ICSCCS01.040.11C5043Detectionof52rohibitedanti-allergicingredientsinsoothingandrepairingcosmetics-Liquidchromatography-tandemmaIDB43/T3084—2024前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14方法原理 15試劑與材料 1 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制255 6分析步驟 2 篩查用混合標(biāo)準(zhǔn)溶液26 基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液制備363 基質(zhì)混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備36 78靈敏度 79精密度 9 （資料性）52種抗過(guò)敏成分的中文名稱英文名稱號(hào)及分子式10附錄B（資料性）52種抗過(guò)敏成分提取離子圖 DB43/T3084—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由湖南省藥品監(jiān)督管理局提出并歸口。本文件起草單位：湖南省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院、水羊化妝品制造有限公司。本文件主要起草人：殷帥、潘小紅、尹偉成、黃海萍、章為、吳志珊、涂曉琴、劉玉玲、趙薇、姜成君、張廷志、劉澤鑫、談金女、肖雄志、楊湘。DB43/T3084—20241舒緩、修護(hù)類化妝品中52種抗過(guò)敏成分的測(cè)定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法本文件規(guī)定了舒緩修護(hù)類化妝品中52種抗過(guò)敏成分高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。本文件適用于舒緩修護(hù)類化妝品中52種抗過(guò)敏成分的測(cè)定，包括：布可立嗪、卡比沙明、氯苯甲嗪、奧沙米特、苯噻啶、苯托沙敏、氮異丙嗪、多塞平、甲吡吩嗪、雷尼替丁、氯吡拉敏、溴苯海明、異丁嗪、苯吡丙胺、吡咯咪唑、二氧丙嗪、法莫替丁、美克洛嗪、美吡拉敏、腦益嗪、去氯羥嗪、西咪替丁、安他唑啉、地氯雷他定、氯苯那敏、阿司咪唑、曲吡那敏、溴苯那敏、苯海拉明、異丙嗪、羥嗪、奮乃靜、西替利嗪、氟奮乃靜、氯丙嗪、氯雷他定、特非那定、賽庚啶、多西拉敏、氯苯沙明、美沙吡林、賽克利嗪、二苯拉林、非索非那定、阿伐斯汀、咪唑斯汀、依巴斯汀、奧洛他定、盧帕他定、貝托斯汀、比拉斯汀、酮替芬。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1舒緩類化妝品soothingcosmetics有助于改善皮膚刺激等狀態(tài)的化妝品。3.2修護(hù)類化妝品repairingcosmetics有助于維護(hù)施用部位保持正常狀態(tài)的化妝品。4方法原理樣品以乙腈為溶劑提取，采用高效液相色譜分離，質(zhì)譜檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間和特征離子對(duì)的相對(duì)豐度比定性、定量離子對(duì)峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。5試劑與材料除另有規(guī)定外，本方法中所用試劑均為分析純，水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。2DB43/T3084—20245.2試劑5.2.1乙腈：色譜純。5.2.2正己烷：色譜純。5.2.3甲醇：色譜純。5.2.4甲酸銨：色譜純。5.2.5甲酸：色譜純。5.3試劑配制5.3.150%乙腈溶液：取乙腈、水等體積混合，搖勻。5.3.270%乙腈溶液：取乙腈、水按體積比7:3混合，搖勻。5.3.3含0.1%甲酸的2mmol/L甲酸銨水溶液：稱取0.1261g甲酸銨于1000mL容量瓶中，加水950mL溶解后，加入1.0mL甲酸，用水定容至刻度，混勻，過(guò)0.22μm微孔濾膜。5.4標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本方法所包含的52種抗過(guò)敏成分標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)、分子式詳見附錄A的表A.1。5.5標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：分別稱取各抗過(guò)敏類成分標(biāo)準(zhǔn)品（見表A.1）10mg（精確到0.00001g）置于10mL容量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度。4℃避光貯存，保質(zhì)期3個(gè)月。5.6材料5.6.1塑料錐形離心管：15mL。5.6.2一次性塑料吸管：3mL。5.6.30.22μm有機(jī)濾膜。5.6.4具塞比色管：25mL。5.7儀器和設(shè)備5.7.1液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）。5.7.2分析天平：感量為0.0001g和0.00001g。5.7.3離心機(jī)：轉(zhuǎn)速大于6000r/min。5.7.4渦旋混合儀。5.7.5超聲波清洗儀：功率不低于200W。6分析步驟6.1篩查用混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分別取52種抗過(guò)敏類成分標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液適量，用初始流動(dòng)相配制成濃度在定量限（見表4）附近的溶液。臨用現(xiàn)配。6.2空白基質(zhì)提取液制備DB43/T3084—20243稱取空白試樣0.2g（精確到0.0001g置于25mL具塞比色管中，與樣品同法處理，作為空白基質(zhì)提取液。6.3基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液制備量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液各1.0mL，置于100mL棕色容量瓶中，用空白基質(zhì)提取液稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為10.0mg/L的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液臨用現(xiàn)配。6.4基質(zhì)混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備取基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液適量，用空白基質(zhì)提取液逐級(jí)稀釋得到濃度為1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L基質(zhì)混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度范圍可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整），基質(zhì)混合系列標(biāo)準(zhǔn)系列溶液臨用現(xiàn)配。6.5樣品處理6.5.1膏霜乳類、液體水基類、凝膠類、面膜類樣品稱取樣品0.2g（精確到0.0001g置于25mL具塞比色管中，加入乙腈1～2mL，在渦旋混合儀上振蕩30s至試樣與提取溶劑混合均勻，然后加入乙腈至近刻度，超聲提取20min，靜置至室溫，用乙腈定容至刻度，搖勻，以6000r/min離心10min，濾過(guò)（必要時(shí)取上清液適量用50%乙腈溶液稀釋，稀釋液經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾），濾液作為待測(cè)溶液。6.5.2液體油基類稱取樣品0.2g（精確至0.0001g置于離心管中，加入2mL正己烷，在渦旋混合儀上分散，然后加入70%乙腈3mL，渦旋振蕩2min，6000r/min離心10min，吸取下層溶液至25mL具塞比色管中，上層正己烷層用70%乙腈3mL，自“渦旋振蕩2min，…”起，重復(fù)上述步驟一次，合并兩次溶液，加50%乙腈定容至刻度，濾過(guò)（必要時(shí)用適量50%乙腈溶液稀釋，稀釋液經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾），濾液作為待測(cè)溶液。6.6儀器參考條件6.6.1液相色譜條件a)色譜柱：C18（100mm×2.1mm，1.8μm），或相當(dāng)者；b)柱溫箱溫度：40℃;c)進(jìn)樣量：2μL；d)流速：0.3mL/min；e)流動(dòng)相梯度及流速見表1。表1液相色譜梯度洗脫條件%%11DB43/T3084—202446.6.2質(zhì)譜條件a)離子源：電噴霧離子源（ESI）；b)掃描方式：正離子掃描；c)檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；d)監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)參數(shù)設(shè)定見表2。表252種抗過(guò)敏成分監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)參數(shù)設(shè)定表123456789DB43/T3084—20245表252種抗過(guò)敏成分監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)參數(shù)設(shè)定表（續(xù)）DB43/T3084—20246表252種抗過(guò)敏成分監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)參數(shù)設(shè)定表（續(xù)）DB43/T3084—202476.7定性判定取待測(cè)溶液與篩查用混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同分析條件下測(cè)定，樣品中如呈現(xiàn)定量離子對(duì)和定性離子對(duì)的色譜峰，被測(cè)成分的特征離子峰保留時(shí)間與篩查用混合標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間一致，且選擇的定性離子的相對(duì)豐度比與相當(dāng)濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液的定性離子的相對(duì)豐度比的最大偏差不超過(guò)表3的規(guī)定，則可以判定樣品中存在對(duì)應(yīng)的抗過(guò)敏類成分。表3定性判定時(shí)離子相對(duì)豐度的最大允許偏差6.8定量測(cè)定取基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液依次測(cè)定，以待測(cè)組分的系列濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)組分的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，繪制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.99。待測(cè)溶液中各組分的響應(yīng)值應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。若待測(cè)溶液響應(yīng)值超出基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍，應(yīng)用空白基質(zhì)樣液將其稀釋至線性范圍內(nèi)進(jìn)行定量測(cè)定。測(cè)定結(jié)果按公式（1）計(jì)算樣品中各成分的含量。6.9空白試驗(yàn)除不加試樣外，按6.1至6.5項(xiàng)下的測(cè)定條件和步驟進(jìn)行。7結(jié)果計(jì)算按公式（1）計(jì)算待測(cè)溶液中52種抗過(guò)敏成分的含量，計(jì)算結(jié)果需扣除空白值。w=···········································································(1)ω——樣品中52種抗過(guò)敏類成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，μg/g；P——待測(cè)溶液中52種抗過(guò)敏成分的質(zhì)量濃度，μg/L；V——樣品定容體積，mL；m——樣品取樣量，g；D——稀釋倍數(shù)（如未稀釋則為1）。8靈敏度本文件中52種抗過(guò)敏類成分的檢出限、定量限和取樣量為0.2g時(shí)的檢出濃度及最低定量濃度見表4。表452種抗過(guò)敏類成分的檢出限、定量限、檢出濃度和最低定量濃度12DB43/T3084—20248表452種抗過(guò)敏類成分的檢出限、定量限、檢出濃度和最低定量濃度（續(xù)）3456789DB43/T3084—20249表452種抗過(guò)敏類成分的檢出限、定量限、檢出濃度和最低定量濃度（續(xù)）9精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過(guò)算術(shù)平均值的15%。DB43/T3084—202452種抗過(guò)敏成分的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)及分子式52種抗過(guò)敏成分的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)及分子式見表A.1。表A.152種抗過(guò)敏成分的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)及分子式1CHClN2CHClNO3CHClN4CH0NO5CHNS6CHNO7CHNS8CHNO9CH0NSCHNOSCH0ClNCH0BrNOCHNSCH0NCH0ClNCH0NOSCHNOSCHClNCHNOCHNCHNOCHNSCHNCHClNCHClNCHFNOCHNCHBrNCHNOCH0NSCHClNODB43/T3084—2024表A.152種抗過(guò)敏成分的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)及分子式（續(xù)）CHClNOSCHClNOCHFNOSCHClNSCHClNOCHNOCHNCHNOCH2ClNOCHNSCHNCHNOCHNOCHNOCHFNOCHNOCHNOCHClNCHClNOCHNOCHNOSDB43/T3084—202452種抗過(guò)敏成分提取離子圖本文件52種抗過(guò)敏成分提取離子圖見圖B.1～B.52。圖B.1布可立嗪圖B.3氯苯甲嗪圖B.5苯噻啶圖B.2卡比沙明圖B.4奧沙米特圖B.6苯托沙敏DB43/T3084—2024圖B.7氮異丙嗪圖B.11氯吡拉敏圖B.10雷尼替丁圖B.12溴苯海明DB43/T3084—2024圖B.13異丁嗪圖B.15吡咯咪唑圖B.17法莫替丁圖B.14苯吡丙胺圖B.16二氧異丙嗪圖B.18美克洛嗪DB43/T3084—2024圖B.19美吡拉敏圖B.21去氯羥嗪圖B.23安他唑啉圖B.20腦益嗪圖B.22西咪替丁圖B.24地氯雷他定DB43/T3084—2024圖B.25氯苯那敏圖B.27阿司咪唑圖B.29溴苯那敏圖B.26西替利嗪圖B.