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運(yùn)城市人民醫(yī)院組織芯片制作考核一、單選題(共10題,每題2分,計(jì)20分)1.組織芯片制作過程中,最常用的固定方法是?A.乙醇固定B.甲醛固定C.甲醇固定D.丙酮固定2.組織芯片中,探針與靶標(biāo)結(jié)合的最佳pH值范圍是?A.5.0-6.0B.6.5-7.5C.8.0-9.0D.7.0-8.03.以下哪種方法不屬于組織芯片的預(yù)處理步驟?A.組織脫水B.組織包埋C.探針標(biāo)記D.組織切片4.組織芯片制作中,最常用的包埋材料是?A.石蠟B.膠原蛋白C.硅膠D.聚乳酸5.組織芯片中,探針密度最高的芯片類型是?A.8通道芯片B.96通道芯片C.384通道芯片D.1536通道芯片6.組織芯片的染色方法中,最常用的熒光染色技術(shù)是?A.免疫熒光染色B.免疫組化染色C.原位雜交染色D.細(xì)胞核染色7.組織芯片制作過程中,探針間距通??刂圃??A.50-100μmB.100-200μmC.200-300μmD.300-400μm8.組織芯片的保存條件中,最適宜的保存溫度是?A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室溫9.組織芯片制作中,最常用的探針類型是?A.DNA探針B.RNA探針C.蛋白質(zhì)探針D.抗體探針10.組織芯片的檢測(cè)方法中,最常用的定量方法是?A.qPCRB.WesternBlotC.ELISAD.免疫熒光定量二、多選題(共5題,每題3分,計(jì)15分)1.組織芯片制作過程中,以下哪些屬于組織預(yù)處理步驟?A.組織切片B.組織脫水C.組織包埋D.探針標(biāo)記2.組織芯片的染色方法中,以下哪些屬于熒光染色技術(shù)?A.免疫熒光染色B.免疫組化染色C.原位雜交染色D.細(xì)胞核染色3.組織芯片制作中,以下哪些屬于常用的包埋材料?A.石蠟B.膠原蛋白C.硅膠D.聚乳酸4.組織芯片的檢測(cè)方法中,以下哪些屬于定量方法?A.qPCRB.WesternBlotC.ELISAD.免疫熒光定量5.組織芯片制作過程中,以下哪些屬于探針類型?A.DNA探針B.RNA探針C.蛋白質(zhì)探針D.抗體探針三、判斷題(共10題,每題1分,計(jì)10分)1.組織芯片制作過程中,探針間距越小,檢測(cè)靈敏度越高。(√)2.組織芯片的保存條件中,4℃是最適宜的保存溫度。(×)3.組織芯片制作中,最常用的固定方法是甲醛固定。(√)4.組織芯片的染色方法中,免疫熒光染色是最常用的技術(shù)。(√)5.組織芯片制作過程中,探針標(biāo)記屬于預(yù)處理步驟。(×)6.組織芯片的包埋材料中,石蠟是最常用的材料。(√)7.組織芯片的檢測(cè)方法中,qPCR是最常用的定量方法。(×)8.組織芯片制作中,探針類型最常用的是DNA探針。(√)9.組織芯片的保存條件中,-80℃是最適宜的保存溫度。(×)10.組織芯片的染色方法中,免疫組化染色是最常用的技術(shù)。(×)四、簡(jiǎn)答題(共5題,每題5分,計(jì)25分)1.簡(jiǎn)述組織芯片制作過程中,組織預(yù)處理的步驟。2.簡(jiǎn)述組織芯片制作過程中,探針標(biāo)記的方法。3.簡(jiǎn)述組織芯片制作過程中,包埋材料的選擇依據(jù)。4.簡(jiǎn)述組織芯片制作過程中,染色方法的原理。5.簡(jiǎn)述組織芯片制作過程中,保存條件的影響因素。五、論述題(共2題,每題10分,計(jì)20分)1.論述組織芯片制作過程中,探針選擇的重要性及影響因素。2.論述組織芯片制作過程中,質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn)及方法。答案與解析一、單選題答案與解析1.B解析:甲醛固定是最常用的固定方法,能較好地保留組織結(jié)構(gòu)。2.B解析:pH值6.5-7.5最適合探針與靶標(biāo)結(jié)合。3.C解析:探針標(biāo)記屬于檢測(cè)步驟,不屬于預(yù)處理步驟。4.A解析:石蠟是最常用的包埋材料,能較好地固定組織。5.C解析:384通道芯片探針密度最高,適用于高通量檢測(cè)。6.A解析:免疫熒光染色是最常用的熒光染色技術(shù)。7.B解析:探針間距100-200μm最適宜,既能保證檢測(cè)精度,又能減少交叉干擾。8.C解析:-80℃最適宜保存組織芯片,能長(zhǎng)期保持活性。9.A解析:DNA探針是最常用的探針類型,適用于多種檢測(cè)方法。10.D解析:免疫熒光定量是最常用的定量方法,操作簡(jiǎn)便且精度較高。二、多選題答案與解析1.B、C解析:組織預(yù)處理包括組織脫水和組織包埋,探針標(biāo)記屬于檢測(cè)步驟。2.A、C解析:免疫熒光染色和原位雜交染色屬于熒光染色技術(shù),免疫組化和WesternBlot不屬于。3.A、B解析:石蠟和膠原蛋白是最常用的包埋材料,硅膠和聚乳酸較少使用。4.A、C、D解析:qPCR、ELISA和免疫熒光定量屬于定量方法,WesternBlot屬于半定量方法。5.A、B、D解析:DNA探針、RNA探針和抗體探針屬于探針類型,蛋白質(zhì)探針較少使用。三、判斷題答案與解析1.√解析:探針間距越小,檢測(cè)靈敏度越高。2.×解析:4℃容易導(dǎo)致組織降解,-80℃最適宜保存。3.√解析:甲醛固定是最常用的固定方法。4.√解析:免疫熒光染色是最常用的熒光染色技術(shù)。5.×解析:探針標(biāo)記屬于檢測(cè)步驟,不屬于預(yù)處理步驟。6.√解析:石蠟是最常用的包埋材料。7.×解析:qPCR屬于半定量方法,免疫熒光定量最常用。8.√解析:DNA探針是最常用的探針類型。9.×解析:-80℃最適宜保存,4℃容易導(dǎo)致組織降解。10.×解析:免疫熒光染色是最常用的技術(shù),免疫組化較少使用。四、簡(jiǎn)答題答案與解析1.組織預(yù)處理的步驟答:組織預(yù)處理包括組織切片、組織脫水和組織包埋。首先將組織切片成厚度約4μm的切片,然后用乙醇或丙酮進(jìn)行脫水,最后用石蠟或膠原蛋白進(jìn)行包埋。2.探針標(biāo)記的方法答:探針標(biāo)記通常使用熒光染料或生物素進(jìn)行標(biāo)記。DNA探針常用熒光染料(如FITC、Cy3)標(biāo)記,RNA探針常用生物素標(biāo)記,抗體探針常用熒光二抗進(jìn)行標(biāo)記。3.包埋材料的選擇依據(jù)答:包埋材料的選擇依據(jù)包括組織類型、檢測(cè)方法和保存條件。石蠟適用于長(zhǎng)期保存和免疫組化檢測(cè),膠原蛋白適用于原位雜交檢測(cè)。4.染色方法的原理答:染色方法的原理是利用熒光染料或酶標(biāo)記的探針與靶標(biāo)結(jié)合,通過熒光顯微鏡或化學(xué)顯色進(jìn)行檢測(cè)。免疫熒光染色的原理是利用抗體與靶標(biāo)結(jié)合,再用熒光二抗進(jìn)行標(biāo)記。5.保存條件的影響因素答:保存條件的影響因素包括溫度、濕度和氣體環(huán)境。-80℃最適宜保存,可避免組織降解和探針失活;干燥環(huán)境可減少濕度影響;氮?dú)饣蚨栊詺怏w可避免氧化。五、論述題答案與解析1.探針選擇的重要性及影響因素答:探針選擇對(duì)組織芯片檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度至關(guān)重要。影響因素包括:-組織類型:不同組織對(duì)探針的親和力不同。-檢測(cè)方法:DNA探針適用于PCR檢測(cè),RNA探針適用于原位雜交,抗體探針適用于免疫組化。-靶標(biāo)性質(zhì):靶標(biāo)分子的大小、結(jié)構(gòu)和對(duì)探針的親和力。-保存條件:探針的穩(wěn)定性受溫度和濕度影響。2.質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn)及方法答:質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn)包括:-組織預(yù)處理:確保切片厚度均勻、脫水充分。-探針標(biāo)記:確保探針標(biāo)記均勻,無交叉干擾。-染色方法:確

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