(10)申請公布號CN102659858A(71)申請人南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司地址210046江蘇省南京市棲霞區(qū)堯化街道甘家邊108號05幢6樓(72)發(fā)明人劉東鋒吳艷波CO7H1/08(2006.01)權利要求書1頁說明書2頁(54)發(fā)明名稱一種木麻黃素的制備方法(57)摘要本發(fā)明涉及一種木麻黃素的制備方法：將旌機溶劑萃取，萃取物采用硅膠柱層析，用氯仿-甲21.一種木麻黃素的制備方法，其特征在于包括以下步驟：(1)取旌節(jié)花科植物的葉粉碎，用50-80%乙醇溶液提取2-4次，減壓回收乙醇得到濃縮(2)將濃縮液用有機溶劑萃取，萃取物采用硅膠柱層析，用氯仿-甲醇洗脫，收集流分濃縮干燥得到粗提物；(3)上述粗提物采用高速逆流色譜法進行分離，將乙酸乙酯一正丁醇-0.004M三氟乙酸(3-7:8-15:15)組成的溶劑系統(tǒng)在分液漏斗中充分振蕩后靜置，分層，上相為固定相，下2.根據權利要求1中所述的一種木麻黃素的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中提取方法可選超聲波提取或回流提取。3.根據權利要求1中所述的一種木麻黃素的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中有機溶劑為正丁醇，氯仿-甲醇的體積比為3-7:4。3一種木麻黃素的制備方法技術領域[0001]本發(fā)明涉及一種木麻黃素的制備方法，尤其涉及一種應用高速逆流色譜法從旌節(jié)花植物中分離制備木麻黃素的方法。背景技術物，該科植物是被子植物門木蘭綱堇菜目下的一個科，多為灌木或小喬木，有時為攀援狀灌木。該科約有200種，該科為東亞特有科，僅1屬，有15種。主要分布中心為中國的西南地區(qū)和日本。中國有11種，分布于秦嶺以南的廣大地區(qū)，而以西南地區(qū)(云南和四川)為最盛。該科植物喜馬山旌節(jié)花、云南旌節(jié)花、柳葉旌節(jié)花和中國旌節(jié)花等的莖、枝髓常代傳統(tǒng)中藥[0003]木麻黃素(Casuarictin):類白色無定形粉末，[α]D+35.2(c=0.2,甲醇)。分子式：C??H??O?6,分子量：936.65,木麻黃素屬于鞣質類物質，其對黑色素瘤RPMI-7951的ED?。為0.51μg/mL;且在10mg/kg時，對荷S-180小鼠的延命率為75.8%。該藥物的多種藥理作用是其的開發(fā)具有重要的意義。[0005]高速逆流色譜技術(HSCCC)是一種不需任何載體的液液分配分離技術，利用單向流體動力學平衡原理，基于樣品在旋轉螺旋管內的相對移動而互不混溶的兩相中分配系數的不同而實現分離，其分離效率和速度可以與HPLC相媲美。HSCCC分離效率高，產品純度高，不存在載體對樣品的吸附和污染，制備量大和溶劑消耗少，操作簡單，能從極復雜的混合物中分離出特定的組分。它與一般色譜的分離方式不同，特別適用于制備級的分離，已被廣泛應用于中藥與天然產物的分離純化過程中。發(fā)明內容[0006]本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種木麻黃素的制備方法。[0007]本發(fā)明是通過以下技術方案實現的：(1)取旌節(jié)花科植物的葉粉碎，用50-80%乙醇溶液提取2-4次，減壓回收乙醇得到濃縮(2)將濃縮液用有機溶劑萃取，萃取物采用硅膠柱層析，用氯仿-甲醇洗脫，收集流分濃縮干燥得到粗提物；(3)上述粗提物采用高速逆流色譜法進行分離，將乙酸乙酯一正丁醇-0.004M三氟乙酸(3-7:8-15:15)組成的溶劑系統(tǒng)在分液漏斗中充分振蕩后靜置，分層，上相為固定相，下[0008]所述步驟(1)中提取方法可選超聲波提取或回流提取。[0009]所述步驟(2)中有機溶劑為正丁醇，氯仿-甲醇的體積比為3-7:4。4[0010]本發(fā)明的優(yōu)點在于：4、本發(fā)明制備得到的高純度的單體成分可作為對照品使用。[0011]下面將結合具體實施方式進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。具體實施方式[0012]實施例1取旌節(jié)花科植物的葉1kg,粉碎，用80%乙醇溶液超聲波提取4次，減壓回收乙醇得到濃縮液，用正丁醇萃取，萃取液回收正丁醇，再采用硅膠柱層析，用氯仿-甲醇(3:4)洗脫，收集流分濃縮干燥得到粗提物。將乙酸乙酯一正丁醇-0.004M三氟乙酸(3:8:15)組成的溶劑系統(tǒng)在分液漏斗中充分振蕩后靜置，分層，上相為固定相，下相為流動相，使進樣閥處于進樣狀態(tài)，將固定相以10ml/min的流速灌滿逆流色譜儀的色譜分離柱，開啟速度控制器，使螺旋管柱順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為850r/min時，以流速為2.5ml/min泵入流動相，將粗提物用下相溶解，并通過進樣閥進樣，根據檢測器紫外光譜圖進行收集，合并相同成分，得到木麻黃素單體95mg。[0013]實施例2取旌節(jié)花科植物的葉1kg,粉碎，用50%乙醇溶液回流提取2次，減壓回收乙醇得到濃縮液，用正丁醇萃取，萃取液回收正丁醇，再采用硅膠柱層析，用氯仿-甲醇(7:4)洗脫，收集流分濃縮干燥得到粗提物。將乙酸乙酯一正丁醇-0.004M三氟乙酸(7:15:15)組成的溶劑系統(tǒng)在分液漏斗中充分振蕩后靜置，分層，上相為固定相，下相為流動相，使進樣閥處于進樣狀態(tài)，將固定相以10ml/min的流速灌滿逆流色譜儀的色譜分離柱，開啟速度控制器，使螺旋管柱順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為850r/min時，以流速為2.5ml/min泵入流動相，將粗提物用下相溶解，并通過進樣閥進樣，根據檢測器紫外光譜圖進行收集，合并相同成分，得到木麻黃素單體109mg。[0014]實施例3取旌節(jié)花科植物的葉10kg,粉碎，用60%乙醇溶液超聲波提取3次，減壓回收乙醇得到濃縮液，用正丁醇萃取，萃取液回收正丁醇，再采用硅膠柱層析，用氯仿-甲醇(5:4)洗脫，收集流分濃縮干燥得到粗提物。將乙酸乙酯一正丁醇-0.004M三氟乙酸(5:11:15)組成的溶劑系統(tǒng)在分液漏斗中充分振蕩后靜置，分層，上相為固定相，下相為流動相，使進樣閥處于進樣狀態(tài)，將固定相以10ml/min的流