2025年大學《生物技術》專業(yè)題庫——細胞生物學技術在生物技術中的應用考試時間：______分鐘總分：______分姓名：______一、選擇題（每題2分，共30分。請將正確選項的字母填在題干后的括號內）1.在體外培養(yǎng)動物細胞時，通常需要維持特定的pH值，最常用的緩沖體系是？A.磷酸鹽緩沖液(PBS)B.Hanks平衡鹽溶液(HBSS)C.氨基甲酸氫鈉緩沖液D.Tris緩沖液2.下列哪項技術主要用于檢測細胞表面標記物或內部特定分子，并能夠對細胞進行定量分析？A.免疫熒光染色B.流式細胞術C.細胞計數板計數D.瓊脂糖凝膠電泳3.單克隆抗體技術的基礎是？A.細胞融合技術B.基因工程C.PCR技術D.組織培養(yǎng)技術4.用于觀察細胞內部精細結構（如細胞器）的最主要工具是？A.光學顯微鏡B.電子顯微鏡C.熒光顯微鏡D.流式細胞儀5.在進行細胞培養(yǎng)時，維持無菌環(huán)境最關鍵的措施是？A.使用無菌的培養(yǎng)基和器皿B.在超凈工作臺中操作C.定期更換培養(yǎng)瓶D.以上都是6.下列哪種方法常用于檢測細胞是否發(fā)生凋亡？A.MTT比色法B.臺盼藍染色法C.AnnexinV-FITC/PI雙染法D.LDH釋放實驗7.下列哪項屬于成體干細胞？A.胚胎干細胞(ES細胞)B.多能誘導干細胞(iPS細胞)C.造血干細胞D.尚未分化的胚胎細胞8.細胞融合技術產生的雜交細胞，其遺傳物質來源于？A.只有一個親本細胞B.兩個親本細胞的核遺傳物質C.僅線粒體DNAD.以上都不對9.在制備單克隆抗體時，用于篩選能夠產生特定抗體雜交瘤細胞的方法是？A.瑞氏染色B.ELISA（酶聯免疫吸附測定）C.肝素抗凝D.活細胞計數10.細胞培養(yǎng)過程中，用于維持細胞正常生長的氣體環(huán)境通常是？A.純氮氣B.純氧氣C.含95%空氣和5%CO2的混合氣D.含95%氮氣和5%CO2的混合氣11.激光捕獲顯微切割技術主要應用于？A.獲得純化的特定細胞群體B.對細胞進行染色C.直接觀察細胞內部結構D.細胞培養(yǎng)12.下列哪項是基因工程中，將外源基因導入宿主細胞常用的一種方法（尤其適用于某些細胞類型）？A.限制性內切酶消化B.基因槍法C.介導轉化D.凝膠電泳分離13.流式細胞術可以用于評估細胞的？A.大小和顆粒度B.細胞周期C.表面標記物表達D.以上都是14.細胞治療的核心是？A.利用細胞培養(yǎng)技術大規(guī)模生產藥物B.將具有治療功能的細胞移植到患者體內C.通過顯微操作改變細胞遺傳物質D.研究細胞信號轉導通路15.在細胞生物學研究中，熒光顯微鏡的主要優(yōu)勢在于？A.可以觀察活細胞B.可以標記特定的細胞結構或分子進行可視化C.分辨率極高D.可以進行定量分析二、填空題（每空1分，共15分。請將答案填寫在橫線上）1.細胞培養(yǎng)的基本要求包括：無菌、______、適宜的溫度和pH值。2.利用雜交瘤技術制備單克隆抗體，通常需要將______與______進行融合。3.細胞凋亡過程中，染色質會濃縮成______，細胞膜會形成______。4.熒光顯微鏡利用熒光物質吸收______后發(fā)出______的特性來觀察細胞。5.干細胞具有______、______和______的能力。6.細胞融合常用的化學誘導劑是______。7.在生物技術中，細胞計數技術可用于______和______。8.組織工程技術旨在構建具有特定功能的______或______。三、名詞解釋（每題3分，共12分。請給出簡潔、準確的定義）1.細胞工程2.原代細胞培養(yǎng)3.細胞系4.流式細胞術四、簡答題（每題5分，共20分。請簡要回答下列問題）1.簡述體外細胞培養(yǎng)需要滿足的基本條件。2.簡述單克隆抗體與傳統多克隆抗體的主要區(qū)別。3.簡述細胞凋亡與細胞壞死的區(qū)別。4.簡述細胞顯微操作技術在生物技術中的一個具體應用實例。五、論述題（10分。請結合所學知識，回答下列問題）試述細胞培養(yǎng)技術在現代生物制藥中的重要作用，并舉例說明其具體應用。試卷答案一、選擇題1.A2.B3.A4.B5.D6.C7.C8.B9.B10.C11.A12.B13.D14.B15.B二、填空題1.飽和濕度2.B淋巴細胞，骨髓瘤細胞3.梭狀小體，凋亡小體4.光，熒光5.自我更新，多向分化潛能，分化潛能6.聚乙二醇(PEG)7.細胞生長密度，細胞活力（或死活比例）8.組織，器官三、名詞解釋1.細胞工程：指在細胞水平上，運用細胞生物學、分子生物學等基礎理論和techniques，結合工程學原理，改造或創(chuàng)造新的細胞或細胞群體，并使其應用于社會生產和科學研究的綜合性技術。2.原代細胞培養(yǎng)：指從體內組織中直接獲取細胞，并在體外培養(yǎng)容器中培養(yǎng)的技術。這些細胞通常只能傳代數次或無法傳代。3.細胞系：指由原代細胞經過第一次傳代后，在適宜的培養(yǎng)條件下，能夠持續(xù)增殖并保持其基本生物學特性的細胞群體。4.流式細胞術：一種可以快速分析單個細胞物理和化學特性的技術。它利用液流系統將細胞單列流過激光束，通過檢測細胞散射光和熒光信號，對細胞進行計數、分選或表征。四、簡答題1.體外細胞培養(yǎng)需要滿足的基本條件：①無菌環(huán)境，防止微生物污染；②適宜的培養(yǎng)基，提供細胞生長所需的營養(yǎng)物質（如氨基酸、糖、維生素、無機鹽等）和生長因子；③適宜的pH值（通常為7.2-7.4）；④適宜的溫度（通常為37℃）；⑤適宜的氣體環(huán)境（通常為95%空氣和5%CO2）；⑥飽和濕度，維持培養(yǎng)環(huán)境濕潤；⑦適宜的物理支持物（如培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶表面）。2.單克隆抗體與傳統多克隆抗體的主要區(qū)別：①來源不同：單克隆抗體來自針對特定抗原的B淋巴細胞克隆，僅能識別該抗原的特定表位；多克隆抗體來自多種能識別同一抗原不同表位的B淋巴細胞，由不同B細胞產生，識別多個表位。②特異性不同：單克隆抗體特異性高，只與單一抗原表位結合；多克隆抗體特異性相對較低，可與抗原的多個表位結合。③純度不同：單克隆抗體純度高，均一性好；多克隆抗體純度相對較低，含有多種抗體。④制備方法不同：單克隆抗體通過雜交瘤技術制備；多克隆抗體通常通過動物免疫法制備。⑤應用不同：單克隆抗體因其高特異性，廣泛應用于科研、診斷和靶向治療；多克隆抗體因其效價高、易于制備，常用于初步診斷和某些治療。3.細胞凋亡與細胞壞死的區(qū)別：①過程不同：細胞凋亡是細胞在生理或病理條件下，受內在或外在信號觸發(fā)，通過高度程序化的過程主動結束生命的過程；細胞壞死是細胞因受到劇烈的物理、化學等因素損傷，導致細胞膜結構破壞，細胞內容物外泄，引起炎癥反應的被動死亡過程。②形態(tài)學特征不同：細胞凋亡表現為細胞收縮，染色質濃縮成團塊，細胞膜形成泡狀結構（凋亡小體），通常不引起周圍組織炎癥；細胞壞死表現為細胞腫脹，細胞膜破裂，染色質彌散，細胞內容物釋放，常引起周圍組織炎癥反應。③生化特征不同：細胞凋亡涉及鈣超載、蛋白酶（如caspase）激活等；細胞壞死主要表現為膜脂過氧化、酶系統失活等。④對機體影響不同：細胞凋亡是正常的生理過程，對維持組織穩(wěn)態(tài)有利；細胞壞死通常是病理過程，對機體有害。4.細胞顯微操作技術在生物技術中的一個具體應用實例：顯微注射技術。該技術利用顯微操作儀，在顯微鏡下將外源DNA、RNA、蛋白質或細胞器等物質直接注射到細胞內（如卵母細胞、受精卵或體細胞中）。其具體應用實例包括：①基因功能研究：將報告基因或特定功能基因注入細胞，觀察其對細胞表型的影響，研究基因的功能；②創(chuàng)建轉基因動植物或細胞系：將外源基因注入早期胚胎或生殖細胞，獲得轉基因個體；③細胞治療：將編碼治療性蛋白質的基因或修復缺陷的基因注入患者細胞（如干細胞）內；④精子輔助受精：將去核卵母細胞與含遺傳物質的精子在顯微下直接結合。五、論述題細胞培養(yǎng)技術在現代生物制藥中發(fā)揮著至關重要的作用，是許多重要生物藥物的生產基礎。其核心優(yōu)勢在于可以在體外提供可控、可重復的微環(huán)境，大規(guī)模生產來源于細胞的生物制品。具體應用包括：1.疫苗生產：許多疫苗，特別是病毒疫苗和重組蛋白疫苗，都依賴細胞培養(yǎng)技術。例如，減毒活疫苗需要在特定細胞系（如Vero細胞、雞胚成纖維細胞）中培養(yǎng)和繁殖病毒；重組蛋白疫苗（如乙肝疫苗、HPV疫苗）則需要利用基因工程技術在宿主細胞（如酵母、昆蟲細胞或哺乳動物細胞，特別是CHO細胞系）中表達并純化目標抗原蛋白。2.單克隆抗體藥物生產：單克隆抗體作為重要的生物治療藥物（如靶向藥物、抗體偶聯藥物ADC），其生產流程的核心環(huán)節(jié)就是利用雜交瘤細胞或基因工程改造的宿主細胞（如CHO細胞）在生物反應器中進行大規(guī)模、無菌的懸浮或貼壁培養(yǎng)，然后通過純化工藝獲得高純度的抗體藥物。3.重組蛋白質藥物生產：