贛州市人民醫(yī)院電鏡標(biāo)本制備考核一、單選題（每題2分，共20題）1.在制備電鏡樣品時，下列哪種方法最適合用于固定細胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)？A.丙酮固定B.戊二醛固定C.乙醇固定D.腈氧乙烷固定2.電鏡樣品的脫水過程應(yīng)使用哪種梯度溶液？A.50%→70%→90%→100%乙醇B.30%→50%→70%→90%→100%乙醇C.100%→90%→70%→50%乙醇D.100%→80%→60%→40%乙醇3.超薄切片常用的厚度是多少？A.1μmB.2μmC.50nmD.100nm4.電鏡樣品載網(wǎng)選擇時，優(yōu)先考慮哪種材質(zhì)？A.銅網(wǎng)B.鉻網(wǎng)C.鋁網(wǎng)D.鎢網(wǎng)5.在電鏡樣品染色中，鉛鹽染色的主要作用是什么？A.提高樣品導(dǎo)電性B.突出細胞核結(jié)構(gòu)C.顯示細胞器膜結(jié)構(gòu)D.增強樣品透明度6.超薄切片機的刀片材料通常是什么？A.不銹鋼B.碳化鎢C.石英D.陶瓷7.電鏡樣品的固定時間一般控制在多長？A.10分鐘B.30分鐘C.1小時D.2小時8.下列哪種試劑常用于電鏡樣品的滲透？A.甲醇B.丙酮C.尿素D.蔗糖9.電鏡樣品的包埋劑應(yīng)具備哪些特性？A.高滲透性B.良好的電導(dǎo)性C.固化后透明度D.快速凝固10.電鏡樣品的染色時間一般控制在多長？A.5分鐘B.10分鐘C.30分鐘D.1小時二、多選題（每題3分，共10題）1.電鏡樣品制備過程中，常用的固定液有哪些？A.戊二醛B.甲醛C.丙酮D.鋨酸2.超薄切片的步驟包括哪些？A.樣品固定B.脫水C.浸透D.脫蠟E.切片3.電鏡樣品的染色技術(shù)包括哪些？A.鉛鹽染色B.鐵染色C.甲基綠染色D.熒光染色4.電鏡樣品制備中，常用的包埋劑有哪些？A.Epon812B.Araldite502C.Polybed812D.LR白膠5.電鏡樣品的滲透步驟應(yīng)注意哪些？A.滲透時間B.滲透溫度C.滲透壓力D.滲透劑濃度6.電鏡樣品的脫水步驟應(yīng)遵循什么原則？A.梯度脫水B.快速脫水C.緩慢脫水D.無水乙醇替代7.電鏡樣品的染色劑有哪些？A.醋酸鈾B.鉛檸檬酸C.鋨酸D.甲基綠8.電鏡樣品制備的注意事項包括哪些？A.避免樣品污染B.控制溫度C.防止樣品收縮D.優(yōu)化染色時間9.電鏡樣品的包埋步驟包括哪些？A.調(diào)節(jié)包埋劑比例B.倒置包埋C.真空干燥D.熱聚合10.電鏡樣品的切片技術(shù)包括哪些？A.超薄切片機操作B.刀片選擇C.樣品固定D.切片厚度控制三、判斷題（每題1分，共10題）1.電鏡樣品的固定時間越長越好。2.超薄切片的厚度與電鏡分辨率成正比。3.電鏡樣品的染色劑越多越好。4.電鏡樣品的包埋劑應(yīng)具有良好的透光性。5.電鏡樣品的脫水過程應(yīng)快速進行。6.超薄切片機的刀片需要定期更換。7.電鏡樣品的染色時間一般不超過30分鐘。8.電鏡樣品的包埋劑應(yīng)快速固化。9.電鏡樣品的滲透過程應(yīng)避免樣品收縮。10.電鏡樣品的染色劑應(yīng)選擇高導(dǎo)電性試劑。四、簡答題（每題5分，共5題）1.簡述電鏡樣品制備的基本步驟。2.簡述電鏡樣品脫水的原則和步驟。3.簡述電鏡樣品包埋的注意事項。4.簡述電鏡樣品染色的作用和常用方法。5.簡述電鏡樣品切片的技術(shù)要點。五、論述題（每題10分，共2題）1.論述電鏡樣品固定對超微結(jié)構(gòu)觀察的影響。2.論述電鏡樣品染色技術(shù)的優(yōu)化要點。答案與解析一、單選題1.B戊二醛固定能更好地固定細胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)，常用于電鏡樣品制備。2.B電鏡樣品脫水應(yīng)使用梯度溶液，從低濃度到高濃度逐步進行，避免樣品收縮。3.D超薄切片的厚度一般為50-100nm，適合電鏡觀察。4.A銅網(wǎng)是電鏡樣品載網(wǎng)最常用的材質(zhì)，具有良好的導(dǎo)電性和支撐性。5.C鉛鹽染色主要用于顯示細胞器的膜結(jié)構(gòu)，增強電鏡圖像的對比度。6.B超薄切片機的刀片材料通常采用碳化鎢，硬度高且鋒利。7.C電鏡樣品的固定時間一般控制在1小時左右，確保細胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。8.C尿素常用于電鏡樣品的滲透，幫助固定液進入細胞內(nèi)部。9.C電鏡樣品的包埋劑應(yīng)具備良好的透明度，避免影響圖像觀察。10.C電鏡樣品的染色時間一般控制在30分鐘左右，避免過度染色。二、多選題1.A、B、D戊二醛、甲醛和鋨酸是電鏡樣品常用的固定液。2.A、B、C、E電鏡樣品超薄切片步驟包括固定、脫水、浸透、脫蠟和切片。3.A、B、C電鏡樣品染色技術(shù)包括鉛鹽染色、鐵染色和甲基綠染色。4.A、B、C電鏡樣品常用的包埋劑包括Epon812、Araldite502和Polybed812。5.A、B、C電鏡樣品滲透步驟應(yīng)注意滲透時間、滲透溫度和滲透壓力。6.A、B、C電鏡樣品脫水步驟應(yīng)遵循梯度脫水、快速脫水和緩慢脫水的原則。7.A、B、C電鏡樣品染色劑包括醋酸鈾、鉛檸檬酸和鋨酸。8.A、B、C、D電鏡樣品制備的注意事項包括避免污染、控制溫度、防止收縮和優(yōu)化染色時間。9.A、B、C、D電鏡樣品包埋步驟包括調(diào)節(jié)包埋劑比例、倒置包埋、真空干燥和熱聚合。10.A、B、C、D電鏡樣品切片技術(shù)包括超薄切片機操作、刀片選擇、樣品固定和切片厚度控制。三、判斷題1.×電鏡樣品的固定時間過長可能導(dǎo)致細胞結(jié)構(gòu)變形。2.√超薄切片的厚度與電鏡分辨率成正比，越薄分辨率越高。3.×電鏡樣品的染色劑應(yīng)根據(jù)需求選擇，過多可能導(dǎo)致圖像失真。4.√電鏡樣品的包埋劑應(yīng)具有良好的透光性，避免影響圖像觀察。5.×電鏡樣品的脫水過程應(yīng)緩慢進行，避免樣品收縮。6.√超薄切片機的刀片需要定期更換，確保切片質(zhì)量。7.√電鏡樣品的染色時間一般不超過30分鐘，避免過度染色。8.×電鏡樣品的包埋劑應(yīng)緩慢固化，避免樣品變形。9.√電鏡樣品的滲透過程應(yīng)避免樣品收縮，影響觀察效果。10.×電鏡樣品的染色劑應(yīng)選擇高對比度試劑，而非高導(dǎo)電性試劑。四、簡答題1.電鏡樣品制備的基本步驟：固定→脫水→浸透→包埋→切片→染色→觀察。2.電鏡樣品脫水的原則和步驟：原則是梯度脫水，步驟包括用低濃度乙醇→高濃度乙醇→純乙醇逐步脫水，最后干燥。3.電鏡樣品包埋的注意事項：選擇合適的包埋劑、調(diào)節(jié)比例、避免氣泡、真空干燥、控制聚合溫度和時間。4.電鏡樣品染色的作用和常用方法：作用是增強圖像對比度，常用方法包括醋酸鈾染色和鉛鹽染色。5.電鏡樣品切片的技術(shù)要點：選擇鋒利刀片、控制切片厚度、避免樣品變形、優(yōu)化切片速度。五、論述題1.