)殖生產(chǎn)、原良種保存、水產(chǎn)種質(zhì)檢測等中仍完全適用。

3技術經(jīng)濟論證

本修訂標準為檢測方法類。魚類種質(zhì)資源是魚類生物多樣性、資源與保

護、水產(chǎn)養(yǎng)殖、水產(chǎn)遺傳育種和漁業(yè)科技活動的遺傳材料和物質(zhì)基礎,開展

魚類種質(zhì)資源研究、保護與利用,需要建立一套規(guī)范的、可操作的技術方法。

因而,本技術標準可為魚類生物學、生物多樣性、魚類資源與保護提供標準

化的技術,同時,也為魚類繁育與養(yǎng)殖、魚類遺傳改良以及水產(chǎn)新品種生產(chǎn)

的科學化、標準化、系列化及產(chǎn)業(yè)化提供基礎技術服務。

4預期的經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效益

本修訂標準,將促進我國魚類種質(zhì)資源研究的廣度和深度,科學開展我

國魚類生物多樣性的保護與利用,具有明顯的社會、經(jīng)濟、生態(tài)效果。同時,

該標準也為教學、科研、漁業(yè)生產(chǎn)與管理等提供科學方法。

本修訂標準可在漁業(yè)資源持續(xù)利用、魚類繁育與養(yǎng)殖、魚類品種改良以

及新品種生產(chǎn)與應用等方面,實現(xiàn)經(jīng)濟效果。

四、與國際、國外同類標準技術內(nèi)容的對比情況,或者與測試的國外樣品、

樣機的有關數(shù)據(jù)對比情況

本標準預期達到國際、國外的先進水平。

本修訂的標準中,未見有同類的國際標準。國外研究人員利用本標準中

規(guī)定的DNA含量測定方法,成功測定了虹鱒(Oncorhynchusmykiss)(Dolezelet

al.,2003)、恒河青鳉(Oryziasdancena)(In-Seoketal.,2016)等魚類體細胞DNA

含量。

8

參考文獻

DolezelJ,BartosJ,GreilhuberJ,etal.NuclearDNAcontentandgenomesize

oftroutandhuman[J].CytometryPartA,2003,51A(2):127-128.

In-SeokP,NamYK,KoMG.CytogeneticStudyofDiploidandTriploid

MarineMedaka,Oryziasdancena[J].KoreanJournalofIchthyology,2016,28(4):

215-222.

五、以國際標準為基礎的起草情況,以及是否合規(guī)引用或者采用國際國外標

準,并說明未采用國際標準的原因;

本修訂的標準中,未見有同類的國際標準,因此,未采用國際標準和國

外先進標準。

六、與有關法律、行政法規(guī)及相關標準的關系

目前,我國現(xiàn)行法律、法規(guī)中,尚沒有規(guī)定魚類種質(zhì)檢驗性狀測定的有關

條款;現(xiàn)行的魚類種質(zhì)標準中,也僅規(guī)定了某些性狀參數(shù)的檢驗方法,但尚

不完整,也存在可操作性差,因此,本標準目的在于規(guī)范國內(nèi)魚類種質(zhì)檢驗

的統(tǒng)一方法,便于各種魚類種質(zhì)標準和種質(zhì)檢驗使用,提高魚類種質(zhì)標準的

完整性和科學性。

本標準與有關現(xiàn)行法律、法規(guī)和強制性標準之間不存在任何矛盾和不協(xié)調(diào)

之處。

七、重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù)

9

本標準修訂中,未發(fā)生重大分歧意見。

八、涉及專利的有關說明;

本標準修訂中,未涉及專利。

九、實施國家標準的要求,以及組織措施、技術措施、過渡期和實施日期的

建議等措施建議

原國標《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準,是作為推薦性標準

頒布實施。

現(xiàn)修訂的《魚類種質(zhì)檢驗》系列標準是方法標準。由于我國魚類種類資

源十分豐富,生物學性狀多樣;養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)性狀特征,不僅南北地理差

異較大,不同養(yǎng)殖水體、人工養(yǎng)殖技術條件下差異也大;加上我們對魚類種

質(zhì)的基礎研究不夠深入,魚類種質(zhì)檢驗的技術方法有不完善之處,這些標準

的可操作性和適用性也可能會存在有局限性或片面性。因此,建議本次修訂

的標準仍作為推薦性標準,實施期滿后視情況再作修訂。

標準發(fā)布后,建議由全國水產(chǎn)標準化技術委員會組織宣傳貫徹,定期為

全國各級水產(chǎn)種質(zhì)檢測中心人員舉辦培訓班和實際操演,使他們熟悉標準,

掌握標準,提高魚類種質(zhì)檢測水平。

在標準使用過程中,建議各方注意收集在每次檢測中遇到的問題,并把

問題或意見,反饋給標準編制單位,以便標準修訂時不斷完善。

十、其他應當說明的事項

10

無。

標準編制(修訂)小組

2024年4月5日

11

《魚類種質(zhì)檢驗第14部分:DNA含量的測定》

編制(修訂)說明

一、工作簡況,包括任務來源、制定背景、起草過程等;

1.任務來源

為落實《國家標準化管理委員會關于開展推薦性國家標準復審工作的通

知》(國標委發(fā)〔2022〕10號)要求,提高標準復審質(zhì)量,2022年3月29

日,全國水產(chǎn)標準化技術委員會會同淡水養(yǎng)殖和海水養(yǎng)殖分技術委員會以視

頻形式組織召開了水產(chǎn)養(yǎng)殖術語及種質(zhì)檢驗方法標準研討會。來自科研、教

學、檢驗、標準化管理以及標準起草單位等相關方面的專家對水產(chǎn)養(yǎng)殖術語

及種質(zhì)檢驗方法系列水產(chǎn)國家標準的適用性、時效性、規(guī)范性、協(xié)調(diào)性以及

實施效果等進行了認真復審、研討,決定對《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》(GB/T18654)

等15個標準進行修訂。

2.制定背景

水產(chǎn)種質(zhì)資源是農(nóng)業(yè)種質(zhì)資源的重要組成部分,是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、水產(chǎn)育

種和漁業(yè)科技活動的遺傳材料和物質(zhì)基礎。自上世紀80年代開始,我國較系

統(tǒng)地研究了主要水產(chǎn)養(yǎng)殖對象的種質(zhì)參數(shù),歷經(jīng)“六五”、“七五”、“八五”和“九

五”科技攻關的努力,取得了很大進展和成果。在此基礎上,已制定與發(fā)布了

多項水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的種質(zhì)標準,為開展養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢測提供了科學依據(jù)。

同時,制定了《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準,并于2008年頒布

實施,這些系列標準為養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)檢測提供了操作性強的統(tǒng)一的科學方

法。該系列標準在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)、教學、科研及貿(mào)易等方面得以廣泛應用,

1

也適用于物種資源調(diào)查與保護、水產(chǎn)原良種場建設與種質(zhì)保存,以及水產(chǎn)新

品種的研發(fā)與審定等活動。該系列標準發(fā)布實施已十余年,在標準實際應用

中,部分內(nèi)容已不能滿足檢測生產(chǎn)的需要,需做適當?shù)恼{(diào)整與修訂,以更好

地服務于漁業(yè)科技發(fā)展。

3.起草過程

2022年3月29日全國水產(chǎn)標準化技術委員會組織相關技術專家,對原

《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》GB/T18654系列標準進行復審,復審結果決定對原系

列標準內(nèi)容進行修訂。

2022年4月在淡水養(yǎng)殖分技術委員會協(xié)調(diào)下,上海海洋大學承擔了該

系列標準中《第4部分:年齡與生長的測定》《第5部分:食性分析》《第6

部分:繁殖性能的測定》《第7部分:生態(tài)特性分析》《第13部分:同工酶

電泳》《第14部分:DNA含量的測定》6項標準的編制(修訂)任務,經(jīng)與

長江水產(chǎn)研究所、東海水產(chǎn)研究所進行溝通交流,并確定了各方參與人員與

分工任務。

2022年5月

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