《水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)

技術(shù)要求》

征求意見稿

編制說明

《水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)要求》標(biāo)準(zhǔn)編制組

二零二四年二月

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1工作簡況

1.1任務(wù)來源

本標(biāo)準(zhǔn)由中國環(huán)境監(jiān)測總站提出，并由中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會歸口，由中國環(huán)境監(jiān)測總站、

南京大學(xué)、南京易基諾環(huán)?？萍加邢薰镜葐挝还餐鸩?。

1.2工作過程

按照標(biāo)準(zhǔn)編寫要求，中國環(huán)境監(jiān)測總站組織相關(guān)科研人員組成了標(biāo)準(zhǔn)編制組。編制組成

員由多年從事環(huán)境DNA水生生物監(jiān)測的研究技術(shù)人員組成，按照GB/T1.1—2020給出的最

新規(guī)定起草和編制。在前期項(xiàng)目研究、文獻(xiàn)資料分析以及實(shí)際應(yīng)用的基礎(chǔ)上，編制組討論并

確定了開展標(biāo)準(zhǔn)編制工作的原則、程序、步驟和方法，目前形成標(biāo)準(zhǔn)（征求意見稿）及編制

說明。主要工作如下：

（1）研究基礎(chǔ)

編制組通過環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)實(shí)踐、閱讀文獻(xiàn)和收集國內(nèi)外相關(guān)資料，確定了環(huán)境

DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求的工作內(nèi)容，初步確定了水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)要求方

法的基本框架和流程。

（2）編制啟動

編制組接到標(biāo)準(zhǔn)制定任務(wù)后，立刻組織落實(shí)標(biāo)準(zhǔn)制定工作。確定由中國環(huán)境監(jiān)測總站、

南京大學(xué)、南京易基諾環(huán)?？萍加邢薰镜葹橹饕鸩輪挝?，并由來自高校、科研機(jī)構(gòu)、企

業(yè)的相關(guān)專家組成起草組，形成標(biāo)準(zhǔn)初稿。

（3）理論研究

標(biāo)準(zhǔn)起草組通過各種途徑，收集并學(xué)習(xí)了《檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第1

部分：通用要求》（GB/T32146.1-2015），《檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第3部分：

食品實(shí)驗(yàn)室》（GB/T32146.3-2015），《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》（GB50073），《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實(shí)

驗(yàn)室技術(shù)要求》（GBT19495.2）和《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489）等實(shí)驗(yàn)室建設(shè)相

關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，收集和研究了國內(nèi)外環(huán)境DNA或PCR檢測實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)要求。經(jīng)過資料

分析和共性總結(jié)，初步對水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)要求進(jìn)行梳理和提煉。理順了

標(biāo)準(zhǔn)制定的方向和思路，形成標(biāo)準(zhǔn)編制大綱。

（4）調(diào)研/實(shí)驗(yàn)研究

為了使標(biāo)準(zhǔn)具有科學(xué)性和可操作性，在2019年至2023年，標(biāo)準(zhǔn)起草組在已有的實(shí)驗(yàn)室

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建設(shè)資料分析的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步聯(lián)合多家編制單位將已構(gòu)建的環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行狀況進(jìn)

行分析，與相關(guān)技術(shù)和管理人員進(jìn)行深入地探討，調(diào)整已有方法。

（5）標(biāo)準(zhǔn)草稿

2023年4月~11月，標(biāo)準(zhǔn)起草組召開起草工作研討會，就標(biāo)準(zhǔn)起草過程中存在的問題進(jìn)

行集中研討。標(biāo)準(zhǔn)起草組針對環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置、操作人員要求、安全防護(hù)和實(shí)驗(yàn)

室配置要求，進(jìn)一步完善環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)基本要求及技術(shù)要求，經(jīng)過若干次編制組內(nèi)

部研討會和專家咨詢會，形成了標(biāo)準(zhǔn)草稿。

（6）標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)

2023年12月，召開標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)論證會，專家組一致同意標(biāo)準(zhǔn)通過立項(xiàng)論證。

2標(biāo)準(zhǔn)制定的必要性

2.1標(biāo)準(zhǔn)制定的意義和目的

環(huán)境DNA技術(shù)已廣泛應(yīng)用于水生生物多樣性研究?；谶z傳學(xué)的環(huán)境DNA

(EnvironmentalDNA,eDNA)技術(shù)為監(jiān)測和鑒定水體中物種多樣性提供了新型替代手段。如

eDNA宏條形碼技術(shù)（Metabarcoding）采集水樣、沉積物、生物膜或生物組織樣品，設(shè)計(jì)通

用引物擴(kuò)增特定基因片段，借助高通量測序獲得DNA條形碼序列，通過數(shù)據(jù)庫比對可以精

準(zhǔn)地鑒別生物物種和環(huán)境中的群落結(jié)構(gòu)信息。相比傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)，該方法具有經(jīng)濟(jì)高效，流程

標(biāo)準(zhǔn)化和精確性高等優(yōu)勢，極有可能會根本性地改變未來生物監(jiān)測、生態(tài)評估和環(huán)境管理的

模式。自2011年以來，全球環(huán)境DNA條形碼研究的相關(guān)論文超過1700余篇，其中美國發(fā)

表的論文數(shù)最多，其次為歐洲，我國發(fā)表論文數(shù)占全球總數(shù)的5%（圖1）。盡管eDNA宏條

形碼技術(shù)在微生物、藻類、無脊椎動物、魚類甚至哺乳動物等各個(gè)類群中表現(xiàn)出了精確的物

種分辨能力，在物種多樣性監(jiān)測中具有廣泛的應(yīng)用前景。但是目前該方法還處在實(shí)驗(yàn)室階段，

不同的實(shí)驗(yàn)室采取的研究方法不一致，很難實(shí)現(xiàn)跨時(shí)間和空間尺度的大規(guī)模調(diào)查和比對，無

法保證監(jiān)測數(shù)據(jù)的持續(xù)性、有效性，難以推廣應(yīng)用到生物監(jiān)測和管理部門。因此，標(biāo)準(zhǔn)化和

規(guī)范化是eDNA宏條形碼監(jiān)測方法推廣和應(yīng)用的前提。

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（A）（B）

圖1全球及我國環(huán)境DNA宏條形碼研究現(xiàn)狀

環(huán)境DNA技術(shù)已成為生物多樣性研究最廣泛使用的技術(shù)之一，該技術(shù)的優(yōu)越性建立在

嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室條件基礎(chǔ)上。環(huán)境DNA技術(shù)實(shí)驗(yàn)室操作核心是PCR技術(shù)，由于PCR技術(shù)高

度敏感性，其要求高、影響因素多，從樣品制備到結(jié)果的產(chǎn)生，任何一處細(xì)微的失誤均會造

成結(jié)果的偏差，導(dǎo)致樣品的假陽性和假陰性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室研究過程中，很多操作都會產(chǎn)生氣

溶膠，比如離心、混勻等操作。為保證環(huán)境安全，環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)需獨(dú)立區(qū)域設(shè)

計(jì)，避免與其它環(huán)境的交叉混雜，因此環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染，

實(shí)驗(yàn)室的平面布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞這個(gè)核心問題進(jìn)行的[8-10]。傳

統(tǒng)分子生物學(xué)PCR實(shí)驗(yàn)室通常分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)五大區(qū)

域，并在各分區(qū)設(shè)置緩沖間。環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室所有實(shí)驗(yàn)室步驟都必須采用單向工作流程（圖

2），如DNA提取必須與所有后續(xù)步驟在物理上分開，材料和人員都不能朝相反的方向流動。

環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室在傳統(tǒng)PCR實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)上，增加并細(xì)化了不同類型環(huán)境DNA樣品處

理、質(zhì)量控制、檢測及數(shù)據(jù)分析等分區(qū)，更加符合環(huán)境DNA操作流程與習(xí)慣。

環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)基本要求與生物安全實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一致。生物安全實(shí)

驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室按國家衛(wèi)生部的要求，各實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的，不能直通，每個(gè)獨(dú)

立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋，進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向

順序，避免發(fā)生交叉污染。環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、實(shí)驗(yàn)條件、技術(shù)操作規(guī)范是環(huán)境DNA技

術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化的基礎(chǔ)。

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圖2環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室單向工作流程，引至瑞士環(huán)境署發(fā)布的《EnvironmentalDNA

applicationsinbiomonitoringandbioassessmentofaquaticecosystems》

環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室對微生物安全級別的要求區(qū)別于生物安全實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室。根據(jù)

對所操作生物因子采取的護(hù)措施，將實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分為一級、二級、三級和四級，

一級護(hù)水平最低，四級防護(hù)水平最高。依據(jù)國家相關(guān)規(guī)定：一級實(shí)驗(yàn)室適用于操作在通常況

下不會引起人類或者動物病的微生物；二級實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動物疾病，

但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起

嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物；三級實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或

者動物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物；

四級實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或

者已經(jīng)宣布消滅的微生物。環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室?guī)缀醪簧婕拔⑸锇踩珕栴}（廢棄物處理除外），

生物安全防護(hù)水平不做特殊要求，通常按照一級實(shí)驗(yàn)室建設(shè)即可。

2.2國外研究進(jìn)展

在國際上，各國都正在或已經(jīng)制定基于環(huán)境DNA的生物多樣性檢測實(shí)驗(yàn)室相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與

規(guī)范。早在2004年，美國環(huán)保署（EPA）就針對環(huán)境樣品PCR實(shí)驗(yàn)室制定了相應(yīng)質(zhì)量保證

/質(zhì)量控制指南，2015年由美國內(nèi)務(wù)部（USI）和美國地質(zhì)調(diào)查局（USGS）頒布了聯(lián)合華盛

頓州立大學(xué)所形成的環(huán)境DNA采樣技術(shù)規(guī)范；2020年瑞士環(huán)境署頒發(fā)了聯(lián)合蘇黎世大學(xué)等

單位形成的環(huán)境DNA水生生態(tài)生物監(jiān)測和評價(jià)技術(shù)導(dǎo)則，其中明確規(guī)定環(huán)境DNA分子實(shí)

驗(yàn)室工作要求。2021年歐盟科技合作聯(lián)盟（COST）也頒發(fā)了環(huán)境DNA生物評估方法的指

南。

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2.3國內(nèi)研究進(jìn)展

國內(nèi)目前尚無已發(fā)布的相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)或團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。

2.4現(xiàn)有工作基礎(chǔ)

目前，編制組已編制并發(fā)布3項(xiàng)基于環(huán)境DNA技術(shù)的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，分別為《淡水生物

DNA條形碼構(gòu)建技術(shù)規(guī)程》T/CSES80-2023，《淡水生物監(jiān)測環(huán)境DNA宏條形碼法》T/CSES

81-2023，《基于環(huán)境DNA的淡水生物評價(jià)技術(shù)指南》T/CSES82-2023。團(tuán)隊(duì)基于環(huán)境DNA

技術(shù)的基本流程，針對流程中重要參數(shù)開展了大量實(shí)驗(yàn)探究，并將環(huán)境DNA技術(shù)推廣應(yīng)用

于我國多個(gè)重點(diǎn)流域的水生生物多樣性監(jiān)測和水生態(tài)健康評估[1-7]，積累了大量的環(huán)境DNA

技術(shù)實(shí)驗(yàn)室操作、實(shí)驗(yàn)室使用及數(shù)據(jù)分析等實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，對于標(biāo)準(zhǔn)的合理性、可操作性提供了

有力的技術(shù)保障。同時(shí)，整理收集了國內(nèi)外基于PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，或環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室技術(shù)

要求，也為標(biāo)準(zhǔn)的編制提供了很好基礎(chǔ)支撐。

3標(biāo)準(zhǔn)編制依據(jù)和原則

3.1編制目的

水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)的建立和完善對于環(huán)境DNA生物多樣性監(jiān)測和生

物評價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)化具有重要意義。本標(biāo)準(zhǔn)以水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)要求為目標(biāo)，

規(guī)范環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)，將促進(jìn)環(huán)境DNA技術(shù)在我國生物監(jiān)測和評價(jià)體系的標(biāo)準(zhǔn)

化與應(yīng)用推廣。

3.2編制原則

本標(biāo)準(zhǔn)按照《中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)管理辦法（試行）》的要求和規(guī)定，確定標(biāo)準(zhǔn)的組

成要素。

在標(biāo)準(zhǔn)制定過程中遵循了以下幾個(gè)原則：

（1）科學(xué)性和規(guī)范性；

（2）保證標(biāo)準(zhǔn)的先進(jìn)性和實(shí)用性；

（3）與國際現(xiàn)行的節(jié)水政策、產(chǎn)業(yè)政策等相結(jié)合；

（4）盡量與相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)、法規(guī)接軌；

（5）充分考慮我國現(xiàn)有環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)的發(fā)展水平，符合我國水生生物監(jiān)測

行業(yè)規(guī)范化發(fā)展需求。

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4標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容的制定依據(jù)

4.1范圍

本文件規(guī)定了環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的總體原則、實(shí)驗(yàn)室分區(qū)、實(shí)驗(yàn)室操作、房屋配件、

實(shí)驗(yàn)室輔助設(shè)施等方面的技術(shù)要求。

本文件適用于環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室的新建、改建和擴(kuò)建的設(shè)計(jì)、建設(shè)，包括但不限于環(huán)境

監(jiān)測中心、高校和第三方檢測機(jī)構(gòu)等。

4.2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包

括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682-1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T15481-2000檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求

GB/T19495.2轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

GB/T19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第1部分：通用要求

GB/T32146.3-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第3部分：食品實(shí)驗(yàn)室

SN/T4835實(shí)驗(yàn)室生物廢棄物管理要求

4.3術(shù)語和定義

4.3.1水生生物hydrobiont

全部或部分生活在各種水域中的動物和植物。包括淡水生物和海洋生物。

4.3.2環(huán)境DNAenvironmentalDNA；eDNA

環(huán)境介質(zhì)（水、土壤、沉積物、生物膜、空氣等）或混合生物組織中存在的生物遺傳物

質(zhì)（DNA）。

[來源：T/CSES81—2023，3.3]

瑞士環(huán)境聯(lián)邦蜀發(fā)布的指南《EnvironmentalDNAapplicationsinbiomonitoringand

bioassessmentofaquaticecosystems》中定義“EnvironmentaDNA”為“Poolofgenomic

materialoriginatedfromlivingorganismsortheirtraces(suchasskincells,mucus,scales,urine,

faeces,saliva,gametes,ordeceasedremains)presentinvariousenvironments,suchas

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water,sediment,soil,orair”，即“來源于生物活體或其遺跡(如皮膚細(xì)胞、粘液、鱗片、尿液、

糞便、唾液、配子或死亡遺骸)的基因組的混合物，存在于各種環(huán)境中，如水、沉積物、土

壤或空氣”歐洲科技合作機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南《ApracticalguidetoDNA-basedmethods

forbiodiversityassessment》中的定義為“DNAisolatedfromanenvironmentalsamplesuchas

waterorsediment.MayincludebothOrganismalDNAderivedfromwholeorganismsinthesample

andextra-organismalDNAwhichiscapturedseparatelyfromtheorganismitoriginatedfrom.Extra-

organismalDNAmaybeintheformofcells,organelles,orfree-floatingDNA,originatingfrom

sourcessuchasshedskin.scales,blood,mucus,faeces,urine,salivaandgametes”，即“從環(huán)境樣品

(如水或沉積物)中分離的DNA?？砂▉碜詷悠分姓麄€(gè)生物個(gè)體的體內(nèi)DNA和其來源的

體外DNA。體外DNA可以是細(xì)胞、細(xì)胞器或自由漂浮的DNA，來源于皮膚鱗片、血液、

粘液、糞便、尿液、唾液和配子”。結(jié)合以上內(nèi)容，本文件將其定義進(jìn)一步精簡化為“環(huán)境

介質(zhì)《水、土壤、沉積物、生物膜、空氣等)或混合生物組織中存在的生物遺傳物質(zhì)(DNA)”。

4.3.3環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室environmentalDNALaboratory

利用環(huán)境DNA技術(shù)進(jìn)行生物多樣性樣品處理、檢測的實(shí)驗(yàn)室。

4.4總體原則

環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室的功能布局、分區(qū)隔離、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)、氣流控制等應(yīng)以避免污染為

首要原則。

a)實(shí)驗(yàn)室宜以室為單元，進(jìn)行布局規(guī)劃和功能分區(qū)，一般應(yīng)包括以下單元：試劑儲存

和制備室、前處理室、提取純化室、檢測室、質(zhì)量控制室和數(shù)據(jù)分析室。環(huán)境DNA

實(shí)驗(yàn)室的典型布局圖見附錄A。

b)試劑儲存和制備室、提取純化室、檢測室和質(zhì)量控制室應(yīng)具備移液、渦旋振蕩、瞬

時(shí)離心功能。移液器需包含1~10μl、1~20μl、20~200μl和100~1000μl的規(guī)格，根

據(jù)需求選配0.1~2.5μl、1~100μl或其他規(guī)格移液器。渦旋振蕩速度通常不小于1000

rpm/分,瞬時(shí)離心速度不小于1000rpm/分。

c)遵守樣品單向流動原則。

d)有條件的實(shí)驗(yàn)室宜在各工作區(qū)域設(shè)置緩沖間，實(shí)驗(yàn)室定期通風(fēng)。

e)工作人員應(yīng)自覺遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，實(shí)驗(yàn)操作中戴一次性手套、口罩，在前處理

室和提取純化室操作時(shí)要穿隔離衣、戴防護(hù)眼鏡。

f)正確配制消毒液，定期對工作環(huán)境消毒。

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環(huán)境DNA技術(shù)流程主要涉及基因擴(kuò)增步驟，功能區(qū)設(shè)置參考GB/T19495.2中實(shí)驗(yàn)室功

能區(qū)域設(shè)置要求，結(jié)合環(huán)境DNA技術(shù)流程的特殊性，將實(shí)驗(yàn)室功能區(qū)域劃分為六大區(qū)域：

試劑儲存和制備室、前處理室、提取純化室、檢測室、質(zhì)量控制室和數(shù)據(jù)分析室。實(shí)驗(yàn)室建

設(shè)功能分區(qū)可用于實(shí)驗(yàn)室的新建、改建和擴(kuò)建。

每一區(qū)域都須有專用的儀器設(shè)備工作區(qū)域及各區(qū)域所用的儀器設(shè)備必須有明確的標(biāo)記，

避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。各區(qū)域?qū)嶒?yàn)臺表面應(yīng)可耐受次氯酸鈉、雙氧水等化

學(xué)物質(zhì)及紫外線的消毒清潔作用。不同功能的核酸檢驗(yàn)工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的工作室，并有

明顯的標(biāo)志，各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連,需安裝物品傳遞艙。

按國家衛(wèi)生部的要求，各實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的，不能直通，每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有

專門的房間供工作人員換工作服和鞋，進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向順序。

實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和環(huán)境要求應(yīng)符合GB/T15481-2000中的規(guī)定，有條件的宜在所分隔的

各工作區(qū)域設(shè)置緩沖間，緩沖間的壓力為負(fù)壓(或上設(shè)抽風(fēng)裝置)，與其相連的工作間為正壓，

工作間與緩沖間之間宜安裝磁性連鎖裝置受實(shí)驗(yàn)場所限制而無條件設(shè)置緩沖間的實(shí)驗(yàn)室，在

對實(shí)驗(yàn)室區(qū)域進(jìn)行功能劃分后，應(yīng)根據(jù)各實(shí)驗(yàn)分區(qū)規(guī)定設(shè)置實(shí)驗(yàn)室的壓力。非實(shí)驗(yàn)人員不應(yīng)

進(jìn)入各實(shí)驗(yàn)工作區(qū)。

避免污染是環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)首要考慮重點(diǎn)。由于基因擴(kuò)增技術(shù)的高度敏感性，

基因擴(kuò)增技術(shù)要求高、影響因素多，從樣品制備到結(jié)果的產(chǎn)生，任何一處細(xì)微的失誤均會造

成結(jié)果的偏差，導(dǎo)致樣品的假陽性和假陰性結(jié)果?；驍U(kuò)增實(shí)驗(yàn)室研究過程中，很多操作都

會產(chǎn)生氣溶膠，比如離心、混勻等操作。為保證環(huán)境安全，環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)需獨(dú)

立區(qū)域設(shè)計(jì)，避免與其余環(huán)境的交叉混雜。

4.5分區(qū)設(shè)置要求

4.5.1試劑儲存和制備室

應(yīng)具備純水制備、冷凍/冷藏儲存、稱量、磁力攪拌、制冰和水浴等功能。純水制備應(yīng)符

合GB/T66821992中一級水的規(guī)格，去離子水的電阻應(yīng)達(dá)到18.2Ω。冷凍儲存需具備-20℃

和-80℃條件，冷藏儲存需具備4℃條件。稱量精度為萬分之一。磁力攪拌轉(zhuǎn)速應(yīng)不小于2000

rpm/分。制冰機(jī)出冰速度應(yīng)不低于30kg/天。水浴溫度最大允許誤差為±0.5℃。

面積應(yīng)不小于5m2。含核酸的樣品禁止帶入本室。所有試劑及原材料應(yīng)直接進(jìn)入本室，

不能經(jīng)過前處理室、提取純化室、檢測室、質(zhì)量控制室和數(shù)據(jù)分析室。

根據(jù)美國EPA《QualityAssurance/QualityControlGuidanceforLaboratoriesPerforming

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PCRAnalysesonEnvironmentalSamples》中“ReagentPreparationRoom”規(guī)定，應(yīng)指定試劑

準(zhǔn)備室用于制備和儲存PCR試劑，包括預(yù)混液（除樣品外PCR所需的所有試劑的混合物）。

應(yīng)在此房間內(nèi)向PCR管中加入預(yù)混液。為了防止交叉污染并避免重復(fù)的冷凍和解凍，試劑

儲備溶液被等分到“反應(yīng)體系”中，并儲存在此房間中以備后用。建議房間處于正壓下，防

止污染。

實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備低溫冰箱、冷藏冰箱、純水設(shè)備、移液設(shè)備為本實(shí)驗(yàn)室必備設(shè)備，主要

用于試劑的儲存、配制、轉(zhuǎn)移和分裝。必要時(shí)可增加天平、水浴鍋、磁力攪拌器、制冰機(jī)、

離心機(jī)或自動化設(shè)備等試劑準(zhǔn)備必要設(shè)備。還需設(shè)置實(shí)驗(yàn)臺用于試劑制備等操作，因此，本

實(shí)驗(yàn)室建筑面積應(yīng)不小于5m2。

試劑制備所需純水應(yīng)符合GB/T66821992中一級水的規(guī)格，去離子水的電阻應(yīng)達(dá)到18.2

Ω。試劑配制常用的稱量設(shè)備為萬分之一天平，稱量精度為0.0001g。孵育過程需提供70℃

恒溫條件，可選水浴或金屬浴，要求溫度控制誤差在±0.5℃之間。為均勻混合試劑，磁力攪

拌轉(zhuǎn)速應(yīng)不小于2000rpm/分。PCR體系配制過程中需一直保持低溫環(huán)境，應(yīng)保證每天實(shí)驗(yàn)

室冰塊供應(yīng)量不小于30kg。

根據(jù)GB/T19489規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)域的氣壓與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于30Pa，

與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于10Pa。在核心工作區(qū)域外通常設(shè)置緩沖區(qū)域，且試劑準(zhǔn)

備區(qū)域通常為正壓，因此，按照試劑單向流方向，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間設(shè)計(jì)不同壓力梯度來實(shí)現(xiàn)

單向氣流組織方向，環(huán)境DNA試劑準(zhǔn)備室通常設(shè)置正壓10~30Pa。

4.5.2前處理室

應(yīng)具備樣品儲存、樣品過濾、凍干、稱量、組織處理和烘干等功能。樣品儲存需滿足4℃

和-20℃儲存條件。針對不同類型樣品設(shè)置不同操作功能區(qū)，如環(huán)境水樣處理操作區(qū)，土壤、

糞便、沉積物樣品操作區(qū)，生物組織樣品操作區(qū)等。水樣過濾負(fù)壓應(yīng)達(dá)到-0.9KPa以下，需

適配環(huán)境DNA一體化過濾器，宜具備廢液直排功能。土壤、糞便、沉積物冷凍干燥的溫度

應(yīng)不高于-40℃，干燥過程中的升華溫度應(yīng)不高于60℃。稱量功能參考5.1要求。烘箱溫控

范圍應(yīng)滿足室溫~300℃，溫度控制精度最大允許誤差為±0.5℃，烘箱容積不小于100L。

面積應(yīng)不小于5m2。需負(fù)壓，宜安裝排風(fēng)系統(tǒng)，如萬向排風(fēng)罩。本區(qū)域?qū)儆诟呶廴緟^(qū)，

嚴(yán)禁將核酸樣品帶入本實(shí)驗(yàn)室。

環(huán)境DNA樣品通常以固體、液體如水樣、濾膜、土壤、糞便、沉積物和生物組織樣品

的形式送至實(shí)驗(yàn)室，不同類型的樣品處理方式不同。水樣需要首先使用過濾設(shè)備獲得環(huán)境

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DNA，宜使用適配的環(huán)境DNA一體化過濾器，過濾負(fù)壓需達(dá)到-0.9Kpa以下，研磨、破碎

后進(jìn)行下一步核酸提取處理；土壤、糞便、沉積物樣品需要首先使用冷凍干燥機(jī)將樣品中水

分脫除，所需凍干溫度不高于-40℃，且升華溫度不高于60℃。取部分樣品稱量、分裝，研

磨、破碎后進(jìn)行下一步核酸提取。烘干所需溫度應(yīng)在室溫~300℃之間。生物組織樣品主要包

括浮游動物、浮游植物、底棲動物、魚類、大型水生植物等，生物組織樣品可能涉及到兩方

面的操作，環(huán)境DNA樣品分析、DNA條形碼數(shù)據(jù)庫構(gòu)建。如樣品后續(xù)做環(huán)境DNA樣品分

析，主要包括浮游動物、浮游植物、底棲動物樣品，需脫除酒精，研磨、破碎后進(jìn)行核酸提

取處理；如樣品后續(xù)做DNA條形碼數(shù)據(jù)庫構(gòu)建，浮游動物、浮游植物、底棲動物樣品需單

個(gè)生物個(gè)體挑樣、鑒定，研磨、破碎后核酸提取，大型底棲動物、魚類、大型水生植物需剪

取部分組織，研磨、破碎后核酸提取。因樣品前處理過程極易發(fā)生樣品交叉污染，不同類型

樣品，必須分功能區(qū)處理。

同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室需制定環(huán)境DNA樣品接收流程。美國EPA《QualityAssurance/Quality

ControlGuidanceforLaboratoriesPerformingPCRAnalysesonEnvironmentalSamples》中

“EnvironmentalSampleAcceptanceProtocol”規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定接受環(huán)境樣本進(jìn)行PCR分

析的方案。該方案應(yīng)記錄在實(shí)驗(yàn)室SOP中，并包括樣品驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)和不符合標(biāo)準(zhǔn)的樣品的糾

正措施（例如，回收樣品或隨訪樣品收集者以獲取缺失信息）。在實(shí)驗(yàn)室接收樣品時(shí)，應(yīng)對

樣品進(jìn)行評估，以驗(yàn)證樣品體積是否足夠，樣品是否經(jīng)過適當(dāng)處理和保存（例如，冷藏并運(yùn)

輸過夜），滿足保存時(shí)間要求，并且所有必需的樣品收集信息均由樣品接收者記錄。樣品體

積、樣品處理和保存時(shí)間的規(guī)范將取決于方法，樣品驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)基于每種方法準(zhǔn)備的SOP

中描述的規(guī)范。評估樣品后，記錄有關(guān)樣品接收日期和時(shí)間以及樣品狀況的信息。應(yīng)使用唯

一標(biāo)識符標(biāo)記、記錄和跟蹤示例。

為保證實(shí)驗(yàn)室有足夠空間放置實(shí)驗(yàn)操作臺、操作空間和實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備，本實(shí)驗(yàn)室建筑

面積應(yīng)不小于5m2。

根據(jù)GB/T19489規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)域的氣壓與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于30Pa，

與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于10Pa。在核心工作區(qū)域外通常設(shè)置緩沖區(qū)域，緩沖區(qū)域

通常為負(fù)壓，核心工作區(qū)域?yàn)檎龎?，形成壓差。如無緩沖區(qū)域的話，可設(shè)置負(fù)壓。

4.5.3提取純化室

應(yīng)具備均質(zhì)破碎、水浴、離心、渦旋振蕩、儲存等功能。均質(zhì)破碎應(yīng)滿足一體化環(huán)境DNA

過濾器和普通濾膜均質(zhì)模式，均質(zhì)速度通常不小于6m/s，單次均質(zhì)樣本不低于6個(gè)?？蛇x

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水浴、氣浴和金屬浴等進(jìn)行孵育，溫度控制精度最大允許誤差為±0.5℃，孵育容積不小于3

L。離心速度需≥3500rpm。DNA儲存應(yīng)滿足-20℃或-80℃儲存條件。

面積應(yīng)不小于8m2。需負(fù)壓，宜安裝排風(fēng)系統(tǒng)，如萬向排風(fēng)罩。DNA檢測體系在此區(qū)

域配制，必須蓋好含主反應(yīng)混合液的反應(yīng)管，再進(jìn)入質(zhì)量控制區(qū)。

為獲得高質(zhì)量DNA樣品，需進(jìn)行核酸提取、純化處理。前處理之后的樣品需利用均質(zhì)

破碎儀高速振動以及研磨珠的敲打，達(dá)到對樣品進(jìn)行研磨、裂解、均質(zhì)的目的，大部分樣品

的均質(zhì)速度要求不小于6m/s。DNA提取時(shí)孵育溫度一般要求55-70℃，可選水浴、氣浴和

金屬浴。洗脫過程中離心速度應(yīng)不小于3500rpm，完成DNA提取。

環(huán)境DNA樣品包括但不僅限于DNA樣品，還包括質(zhì)粒、RNA、生物組織等樣品，這

些樣品需短期（三個(gè)月內(nèi)）或長期（三年以上）儲存，為方便樣品后續(xù)使用、查找、核對，

避免樣品損壞、遺失，特設(shè)置環(huán)境DNA樣品儲存室。符合GB/T19495.2-2004中其他區(qū)域

要求可設(shè)置低溫/超低溫冰箱室的規(guī)定。

為保證實(shí)驗(yàn)室有足夠空間放置實(shí)驗(yàn)操作臺、操作空間和實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備，必要時(shí)還需添

加自動化核酸提取設(shè)備，因此，本實(shí)驗(yàn)室建筑面積應(yīng)不小于8m2。

根據(jù)GB/T19489規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)域的氣壓與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于30Pa，

與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于10Pa。在核心工作區(qū)域外通常設(shè)置緩沖區(qū)域，緩沖區(qū)域

通常為負(fù)壓，核心工作區(qū)域?yàn)檎龎海纬蓧翰?。如無緩沖區(qū)域的話，可設(shè)置負(fù)壓。

4.5.4檢測室

應(yīng)具備PCR擴(kuò)增、核酸高通量測序、核酸定量檢測等功能。宜根據(jù)功能設(shè)置實(shí)驗(yàn)分區(qū)。

需配備PCR擴(kuò)增儀、高通量測序儀、熒光定量PCR儀、數(shù)字PCR儀等。

面積應(yīng)不小于10m2。需負(fù)壓，宜安裝排風(fēng)系統(tǒng)，如萬向排風(fēng)罩。本區(qū)域主要為精密設(shè)

備，應(yīng)避免集中擺放，防止工作過程中的震動產(chǎn)生相互影響。

核酸檢測的目的是檢測核酸濃度和評估核酸質(zhì)量，判斷是否可用于后續(xù)PCR擴(kuò)增反應(yīng)，

核酸提取效率因樣品類型、核酸提取程序而異，理想情況下，應(yīng)滿足以下要求：

a.展示目標(biāo)核酸回收的高效率

b.保持核酸完整性并最大限度地減少片段化

c.提供足夠純的核酸，不含PCR抑制劑

d.盡量減少危險(xiǎn)化學(xué)品的使用

e.可重復(fù)

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美國EPA《QualityAssurance/QualityControlGuidanceforLaboratoriesPerformingPCR

AnalysesonEnvironmentalSamples》中“EnvironmentalSampleAcceptanceProtocol”規(guī)定，

應(yīng)指定該室進(jìn)行與PCR擴(kuò)增和PCR后分析相關(guān)的活動。PCR擴(kuò)增儀應(yīng)位于這間實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。

應(yīng)始終佩戴手套和實(shí)驗(yàn)室外套并在離開房間之前移除，以控制其他位置的擴(kuò)增產(chǎn)物污染。所

有用于擴(kuò)增和產(chǎn)品檢測的設(shè)備都應(yīng)該專用于這個(gè)房間，包括可調(diào)節(jié)移液器，帶有堵塞，氣溶

膠屏障或正位移移液器尖端。這個(gè)室應(yīng)該保持在負(fù)壓下。雖然PCR擴(kuò)增和PCR后分析可以

在同一個(gè)室內(nèi)進(jìn)行，但應(yīng)將這些活動分隔在不同的區(qū)域，以減少擴(kuò)增產(chǎn)物的污染風(fēng)險(xiǎn)。

根據(jù)GB/T19489規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)域的氣壓與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于30Pa，

與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于10Pa。在核心工作區(qū)域外通常設(shè)置緩沖區(qū)域，且試劑準(zhǔn)

備區(qū)域通常為正壓，因此，按照試劑單向流方向，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間設(shè)計(jì)不同壓力梯度來實(shí)現(xiàn)

單向氣流組織方向，環(huán)境DNA樣品儲存室通常設(shè)置正壓0~20Pa。

實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備低溫冰箱、冷藏冰箱、純水設(shè)備、移液設(shè)備為本實(shí)驗(yàn)室必備設(shè)備，主要

用于DNA樣品的儲存、配制、轉(zhuǎn)移和分裝。必要時(shí)可增加超凈工作臺、離心機(jī)或自動化設(shè)

備等試劑準(zhǔn)備必要設(shè)備。

4.5.5質(zhì)量控制室

應(yīng)具備凝膠電泳、膠圖掃描、混庫、核酸濃度測定等功能。膠塊制備通常使用微波快速

加熱，電泳電壓應(yīng)滿足100~220V范圍調(diào)節(jié)，膠圖拍照分辨率不低于1080p。1μL混庫體系

移液精度最大允許誤差為±10.0%，10μL混庫體系移液精度最大允許誤差為±1.2%。濃度測

定需配備熒光檢測儀或微量分光光度計(jì)。

面積應(yīng)不小于4m2。需負(fù)壓，宜安裝排風(fēng)系統(tǒng)，如萬向排風(fēng)罩。本區(qū)域?qū)儆诟呶廴緟^(qū)，

可采用負(fù)壓或排風(fēng)扇較少污染擴(kuò)散，必要時(shí)，可配置可移動紫外消毒設(shè)備。

質(zhì)控室主要功能為擴(kuò)增產(chǎn)物質(zhì)檢和文庫質(zhì)檢，用于評估樣品是否符合后續(xù)操作上樣。樣

品質(zhì)檢加樣過程中，高濃度的擴(kuò)增產(chǎn)物開蓋次數(shù)較多，易產(chǎn)生核酸污染，質(zhì)檢方式通常是瓊

脂糖凝膠電泳、毛細(xì)管凝膠電泳，制備瓊脂糖膠塊時(shí)需使用微波加熱，使瓊脂糖完全溶解。

控制電泳電壓在100~220V之間，使電泳條帶平整、清晰。檢測過程通常是開放體系，極易

產(chǎn)生核酸污染，因此，該區(qū)域需與其他區(qū)域隔離，避免污染。

為保證實(shí)驗(yàn)室有足夠空間放置實(shí)驗(yàn)操作臺、操作空間和凝膠電泳系統(tǒng)、成像儀等分析設(shè)

備，并保證空氣流通和視線清晰，本實(shí)驗(yàn)室建筑面積應(yīng)不小于4m2。

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4.5.6數(shù)據(jù)分析室

應(yīng)具備高通量測序數(shù)據(jù)分析、數(shù)據(jù)存儲、數(shù)據(jù)備份等功能。數(shù)據(jù)分析服務(wù)器應(yīng)具備運(yùn)行

內(nèi)存不小于32G，硬盤容量不小于10T。服務(wù)器上需安裝可視化的數(shù)據(jù)分析軟件系統(tǒng)，并配

備本土物種數(shù)據(jù)庫。測序數(shù)據(jù)應(yīng)至少備份1份。數(shù)據(jù)分析過程需注意數(shù)據(jù)安全。

面積應(yīng)不小于4m2。

在樣品檢測室獲得高通量測序數(shù)據(jù)后，通過數(shù)據(jù)傳輸導(dǎo)入數(shù)據(jù)分析服務(wù)器，使用生物信

息學(xué)分析代碼、商業(yè)化分析軟件等方法，獲取生物多樣性結(jié)果。服務(wù)器運(yùn)行內(nèi)存常用32GB，

硬盤不小于10T即可滿足儲存需求。數(shù)據(jù)分析過程需注意數(shù)據(jù)信息安全。

本功能區(qū)主要用于高通量測序數(shù)據(jù)分析，主要包括顯示器、服務(wù)器，該區(qū)域涉及數(shù)據(jù)安

全，為避免數(shù)據(jù)泄露、服務(wù)器需設(shè)置密碼，進(jìn)入本區(qū)域工作人員需經(jīng)嚴(yán)格審查、培訓(xùn)。

為保證實(shí)驗(yàn)室有足夠空間放置操作臺和數(shù)據(jù)分析服務(wù)器，并保證人員操作視線清晰，本

實(shí)驗(yàn)室建筑面積應(yīng)不小于4m2。

4.5.7其他分區(qū)

除主要功能區(qū)外，環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室可配備消洗室、更衣室等。消洗室應(yīng)具備試劑耗材

滅菌、除酶，生物樣品滅菌處理等功能，應(yīng)安排在有上下水的角落位置，但不宜與高溫室或

較強(qiáng)電磁干擾的房間相鄰。更衣室用于更換實(shí)驗(yàn)服、鞋子以及存放個(gè)人物品等。

本工作區(qū)域?yàn)閷?shí)驗(yàn)室輔助區(qū)域，主要用于試劑耗材滅菌、除酶，生物樣品滅菌處理。如

不涉及試劑耗材滅菌，實(shí)驗(yàn)室直接采購無菌、無酶試劑耗材，且不涉及生物樣品滅菌處理，

可根據(jù)實(shí)際情況，不設(shè)置消洗室。涉及到生物樣品處理，按GB19489-2008的規(guī)定執(zhí)行。

根據(jù)GB/T19489規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)域的氣壓與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于30Pa，

與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于10Pa。在核心工作區(qū)域外通常設(shè)置緩沖區(qū)域，且前處理室

通常為負(fù)壓，因此，按照試劑單向流方向，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間設(shè)計(jì)不同壓力梯度來實(shí)現(xiàn)單向氣

流組織方向，環(huán)境DNA擴(kuò)增建庫室通常設(shè)置負(fù)壓與相鄰區(qū)域的壓差不小于10Pa。

實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備應(yīng)包含滅菌設(shè)備，必要時(shí)可添加其他用于滅菌消毒、除酶的設(shè)備，如烘

箱等。

4.6實(shí)驗(yàn)室操作要求

樣品應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)單一方向，低核酸污染區(qū)到高核酸污染區(qū)方向流動。

實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)具備良好的分子生物學(xué)專業(yè)技術(shù)操作規(guī)范，自覺遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度。

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非實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。

實(shí)驗(yàn)操作過程中，操作者須穿戴該區(qū)的實(shí)驗(yàn)服、口罩、手套、鞋套和一次性帽子，鞋套

和帽子根據(jù)功能區(qū)需求穿戴。

應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)操作程序開展實(shí)驗(yàn)，應(yīng)特別注意防止樣品交叉污染。實(shí)驗(yàn)前后應(yīng)及時(shí)臺面消

毒、廢棄物處理等，參照GB/T19495.2-2004的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

樣品DNA提取過程應(yīng)選用有效提取環(huán)境DNA的處理方法，否則將影響后續(xù)PCR擴(kuò)增

反應(yīng)。操作過程涉及到微生物安全的內(nèi)容，按GB19489-2008的規(guī)定執(zhí)行。

根據(jù)GB/T19495.2-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求的相關(guān)要求，用過的加樣器

吸頭必須放入專門的消毒容器（含1%次氯酸鈉溶液）內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室桌椅表面每次工作后都要

清潔。含有PCR產(chǎn)物的任何廢液必須收集到1mol/L鹽酸中，并且不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傾倒，而

應(yīng)到遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉。污染了PCR產(chǎn)物的吸頭也必須放到1mol/L鹽酸中浸泡

后再放到垃圾袋中按程序處理（如焚燒）。

樣品粉碎、制樣、核酸提取等過程中出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)材料散落或PCR產(chǎn)物外濺時(shí)，必須立即

進(jìn)行清潔處理并作出記錄。

實(shí)驗(yàn)室自配試劑（去離子水、緩沖液等）和所有器具在使用前均應(yīng)高壓滅菌或紫外殺菌，

移液器吸頭、反應(yīng)管等實(shí)驗(yàn)耗材應(yīng)一次性使用。在操作過程中需正確使用加樣器，避免在加

樣時(shí)產(chǎn)生氣溶膠氣體。

盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動以減少交叉污染的可能性。

4.7房屋配件、實(shí)驗(yàn)室輔助設(shè)施要求

4.7.1門窗

按照GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第8章設(shè)置實(shí)驗(yàn)室門窗

尺寸。

實(shí)驗(yàn)室門扇應(yīng)設(shè)觀察窗，有特殊要求的房間的門洞尺寸應(yīng)按具體情況確定。各個(gè)實(shí)驗(yàn)室

的門須保證實(shí)驗(yàn)人員和設(shè)備進(jìn)出方便。

有空調(diào)、潔凈要求的房間設(shè)置外窗時(shí)，應(yīng)為雙層密閉窗。

由1/2標(biāo)準(zhǔn)單元組成的實(shí)驗(yàn)室門洞寬度不宜小于1m，高度不宜小于2.1m。由一個(gè)及以

上標(biāo)準(zhǔn)單元組成的實(shí)驗(yàn)室門洞寬度不宜小于1.2m，高度不宜小于2.1m。

實(shí)驗(yàn)室的門扇應(yīng)設(shè)觀察窗。有特殊要求的房間的門洞尺寸應(yīng)按具體情況確定，如經(jīng)常進(jìn)

出大型試件或設(shè)備的房間，可設(shè)置無門檻的卷簾門。在共用建筑物中建立的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)設(shè)可

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自動關(guān)閉的帶鎖的門，必要時(shí)，可設(shè)立緩沖區(qū)域，如緩沖間等。

在設(shè)置采暖及空氣調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)建筑，在滿足采光要求的前提下，應(yīng)減少外窗面積。設(shè)置

空氣調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)室外窗應(yīng)具有良好的密閉性及隔熱性，且宜設(shè)不少于1/3的可開啟窗扇。

如果沒有機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)有窗戶進(jìn)行自然通風(fēng)，并應(yīng)有防蟲紗窗（一般情況下，應(yīng)有

機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，否則溫濕度指標(biāo)難以保證）。應(yīng)有防昆蟲、鼠等動物進(jìn)入和外逃的措施。底

層、半地下室及地下室的外窗應(yīng)采取防蟲及防嚙齒動物的措施。

實(shí)驗(yàn)室窗包括：固定窗、可開關(guān)窗、雙層窗、密閉窗、屏蔽窗、隔聲窗。可根據(jù)不同的

需求選用。如實(shí)驗(yàn)室要求水平遮陽或垂直遮陽，需選用有遮陽功能的窗，如百葉窗。

4.7.2地面、墻面要求

按照GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第8章設(shè)置實(shí)驗(yàn)室地面、

墻面。實(shí)驗(yàn)室整體要求防塵、防腐蝕，地面耐磨、防滑，并按要求采取防靜電措施。

實(shí)驗(yàn)室地面應(yīng)堅(jiān)實(shí)耐磨、不起塵、不積塵并能夠防水、防滑、防放射性沾染、防靜電。

實(shí)驗(yàn)室防振應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)本身或精密儀器本身所提出的防振要求，以及實(shí)驗(yàn)所產(chǎn)生的振動。使

用強(qiáng)酸強(qiáng)堿實(shí)驗(yàn)室所布置地面應(yīng)具有耐腐蝕性。用水量較多的實(shí)驗(yàn)室地面應(yīng)設(shè)地漏。

實(shí)驗(yàn)室墻面總體要求為方便清潔，不得采用帶有強(qiáng)反光性質(zhì)的飾面材料，對于冷藏墻面

要求隔熱；有些實(shí)驗(yàn)室在實(shí)驗(yàn)時(shí)有酸堿氣體逸出，要求設(shè)計(jì)耐酸堿的涂層墻面；對于會產(chǎn)生

噪聲的實(shí)驗(yàn)室，墻面應(yīng)布置吸聲材料；有抗電磁波干擾的房間，墻面需做屏蔽處理。

實(shí)驗(yàn)室墻裙高度應(yīng)離地面1.2~1.5m左右，便于清潔，如瓷磚墻裙、油漆墻裙等。

4.7.3頂棚

除了有嚴(yán)格防塵需求的實(shí)驗(yàn)室之外，實(shí)驗(yàn)室不宜設(shè)置吊頂，頂棚應(yīng)選用易清潔、防塵的

難燃材料。對于某些具有吊頂需求且無嚴(yán)格密封要求的空間，可采用活動板塊式吊頂。

4.7.4走道

按照GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第8章設(shè)置實(shí)驗(yàn)室走道。

走道應(yīng)直接通向出口，且保證實(shí)驗(yàn)人員和貨運(yùn)車輛通過。

走道應(yīng)直接通向出口的方向，以便危險(xiǎn)發(fā)生時(shí)人員的撤離，因此應(yīng)避免設(shè)計(jì)成無規(guī)則的

形狀。

走道地面有高度時(shí)，當(dāng)高差不足二級踏步時(shí)，不得設(shè)置臺階，應(yīng)設(shè)坡道，其坡度不宜大

于1：8。實(shí)驗(yàn)室宜設(shè)置緩坡坡道供貨運(yùn)車輛通行。

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應(yīng)根據(jù)使用過程中具體情況來確定走道的寬度和高度設(shè)計(jì)，同時(shí)應(yīng)特別注意回轉(zhuǎn)余量。

雙面布房的走道寬度不宜小于1.8m，單面布房的走道寬度不宜小于1.5m。

4.7.5緩沖區(qū)

有條件的實(shí)驗(yàn)室宜設(shè)置緩沖區(qū)或在所各工作區(qū)域設(shè)置緩沖間，緩沖間的壓力為負(fù)壓(或

上設(shè)抽風(fēng)裝置)，與其相連的工作間為正壓，工作間與緩沖間之間宜安裝磁性連鎖裝置受實(shí)

驗(yàn)場所限制而無條件設(shè)置緩沖間的實(shí)驗(yàn)室，緩沖區(qū)的面積不能大于實(shí)驗(yàn)室房間面積的1/8。

緩沖區(qū)設(shè)置于清潔區(qū)與污染區(qū)之間，保證有效隔離，每個(gè)獨(dú)立分區(qū)都要設(shè)置一個(gè)緩沖區(qū)。非

實(shí)驗(yàn)人員不應(yīng)進(jìn)入各實(shí)驗(yàn)工作區(qū)。

4.7.6實(shí)驗(yàn)臺

按照GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第8章設(shè)置實(shí)驗(yàn)臺。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室規(guī)模設(shè)置實(shí)驗(yàn)臺的結(jié)構(gòu)和布局。

按結(jié)構(gòu)形式可分為：固定試驗(yàn)臺、懸掛實(shí)驗(yàn)臺、分體實(shí)驗(yàn)臺和移動實(shí)驗(yàn)臺。

固定實(shí)驗(yàn)臺：是一種傳統(tǒng)布置，落地柜支撐臺面，靈活性較差。

懸掛實(shí)驗(yàn)臺：防潮性能好、靈活性稍強(qiáng)，柜體可以重新布置而不影響其他工作系統(tǒng)的其

他部分。

分體實(shí)驗(yàn)臺：水電氣系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)臺屬于分體的兩部分，實(shí)驗(yàn)臺可以輕易移動，重新布置

而不需要新裝水電氣系統(tǒng)，靈活性強(qiáng)，是未來發(fā)展的主流產(chǎn)品之一，這種實(shí)驗(yàn)臺價(jià)格較高。

移動實(shí)驗(yàn)臺：工作臺下方裝有輪子，可以輕易移動。許多桌子、推車和工作臺物件可以

垂直調(diào)節(jié)高度以更加符合人體工效學(xué)。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室布局不同，可分為：一字型、L型、半島型和島型。

一字型：實(shí)驗(yàn)臺采用一字型布置方式，適用于小型實(shí)驗(yàn)室或大型實(shí)驗(yàn)室邊臺。

L型：實(shí)驗(yàn)臺與實(shí)驗(yàn)室的兩相鄰墻壁平行布置且留有維修通道，適合精密儀器室。

半島型：實(shí)驗(yàn)臺一端靠墻，適合大型實(shí)驗(yàn)室及理化室，空間使用率高。

島型：實(shí)驗(yàn)臺布置在實(shí)驗(yàn)室中間，方便實(shí)驗(yàn)人員工作與逃生，效率及安全性高。

按照GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求的要求，實(shí)驗(yàn)臺

尺寸應(yīng)根據(jù)使用要求設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)臺的臺面高宜為0.8~0.9m，單面實(shí)驗(yàn)臺寬度宜為0.65~0.8m，

雙面實(shí)驗(yàn)臺寬度宜為1.5m，長度應(yīng)按實(shí)驗(yàn)的具體要求確定。

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4.7.7物品架

按照GB/T32146.1-2015檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建設(shè)技術(shù)要求第8章設(shè)置物品架。實(shí)

驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置嵌墻式和掛墻式物品架，物品架底距地面不應(yīng)小于1.2m。物品架應(yīng)具有足夠的

承載能力，并與墻體牢固連接，物品架橫隔板的位置應(yīng)上下可移動。

4.7.8紫外燈

每個(gè)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈波長、數(shù)量和長度標(biāo)準(zhǔn)參照GB/T

19495.2-2004實(shí)施。易污染區(qū)域可設(shè)置移動紫外消毒車。

根據(jù)GB/T19495.2-20046.1.1設(shè)施和環(huán)境要求，每個(gè)工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫

外燈的波長為254nm，安裝數(shù)量為每20m2安裝一支40W的紫外燈，燈與地面的距離不宜超

過2.0m±0.1m。

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5附錄

附錄A

（規(guī)范性附錄）

環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室典型布局圖

圖A.1環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室典型布局圖1

圖A.2典型環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室典型布局圖2

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圖A.3典型環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室典型布局圖3

圖A.4典型環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室典型布局圖4

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6主要試驗(yàn)、驗(yàn)證及試行結(jié)果

本標(biāo)準(zhǔn)主要基于已獲取的研究數(shù)據(jù)開展標(biāo)準(zhǔn)的研制，不涉及專題研究、試驗(yàn)、測試等過

程。

7標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施建議

本文件適用于基于環(huán)境DNA技術(shù)的水生生物多類群監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室的新建、改建和擴(kuò)建的

設(shè)計(jì)、建設(shè)和質(zhì)量控制。包括浮游植物、浮游動物、著生藻類、水生維管植物、大型底棲無

脊椎動物和魚類等。

本標(biāo)準(zhǔn)為首次制定，隨著DNA條形碼技術(shù)的快速崛起和發(fā)展，本標(biāo)準(zhǔn)中的DNA條形

碼建庫方法和涉及到的相關(guān)參數(shù)也可能會隨之發(fā)生變化。因此，建議在本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施過程中，

繼續(xù)廣泛聽取和收集各方面的意見與建議，并根據(jù)實(shí)際應(yīng)用情況，對本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行不斷地修訂

與完善，使其實(shí)用性和可操作性與時(shí)俱進(jìn)，為規(guī)范開展基于DNA技術(shù)的水生生物鑒定和生

物多樣性監(jiān)測等工作提供基礎(chǔ)支撐和指導(dǎo)。

8標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)計(jì)專利的情況

本標(biāo)準(zhǔn)沒有設(shè)計(jì)專利。

9預(yù)期達(dá)到的社會效益、對產(chǎn)業(yè)發(fā)展的作用

從社會效益來看，水生生物環(huán)境DNA實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)將提升公眾對于水生態(tài)環(huán)境保護(hù)的

認(rèn)識和意識。實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)也將為科學(xué)研究提供更好的平臺和條件，推動相關(guān)領(lǐng)域的發(fā)展和

創(chuàng)新。

從產(chǎn)業(yè)發(fā)展作用來看，實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)將帶動相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，如生物多樣性監(jiān)測技術(shù)研

發(fā)、實(shí)驗(yàn)室工程設(shè)計(jì)等，進(jìn)一步推動經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)發(fā)展。

10與國際、國外標(biāo)準(zhǔn)對比情況

本標(biāo)準(zhǔn)沒有采用國際標(biāo)準(zhǔn)。

11與有關(guān)現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的關(guān)系

本標(biāo)準(zhǔn)與有關(guān)的現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)無沖突、無交叉。

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12重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù)

無。