泉州市人民醫(yī)院「腎臟病理」樣本處理技術(shù)考核一、單選題（每題2分，共20題）說明：請選擇最符合題意的選項。1.泉州市人民醫(yī)院腎活檢樣本固定時，最佳固定液使用時間應(yīng)為多久？A.6小時B.12小時C.24小時D.48小時2.對于體積較小的腎活檢樣本（如<2mm），哪種方法更適合進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察？A.傳統(tǒng)石蠟包埋B.樹脂包埋（Epoxy）C.空氣干燥法D.冷凍切片技術(shù)3.在進(jìn)行免疫熒光檢測時，以下哪種試劑需要使用冷丙酮固定？A.IgGB.C3C.FRA（纖維連接蛋白相關(guān)抗原）D.補(bǔ)體因子B4.泉州地區(qū)常見的IgA腎病中，進(jìn)行銀染時，最佳的染色時間為多少分鐘？A.5分鐘B.10分鐘C.15分鐘D.20分鐘5.腎活檢樣本進(jìn)行組織學(xué)切片時，哪種切片厚度最適用于常規(guī)HE染色？A.2μmB.4μmC.6μmD.10μm6.對于懷疑微小病變腎病（MCD）的樣本，哪種特殊染色方法最常用？A.Masson三色染色B.Oil紅O染色C.periodicacid-Schiff（PAS）染色D.免疫熒光染色7.在進(jìn)行腎小管免疫熒光檢測時，哪種封閉劑效果最佳？A.牛血清白蛋白（BSA）B.蛋清白蛋白（BSA）C.封閉OCT包埋劑D.多聚賴氨酸8.泉州市人民醫(yī)院腎病理科常用的甲苯胺藍(lán)（TBL）染色主要用于檢測哪種成分？A.黏液B.糖原C.彈性纖維D.脂滴9.對于懷疑狼瘡性腎炎（LN）的樣本，哪種免疫熒光模式提示CD3+T細(xì)胞浸潤？A.脈絡(luò)膜樣體（C1q沉積）B.網(wǎng)狀熒光（IgG呈網(wǎng)狀分布）C.腎小管上皮細(xì)胞線性沉積（C3）D.胞質(zhì)染色（CD3）10.腎活檢樣本進(jìn)行電子顯微鏡檢查時，哪種fixative最能保存細(xì)胞器結(jié)構(gòu)？A.2.5%戊二醛B.4%多聚甲醛C.10%福爾馬林D.甲醇二、多選題（每題3分，共10題）說明：請選擇所有符合題意的選項。1.泉州市人民醫(yī)院腎病理科進(jìn)行腎活檢樣本處理時，以下哪些步驟屬于標(biāo)準(zhǔn)化流程？A.樣本編號與登記B.甲醛固定C.空氣干燥D.石蠟包埋2.對于IgA腎病的免疫熒光檢測，以下哪些指標(biāo)需要檢測？A.IgGB.C3C.FRAD.IgA3.腎活檢樣本進(jìn)行特殊染色時，以下哪些方法可用于觀察淀粉樣變？A.甲基紫染色B.Masson三色染色C.透明質(zhì)酸染色D.甲狀腺球蛋白染色4.在進(jìn)行腎小管損傷檢測時，以下哪些免疫熒光指標(biāo)有臨床意義？A.CD68（巨噬細(xì)胞標(biāo)記）B.CD3（T細(xì)胞標(biāo)記）C.podocalyxin（足細(xì)胞標(biāo)記）D.α-SMA（肌成纖維細(xì)胞標(biāo)記）5.泉州地區(qū)常見的腎小球疾病中，以下哪些病理類型需要做油紅O染色？A.脂肪腎病變B.微小病變腎病C.脂肪性腎病D.銀屑病腎炎6.腎活檢樣本進(jìn)行免疫組化檢測時，以下哪些封閉劑可提高抗體結(jié)合效率？A.5%牛血清白蛋白（BSA）B.10%脫脂奶粉C.封閉OCT包埋劑D.蛋清白蛋白（BSA）7.在進(jìn)行腎小管間質(zhì)病變檢測時，以下哪些染色方法有臨床意義？A.Masson三色染色（膠原）B.Verhoeff-vanGieson（彈力纖維）C.PAS染色（糖原）D.Oil紅O（脂滴）8.腎活檢樣本進(jìn)行電子顯微鏡檢查時，以下哪些結(jié)構(gòu)需要重點觀察？A.腎小球基底膜（GBM）B.足細(xì)胞裂隙膜C.線粒體D.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)9.泉州市人民醫(yī)院腎病理科常用的特殊染色方法包括哪些？A.Masson三色染色B.Periodicacid-Schiff（PAS）染色C.Oil紅O染色D.甲基紫染色10.腎活檢樣本進(jìn)行免疫熒光檢測時，以下哪些抗體需要使用直接法？A.IgGB.C3C.FRAD.CD3三、判斷題（每題1分，共10題）說明：請判斷以下說法的正誤。1.腎活檢樣本固定不充分會導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)模糊，影響病理診斷。（正確）2.免疫熒光檢測時，樣本需要用冷丙酮固定才能提高抗體結(jié)合效率。（正確）3.腎小管免疫熒光檢測時，IgG呈顆粒樣或線狀沉積提示狼瘡性腎炎。（錯誤，應(yīng)為顆粒樣沉積）4.脂肪性腎病進(jìn)行油紅O染色時，陽性結(jié)果表現(xiàn)為腎小管內(nèi)脂滴空泡。（正確）5.腎活檢樣本進(jìn)行電子顯微鏡檢查時，樣本需要用戊二醛和鋨酸雙重固定。（正確）6.IgA腎病的免疫熒光檢測中，C3呈顆粒樣沉積提示免疫復(fù)合物沉積。（正確）7.腎小管間質(zhì)纖維化時，Masson三色染色顯示膠原纖維增多。（正確）8.腎活檢樣本進(jìn)行免疫組化檢測時，封閉劑使用過多會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。（正確）9.微小病變腎病的免疫熒光檢測通常表現(xiàn)為“顆粒狀”或“線性”熒光模式。（錯誤，應(yīng)為陰性或微弱熒光）10.腎活檢樣本進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察時，樣本需要用環(huán)氧樹脂包埋。（正確）四、簡答題（每題5分，共4題）說明：請簡述以下問題。1.簡述泉州地區(qū)IgA腎病進(jìn)行免疫熒光檢測時，常見的熒光模式及其臨床意義。答案要點：-顆粒樣熒光（IgG、C3）：提示免疫復(fù)合物沉積，常見于IgA腎病。-線性熒光（C3）：提示免疫復(fù)合物沉積在基底膜，常見于狼瘡性腎炎。-網(wǎng)狀熒光（IgG）：提示系膜區(qū)或毛細(xì)血管壁IgG呈彌漫性沉積，常見于系膜增生性腎炎。2.簡述腎活檢樣本進(jìn)行電子顯微鏡檢查時，觀察腎小球超微結(jié)構(gòu)的主要步驟。答案要點：-樣本固定：用2.5%戊二醛和1%鋨酸雙重固定。-脫水與包埋：乙醇梯度脫水，環(huán)氧樹脂包埋。-超薄切片：超薄切片機(jī)切片至50-70nm。-鉛染色：醋酸鉍酸染色或鉛染色。-透射電鏡觀察：觀察GBM、足細(xì)胞裂隙膜、系膜區(qū)等結(jié)構(gòu)。3.簡述腎活檢樣本進(jìn)行免疫組化檢測時，如何提高抗體結(jié)合效率？答案要點：-優(yōu)化封閉劑：5%BSA或脫脂奶粉封閉。-抗體稀釋度：根據(jù)說明書優(yōu)化抗體濃度。-溫度與時間：37℃孵育，延長抗體結(jié)合時間。-抗體優(yōu)化：使用即用型抗體或優(yōu)化抗體稀釋度。4.簡述泉州地區(qū)常見的腎小球疾病中，哪些病理類型需要進(jìn)行油紅O染色？答案要點：-脂肪性腎?。耗I小管內(nèi)脂滴空泡。-微小病變腎?。ㄖ|(zhì)沉積型）：腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)脂滴。-脂肪性腎?。ǔ扇诵停耗I小管內(nèi)脂滴沉積。五、論述題（每題10分，共2題）說明：請詳細(xì)闡述以下問題。1.詳細(xì)論述腎活檢樣本進(jìn)行免疫熒光檢測時，常見的熒光模式及其臨床意義。答案要點：-顆粒樣熒光：-IgG、C3顆粒樣沉積：提示免疫復(fù)合物沉積，常見于IgA腎病、膜性腎病。-補(bǔ)體沉積：C1q、C4顆粒樣沉積提示狼瘡性腎炎。-線性熒光：-C3線性沉積：提示基底膜免疫復(fù)合物沉積，常見于狼瘡性腎炎、膜性腎病。-IgA線性沉積：提示IgA沉積在GBM，常見于IgA腎病。-網(wǎng)狀熒光：-IgG網(wǎng)狀熒光：提示系膜區(qū)或毛細(xì)血管壁IgG彌漫性沉積，常見于系膜增生性腎炎。-免疫熒光缺失：-IgG/C3陰性：提示無免疫復(fù)合物沉積，常見于微小病變腎病。2.詳細(xì)論述腎活檢樣本進(jìn)行特殊染色時，Masson三色染色的原理及其臨床應(yīng)用。答案要點：-原理：-嗜堿性染色：膠原纖維呈藍(lán)色。-嗜酸性染色：細(xì)胞核呈紅色，背景呈淡綠色。-彈性纖維：不被染色，呈透明。-臨床應(yīng)用：-腎小管間質(zhì)纖維化：Masson染色顯示膠原纖維增多，提示腎臟瘢痕形成。-腎血管疾病：觀察彈性纖維破壞，如動脈硬化。-腎移植排斥反應(yīng)：間質(zhì)纖維化程度與排斥反應(yīng)相關(guān)。答案與解析一、單選題答案與解析1.C（24小時固定最充分，保證組織結(jié)構(gòu)保存）2.B（樹脂包埋更適合超微結(jié)構(gòu)觀察）3.B（C3需冷丙酮固定以提高熒光強(qiáng)度）4.C（15分鐘最適，過長會過染）5.B（4μm最適，兼顧分辨率與切片質(zhì)量）6.B（Oil紅O染色觀察脂滴沉積）7.A（BSA封閉效果最佳）8.B（甲苯胺藍(lán)染色檢測糖原）9.D（CD3胞質(zhì)染色提示T細(xì)胞浸潤）10.A（戊二醛保存細(xì)胞器結(jié)構(gòu)）二、多選題答案與解析1.A、B、D（C項空氣干燥非標(biāo)準(zhǔn)化流程）2.A、B、C（D項IgA非必需）3.A、B（C項透明質(zhì)酸染色非淀粉樣變檢測）4.A、B、D（C項podocalyxin足細(xì)胞標(biāo)記）5.A、C（B項MCD無需油紅O染色）6.A、B、D（C項封閉OCT包埋劑非封閉劑）7.A、B、C（D項脂滴非間質(zhì)病變指標(biāo)）8.A、B、C（D項內(nèi)質(zhì)網(wǎng)非重點觀察結(jié)構(gòu)）9.A、B、C（D項甲基紫非常用染色）10.A、B、C（D項CD3需間接法）三、判斷題答案與解析1.正確2.正確3.錯誤（應(yīng)為顆粒樣沉積）4.正確5.正確6.正確7.正確8.正確9.錯誤（應(yīng)為陰性或微弱熒光）10.正確四、簡答題答案與解析1.答案要點：-顆粒樣熒光（IgG、C3）：提示免疫復(fù)合物沉積，常見于IgA腎病。-線性熒光（C3）：提示免疫復(fù)合物沉積在基底膜，常見于狼瘡性腎炎。-網(wǎng)狀熒光（IgG）：提示系膜區(qū)或毛細(xì)血管壁IgG彌漫性沉積，常見于系膜增生性腎炎。2.答案要點：-樣本固定：用2.5%戊二醛和1%鋨酸雙重固定。-脫水與包埋：乙醇梯度脫水，環(huán)氧樹脂包埋。-超薄切片：超薄切片機(jī)切片至50-70nm。-鉛染色：醋酸鉍酸染色或鉛染色。-透射電鏡觀察：觀察GBM、足細(xì)胞裂隙膜、系膜區(qū)等結(jié)構(gòu)。3.答案要點：-優(yōu)化封閉劑：5%BSA或脫脂奶粉封閉。-抗體稀釋度：根據(jù)說明書優(yōu)化抗體濃度。-溫度與時間：37℃孵育，延長抗體結(jié)合時間。-抗體優(yōu)化：使用即用型抗體或優(yōu)化抗體稀釋度。4.答案要點：-脂肪性腎?。耗I小管內(nèi)脂滴空泡。-微小病變腎病（脂質(zhì)沉積型）：腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)脂滴。-脂肪性腎?。ǔ扇诵停耗I小管內(nèi)脂滴沉積。五、論述題答案與解析1.答案要點：-顆粒樣熒光：-IgG、C3顆粒樣沉積：提示免疫復(fù)合物沉積，常見于IgA腎病、膜性腎病。-補(bǔ)體沉積：C1q、C4顆粒樣沉積提示狼瘡性腎炎。-線性熒光：-C3線性沉積：提示基底膜免疫復(fù)合物沉積，常見于狼瘡性腎炎、膜性腎病。-IgA線性沉積：提示IgA沉積在GBM，常見于IgA腎病。-網(wǎng)狀熒光：-IgG網(wǎng)狀熒光：提示系膜區(qū)或毛細(xì)血管壁IgG彌漫性沉積，常見于系膜增生性腎炎。-免疫熒光缺失：-IgG/