ICS65.020.20

CCSB61

35

福建省地方標準

DB35/T2066—2022

十二卷屬軟葉類多肉植物組培育苗通用

技術(shù)規(guī)范

Technicalspecificationfortissuecultureandseedlingraisingofsucculentplantsof

HaworthiaDuval

2022-08-08發(fā)布2022-11-08實施

福建省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB35/T2066—2022

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4環(huán)境設(shè)施與控制.....................................................................1

5培養(yǎng)基.............................................................................1

6外植體采集與處理...................................................................2

7誘導(dǎo)培養(yǎng)...........................................................................3

8增殖培養(yǎng)...........................................................................3

9生根培養(yǎng)...........................................................................3

10煉苗..............................................................................4

11質(zhì)量標準與出苗....................................................................4

12技術(shù)檔案..........................................................................4

附錄A（資料性）MS基本培養(yǎng)基成分及母液配制..........................................5

附錄B（資料性）十二卷屬軟葉多肉植物組培培養(yǎng)基配方...................................6

附錄C（資料性）培養(yǎng)基配制記錄表.....................................................7

附錄D（資料性）外植體采集記錄表.....................................................8

附錄E（資料性）接種記錄表...........................................................9

I

DB35/T2066—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。

本文件由福建省林業(yè)局提出并歸口。

本文件起草單位：龍巖市禾康生物科技有限公司、福建省龍巖市林業(yè)種苗站。

本文件主要起草人：樊仲書、林能慶、張玉華、洪永輝、樊昌華、黃以法、樊君早、王海斌。

II

DB35/T2066—2022

十二卷屬軟葉類多肉植物組培育苗通用技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了十二卷屬軟葉類多肉植物組培育苗生產(chǎn)技術(shù)的環(huán)境設(shè)施與控制、培養(yǎng)基、外植體采集

與處理、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗、質(zhì)量標準與出苗和技術(shù)檔案。

本文件適用于阿福花科十二卷屬軟葉類多肉植物組培育苗。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB15569—2009農(nóng)業(yè)植物調(diào)運檢疫規(guī)程

LY/T1882—2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

NY/T2306—2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

LY/T1882—2010界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

十二卷屬軟葉類多肉植物succulentsoftleafedplantsofHaworthiaDuval

阿?；菩⌒投嗄晟呷~型多肉植物。

4環(huán)境設(shè)施與控制

按照NY/T2306—2013的規(guī)定執(zhí)行。

5培養(yǎng)基

5.1培養(yǎng)基選擇

選擇MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基。

5.2母液配制與保存

5.2.1母液配制

母液用無菌的蒸餾水或去離子水配制。母液主要包括大量元素、鐵鹽、微量元素、有機物質(zhì)和植物

生長調(diào)節(jié)劑等（參見附錄A）。

1

DB35/T2066—2022

5.2.2母液保存

母液置于3℃～5℃的冰箱中保存，其中鐵鹽和植物生長調(diào)節(jié)劑母液儲存在避光容器中，母液保存

期不超過1個月。母液貯存容器上貼好標簽，注明名稱、配制日期，發(fā)現(xiàn)標簽不明或母液中有沉淀、結(jié)

晶或微生物和藻類應(yīng)廢棄不用。

5.3培養(yǎng)基配制

5.3.1配制方法

依照培養(yǎng)基配方以及需要配制的培養(yǎng)基體積，量取70%～75%最終體積（V）的純凈水，按配方量取

母液、稱取凝固劑和白砂糖，轉(zhuǎn)至分裝桶并定容。誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基配方（參見附

錄B）。

5.3.2pH值的調(diào)整

用1.0mol/L鹽酸或1.0mol/L氫氧化鈉調(diào)整培養(yǎng)基pH值至5.8～6.0。

5.3.3分裝

配制好的培養(yǎng)基應(yīng)及時分裝到培養(yǎng)容器中，分裝時勿將培養(yǎng)基沾到培養(yǎng)容器口，蓋好瓶蓋，做好標

記和記錄（參見附錄C）。

5.4滅菌

將分裝好的培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)進行濕熱滅菌，在蒸汽壓力為0.105Mpa，溫度121℃的

條件下，滅菌20min～25min。滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)置于無風和潔凈的環(huán)境中冷卻至常溫。

5.5貯存

滅菌后的培養(yǎng)基注明培養(yǎng)基編號、配制日期和滅菌鍋次。為保證培養(yǎng)基質(zhì)量，將配制好的培養(yǎng)基在

23℃～27℃潔凈環(huán)境中放置5d～7d備用，貯存時間不超過一個月。

6外植體采集與處理

6.1外植體采集

選擇植株的葉片或花莖作為外植體。春、秋兩個生長旺季選擇觀賞性高、抗逆性強、生長健壯植株

作為采集外植體的母株。采集前將母株放在通風處陰干2d～3d。采集時，對母株用清水沖洗干凈，用

毛筆蘸洗衣粉水刷洗，并用無菌水清洗3～5次。外植體要標明品名、來源、采集地點、時間、人員等（參

見附錄D）。

6.2外植體處理

在超凈工作臺上先用75%酒精浸泡外植體20s～30s，然后用無菌水沖洗3次，再用2%～3%的次氯酸

鈉溶液浸泡15min～25min，最后用無菌水清洗3～5次。

2

DB35/T2066—2022

7誘導(dǎo)培養(yǎng)

7.1誘導(dǎo)培養(yǎng)基

參見附錄B。

7.2外植體接種

將消毒后的外植體切成1cm左右的小段，其中以花莖為外植體的需帶花芽，垂直或斜插接種到誘導(dǎo)

培養(yǎng)基中，外植體與培養(yǎng)基要接觸良好，深淺適中。接種后及時填寫接種記錄表（參見資料性附錄E）。

7.3培養(yǎng)條件

接種后先暗培養(yǎng)5d～7d，再置于光照強度為1500Lx～2000Lx、溫度23℃～27℃、濕度RH

≤60%環(huán)境中進行培養(yǎng)，每天光照12h～14h，培養(yǎng)28d～35d。

8增殖培養(yǎng)

8.1增殖培養(yǎng)基

參見附錄B。

8.2增殖接種

應(yīng)根據(jù)不同品種的組培生長分化特性，接種時將無菌增殖材料切成帶2～3個芽的叢芽或小段，芽苗

高保留2cm左右，切除松散的愈傷、褐化組織、畸形苗和玻璃化苗，接種于增殖培養(yǎng)基中。接種后及時

填寫接種記錄表（參見資料性附錄E）。

8.3培養(yǎng)條件

置于光照強度為1500Lx～2000Lx、溫度23℃～27℃、濕度RH≤60%環(huán)境中進行培養(yǎng)，每天光

照12h～14h，培養(yǎng)28d～35d。

9生根培養(yǎng)

9.1生根培養(yǎng)基

參見附錄B。

9.2生根接種

選擇無污染、生長健壯、苗高為2cm～4cm、葉片數(shù)為2～4片的增殖芽苗，切割成單芽接種到生根

培養(yǎng)基中。接種后及時填寫接種記錄表（參見資料性附錄E）。

9.3培養(yǎng)條件

置于光照強度為1500Lx～2000Lx、溫度23℃～27℃、濕度RH≤60%環(huán)境中進行培養(yǎng)，每天光

照12h～14h，培養(yǎng)28d～35d。

3

DB35/T2066—2022

10煉苗

生根瓶苗根長達到1㎝～2㎝時，置于光照強度為5000Lx～8000Lx、溫度15℃～30℃、濕度

RH≤80%環(huán)境中進行煉苗15d～30d。

11質(zhì)量標準與出苗

11.1組培苗質(zhì)量標準

生根苗健壯、無污染、無病蟲害，根數(shù)≥2條,葉片數(shù)≥3片。

11.2出苗

煉苗結(jié)束后，從培養(yǎng)瓶中取出組培生根苗，用清水洗去苗上的培養(yǎng)基，置于溫度10℃～30℃、通

風條件下陰干3d～5d后，按11.1進行檢驗。檢驗合格的包裝出苗，貼上合格證，包括品名、代碼、數(shù)

量、生產(chǎn)日期、檢驗人員。

11.3檢驗檢疫

按GB15569—2009的要求執(zhí)行。

12技術(shù)檔案

技術(shù)管理檔案的內(nèi)容參見附錄C～附錄E。

4

DB35/T2066—2022

附錄A

（資料性）

MS基本培養(yǎng)基成分及母液配制

十二卷屬軟葉類多肉植物MS基本培養(yǎng)基成分及母液配制參見表A.1。

表A.1十二卷屬軟葉類多肉植物MS基本培養(yǎng)基成分及母液配制

配培養(yǎng)基

定量擴大后稱量母液體積

母液種類基質(zhì)名稱擴大倍數(shù)吸取量

（mg/L）mgL

（mL/L）

NH4NO31650.00016500.0

KNO31900.00019000.0

A大量元素MgSO4·7H2O370.000103700.01100

KH2PO4170.0001700.0

CaCl2440.0004400.0

FeSO4·7H2O27.8002780.0

B鐵鹽100110

Na2-EDTA37.3003730.0

MnSO4·H2O16.9001690.0

ZnSO4·7H2O8.600860.0

CuSO4·5H2O0.0252.5

C微量元素NaMoO4·2H2O0.25010025.0110

CoCl2·6H2O0.0252.5

KI0.83083.0

H3BO36.200620.0

煙酸0.50025.0

鹽酸硫胺素0.1005.0

D有機物質(zhì)鹽酸吡哆醇0.5005025.00.510

甘氨酸2.000100.0

肌醇100.0005000.0

5

DB35/T2066—2022

附錄B

（資料性）

十二卷屬軟葉多肉植物組培培養(yǎng)基配方

十二卷屬軟葉類多肉植物組培培養(yǎng)基配方參見表B.1。

表B.1十二卷屬軟葉類多肉植物組培培養(yǎng)基配方

誘導(dǎo)培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基

基質(zhì)類別基質(zhì)名稱

（mg/L）（mg/L）（mg/L）

NH4NO3825.000825.000825.000

KNO3950.000950.000950.000

大量元素MgSO4·7H2O185.000185.000185.000

KH2PO485.00085.00085.000

CaCl2220.000220.000220.000

FeSO4·7H2O27.80027.80027.800

鐵鹽

Na2-EDTA37.30037.30037.300

MnSO4·H2O16.90016.90016.900

ZnSO4·7H2O8.6008.6008.600

CuSO4·5H2O0.0250.0250.025

微量元素NaMoO4·2H2O0.2500.2500.250

CoCl2·6H2O0.0250.0250.025

KI0.8300.8300.830

H3BO36.2006.2006.200

煙酸0.5000.5000.500

鹽酸硫胺素0.1000.1000.100

有機物質(zhì)鹽酸吡哆醇0.5000.5000.500

甘氨酸2.0002.0002.000

肌醇100.000100.000100.000

6-BA0.500～0.8000.200～0.400—

植物生長IBA—0.200～0.3000.300～0.600

調(diào)節(jié)劑NAA——0.300～0.600

IAA——0.100～0.300

蔗糖白砂糖30000.00030000.0003000.000

凝固劑卡拉膠6000.0006000.0007000.000

6

DB35/T2066—2022

附錄C

（資料性）

培養(yǎng)基配制記錄表

十二卷屬軟葉類多肉植物組培培養(yǎng)基配制記錄表參見表C.1。

表C.1十二卷屬軟葉類多肉植物組培培養(yǎng)基配制記錄表

母液代碼ABCDEFGHIJKPH備注簽名

培養(yǎng)基配

日培養(yǎng)基培養(yǎng)基1L配方

制量

期名稱代碼取量

L

mL

7

DB35/T2066—2022

附錄D

（資料性）

外植體采集記錄表

十二卷屬軟葉類多肉植物外植體采集記錄表參見表D.1。

表D.1十二卷屬軟葉類多肉植物外植體采集記錄表

采集日期

采集人

采集地點

科屬名

植物名

學(xué)名

基本特征

采集部位

采集數(shù)量

照片存放點

備注

8

DB35/T2066—2022

附錄E

（資料性）

接種記錄表

十二卷屬軟葉類多肉植物接種記錄表參見表E.1。

表E.1十二卷屬軟葉類多肉植物接種記錄表

原材料數(shù)量接種數(shù)量培養(yǎng)基

時間品種代碼接種人員階段代數(shù)備注

瓶瓶代碼