2025年大學《資源化學》專業(yè)題庫——生物大分子的化學合成與分析考試時間：______分鐘總分：______分姓名：______一、選擇題1.下列哪種氨基酸側鏈具有強酸性？A.甘氨酸B.丙氨酸C.天冬氨酸D.賴氨酸2.在蛋白質Fmoc固相合成中，F(xiàn)moc基團的主要作用是：A.保護氨基B.保護羧基C.連接樹脂D.作為引物3.DNA雙螺旋結構中，堿基之間通過何種化學鍵連接？A.肽鍵B.磷酸二酯鍵C.離子鍵D.堿基堆積力4.下列哪種方法最適合用于分離分子量較大的蛋白質？A.丙酮沉淀B.離子交換色譜C.凝膠過濾色譜D.毛細管電泳5.在紫外-可見光譜中，蛋白質的主要吸收峰位于哪個波長區(qū)域，其主要吸收物質是？A.230nm，酪氨酸B.280nm，苯丙氨酸C.280nm，酪氨酸和色氨酸D.260nm，核糖6.SDS電泳主要依據(jù)什么原理分離蛋白質？A.蛋白質分子量大小B.蛋白質等電點C.蛋白質電荷多少D.蛋白質溶解度7.核酸雜交技術的基本原理是？A.核酸鏈的酶促合成B.核酸分子在特定條件下形成雙鏈C.核酸的酶解降解D.核酸序列的化學修飾8.質譜法在生物大分子分析中的主要應用不包括？A.確定分子量B.確定氨基酸序列C.確定蛋白質構象D.確定糖鏈結構9.從天然資源中提取蛋白質時，常用的初步純化方法是？A.凝膠過濾色譜B.透析C.丙酮沉淀D.等電點沉淀10.下列哪項不是影響DNA復制的關鍵因素？A.解旋酶B.DNA聚合酶C.RNA引物D.脂肪酸二、填空題1.蛋白質的一級結構是指其氨基酸的________和________。2.核酸分子中，戊糖與磷酸之間通過________鍵連接。3.蛋白質變性是指其________結構和________結構的破壞，通常不可逆。4.在UV-Vis光譜中，色氨酸在約________nm處有強吸收，酪氨酸在約________nm處有強吸收。5.離子交換色譜是利用蛋白質分子表面________帶電，與色譜柱填料上的________離子發(fā)生交換來分離蛋白質。6.核酸分子雜交技術在________領域有廣泛應用，如基因診斷、PCR等。7.蛋白質人工合成的固相策略中，常用的保護氨基基團有Fmoc和________。8.核酸的一級結構是指其核苷酸的________和________順序。三、名詞解釋1.肽鍵2.等電點(pI)3.凝膠過濾色譜(GelFiltrationChromatography)4.分子雜交(Hybridization)四、簡答題1.簡述影響蛋白質溶解度的因素。2.比較凝膠過濾色譜和離子交換色譜在分離蛋白質方面的主要區(qū)別。3.簡述PCR技術的基本原理及其關鍵步驟。4.為什么說質譜法是現(xiàn)代生物大分子分析中一種強大的工具？五、綜合應用題1.假設你需要從含多種蛋白質的天然樣品中分離純化一種特定的酶（假設該酶的分子量約為30kDa，等電點為pH5.0）。請簡述你會選擇哪些層析方法（至少兩種），并說明選擇理由。2.在資源化學研究中，需要檢測某種微生物產(chǎn)生的特定蛋白質是否具有某種酶活性。請設計一個簡要的實驗方案，說明你會如何利用所學知識進行檢測（包括可能的分析技術）。試卷答案一、選擇題1.C2.A3.D4.C5.C6.A7.B8.C9.C10.D二、填空題1.順序，構型2.磷酸二酯3.二級，三級4.280，2405.表面電荷，帶相反電荷6.分子生物學7.Boc8.順序，構型三、名詞解釋1.肽鍵：連接相鄰氨基酸殘基的酰胺鍵。2.等電點(pI)：蛋白質分子所帶凈電荷為零時的pH值。3.凝膠過濾色譜(GelFiltrationChromatography)：利用多孔凝膠顆粒作為固定相，根據(jù)蛋白質分子大小不同進行分離的技術。4.分子雜交(Hybridization)：指帶有互補核酸序列的單鏈DNA或RNA在一定條件下結合形成雙鏈的現(xiàn)象。四、簡答題1.影響蛋白質溶解度的因素：主要因素包括蛋白質的氨基酸組成和性質（如帶電荷多少、親疏水性）、溶液的pH值（影響電荷狀態(tài)）、溫度、離子強度等。2.凝膠過濾色譜和離子交換色譜的主要區(qū)別：*原理：凝膠過濾基于分子大小分離；離子交換基于分子表面電荷與填料電荷的相互作用分離。*分離參數(shù)：凝膠過濾主要取決于分子半徑；離子交換取決于分子電荷、pH（影響電荷）和分子尺寸。*應用：凝膠過濾常用于分子量測定和緩沖液更換；離子交換用于蛋白質的初步純化和分級分離。3.PCR技術的基本原理及其關鍵步驟：*原理：PCR（聚合酶鏈式反應）是利用DNA聚合酶在體外擴增特定DNA片段的技術，其基本原理是DNA的雙鏈復制。*關鍵步驟：包括變性（加熱使雙鏈DNA解開）、退火（降低溫度使引物與模板DNA結合）、延伸（加熱至適宜溫度，DNA聚合酶在引物處合成新鏈）三個可重復循環(huán)的過程。4.質譜法是現(xiàn)代生物大分子分析中一種強大的工具的解析：*高靈敏度：可檢測痕量生物分子。*高準確度分子量測定：可精確測定蛋白質、肽段、核酸等的分子量。*豐富的結構信息：可通過碎片離子分析推測分子結構、氨基酸序列、糖鏈組成等。*適用于多種樣品：可分析混合物，并進行原位分析。*與其他技術聯(lián)用：可與色譜、電噴等聯(lián)用，實現(xiàn)復雜樣品的分離與鑒定。五、綜合應用題1.分離純化策略及理由：*方法一：離子交換色譜。理由：目標酶等電點為pH5.0，可在該pH或略偏離等電點的酸性條件下，利用離子交換色譜進行分離?？赏ㄟ^改變緩沖液pH或離子強度進行洗脫，實現(xiàn)分離。*方法二：凝膠過濾色譜。理由：目標酶分子量約為30kDa，凝膠過濾可將不同大小的蛋白質分離。可用它去除樣品中分子量遠大于或遠小于30kDa的其他雜蛋白，起到粗提和分級分離的作用。*其他可能方法：疏水相互作用色譜（利用蛋白質表面的疏水性）、親和色譜（如果已知特異性結合配體）。2.檢測特定蛋白質酶活性的方案設計：*步驟1：利用SDS或免疫印跡等方法從樣品中鑒定并確認目標蛋白質的存在，初步確定其純度。*步驟2：若目標蛋白純度足夠，可直接進行酶活性測定。若純度不高，可進一步純化。*酶活性測定：選擇一種特異性底物，設計酶促反應體系。在一定條件下（如溫度、pH）孵育反應一定時間，通過檢測產(chǎn)物生成量或底物消耗量來定量酶活性。常用的檢測方法有分