ICS65.020.30

CCSB43

43

湖南省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB43/T2474—2022

湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

CodeofpracticeformakingfrozensemenofXiangdongblackgoat

2022-12-09發(fā)布2023-03-09實(shí)施

湖南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB43/T2474—2022

目次

前言...............................................................................III

1范圍..............................................................................1

2規(guī)范性引用文件....................................................................1

3術(shù)語(yǔ)和定義........................................................................1

4基本要求..........................................................................1

5采精..............................................................................1

6精液處理..........................................................................2

7精液冷凍..........................................................................3

8凍精活力檢查......................................................................3

9包裝、標(biāo)簽、貯存和運(yùn)輸............................................................3

10記錄.............................................................................4

附錄A（資料性）湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)儀器設(shè)備......................................5

附錄B（資料性）羊采精操作技術(shù)......................................................6

附錄C（資料性）細(xì)管冷凍精液標(biāo)識(shí)方法................................................7

附錄D（資料性）羊精液生產(chǎn)記錄表....................................................8

I

DB43/T2474—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由湖南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。

本文件由湖南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。

本文件起草單位：湖南省光大牧業(yè)科技有限公司、湖南省畜牧獸醫(yī)研究所、瀏陽(yáng)市農(nóng)業(yè)發(fā)展事務(wù)中

心、長(zhǎng)沙學(xué)院、長(zhǎng)沙市動(dòng)植物疫病預(yù)防控制中心、湘陰縣畜牧水產(chǎn)服務(wù)中心。

本文件主要起草人：段洪峰、劉海林、張佰忠、朱立軍、張翠永、李昊幫、羅璋、李安定、劉東翔、

朱建軍、樊志堅(jiān)、馮小花、劉伯承、向靜、奉佳、薛爽、陳新娟、趙曉。

III

DB43/T2474—2022

湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)的基本要求，采精，精液處理，精液冷凍，凍精活力檢查，

包裝、標(biāo)簽、貯存和運(yùn)輸，記錄。

本文件適用于湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB20557山羊冷凍精液

GB/T30396牛冷凍精液包裝、標(biāo)識(shí)、貯存和運(yùn)輸

NY/T810湘東黑山羊

NY/T1234牛冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T3186羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

DB43/T2410湘東黑山羊種羊選育技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

NY/T3186界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

4基本要求

種公羊

品種特征特性應(yīng)符合NY/T810的規(guī)定，體質(zhì)健康，無(wú)傳染病和規(guī)定疫病，3代以上系譜完善，等級(jí)

綜合評(píng)定為特級(jí)或者一級(jí)，等級(jí)綜合評(píng)定方法按DB43/T2410規(guī)定執(zhí)行。

儀器設(shè)備

見附錄A。

器具

器具清洗、消毒、貯存按NY/T3186規(guī)定執(zhí)行。

稀釋液

使用商品化的山羊?qū)Ｓ孟♂屢骸?/p>

5采精

1

DB43/T2474—2022

環(huán)境

采精場(chǎng)所應(yīng)環(huán)境安靜，清潔衛(wèi)生，地面平坦防滑，有護(hù)欄等安全設(shè)施。

采精前準(zhǔn)備

5.2.1器具

集精管、假陰道、漏斗、水浴鍋、干燥箱。

5.2.2采精器潤(rùn)滑劑

將凡士林與液體石蠟1:1混合，用水浴煮沸消毒10min后置于62℃～65℃水浴鍋內(nèi)待用。

5.2.3臺(tái)羊

臺(tái)羊應(yīng)選擇健壯、性情溫順、無(wú)疫病且性成熟的母羊，體表、外陰、臀部應(yīng)清潔衛(wèi)生，并保定于牢

固的采精架內(nèi)。

5.2.4公羊

種公羊體表應(yīng)修剪過(guò)長(zhǎng)的陰毛，體表清潔衛(wèi)生。包皮需沖洗的，沖洗干凈30min后才準(zhǔn)許采精。

5.2.5采精器

將采精器安裝好后，注入溫水約130mL，外殼與內(nèi)胎容積的三分之二。采精時(shí)內(nèi)胎溫度應(yīng)達(dá)到

38℃～43℃，有一定壓力，外口呈三角形。集精杯溫度維持在33℃～35℃。采精器的消毒和潤(rùn)滑劑

的使用應(yīng)符合NY/T3186的要求。

采精操作

見附錄B。

6精液處理

準(zhǔn)備

接觸精液的器皿均應(yīng)放在34℃恒溫箱中，稀釋液放在34℃恒溫水浴箱中備用。稀釋精液的稀釋瓶

應(yīng)做明顯標(biāo)記。

外觀檢查

檢查精液的色澤，氣味及是否有膿性分泌物或血液等異物。正常情況下，精液為乳白色或微黃，略

有腥味。

采精量測(cè)定

直接讀取集精管上刻度（精確到0.1mL），記錄采精量。

精子密度測(cè)定

使用精子密度測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合GB20557的規(guī)定。

精子活力測(cè)定

2

DB43/T2474—2022

取精液和稀釋液5μL～10μL于載玻片上，加蓋蓋玻片后在37℃恒溫裝置的相差顯微鏡上評(píng)定

活力，用百分率表示。應(yīng)符合GB20557的規(guī)定。

精液評(píng)價(jià)及處理

外觀正常、密度大于等于6×108個(gè)/mL、活力大于等于65%、畸形率小于等于15%的精液用于凍精

生產(chǎn)。

稀釋、平衡、灌裝

應(yīng)符合NY/T1234的規(guī)定。

標(biāo)識(shí)

細(xì)管冷凍精液標(biāo)識(shí)方法見附錄C。

7精液冷凍

上架

灌裝、封口、標(biāo)識(shí)后的細(xì)管上架碼放時(shí)，應(yīng)注意細(xì)管擺放的方向，棉塞封口端靠近操作者，超聲波

封口端遠(yuǎn)離操作者。放入程控冷凍儀時(shí)亦應(yīng)如此放置。用區(qū)分棒做好不同羊號(hào)細(xì)管間的識(shí)別。

冷凍

采用程控冷凍儀冷凍精液，程控冷凍儀與低溫平衡柜應(yīng)盡量靠近，設(shè)置好冷凍程序，4℃下降至-

10℃用時(shí)180s，-10℃降至-100℃用時(shí)150s，-100℃降至-140℃用時(shí)120s，應(yīng)按照程控冷凍儀的操

作程序進(jìn)行冷凍。

收集

冷凍完成后，打開程控冷凍儀蓋子，把細(xì)管的棉塞封口端在下，快速將凍精收集到貯精管內(nèi)，每管

收集25支，按種公羊號(hào)投入盛滿液氮的不同提筒中，并迅速浸泡在液氮中。

8凍精活力檢查

參照NY/T1234的方法。每只羊每批次取1支凍精迅速浸入37℃～38℃水中并晃動(dòng)20s，取出擦干

水珠，剪去細(xì)管的超聲波封口端，用專用推針把精液擠入一小試管內(nèi)。取解凍精液進(jìn)行活力檢查，操作

方法見6.5。

檢查合格的凍精作為初檢合格品保存。

9包裝、標(biāo)簽、貯存和運(yùn)輸

包裝和標(biāo)簽

9.1.1在液氮內(nèi)將細(xì)管分類裝入凍精儲(chǔ)存管，包裝后的細(xì)管其棉塞端朝下。包裝袋規(guī)格應(yīng)符合GB/T

30396的規(guī)定。

9.1.2包裝袋標(biāo)簽應(yīng)標(biāo)記生產(chǎn)單位、品種、種羊號(hào)、數(shù)量。

3

DB43/T2474—2022

貯存和運(yùn)輸

應(yīng)符合GB/T30396的規(guī)定。

10記錄

記錄內(nèi)容和格式見附錄D。

4

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A

A

附錄A

（資料性）

湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)儀器設(shè)備

表A.1湘東黑山羊冷凍精液生產(chǎn)儀器設(shè)備

序號(hào)名稱規(guī)格和數(shù)量用途

1移液槍50μL，2把精液取樣

2磁力攪拌器2臺(tái)攪拌稀釋液

3水浴鍋2臺(tái)稀釋液恒溫保存

4冰箱冷藏0℃～4℃，冷凍-20℃，1臺(tái)試劑的保存

5干燥箱80℃～120℃，1臺(tái)使用器械的干燥及消毒

容量30L，口徑150mm

6液氮罐冷凍精液的保存及轉(zhuǎn)移

容量10L，口徑50mm

7自動(dòng)噴碼機(jī)1臺(tái)噴印細(xì)管凍精的編碼信息

8自動(dòng)程序冷凍儀1臺(tái)冷凍分裝好的細(xì)管精液

9大型平衡柜20L～30L，1臺(tái)稀釋好的精液低溫平衡

10光學(xué)相差顯微鏡1臺(tái)檢測(cè)精液的活力及密度等

11自動(dòng)灌裝機(jī)1臺(tái)罐裝細(xì)管精液

在冷凍精液制備中提供穩(wěn)定可靠

12自控蒸餾水儀1臺(tái)

的蒸餾水

13智能精液分析系統(tǒng)1臺(tái)精子密度的檢測(cè)分析

5

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B

B

附錄B

（資料性）

羊采精操作技術(shù)

B.1準(zhǔn)備

公羊靠近臺(tái)羊時(shí)，應(yīng)采取控制措施，不讓公羊立即爬跨，使其充分排泄副性腺后進(jìn)行2次～3次空爬，

等待3min～5min后采精，空爬時(shí)不讓陰莖觸及臺(tái)羊。性欲不強(qiáng)的公羊采取觀摩、引誘、被爬跨和更換

臺(tái)羊、地點(diǎn)等措施引導(dǎo)采精。

B.2采精方法

采精員手持采精器站在公羊側(cè)后方，當(dāng)公羊陰莖伸出爬跨時(shí)，迅速向前托著公羊包皮，采精器口斜

向下方，雙手配合將陰莖引入采精器口內(nèi)，公羊往前一沖完成射精。采精器緊隨公羊陰莖移動(dòng)，當(dāng)陰莖

縮回后立即將采精器口斜向上方，打開活塞，取下集精管，迅速送至精液處理室。安裝好的采精器只能

使用一次，不應(yīng)重復(fù)使用。

B.3采精量

公羊一般3d～4d采精1次，視年齡、身體狀況增減次數(shù)，每次可連續(xù)采精2回（間隔時(shí)間30min

以上），采精充分（集精管內(nèi)泡沫豐富，精液量大且稠密）的公羊不宜連續(xù)采精。

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C

C

附錄C

（資料性）

細(xì)管冷凍精液標(biāo)識(shí)方法

C.1標(biāo)記組成

細(xì)管冷凍精液標(biāo)記由四部分組成，排列順序從棉塞封口端到超聲波封口端依次為“產(chǎn)地代號(hào)”或“公

牛站代號(hào)”+“種公羊品種代號(hào)”+“凍精生產(chǎn)日期”+“種公羊號(hào)”。

C.2標(biāo)記代碼

C.2.1生產(chǎn)單位代碼或用漢語(yǔ)拼音大寫首字母表示。

C.2.2種公羊品種代碼為該品種漢字的漢語(yǔ)拼音大寫字母。

C.2.3生產(chǎn)日期按年、月、日次序排列，年、月、日各兩位數(shù)字，年的兩位數(shù)采用年度的后兩位數(shù)，

月、日不夠兩位的，分別加“0”補(bǔ)充為兩位數(shù)。

C.2.4各部分之間空6個(gè)字節(jié)以上。

示例：

注：431表示產(chǎn)地湖南，XDHSY表示品種為湘東黑山羊，2021/11/21表示2021年11月21日生產(chǎn)，03100表示種公羊號(hào)。

7

DB43/T2474—2022

D

D

附錄D

（資料性）

羊精液生產(chǎn)記錄表

表D.1給出了羊精液生產(chǎn)記錄的內(nèi)容和格式。

表D.1羊精液生產(chǎn)記錄表

第一第二

總采精子密稀釋冷凍冷凍